全 文 ：枝获荃丸可通过 降低红细胞膜外侧唾液酸
酶活性而改善癖血状态 。
( 王 丹摘译 梁爱华校 )
03 1裂叶荆芥中 d并檬烯合酶的分子克隆 、
功能表达和特征 〔英〕 / M甲l ya“ 以 T. 二 / Biol
Ph am rB ul l
一2 0 0 1, 24 ( 4 )
` 一
3 7 3一 3 7 7
以富含 d 一柠檬烯及其衍生物 的裂叶荆
芥 ( s e h i z o n即e t a t e n u i fo li a ) 进行了 d 一柠檬
烯合酶 基因的克隆 , 并对 该酶的立 体化学
调节机制进行了探讨 。
从荆芥穗中提取总 R N A , 以逆转录得
到的 c D N A 为模板 , 参考几种植物中的菇
烯合酶的保守氨基酸序列设计变性引物 ,
进行聚 合酶链反应 ( P C R ) 扩增 , 并分析
序列 , 得到含柠檬烯合酶 3 尸一侧翼区的核心
序列 。 用 5 ` . RA C E 技术确证保留的 5 ’ 一区序
列 , 由此克隆到柠檬烯合酶的全长 c D N A
( d L M S )
。 完整的核昔 酸序列注 册 号为
A F2 8 2 8 7 5
。
d L M S 的长度为 2 10 8 个核普
酸 , 含有一个编码 620 个氨基酸的 1 8 6 0 b p
翻译区 。 推断 d L M S 中氨基酸序列在 N 一端
有一个质体转移肤样结构域 。 转移肤是 内
质 网中合成 的蛋 白质转移 到质体的导 向序
列 , 迁移后产生活性成 熟蛋 白质 , 其后消
失 。 单菇合酶的转移肤长度为 5 0一 70 个氨
基酸 , 富含丝氨酸和苏氨酸 , 缺少酸性残
基 , d LM S 具有这些特征 。 d LM S 还有另一
个结构域 D D x x D 基元 , 是底物 一二价金属
阳离子 ( M n Z+ 、 M犷+ 等 ) 复合体的结合位
点 , 其 x x 序列为 I Y , 在所有已知的柠檬
烯合酶中都可观察到 。
制备重组蛋 白 , 并用一个体外转录 /翻
译 系统对 d L M S 进行功 能分析 。 结果 从
d L M S 和从紫苏 (阳性对照 ) 中得到的 卜柠
檬烯合酶基 因 的重组蛋 白的分子 量均为
6 2kD
a , 而计算得到的值为 64 kD a 。
气相 一质谱分析表明 , d L M S 重组蛋白
产 生主 要产物柠檬烯和其它一些副产物 。
用 C y cl o de x 一 B 柱进行柠檬烯的立体化学分
析 , 表明 d L M S 重组蛋白产生的柠檬烯为
d
一柠檬烯 , 而从紫苏中得到的柠檬烯为 l -
柠檬烯 , 这是首次从植物中克隆得到 d 一柠
檬烯合酶基因 。
( 宋丽明摘译 江纪武校 )
0 3 2 人参皂普的生物转化物抑制鼠黑色素
瘤 B 1 6一 F 10 细胞的生长和转移 〔英 〕 /
H a s e g a w a H… / 和汉医药学杂志一 2 0 0 0 , 17
( 5 ) 一 18 6 ~ 19 3
研究发现 口 服人参皂昔 的抑瘤效应源
于人参皂普被肠细菌转化 的代谢物 , 包括
2 0 ( s )
一原人参菇 二醇 一2 0 一氧 一 p一D 一毗喃葡
糖昔 ( M l ) , 口服或静注 M l 又能在肝内
进一步转化为脂肪酸酷 , 包括 3 一氧一油酸 -
M I ( O M I )
。 对 O M I 与 M I 的抑瘤作用进
行比较发现 , O M I 经刺激免疫应答而具有
抑瘤作用 。
材料 : 实验动物为 12 ~ 16 周龄 、 肠道
内有厌氧菌群生长的 C 57 B L/ 6 小鼠。 M l 、
0 M I 均 以二肉豆范酞磷脂酞胆碱 〔D M P C )
脂质体包裹用于体内外实验 。 在含 10 % 胎
牛血清 、 一0 0林g /m L 链霉素 、 6 0林g /毗 卡那
霉素 、 1 0 OU八n L 青霉素的 好树 164 0 培养
基 ( 完全培养基 ) 中单层培养黑色素瘤 B 16
细胞的易转移亚型 B 1 6一F 10 细胞 。
体内实验 : ①给药组小鼠静注 M l 或
o M I 3 om g瓜g ( 0 . 1毗 / 2 0 9 ) , 检测肝内药