全 文 ：* 国家科技支撑计划项目(2012BAI29B09)
＊＊ 通信作者 Tel:13668987309;E － mai:huangnn421@ 163． com
第一作者 Tel:15088068915;E － mail:thm1835@ qq． com
HPLC法同时测定不同来源溪黄草药材中 8 个水溶性成分的含量*
唐海明1，陈建南1，2，张扬1，赖小平1，2，黄松1，2＊＊
(1．广州中医药大学新药开发研究中心，广州 510006;2．东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院，东莞 523808)
摘要 目的:建立同时测定不同品种溪黄草中咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素
－6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁含量的高效液相色谱法，并比较评价溪黄草各品种药材质量。方法:采用 Phe-
nomenex luna C18(250 mm ×4. 6 mm，5 μm)色谱柱，流动相为甲醇 － 0. 5%甲酸水溶液梯度洗脱，流速 0. 8 mL·min
－1，检测波长
334 nm;柱温为室温(25 ℃)。结果:咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 － 6，8 －二
－ C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁线性范围分别为 0. 09 ～2. 28、0. 13 ～3. 11、0. 06 ～1. 38、0. 18 ～4. 54、0. 08 ～1. 97、0. 07 ～ 1. 71、
0. 06 ～1. 49、0. 05 ～1. 31 μg;平均回收率(n =6)分别为 99. 7%、99. 5%、100. 1%、99. 0%、98. 4%、98. 4%、101. 8%、99. 4%，ＲSD分
别为 0. 86%、1. 8%、1. 8%、1. 7%、2. 0%、1. 2%、1. 2%、1. 4%。狭基线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏
佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 －6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁 8个水溶性成分含量分别为 0. 63 ～0. 33、0. 88 ～
6. 20、0. 44 ～2. 41、2. 37 ～11. 19、0. 75 ～5. 53、0. 76 ～1. 83、0. 45 ～1. 78、0. 00 ～2. 45 mg·g －1，纤花线纹香茶菜中上述 8个水溶性成分含量
分别为 0. 86 ～3. 12、0. 76 ～6. 35、0. 53 ～1. 47、2. 44 ～11. 1、1. 96 ～5. 29、0. 00 ～1. 82、0. 90 ～5. 82、0. 00 ～2. 34 mg·g －1，线纹香茶菜中上述 8
个水溶性成分含量分别为 0. 61 ～2. 17、0. 77 ～1. 56、0. 47 ～1. 82、1. 97 ～6. 48、1. 69 ～6. 72、0. 00 ～0. 56、0. 00 ～3. 30、0. 00 ～0. 84 mg·g －1，
溪黄草中上述 8个水溶性成分含量分别为 0. 62 ～ 1. 33、0. 00 ～ 0. 94、0. 44 ～ 1. 33、0. 00 ～ 2. 13、0. 18 ～ 1. 81、0. 00 ～ 0. 50、0. 00 ～ 1. 11、
0. 00 ～0. 22 mg·g －1。结论:本研究所建立的方法能鉴别不同来源的溪黄草药材，可用于溪黄草药材的质量控制。
关键词:高效液相色谱法;溪黄草;新西兰牡荆苷;异夏佛塔苷;夏佛塔苷;牡荆苷;咖啡酸;芹菜素;芦丁
中图分类号:Ｒ 917 文献标识码:A 文章编号:0254 － 1793(2015)02 － 0228 － 07
Simultaneous determination of eight water － soluble compositions
in Isodon serra from different origins by HPLC*
TANG Hai － ming1，CHEN Jian － nan1，2，ZHANG Yang1，LAI Xiao － ping1，2，HUANG Song1，2＊＊
(1． New Drug Ｒesearch ＆ Development Center，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006，China;
2． Dongguan Institution for Mathematics and Theoretics Engineering Ｒesearch，Guangzhou University of Chinese Medicine，Dongguan 523808，China)
Abstract Objective:To establish an HPLC method for simultaneous determination of caffeic acid，vicenin Ⅱ，vi-
cenin Ⅲ，isoschaftoside，schaftoside，vitexin，6，8 － di － C － α － L － arabinosylapigenin，rutin in Isodon serra，and
compare and evaluate quality of different varieties of Isodon serra． Methods:The HPLC system consisted of Phe-
nomenex Luna C18(250 mm ×4. 6 mm，5 μm)column and a solution system of methanol and 0. 5% formic acid as
the mobile phase for gradient elution，the flow rate was 0. 8 mL·min －1 and the wavelength of detector was 334 nm
at the column temperature of 25 ℃ ． Ｒesults:The linear ranges of caffeic acid，vicenin Ⅱ，vicenin Ⅲ，isoschafto-
side，schaftoside，vitexin，6，8 － di － C － α － L － arabinosylapigenin，rutin were 0. 09 － 2. 28 μg，0. 13 － 3. 11
μg，0. 06 － 1. 38 μg，0. 18 － 4. 54 μg，0. 08 － 1. 97 μg，0. 07 － 1. 71 μg，0. 06 － 1. 49 μg，0. 05 － 1. 31 μg，re-
spectively． The average recoveries(n = 6)were 99. 7% (ＲSD = 0. 86%)，99. 5% (ＲSD = 1. 8%) ，100. 1%
(ＲSD = 1. 8%) ，99. 0%(ＲSD = 1. 7%) ，98. 4%(ＲSD = 2. 0%) ，98. 4%(ＲSD = 1. 2%) ，101. 8%(ＲSD =
1. 2%) ，99. 4%(ＲSD = 1. 4%) ，respectively． The content ranges of caffeic acid，vicenin Ⅱ，vicenin Ⅲ，isos-
chaftoside，schaftoside，vitexin，6，8 － di － C － α － L － arabinosylapigenin and rutin in Isodon lophanthoides var．
gerardianus were 0. 63 － 0. 33 mg·g － 1，0. 88 － 6. 20 mg·g － 1，0. 44 － 2. 41 mg·g － 1，2. 37 － 11. 19 mg·g － 1，
—822— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(2)
0. 75 － 5. 53 mg·g － 1，0. 76 － 1. 83 mg·g － 1，0. 45 － 1. 78 mg·g － 1，0. 00 － 2. 45 mg·g － 1，respectively． The
content ranges of the above eight water － soluble compositions in Isodon lophanthoides var． graciliflora were 0. 86 －
3. 12 mg·g －1，0. 76 －6. 35 mg·g －1，0. 53 －1. 47 mg·g －1，2. 44 －11. 1 mg·g －1，1. 96 －5. 29 mg·g －1，0. 00 － 1. 82 mg
·g －1，0. 90 － 5. 82 mg·g －1，0. 00 － 2. 34 mg·g －1，respectively． The content ranges of the above eight water － solu-
ble compositions in Isodon striatus were 0. 61 － 2. 17 mg·g －1，0. 77 － 1. 56 mg·g －1，0. 47 － 1. 82 mg·g －1，1. 97 －
6. 48 mg·g －1，1. 69 － 6. 72 mg·g －1，0. 00 － 0. 56 mg·g －1，0. 00 － 3. 30 mg·g －1，0. 00 － 0. 84 mg·g －1，respec-
tively． The content ranges of the above eight water － soluble compositions in Isodon sorra(Maxim．)Kudo were 0. 62 －
1. 33 mg·g －1，0. 00 －0. 94 mg·g －1，0. 44 －1. 33 mg·g －1，0. 00 －2. 13 mg·g －1，0. 18 －1. 81 mg·g －1，0. 00 －0. 50 mg·
g －1，0. 00 －1. 11 mg·g －1，0. 00 －0. 22 mg·g －1，respectively．Conclusion:The developed HPLC method can be used to i-
dentify different varieties of Isodon serra and can be used for the quality control of Isodon serra．
Keywords:HPLC;Isodon sorra;vicenin;isoschaftoside;schaftoside;vitexin;caffeic acid;apigenin;rutin
溪黄草为唇形科植物线纹香茶菜(Isodon striatus
(Benth．)Kudo)或溪黄草(Isodon sorra (Maxim．)Ku-
do)干燥地上部分［1］，具有清热利湿及退黄功效，用于
湿热黄疸、湿热泻痢、急性黄疸型肝炎、急性胆囊炎而
有黄疸者［2］。溪黄草主要含有挥发油、萜类、酚酸、黄
酮类和香豆素等成分。药理研究表明，溪黄草水提物
具有抗炎、保肝作用［3］。笔者前期研究成功从狭基线
纹香茶菜水提液中分离得到咖啡酸、新西兰牡荆苷
2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹
菜素 －6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁
等水溶性类成分。研究表明，黄酮苷具有保肝、护肝
的功效［4］，其中新西兰牡荆苷 2具有抗炎、抗氧化、抗
CCl4和半乳糖肝损伤作用
［5］及抗前列腺癌作用［6］，异
夏佛塔苷［7］和牡荆苷［8］具有保肝、护肝的功效。溪黄
草作为一种岭南特色的中药资源，是多种中成药和保
健品的主要原料，市场需求量大，极具开发研究前景。
溪黄草药材首次被载入 2010 年版中国药典［1］，近几
年岭南地区溪黄草种植面积、产量迅速发展，但产品
质量不稳定，没有统一的质量控制标准，开发利用率
相对较低，开发深度还不够，有些产品还停留在粗加
工状态，加工层次不高，附加值低，在一定程度上制约
了该产业进一步地发展。
目前，有关溪黄草质量控制方面研究有咖啡酸、
迷迭香酸、二萜类、三萜类、黄酮类和挥发油成分定
量测定的报道［9 － 13］，而笔者在研究溪黄草水溶性成
分时发现，溪黄草水提物中含有较多酚酸和黄酮苷
类成分，酚酸及黄酮苷类成分有较强的生物活性，尚
未发现 HPLC法同时测定溪黄草中多种水溶性成分
的报道，加之国内外对溪黄草水溶性成分报道同样
少，这些研究不能全面系统地评价溪黄草的质量，使
其质量监控标准缺乏。本研究建立了 HPLC 法同时
测定溪黄草中咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆
苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 － 6，
8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁的量的
方法，并对不同来源溪黄草药材进行鉴别，为其质量
控制提供依据。
1 仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪(SIL － 20A自动进样
器，LC － 20AT 紫外检测器，DGU － 20A5 柱温箱);
万分之一电子天平(Sartorius BP110s，德国赛多利斯
公司) ;粉碎机械 FZ － 230 型(温岭市牧屿百乐机床
厂) ;超声清洗器(ULTＲASONIC，360KW，250KHz)。
流动相所用甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其他试
剂均为分析纯。
对照品咖啡酸(批号 110885 － 200102)、牡荆苷
(批号 111687 － 200602)、芦丁(批号 100080 －
200707)购自中国食品药品检定研究院，新西兰牡
荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、芹
菜素 － 6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷均为
广州中医药大学新药中心自制，经 ESI － MS、1 H －
NMＲ和13C － NMＲ确认结构，纯度在 98%以上。
溪黄草药材(实地采集及购自广东各大药店)，
经广州中医药大学新药开发研究中心陈建南研究员
和广州白云山和记黄埔中药有限公司高级药师邓乔
华鉴定为唇形科香茶菜属植物线纹香茶菜 Isodon
striatus (Benth．)Kudo、狭基线纹香茶菜 Isodon loph-
anthoides var． gerardianus (Benth．)H． Hara、纤花香
茶菜 Isodon lophanthoides var． graciliflora (Benth．)
H． Hara和溪黄草 Isodon sorra (Maxim．)Kudo，以上
凭证标本存于广州中医药大学新药开发研究中心。
2 方法与结果
2. 1 混合对照品溶液 精密称取各对照品适量，加
入 50%甲醇制成含咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰
牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 －
6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁 8 个
成分分别为 364、2 490、550、3 630、1 580、685、595、
—922—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(2)
525 μg·mL －1的单一对照品储备液。分别取单一对
照品储备液适量，配制成含上述 8 个成分分别为
45. 50、62. 25、27. 5、90. 75、39. 5、34. 25、29. 75、
26. 25 μg·mL －1的混合溶液，即得。
2. 2 供试品溶液 药材经粉碎机粉碎，过 40 目筛。
取样品粉末约 0. 5 g，精密称定，置于 50 mL 具塞锥
形瓶中，加 70%乙醇 20 mL，超声(360 W，250 kHz)
提取 30 min，提取 2 次，滤过，合并滤液定容至 50
mL，过 0. 45 μm滤膜，取续滤液，即得。
2. 3 色谱条件及系统适用性考察 采用日本岛津
LC －20AT C18色谱柱(250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ，以
甲醇 － 0. 5%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱(0 ～
25 min，25%甲醇→2%甲醇;35 ～ 40 min，32%甲醇;
40 ～ 45 min，32%甲醇→34%甲醇;45 ～ 70 min，34%
甲醇→36% 甲醇) ，流速 0. 8 mL·min －1，柱温为
25 ℃，检测波长 334 nm，进样量 15 μL。各峰与相
邻峰的分离度均大于 1. 5，理论塔板数均在 10 000
以上。色谱图见图 1。
图 1 对照品与样品 HPLC色谱图
Fig． 1 HPLC chromatograms of reference substances and samples
A．混合对照品(a mixture of reference substances) B．狭基线纹香茶菜［Isodon lophanthoides var． gerardianus (Benth．)H． Hara］ C．纤花线纹香茶菜［Isodon lophan-
thoides var． graciliflora (Benth．)H． Hara］ D．线纹香茶菜［Isodon striatus (Benth．)Kudo］ E．溪黄草［Isodon sorra (Maxim．)Kudo］
1．咖啡酸(caffeic acid) 2．新西兰牡荆苷 2(vicenin Ⅱ) 3．新西兰牡荆苷 3(vicenin Ⅲ) 4．异夏佛塔苷(isoschatroside) 5．夏佛塔苷(schaftoside) 6．牡荆苷
(vitexin) 7．芹菜素 －6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷(6，8 － di － C － α － L － arabinosylapigenin) 8．芦丁(rutin)
—032— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(2)
2. 4 线性关系考察 精密量取“2. 1”项下混合对
照品溶液 1、5、10、15、20、25 μL，分别重复进样测定
3 次，记录色谱峰。以进样量 X(μg)为横坐标，峰面
积平均值 Y为纵坐标，绘制标准曲线并进行回归计
算，8 个水溶性成分线性关系良好，回归方程、线性
范围、相关系数见表 1;以信噪比(S /N)为 3∶ 1 和 10
∶ 1 为基准测得各化合物的检测限和定量限，结果见
表 1。
表 1 8 个水溶性成分的线性关系、检测限及定量限(n =6)
Tab． 1 Ｒegression equation，LOQ and LOD of eight water － soluble compositions
成分
(composition)
回归方程
(regression equation)
r
线性范围
(linear range)/μg
检测限
(LOQ)/ng
定量限
(LOD)/ng
咖啡酸(caffeic acid) Y =5 ×106X －2. 901 × 104 0. 999 7 0. 09 ～ 2. 28 2. 28 0. 87
新西兰牡荆苷 2(vicenin Ⅱ) Y =2 ×106X +3. 237 × 103 0. 999 9 0. 13 ～ 3. 11 1. 19 0. 69
新西兰牡荆苷 3(vicenin Ⅲ) Y =2 ×106X +2. 083 × 104 0. 999 8 0. 06 ～ 1. 38 3. 12 1. 02
异夏佛塔苷(isoschaftoside) Y =2 ×106X +3. 412 × 103 0. 999 9 0. 18 ～ 4. 54 2. 33 1. 18
夏佛塔苷(schaftoside) Y =2 ×106X +7. 617 × 103 0. 999 9 0. 08 ～ 1. 97 2. 09 0. 94
牡荆苷(vitexin) Y =3 ×106X +9. 142 × 103 0. 999 9 0. 07 ～ 1. 71 1. 26 1. 02
芹菜素 －6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯
糖苷(6，8 － di － C － α － L － arabinossylapi-
genin)
Y =2 ×106X +1. 151 × 104 0. 999 9 0. 06 ～ 1. 49 3. 15 0. 54
芦丁(rutin) Y =2 ×106X +4. 709 × 103 0. 999 9 0. 05 ～ 1. 31 1. 22 1. 06
2. 5 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液
15 μL，连续进样 6 次，测定峰面积。结果咖啡酸、新
西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔
苷、牡荆苷、芹菜素 － 6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿
拉伯糖苷和芦丁峰面积的 ＲSD(n = 6)分别为
0. 60%、0. 46%、0. 88%、0. 44%、0. 76%、0. 66%、
0. 43%、0. 85%，表明仪器精密度良好。
2. 6 重复性试验 分别称取同一批样品(广东饶
平基地 1)6 份，按“2. 2”项下方法平行制备 6 份供
试品溶液，进样 15 μL，记录各待测成分的峰面积
值，代入“2. 4”项下回归方程，计算含量。结果样品
中咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛
塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 －6，8 －二 － C － α －
L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁的平均含量分别为 0. 63、
3. 91、0. 45、7. 18、3. 01、0. 53、0. 57、0. 54 mg·g －1，ＲSD
分别为 0. 38%、0. 93%、0. 79%、1. 1%、0. 46%、
1. 2%、1. 7%、0. 96%，表明该方法重复性良好。
2. 7 稳定性试验 取同一份供试品溶液(广东饶
平基地 1 样品) ，分别在 0、2、4、8、12、24 h 进样 15
μL，记录色谱图，计算咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西
兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜
素 － 6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁
色谱峰的峰面积值，计算其 ＲSD 分别为 0. 96%、
1. 7%、1. 2%、2. 0%、0. 82%、1. 1%、1. 6%、1. 2%，
表明供试品溶液在 24 h内稳定性良好。
2. 8 加样回收率试验 取“2. 6”项中已测知含有
量的狭基线纹香茶菜粉未 6 份，每份约 0. 25 g，精密
稳定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入咖啡酸、新西
兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔
苷、牡荆苷、芹菜素 － 6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿
拉伯糖苷、芦丁的对照品储备液 0. 5、0. 4、0. 2、0. 5、
0. 5、0. 2、0. 2、0. 2 mL，按“2. 2”项下的方法制备供
试溶液，在上述色谱条件下进样 15 μL，记录峰面
积，计算回收率，结果见表 2，表明方法准确度良好。
表 2 加样回收率试验结果(n =6)
Tab． 2 Ｒesults of recovery tests
成分
(composition)
加入量
(added)/μg
平均回收率
(average
recovery)%
ＲSD /%
咖啡酸(caffeic acid) 182 99. 7 0. 86
新西兰牡荆苷 2(vicenin Ⅱ) 996 99. 5 1. 8
新西兰牡荆苷 3(vicenin Ⅲ) 110 100. 1 1. 8
异夏佛塔苷(isoschaftoside) 1 815 99. 0 1. 7
夏佛塔苷(schaftoside) 790 98. 4 2. 0
牡荆苷(vitexin) 137 98. 4 1. 2
芹菜素 － 6，8 － 二 － C － α －
L －吡喃阿拉伯糖苷(6，8 －
di － C － α － L － arabinosy-
lapigenin)
119 101. 8 1. 2
芦丁(rutin) 105 99. 4 1. 4
2. 9 样品含量测定 取不同来源溪黄草样品，分别
按“2. 2”项下方法制备供试品溶液，精密取 15 μL
进样分析，测定峰面积，按“2. 4”项下回归方程计算
各成分含量，结果见表 3。
3 讨论
本试验分别对咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰
牡荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 －6，
—132—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(2)
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—332—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(2)
8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁溶液进行
了紫外全波长扫描，其最大吸收波长多数在 334 nm
左右，在该波长下测定样品，各成分峰形较好，基线稳
定，干扰少，故选择 334 nm作为检测波长。
本试验对 4 种常用的流动相系统(乙腈 －水、
乙腈 －磷酸水、甲醇 －水、甲醇 －磷酸水)的应用进
行了考察，结果表明上述系统在等度洗脱情况下，所
测的咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏
佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 － 6，8 －二 － C －
α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁 8 个成分达不到很
好的分离效果，用乙腈作有机相时，同分异构体异夏
佛塔苷和夏佛塔苷根本不能分离开，最终用甲醇 －
0. 5%甲酸系统，被测 8 个水溶性成分分离度良好，
峰形窄而对称，不受其他峰的干扰。
本实验所测咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、新西兰牡
荆苷 3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素 － 6，
8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁 8 个成分
为水溶性酚酸和黄酮苷类，试样对提取溶剂水、甲醇
以及 10%、30%、50%、70%、80%、95%乙醇等进行了
选择，结果甲醇、高浓度乙醇提取率极低，含水甲醇提
取率与含水乙醇相当，但甲醇毒性大，用 70%乙醇作
提取溶剂，提取率高，其他成分干扰小。狭基线纹香
茶菜与纤花线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷 2、
新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜
素 －6，8 －二 － C － α － L －吡喃阿拉伯糖苷和芦丁 8
个水溶性成分的含量相差较小，平均含量比基本一
致，为 2∶ 2∶ 1∶ 5∶ 3∶ 1∶ 2∶ 1，线纹香茶菜的成分与其变种
相似，但含量略低，溪黄草中各水溶性成分的含量明
显低于线纹香茶菜及其变种，且溪黄草中新西兰牡荆
苷 2、新西兰牡荆苷 3、异夏佛塔苷、牡荆苷和芦丁 5个
成分常常缺失，不易被检测到。从所采集样品来看，不
同产地狭基线纹香茶菜各成分含量较稳定，且以广东
潮汕地区的品质较好，其他各品种溪黄草药材产地差
异较大，这可能与气候环境等因素的影响有关，但由于
样品采集量有限，目前还缺乏确切的数据支撑，有待进
一步研究。有关各组分含量、采收时间之间的动态变
化以及产地之间含量的差异，将在后期实验中进一步
研究。本实验首次对溪黄草多个水溶性成分同时进行
测定，建立的方法简便、快速、准确，对于溪黄草的质量
控制、质量标准的建立均具有重要意义。
参考文献
［1］ ChP 2010． Vol Ⅰ(中国药典 2010 年版．一部) ［S］． 2010:Ap-
pendix(附录)Ⅲ 26
［2］ WU JF(吴剑峰)． The research reviewed of Isodon serra(溪黄草
的研究综述) ［J］． Lishizhen Med Mater Med Ｒes(时珍国医国
药)，2003，14(8):498
［3］ LIAO XZ(廖雪珍) ，LIAO HF(廖惠芳) ，YE MＲ(叶木荣) ，et
al． Effects of the water soluble extracts of Isodon lophanthoides，I．
lophanthoides var． gerardianus and I． serra on Anti － inflamma-
tion and live r － protection in mice(线纹香茶菜、狭基线纹香茶
菜、溪黄草水提物抗炎、保肝作用初步研究) ［J］． J Chin Med
Mater(中药材) ，1996，19(7):363
［4］ GONG JY(龚金炎) ，WU XQ(吴晓琴) ，ZHANG Y(张英) ，et
al． Advanced research of flavonoid C － glycosides and their phar-
macological effects(碳苷黄酮及其药理活性研究进展) ［J］．
Nat Prod Ｒes Dev(天然产物研究与开发) ，2010，22(3) :525
［5］ MAＲＲASSINI C，DAVICINO Ｒ，ACEVEDO C，et al． Vicenin －
2，a potential Anti － inflammatory constituent of Urtica circularis
［J］． J Nat Prod，2011，74(6) :1503
［6］ NAGAPＲASHANTHA LD，VATSYAYAN Ｒ，SINGHAL J，et al．
Anti － cancer effects of novel flavonoid vicenin － 2 as a single a-
gent and in synergistic combination with docetaxel in prostate
cancer［J］． Biochem Pharmacol，2011，82(9) :1100
［7］ WADA S，HE P，WATANABE N，et al． Suppression of D － galac-
tosamine － induced rat liver injury by glycosidic flavonoids － rich frac-
tion from green tea［J］． Biosci Biotechnol Biochem，1999，63(3):570
［8］ HUI YZ(惠永正)． Comprehensive Natural Products in Tradition-
al Chinese Medicine(中药天然产物大全)［M］． Shanghai(上
海) :Shanghai Science and Technology Publishers(上海科学技
术出版社) ，2011:2688
［9］ WU JF(吴剑峰) ，LIU B(刘斌) ，ZHU CC(祝晨蔯) ，et al． De-
termination of 2α － hydroxy － ursokic acid in stems，leaves and
whole plant of herba Ｒabdosia lophanthoides var． gerordianus
from various planting bases(不同种植基地的溪黄草茎、叶及全
草中 2α －羟基熊果酸的含量测定) ［J］． Chin Pharm J(中国
药学杂志) ，2004，39(7):500
［10］ ZHU DQ(朱德全) ，HUANG S(黄松) ，CHEN JN(陈建南) ，et
al． Determination of caffeic acid and rosmarinic acid in Ｒabdosia
serra from different species and different habitat(不同品种、不同
产地溪黄草咖啡酸与迷迭香酸的含量测定) ［J］． Chin J Exp
Tradit Med Form(中国实验方剂学杂志) ，2013，19(2) :114
［11］ KUANG YH(匡艳辉) ，LIANG S(梁斯) ，YAO XH(姚小华) ，
et al． Determination of isoschaftoside，schaftoside and rosmarinic
acid in Isodon lophanthoides var． graciliflora by HPLC(HPLC 法
测定纤花线纹香茶菜中异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸)
［J］． Chin Tradit Pat Med(中成药)，2013，35(3):570
［12］ HUANG H(黄浩) ，HOU J(候洁) ，HE CL(何纯莲) ，et al．
Study on chemical components of essential oil from Ｒabdosin serra
(Maxim．)Hara by GC － MS(溪黄草挥发油化学成分分析)
［J］． Chin J Pharm Anal(药物分析杂志) ，2006，26(12):1888
［13］ XIANG HY(向海艳) ，XIE Y(谢扬)． Simultaneous determin-
nation of rutin and quercetin in Ｒabdosia lophanthoides(Buch．
Ham． ex D． Don)Hara by ＲP － HPLC(ＲP － HPLC 同时测定溪
黄草药材中芦丁和槲皮素的含量)［J］． Chin J Spectrosc Lab
(光谱实验室) ，2011，28(3):117
(本文于 2014 年 4 月 13 日收到)
—432— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(2)