全 文 ：社区医学杂志 2015年 9月第 13卷第 17期 JCM，Sep.2015，Vol.13，No.17
鸡矢藤苷酸甲酯对模型小鼠镇痛活性研究
居颺
普陀区长征镇社区卫生服务中心，上海 200333
·论 著·
摘要：目的 探讨鸡矢藤苷酸甲酯在小鼠疼痛模型中的活性研究。方法 在 2013年 4—9月将 170例小鼠随机分为 17
组，每组 10只。首先从植物鸡矢藤中分离提取出鸡矢藤苷酸甲酯。将鸡矢藤苷酸甲酯分别按照不同的剂量注射在受试小
鼠，在小鼠醋酸扭体实验，小鼠福尔马林实验和小鼠热板实验中进行其对化学和热刺激引发的疼痛的耐受性测试，分析鸡
矢藤苷酸甲酯的镇痛活性。计量资料采用 t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。结果 小鼠醋酸扭体的外周镇痛实验的
结果显示：鸡矢藤苷酸甲酯 3、4、5组对腹腔注射醋酸引发的小鼠扭体次数［（26.8±4.6）、（26.3±3.4）、（22.5±3.0）次］与空
白组［（44.2±4.7）次］相比有显著的抑制作用，差异均有统计学意义（均 P<0.05）；小鼠热板的中枢镇痛实验显示：鸡矢藤苷
酸甲酯 4、5组对热刺激的耐受时间［（2.45±0.30）、（2.46±0.24）s］较空白组［（1.52±0.15）s］具有明显的延长，差异均有统
计学意义（均 P<0.05）。而小鼠福尔马林实验中，鸡矢藤苷酸甲酯组在 0~5min与 25~30min的时间段内有良好的外周和中
枢神经镇痛效果［（36.40±4.80）、（5.40±2.66）次］，与空白组［（83.83±13.56）、（45.17±12.86）次］相比差异均有统计学意
义（均 P<0.05）。结论 鸡矢藤苷酸甲酯对小鼠疼痛模型具有中枢和外周双重镇痛调节作用，提示其作为疼痛治疗或者预
防药物具有一定的开发价值。
关键词：鸡矢藤苷酸甲酯；镇痛；小鼠模型
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1672- 4208（2015）17- 0016- 03
Analgesic activities of methyl paederosidate on mouse models
JU Yang
Putuo District Changzheng Town Community Health Service Center,Shanghai 200333,China
Abstract：Objective Explore the analgesic activities of methyl paederosidate on mouse models.Methods 170 mouses were
randomly divided into 17 groups,10 in each group from Apirl to September 2013.Firstly,we extracted methyl paederosidate from
plant paederia scandens,then injected different doses of the paederiae methyl glucoside to tested mouses.According to these
mouses reaction from chemical and thermal stimulation induced the pain tolerance testing during the mouses acetic acid writhing
experiment, formalin experiment and hot plate experiment,analyze the analgesic activities of methyl paederosidate.All data were
using count data t test,P<0.05 for the difference is statistically significant.Results Mouses acetic acid writhing outer peripheral
analgesic experiment showed:methyl paederosidate group 3,4,5 had significant inhibition influence to mouses writhing induced
from intraperitoneal injection of acetic acid [(26.8±4.63),(26.3±3.38),(22.5±2.99)times] than blank group[(44.2±4.7)times](all
P<0.05).Mouses hot plate analgesic experiment showed that: methyl paederosidate group 4,5 significantly prolonged mouses pain
reaction period induced fom thermal stimulation[(2.45±0.30),(2.46±0.24)s] than blank group[(1.52±0.15)s](all P<0.05).For-
malin experiment showed:in the 0- 5 minutes and 25- 30 minutes period methyl paederosidate group had significantly outer periph-
ery of the town pain,analgesia and CNS effects [(36.40±4.80),(5.40±2.66)times] than blank group[(83.83±13.56),(45.17±12.86)
times](all P<0.05).Conclusion Methyl paederosidate has both the central and peripheral analgesic effects on mouses pain model.
It is worth being developed as one of the ingredients of pain treatment drugs or prevention drugs.
Key words：Methyl paederosidate;Analgesic;Mouse models
鸡矢藤为茜草科鸡矢藤属植物鸡矢藤或毛鸡矢藤
的地上部分及干燥根或全草，为传统中草药，分布于长
江流域及其南部地区，粤东地区分布广泛［1-3］。鸡矢藤
的药学和化学成分研究工作最早可追溯到二十世纪
六、七十年代日本学者栗原藤三郎等，其后研究一直延
续至今［4-7］。作为由《黄帝内经》发展而来的中草药，我
国在上世纪七十年代已经生产鸡矢藤注射液用于临床
治疗各种疼痛，临床疗效显著［7］。我国鸡矢藤植物资源
丰富，发展前景广阔。但是目前大多数对于鸡矢藤的研
究还仅限于化学基础研究，对于药效成分、药理活性及
其药物制剂的开发研究还有待进一步深入。据此，我们
于 2013年 4—9月进行了鸡矢藤中鸡矢藤苷酸甲酯单
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体化合物的提取，并进行镇痛药理活性测试，取得了良
好的疗效，为临床用药以及开发中药成分的新型药物
提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料 四川产的鸡矢藤全草，由四川省药材总公
司购入；昆明小白鼠（清洁级，来自上海大学生科院），
体重 18～22g，雌雄各半，鼠龄 10周，共 170只。
1.2 试剂及仪器 薄层层析用硅胶 GF254、柱层析用
硅胶（青岛海洋化工有限公司）；熔点分析仪（天津分析
仪器厂）；Bruker DRX- 400 型核磁共振仪（Bruker 公
司）；高效薄层层析板（Merck公司）；HPLC分析仪（上
海骥辉科学分析仪器有限公司）；TLC显色剂（上海荆
和分析仪器有限公司）；紫外分析仪（上海电光仪器
厂）；HPLC试剂（中国医药集团）；智能热板仪（正华生
物仪器设备有限公司）。
1.3 方法
1.3.1 鸡矢藤苷酸甲酯的提取 取鸡矢藤药材 50 kg，
粉碎后过 20目筛，以 70%乙醇进行回流提取，提取液
进行减压浓缩后得到膏状物约 7.5 kg。分别先后用石
油醚、氯仿、正丁醇和水萃取，直至溶液没有颜色为止。
取正丁醇萃取部分（约 1.8 kg）经过 D101大孔吸附树
脂柱进行吸附，然后用水 - 乙醇以不同的梯度进行洗
脱。经过 TLC和 HPLC的显色，收集具有特征的洗脱
部分，浓缩后得到浸膏约 49.8 g（收率 1%）。取 45 g浸
膏进行梯度洗脱（石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇 - 水为流
动相），得到 8个部分。分别使用柱层析进行，对三个主
要单体化合物进行分离，得到三种不同的白色粉末，分
别收得鸡矢藤苷、鸡矢藤苷酸、鸡矢藤苷酸甲酯，详见
图 1。
1.3.2 试验方法 鸡矢藤提取物鸡矢藤苷酸甲酯给药
受试小鼠，应用化学刺激和热刺激引发疼痛的动物模
型对其镇痛药理活性进行研究。每个实验均分成空白
组（生理盐水，0.2 ml/只）、阳性对照组与鸡矢藤苷酸
甲酯组，一共三个实验，将所有小鼠随机分为 17组，每
组 10只。在小鼠醋酸扭体实验中，鸡矢藤苷酸甲酯分
别以 5、10、20、40、60 mg/kg进行给药，分别为鸡矢藤
苷酸甲酯 1、2、3、4、5组，以阿司匹林（200 mg/kg）作为
阳性对照组，合空白组共 7组。在小鼠热板实验中，以
吗啡（10 mg/kg）进行阳性对照，鸡矢藤苷酸甲酯分别
以 5、10、20、40、60 mg/kg进行给药，分别为鸡矢藤苷
酸甲酯 1、2、3、4、5组，含空白组共 7组。在小鼠福尔马
林实验中，鸡矢藤苷酸甲酯的注射剂量为 60 mg/kg，以
吗啡（10 mg/kg）进行阳性对照，共 3组。根据三个实验
的结果来观察鸡矢藤苷酸甲酯的镇痛药理活性。
1.3.3 镇痛药理活性研究
1.3.3.1 小鼠醋酸扭体实验 对隔夜禁食的小鼠进行
灌胃给药，1 h 后在小鼠腹腔进行醋酸溶液（0.7%，
10 ml/kg）注射。3 min后，小鼠出现腹部内凹、躯干和
后肢伸张、臀部高跷等扭体行为反应。观察 12 min，并
记录小鼠的扭体次数。
1.3.3.2 小鼠热板实验 对隔夜禁食的小鼠进行灌胃
给药，30 min后将小鼠放置于（55±1）℃的智能热板
仪上，记录其足底接触热板到出现舔后足、踢后足或跳
跃的时间（热板反应潜伏期），为防止小鼠足部烫伤，本
实验最长设定为 60 s，用药后小鼠潜伏期达到 60 s者
停止实验并以 60 s作为记录。
1.3.3.3 小鼠福尔马林实验 对禁食 15 h 的小鼠进
行灌胃方式给药，1 h后向小鼠足底皮下注射福尔马
林溶液（5%，20 μl），随后观察小鼠足底的反应。而在
整个过程中，小鼠注射福尔马林后 0～5 min为早期
相，25～30 min为迟发相。分别观察两个时间段中的
小鼠舔、抖动被注射足次数，将其作为疼痛指标。
1.4 统计学处理 用 SPSS 17.0进行统计分析，，计量
资料以 x±s表示，采用 t检验，P<0.05为差异有统计学
意义。
2 结 果
2.1 鸡矢藤苷酸甲酯的制备鉴定 对鸡矢藤提取物
进行柱层析分离并重结晶，得到三种主要产物，均在
TLC板紫外灯（254 nm）下有荧光，硫酸显色剂呈现深
蓝色，喷硫酸后在 TLC板在加热时，有臭味发出，提示
可能是含硫的环烯醚萜化合物。
其中鸡矢藤苷酸甲酯检测结果如下：
ESI- MS m/z：501.114 4［M+Na+］；UV（MeOH）：234
（4.16）；IR（KBr）：3 374，2 929，1 700，1 633，1 440，1 308，
1 159，1 077，898；1H- NMR （600 MHz，CD3OD）：5.06
（d，1H），7.65（d，J1H），3.03（m，1H），4.80（m，1H），6.02
（d，1H），2.62（m，1H），4.95（m，1H），5.10（m，1H），3.74
（s，3H），2.34（s，3H），4.72（d，1H），3.24（m，1H），3.38
（m，1H），3.26（m，1H），3.27（m，1H），3.63（m，1H），3.85
（m，1H）；13C- NMR（150 MHz，CD3OD）：101.3，155.4，
108.1，42.4，75.3，132.4，145.5，46.2，66.2，172.9，169.3，
51.9，13.5，100.7，74.9，77.9，71.6，78.6，63.0.
其波谱数据与文献［7-10］报道的鸡矢藤酸甲酯一致，
因此鉴定该化合物为鸡矢藤酸甲酯。
2.2 小鼠醋酸扭体实验 与空白组相比，阿司匹林能
显著抑制小鼠扭体次数，鸡矢藤苷酸甲酯 3、4、5组对
图1 鸡矢藤提取物 HPLC检测图
鸡矢藤苷
鸡藤苷酸
鸡矢藤苷酸甲脂
0 10 20 30 40 50 more
1 600
1 100
1 200
1 000
800
600
400
200
0
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腹腔注射醋酸引发的小鼠扭体次数相比空白组有显著
的抑制作用，差异均有统计学意义（均 P<0.05），呈现
出一定的剂量相关，见表 1。
2.3 小鼠热板实验 与空白组相比，吗啡对热刺激有
明显耐受，鸡矢藤苷酸甲酯 4、5组对热刺激的耐受时
间较空白组具有明显的延长作用，差异均有统计学意
义（均 P <0.05），呈现出一定的剂量相关，见表 2。
2.4 小鼠福尔马林实验 结果显示鸡矢藤苷酸甲酯
组与空白组相比，具有良好的外周镇痛效果和中枢神
经镇痛效果，从起效的时间来看，其镇痛药理作用与吗
啡不同，差异均有统计学意义（均 P<0.05），见表 3。
3 讨 论
在中国、日本、越南和其他的一些东南亚国家，植
物鸡矢藤的根、茎、藤皮、果实作为民间草药使用已有
数千年的历史，尤其在治疗牙痛、胸痛、痔疮引发的疼
痛、风湿性关节炎、脾脏炎症、杆菌性痢疾等方面具有
显著的疗效［8］。结合现代药理学研究，鸡矢藤的成分主
要包括，乙酸异戊酯、乙酸苯甲酯、十五碳酸乙酯、软脂
酸，还含有大量的环烯醚萜苷类化合物［9-10］。虽然鸡矢
藤因为其镇痛作用在民间被广泛使用，但对于其多种
提取物中究竟哪种物质起到关键的镇痛作用以及其镇
痛药理活性均未有相关报告。
基于此，我们对鸡矢藤中主要的化学成分之
一——鸡矢藤苷酸甲酯进行了成分的提取，并通过三
个小鼠实验对其镇痛活性作用进行检测。结果发现鸡
矢藤苷酸甲酯对小鼠具有外周镇痛和中枢镇痛的双重
作用。小鼠醋酸扭体的外周镇痛实验的结果显示鸡矢
藤苷酸甲酯在 20、40、60 mg/kg三组对腹腔注射醋酸
引发的小鼠扭体有显著的抑制作用。小鼠热板的中枢
镇痛实验显示，鸡矢藤苷酸甲酯在 40、60 mg/kg两组
对热刺激引发的小鼠疼痛反应时间具有明显的延长作
用，这两组实验中鸡矢藤苷酸甲酯的剂量与其发生镇
痛作用的疗效正相关。而在小鼠福尔马林实验中，鸡矢
藤苷酸甲酯在 60 mg/kg剂量下较空白组，在 0~5 min
与 25~30 min的时间段内均显示出良好的外周镇痛效
果和中枢神经镇痛效果。
虽然之前中药鸡矢藤的资源开发与利用已取得了
一些进展，但从整体上看，除按照传统方法炮制使用
外,有关其制剂的开发依然没有突破性进展。因此，从
天然产物中寻找具有确切功效的成分提取物具有广泛
的市场前景。本次实验对鸡矢藤中具体起效成分进行
相关研究，希望能与现代科学相结合，为加大中药鸡矢
藤资源的综合利用和深层次开发新型或辅助药物提供
新的参考。
参考文献
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收稿日期：2015- 06- 27 责任编辑：马方 李娜
表1 小鼠醋酸扭体实验相关数据（x±s，次）
组别
空白组
阿司匹林阳性对照组
鸡矢藤苷酸甲酯 1组
鸡矢藤苷酸甲酯 2组
鸡矢藤苷酸甲酯 3组
鸡矢藤苷酸甲酯 4组
鸡矢藤苷酸甲酯 5组
n
10
10
10
10
10
10
10
扭体次数
44.2±4.7
23.9±5.1
46.8±3.0
31.5±4.5
26.8±4.6
26.3±3.4
22.5±3.0
表2 小鼠热板实验相关数据（x±s，s）
组别
空白组
吗啡阳性对照组
鸡矢藤苷酸甲酯 1组
鸡矢藤苷酸甲酯 2组
鸡矢藤苷酸甲酯 3组
鸡矢藤苷酸甲酯 4组
鸡矢藤苷酸甲酯 5组
n
10
10
10
10
10
10
10
耐受时间
1.52±0.15
4.95±0.35
1.10±0.09
1.45±0.16
2.05±0.49
2.45±0.30
2.46±0.24
表3 小鼠福尔马林实验相关数据（x±s，次）
组别
空白组
吗啡阳性对照组
鸡矢藤苷酸甲酯组
n
10
10
10
0~5 min小鼠舔足次数
83.83±13.56
6.67±1.26
36.40±4.80
25~30 min小鼠舔足次数
45.17±12.86
0.17±0.17
5.40±2.66
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