全 文 ：治鼻渊 、鼻塞不通良药;白芷辛温发表 ,芳香醒脑 , 通里达表 ,宣肺
通窍 , 为治鼻塞 、流涕之要药。荆芥 、牛蒡子疏风宣肺;百部 、蒺
藜 、地肤子疏风止痒;鱼腥草清热宣肺散结 ,全方具有祛风解表 ,
发散风寒 , 消肿通窍的作用。本实验研究结果表明 , 鼻敏水滴鼻
剂具有明显抑制或消除变应性鼻炎症状的作用 ,症状积分比较有
显著差异(P <0. 01), 说明鼻敏水为治疗变应性鼻炎有效药物
之一。
本实验研究结果表明 ,鼻敏水滴鼻剂能显著降低实验性 AR
大鼠鼻分泌物和血清中嗜酸粒细胞水平(P <0. 01), 提示鼻敏水
可能通过减少嗜酸性细胞的数量 ,从而减少强碱性的颗粒蛋白等
炎性介质对细胞的损伤 , 降低变应性炎症反应。但鼻敏水组血清
嗜酸粒细胞水平与药物对照组间比较无统计学意义(P >0. 05),
可能与疗程短有关。
本实验研究结果表明 ,鼻敏水滴鼻剂能显著降低实验性 AR
大鼠的鼻黏膜组胺含量(P <0. 01), 提示鼻敏水可能通过抑制组
胺释放 , 阻断组胺信息作用于鼻黏膜 ,使炎性细胞浸润减少 、减轻
组织反应 , 减轻变态反应症状而起治疗作用。
本实验研究结果表明 ,鼻敏水滴鼻剂能显著降低实验性变应
性鼻炎大鼠血清 IgE水平(P <0. 01), 提示鼻敏水可能通过抑制
IgE产生或降低己合成的 IgE水平 , 阻断其释放介质而达到治疗
AR作用。但鼻敏水组血清 IgE水平与药物对照组间比较无统计
学意义(P >0. 05), 可能与疗程短有关。
目前的治疗主张将抗组胺药和鼻内皮质类固醇作为第一线
治疗药物。但由于此类药物的使用具有一定的副作用而在临床
上受到诸多限制 。而中医耳鼻咽喉科集唐朝以来治疗本病的经
验具有安全可靠 ,毒副作用小 , 疗效确切 、稳定 、持续 ,复发率低及
治疗价格低廉等优势而成为近年来国内学者研究的热点。鼻敏
水滴鼻剂为纯中药制剂 ,对 AR有治疗作用 , 价格低廉 , 有利于广
大农村患者的治疗。
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收稿日期:2006-04-20;　修订日期:2006-11-25
作者简介:吕应年 (1975-),男 (汉族 ),湖北应城人 ,现任广东医学院讲
师 ,硕士学位 ,主要从事天然活性成分研究.
高效液相色谱法测定半边旗中木犀草素的含量
吕应年 , 吴科锋 , 邓亦峰 , 梁念慈
(广东医学院 广东天然药物研究与开发重点实验室 , 广东 湛江　524023)
摘要:目的 建立草药半边旗中木犀草素含量的准确测定方法 , 并测定不同采收期半边旗中木犀草素的含量。方法 采用
高效液相色谱法 , 色谱柱为 D iam onsil C18 , 流动相为甲醇水梯度洗脱 , 流速 0. 2 m l m in-1 ,检测波长为 283 nm , 柱温度
35℃。结果 木犀草素进样量在 0. 062 ～ 0. 62 μg范围内线性关系良好 (R2 =0. 998 7), 平均回收率为 99. 5%(RSD =
1. 98%)。结论 该方法操作简便 , 结论可靠 ,可用于半边旗草药的质量控制。
关键词:高效液相色谱;　半边旗;　黄酮;　木犀草素
中图分类号:R284. 1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)01-0102-02
Quantitative Determ ination of Luteolin in P ter is sem ipinnata L. by HPLC
LÜY ing - nian, WU Ke-feng, DENG Y i-feng, L IANG N ian-ci
(GuangdongMed ica lCollege, GuangdongK ey Lab for Research andDevelopmen t of Natura lDrug , Zhanjiang
524023, China)
Abstract:Objective To estab lish an H PLC me thod for content dete rm ina tion of lu teo lin from PSL.M ethods The sepa ra tion was
perform ed on a D iamonsil C18 co lum n, them obile phasew as run w ith am ixture ofm e thano l(B) and w a te r(A) w ith a linear grad i-
ent e lu tion a t a flow rate of 0. 2 m l m in-1 , the u ltravio le tw aveleng th w as 283 nm , and the co lumn temperatu re was m aintained a t
35℃. Resu lts The calibration curve show ed good linearity in the range of 0. 062 ～ 0. 62 μg(R2 =0. 998 7), the ave rage re covery
w as 99. 5%(RSD =1. 98%). Conc lu sion Them ethod is sim ple, convenien t and accura te and can be used fo r the qua lity con tro l
o f PSL.
Key words:HPLC;　P te ris Sem ipinnata;　F lavonoid;　Luteolin
　　半边旗 P steris sem ipinna ta L. 又名半边蕨 、半边莲 、单边旗 ,系
凤尾蕨科植物 , 是一种南方常用生药 ,始载于《岭南采药录》, 称
半边旗。有止血 、生肌 、解毒 、消肿之功效 ,民间用于吐血 、外伤出
血 、发背 、疔疮 、跌打损伤 、目赤肿痛等 [ 1] 。现代研究表明 , 半边
旗中含有挥发油 、萜类 、黄酮 、皂苷等多种物质 [ 2] 。有关半边旗
的药效成分研究主要集中在萜类化合物 [ 3, 4] 。 关于半边旗中黄
酮类物质药学研究尚未见报道。本课题组曾用分光光度法测定
半边旗黄酮的含量 [ 5] , 但该法主要用于植物提取物总黄酮的含
量测定 ,不适合于对黄酮单体的分析。本文采用高效液相色谱对
半边旗的黄酮单体木犀草素进行研究 ,建立了半边旗中木犀草素
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 1期 LISH IZHEN MEDIC INE AND MATERIA M ED ICA RESEARCH 2007VOL. 18 NO. 1　
含量的测定方法 , 并测定不同采取收期半边旗的黄酮单体木犀草
素进行研究 , 并测定不同采收期半边旗中木犀草素的含量 , 为植
物半边旗的广泛开发利用奠定基础。
1　仪器与试剂
1. 1　仪器 岛津 LC-10A高效液相色谱仪(LC-10ATVP泵 , SCL-
10AVP控制器 , SPD-10 AVP紫外检测器 , CTO-10AVP柱温箱 ),
梅特勒 AE240型分析天平。
1. 2　木犀草素对照品 购于天津尖峰天然产物研究开发公司。
1. 3　半边旗草药 采收于广东湛江郊区 , 经成都中医药大学苟占
平博士鉴定为半边旗全草。
2　方法和结果
2. 1　色谱条件 色谱柱 Diam onsil C18(150 mm ×4. 6 mm, 5μm);
紫外检测波长 283 nm;流动相为甲醇水溶液 , 0% ～ 100%梯度洗
脱;流速 0. 2 m l m in-1;柱温为 35℃。
2. 2　溶液的制备
2. 2. 1　对照品溶液的配制 精密称取木犀草素对照品 0. 00124
g, 置 10 m l容量瓶中 , 加甲醇超声溶解 ,定容至刻度 , 摇匀 , 即得
浓度为 0. 124 g L-1的木犀草素对照品储备液。精密吸取储备液
0. 1, 0. 3, 0. 5, 0. 7, 1. 0 m l,分别加入甲醇定容至 1. 0 m l,摇匀 ,即
得含木犀草素对照品溶液。
2. 2. 2　供试品溶液的配制 按文献 [ 5]的方法制备半边旗提取
物 , 称取半边旗提取物约 5 g, 先后加氯仿 、醋酸乙酯索氏提取至
无色 , 蒸干醋酸乙酯提取液得半边旗黄酮 , 精密称取半边旗黄酮
约 100 m g, 置 100 m l容量瓶中 , 加甲醇超声使溶解 ,定容至刻度 ,
摇匀。经 0. 45 μm微孔滤膜过滤 ,即得。
2. 3 　系统适应性及专属性实验 分别取对照品溶液 、供试品溶
液各 5 μl进样色谱仪 ,记录色谱图如图 1。在上述色谱条件下木
犀草素出峰时间 28 m in,供试品在木犀草素峰相应位置有一显著
峰。实验结果表明该方法能使半边旗黄酮较好分离 ,色谱系统的
适应性及专属性良好 。
a-木犀草素标准品　　 b-半边旗黄酮供试品
图 1　色谱图
2. 4　线性关系的考察 分别精密量取上述对照品溶液各 5μl进
样 , 以色谱峰面积(Y)对质量(X)进行回归 , 木犀草素的线性回
归方程为 Y =408 058X , R 2 =0. 998 7, 线性范围为 0. 062 ～
0. 62 μg。
2. 5　精密度实验 取对照品储备液 5 μl, 连续进样 6次 , 测得木
犀草素峰面积 RSD 均为 0. 84%, 表明仪器进样精密度良好。
2. 6　稳定性实验 取供试样品溶液 5 μl, 分别在 0, 3, 6, 12, 16 h
进样 ,测定木犀草素的峰面积 RSD为 1. 34%, 表明样品溶液在 16
h内稳定。
2. 7　重复性实验 取同一批半边旗草药 , 按供试品制备方法配制
6份 , 分别进样 5 μl,测定木犀草素的含量 RSD为 1. 64%,表明该
方法的重现性较好。
2. 8　加样回收率实验 取同一供试品 5份 , 分别加入木犀草素对
照品 , 按供试品溶液制备方法制备样品 ,进样 5μl, 计算得回收率
分别为 99. 5%, RSD 1. 98%。结果见表 1。
2. 9　样品含量测定 取不同采收期的半边旗全草 , 按供试品制备
方法制成样品溶液 , 各取 5 μl进样 , 测定峰面积 , 由线性方程计
算得木犀草素的含量见表 2, 对照品及供试品色谱图见图 2。
表 1　木犀草素的加样回收率实验结果
样品含量
m /mg
对照品加入量
m /mg
实际测量值
m /mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
0. 186 0. 186 0. 373 100. 2
0. 188 0. 186 0. 368 98. 4
0. 182 0. 186 0. 362 98. 3 99. 5 1. 98
0. 184 0. 186 0. 362 97. 8
0. 185 0. 186 0. 382 102. 6
　　n =5
表 2　半边旗草药中木犀草素含量测定
半边旗
采收期
木犀草素
含量(%)
半边旗
采收期
木犀草素
含量(%)
5月份 0. 038 9月份 0. 052
6月份 0. 026 10月份 0. 037
7月份 0. 032 11月份 0. 022
8月份 0. 051
图 2　木犀草素标准曲线
3　讨论
黄酮类化合物是中草药中一类重要的药效成分 ,木犀草素是
一种很具有代表性的天然黄酮 [ 6] , 属弱酸性四羟基黄酮类化合
物 , 在植物界分布较广 , 从半边旗中提取分离的黄酮部位含有木
犀草素 。木犀草素有很强的抗氧化活性 ,有关药理及临床实验的
结果还表明木犀草素在体内具有抗菌 、抗病毒及降低血脂和胆固
醇的作用 [ 7, 8]。
采用 H PLC法测定半边旗中木犀草素的含量 , 方法稳定 , 快
速 , 重现性好 ,杂质干扰小 , 适合半边旗中木犀草素的含量测定。
从含量测定结果看出 ,半边旗中木犀草素含量不高 ,在不同采收
期 , 半边旗中木犀草素含量有较大差别 , 8、9月份采收的半边旗
中木犀草素含量最高 ,实验结果可为半边旗适当的采收季节资源
利用提供指导 ,为相关制剂的质量研究提供实验依据。
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