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中药溪黄草的物质基础研究
毛学鑫 天津红日药业股份有限公司
摘 要：目的：以中药溪黄草为研究对象，初步探明溪黄草发挥抑菌作用的药效物质基础。方法：本课题采用6种溶剂(蒸馏水、乙醇、乙
醚、丙酮、甲醇和丁醇)提取溪黄草中的可溶出成分，分析比较不同提取液对大肠杆菌、黄曲霉菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果。 结果：溪黄
草70% 乙醇提取液对大肠杆菌、黄曲霉菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好，优于其他5种提取液(P ＜0. 05)。结论：溪黄草发挥抑菌作用的活
性物质主要存在于乙醇提取物中, 预计溪黄草的抑菌作用能够在食品天然防腐剂、临床抗炎抑菌等方面有良好的应用前景和应用价值。
关键词：溪黄草 乙醇提取液 抑菌作用 物质基础
本次实验为探明溪黄草发挥抑菌抗菌作用的药效物质基础，对
不同溶剂的溪黄草提取物进行了体外抑菌试验，以深入了解溪黄草提
取物对各类微生物的抗菌作用，初步确定溪黄草中发挥抗炎抑菌作用
的活性物质，为溪黄草提取物用于制备食物天然防腐剂和医疗抗菌药
提供实验依据和数据支持。
一、材料与方法
1.仪器和材料。粉碎的干溪黄草（安国市御颜坊中药材有限公
司），大肠杆菌、曲霉菌、金色葡萄球菌的菌种，LB培养基，查氏
培养基，血琼脂平板培养基，肉汤培养基(连云港端峰生物科技有限
公司)，所有培养基均经170℃的干热灭菌2小时。
2.实验方法。
2.1水提取物 将干溪黄草尽量切碎，充分浸泡在蒸馏水中，煮沸
三次后，将药液合并过滤除渣后，得到的纯净提取液进行减压浓缩操
作，最后将制得的水提取物做好备注收好备用。
2.2其他提取物 将干溪黄草分别用浓度为70%的乙醇、乙醚、丙
酮、甲醇和丁醇充分浸泡，得到的溪黄草提取液加入絮凝剂后过滤提
纯、减压浓缩等处理，并将得到的乙醇提取物、甲醇提取物等备注好
姓名收藏备用。
2.3制备含菌平板 在无菌操作环境中，将三种试验菌菌种移入
相应的培养基内（大肠杆菌--LB培养基，黄曲霉菌--查氏培养基，
金黄色葡萄球菌--血琼脂平板培养基），划线分离或涂布分离后，
将LB培养基和血琼脂平板培养基放在培养箱中以37℃培养一小时，
待其完全吸收后翻转培养基，使其倒置于培养箱内，在25℃下培养
一周，或36±1℃下培养20-28小时；同样操作后将查氏培养基放于
培养箱中以28℃培养2-3天。培养成功后所有培养基在0-4℃冷藏备
用。
2.4测定抑菌圈直径。用灼烧后的无菌接种环挑取少量菌体于带
玻璃珠的无菌生理盐水中，制成不同菌种的菌悬液，吸取适量菌悬
液将细菌均匀密集的接种于培养基平皿上。无菌操作下将制备好的
无菌滤纸小圆片分别浸泡于6种溪黄草提取液中，每种提取液设置三
个浓度，浸泡好后用无菌镊子夹取圆片滤纸，等距离贴在刚刚制作的
含菌培养基平板表面，最后将浸有生理盐水的对照滤纸片按上诉方法
贴于培养基的中央部位，滤纸片放置后不可移动。不同的带菌培养基
平板上贴好不同浓度、不同种类的溪黄草提取液滤纸片后，将培养基
置于适宜温度下培养，带有大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养基在
36±1℃下培养24h，黄曲霉菌培养基在28℃下培养48h，观察滤纸片
周围抑菌圈的有无及大小，并测定抑菌圈的直径，以确定溪黄草提取
物抑菌效果及最优提取方法。
2.5最小抑菌浓度和最小杀菌浓度 试管稀释法，取无菌试管6
只，第一支加入1.8ml肉汤培养基，2-5加入1ml肉汤培养基。以无菌
操作吸取已制备好的溪黄草乙醇提取液0.2ml加入第1支试管中，混匀
后吸取1ml加入第2支试管中依次倍比稀释至第5管，第5管弃去1ml，
第6管只加入1ml肉汤培养基作为对照管。每管加入1×105cfu大肠杆菌
菌液0.1ml。在37℃培养18-24h后观察不同管内细菌生长现象。将实
验重复3次，能够完全抑制大肠杆菌生长的最小药物浓度为最小抑菌
浓度（MIC)。将溪黄草乙醇提取液的浓度高于MIC的试管继续培养一
定时间，观察菌落生长情况,以仍无菌落生长的最小药物浓度为该提
取物的最低杀菌浓度(MBC)。金黄色葡萄球菌和黄曲霉菌也按照上述
方法测定MIC和MBC，记录实验结果。
二、结果
1.溪黄草提取物的抑菌效果。由表1、表2、表3的实验数据比较
可知，溪黄草提取物对大肠杆菌、曲霉菌、金色葡萄球菌均有抑菌作
用，虽然不同提取剂提取的溪黄草对不同的细菌真菌抑菌作用并不相
同，但通过综合比较发现用乙醇做提取剂，溪黄草提取物对三种试验
菌的抑菌圈直径最大，抑菌效果最好，因此乙醇是提取溪黄草抑菌成
分的最佳提取剂，溪黄草发挥抑菌作用主要药效成分存在于乙醇提取
物中。
表1 溪黄草提取物对大肠杆菌的抑菌圈直径 (mm)
抑菌物质 平皿1 平皿2
水提取物 11.3±0.5 11.5±0.3
甲醇提取物 10.8±0.3 10.5±0.5
乙醇提取物 13.8±0.5 14.0±0.3
丁醇提取物 10.3±0.2 10.4±0.2
乙醚提取物 9.0±0.3 9.3±0.2
丙酮提取物 11.0±0.3 11.4±0.5
表2 溪黄草提取物对曲霉菌的抑菌圈直径 (mm)
抑菌物质 平皿1 平皿2
水提取物 6.3±0.5 6.9±0.7
甲醇提取物 6.1±0.3 6.2±0.7
乙醇提取物 7.3±0.5 7.5±0.6
丁醇提取物 5.4±0.4 5.6±0.3
乙醚提取物 3.7±0.5 3.8±0.7
丙酮提取物 5.2±0.6 5.9±0.2
表3 溪黄草提取物对金色葡萄球菌的抑菌圈直径 (mm)
抑菌物质 平皿1 平皿2
水提取物 7.8±0.6 7.7±0.3
甲醇提取物 8.6±0.4 8,1±0.4
乙醇提取物 10.3±0.4 10.5±0.4
丁醇提取物 9.5±0.5 9.1±0.3
乙醚提取物 7.9±0.5 7.3±0.6
丙酮提取物 7.7±0.3 7.5±0.3
2.溪黄草提取物的最低抑菌浓度和最小杀菌浓度。为了更准确的
了解溪黄草提取物的抑菌效果，我们进一步测定了溪黄草乙醇提取物
对试验菌的最低抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC），实验结
果见表4。
表4 溪黄草乙醇提取物的最低抑菌浓度和最小杀菌浓度（%）
大肠杆菌 曲霉菌 金色葡萄球菌
最低抑菌浓度
（MIC） 0.125 0.5 0.25
最小杀菌浓度
（MBC） 0.25 1 0.50
由表4实验数据分析可知，不同浓度的溪黄草乙醇提取物对大肠
杆菌、曲霉菌、金色葡萄球菌有不同的抑制作用，溪黄草乙醇提取物
对大肠杆菌的MIC值、MBC值最小，抑菌、杀菌作用最明显；对金色
葡萄球菌的抑菌、杀菌效果次之；对曲霉菌的最低抑菌浓度为0.5%，
表明溪黄草提取物对曲霉菌的抑菌作用还是比较有效得。
三、结语
在本次实验中，溪黄草70%乙醇提取物对试验菌的抑菌作用优于其
他溶剂提取物，说明溪黄草发挥抑菌作用主要药效成分存在于乙醇提取
物中。溪黄草提取物对大肠杆菌、曲霉菌、金色葡萄球菌均有较好的抑
菌作用，且其抑菌效果随着浓度的增加而逐渐增强，溪黄草乙醇提取物
是一种抗炎抑菌的天然活性物质，以其作为原材料开发安全经济实用的
新型抗菌药预计在医药、食品等方面的能取得广阔应用前景。
参考文献：
[1]刘方乐,陈德金,冯秀丽,吴冲,林朝展,祝晨蔯. 溪黄草的化学成分
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[2]郑琴,崔炯谟,傅宏征. 溪黄草的化学成分研究[J]. 中国中药杂
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