全 文 :·技术方法·
毛钩藤叶的生药学鉴定
陈兴兴,张宏伟,邵 帅,梁镇标,莫志贤
南方医科大学中医药学院,广东 广州 510515
摘要:目的建立毛钩藤叶的生药鉴定方法。方法采用生药性状鉴别、显微鉴别及薄层层析色谱法对毛钩藤叶进行生药学
研究。结果毛钩藤叶含众多多细胞非腺毛,栅栏组织细胞2列,叶片薄璧细胞含草酸钙簇晶,于上表面的表皮下层细胞沿
网脉成列分布,气孔直轴式,薄层层析显示与对照药材至少有2种相同的生物碱成分。结论本实验为毛钩藤叶的鉴定、质
量标准的制定及进一步开发利用提供了科学依据。
关键词:毛钩藤叶;性状鉴别;显微鉴别;薄层色谱
中图分类号:R282.5 文献标志码:A 文章编号:1673-4254(2011)02-0269-03
Pharmacognostical identification of the leaf of Uncaria hirsuta Havil
CHEN Xing-xing, ZHANG Hong-wei, SHAO Shuai, LIANG Zhen-biao, MO Zhi-xian
College of Traditional Chinese Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China
Abstract: Objective To perform a pharmacognostical study of the leaf of Uncaria hirsuta Havil. Methods The
specimens of Folium Uncariae Hirsutae were collected for studying its characteristics, microscopic appearance and
thin-layer chromatography. Results The leaf of Uncaria hirsuta Havil was characterized by numerous multicellular
non-glandular hairs, 2 lines of palisade tissue, a diacytic type of stoma, and clustered crystals in its parenchyma. At
least two kinds of alkaloids identical to the control were identified in the specimens. Conclusion The results can be
used as the evidence for identification, formulation of the quality-control standards as well as further utilization of
Folium Uncariae Hirsutae.
Key words: leaves; Uncaria hirsuta Havil; characterization; microscopic identification; thin-layer chromatography
毛钩藤(Uncaria hirsuta Havil.)是茜草科(Rubia-
ceae)钩藤属(Uncaria)植物,在2005年版《中华人民共
和国药典》中被收载作为中药钩藤的一种[1],是目前
华南地区的主要药用钩藤品种之一。中药钩藤传统
的药用部位是带钩茎枝,具有清热平肝、熄风定惊之
功效。然而早在20世纪70年代,我国药学工作者便
对国产钩藤资源进行了较为系统的考察研究,发现
钩藤叶的总生物碱含量与钩枝相近,而钩藤叶的资
源产量却远比钩藤带钩茎枝的产量高,其比例为钩
占9.8%,钩茎占31.2%,叶占60%[2]。可见钩藤的叶作
为一种药用资源,药用价值及综合利用潜力都很
大。在民间各种钩藤的叶也有较广泛应用[3]。目前
对毛钩藤藤茎、钩的显微鉴别研究已有报道[4],尚未
见有关其叶的生药学研究报道。本实验对毛钩藤叶
的药材性状、显微结构、理化鉴别等进行研究,以期
为该药材的鉴定、质量标准的制定以及进一步开发
利用提供参考。
1 材料、仪器与方法
1.1 实验材料
样品于 2009年 2月采自南方医科大学药用植物
园,经南方医科大学中医药学院药用植物与鉴定教
研室马骥教授鉴定为茜草科钩藤属植物毛钩藤Un-
caria hirsuta Havil.,标本保存于南方医科大学中药标
本馆。
1.2 仪器及试剂
PM-2135型切片机 (德国莱卡),Nikon Eclipse
E600生物显微镜,Nikon Coolpix 4500数码相机,
SK3300LHC超声波清洗仪(上海科导超声仪器有限
收稿日期:2010-10-15
基金项目:国家自然科学基金(30828033)
Supported by National Natural Science Foundation of China(30828033).
作者简介:陈兴兴,讲师
通 讯 作 者 :张 宏 伟 ,副 教 授 ,电 话 :020-61648256,E-mail:
zhwjyl@fimmu.com
2011;31(2) 南方医科大学学报(J South Med Univ) ·· 269
公司),JA2003型电子天平(上海良平仪器仪表有限
公司),R205型旋转蒸发仪(上海申生科技有限公
司),GOODLOOK-1000型薄层色谱成像系统(上海
科哲生化科技有限公司),钩藤对照药材(中国药品
生物制品检定所,批号:1190-200101),所用试剂均为
分析纯。
1.3 方法
石蜡切片:新鲜毛钩藤叶片,经 FAA固定液固
定,常规石蜡切片,番红-固绿染色制成永久片[2]。表
面撕片:撕取毛钩藤叶上下表皮,制成临时水装片。
2 结果与分析
2.1 性状鉴别
叶多皱缩,浅波状。完整叶片展平后呈卵形或
椭圆形,长 6~12 cm,宽 3.5~7 cm,顶端渐尖,基部
钝。上表面棕绿色,稍粗糙,被疏硬毛;下表面浅绿
色或黄绿色,被糙伏毛;侧脉羽状,7~10对,于下表面
突起,脉腋陷窝内有黏液毛。叶柄短,1~3 mm,有
毛。薄革质而脆,易碎。气微,味微苦。
2.2 显微鉴别
2.2.1 叶的横切面 如图1。上下表皮各为1列细胞,
外被角质层,均有多细胞非腺毛。上表皮细胞稍大,
类方形或扁方形;下表皮细胞较小,有气孔分布。栅
栏组织约占叶片切面的 1/2,为 2列细胞,第 1列细胞
排列紧密整齐,长约37 μm,直径约6 μm;第2列细胞
稍短,长 20~27 μm。海绵组织薄。主脉向下突出,
上、下表皮内侧有数层厚角组织细胞,维管束3个,外
韧型,中间的一个较大,半月形,两端内弯,几乎占据
整个叶脉,另两个较小,靠近上表面,在半月形的内
弯处。主脉薄璧细胞含草酸钙砂晶,叶片薄璧细胞
含草酸钙簇晶。
2.2.2 叶表面撕片 如图 2。上表皮细胞垂周壁近平
直。下表皮细胞垂周壁稍弯曲。气孔直轴式,副卫
细胞 2个,较小,气孔直径 20~25 μm。草酸钙簇晶
12~25 μm,在上表面的表皮下层细胞沿网脉成列分
布。下表皮多细胞非腺毛众多,细胞数 2~16个,长
150~900 μm,直径约 20 μm。上表皮毛少,除多细胞
非腺毛外,偶有单细胞非腺毛,长约160 μm。
2.3 薄层层析鉴别
取钩藤对照药材及毛钩藤叶样本粉末各 1 g,加
浓氨水使湿润,加三氯甲烷 30 ml,以 40 kHz超声波
提取30 min,滤过,滤液用2% H2SO4溶液萃取3次,每
次 10 ml,合并萃取液后用浓氨水调节 pH值≈9,碱化
后溶液用三氯甲烷萃取3次,每次10 ml,合并三氯甲
烷萃取液后回收溶剂至干,残渣用 0.5 ml甲醇溶解。
用5 μl毛细管吸取样本点样于自制硅胶G薄层板上,
以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(10∶4∶1)为展开剂,在层
析缸中饱和30 min后上行展开10 cm,取出,晾干,显
色[5]。结果显示,在 365 nm波长紫外光下观察,毛钩
藤叶与对照药材有相同比移值的斑点为3个,薄层板
用改良碘化铋钾显色后,样品与对照药材各有两个
相对应的斑点显橙红色,说明毛钩藤叶与对照药材
至少有两种相同的生物碱成分(图3)。
3 讨论
实验结果表明,毛钩藤叶从药材性状、叶横切面
及表面显微特征均具有形态学规律,对其生药鉴定
有实际意义。如其含众多多细胞非腺毛,栅栏组织
图1 毛钩藤叶主脉横切面详图
1: 非腺毛; 2:上表皮; 3: 栅栏组织; 4: 海绵组织; 5: 下表皮; 6: 木
质部; 7: 形成层; 8: 韧皮部; 9: 草酸钙晶体; 10: 厚角组织
图2 毛钩藤叶表面撕片及叶片横切面图
1:上表皮细胞及草酸钙簇晶; 2:非腺毛; 3:下表
皮细胞及气孔; 4:叶片横切面详图
图3 毛钩藤叶薄层层析图谱
1: 钩藤对照药材; 2: 毛钩藤叶样品
南方医科大学学报(J South Med Univ) 第31卷·· 270
细胞 2列,叶片薄璧细胞含草酸钙簇晶,于上表面的
表皮下层细胞沿网脉成列分布,气孔直轴式。这些
特征都可以作为毛钩藤叶鉴定的依据。在薄层色谱
实验中,毛钩藤叶是和传统的钩藤药材也即钩藤(U.
rhynchophylla (Miq.)Jacks.)的带钩茎枝进行对照的,
而实验的结果表明二者有部分相同的化学成分,尤
其在生物碱方面至少有两种相同的成分。这一结果
为毛钩藤叶的开发利用和深入研究提供了实验依
据,而其活性有效成分及含量、药理作用等有待进一
步研究。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部[M].北京:化学工
业出版社, 2005: 180.
[2] 夏光成,徐实枚,刘雪明.国产钩藤属植物资源的利用研究[J].
中草药通讯, 1977, (2): 43-7.
[3] 余再柏,舒光明,秦松云,等.国产钩藤类中药资源调查研究[J].
中国中药杂志, 1999, 24(4): 198-203.
[4] 唐勇琛,蒋朝晖,付志明,等.黔产野生和栽培钩藤药材的显微鉴
别研究[J].中国民族民间医药, 2007, 88(5): 260-5.
[5] 周嘉琳.中药配方颗粒薄层色谱彩色图集[M].南京:江苏科学
技术出版社, 2004: 108.
(编辑:黄开颜)
陈兴兴,等.毛钩藤叶的生药学鉴定第2期 ·· 271