全 文 ：1 9 8 0 年第 I J 映第 4 1汀斗( 广认第口Z J钥 )
小 红 参 醒 在 体 外 的 抗 癌 作 用
黎文亮 胡文华 王升启
( 军事医学科学院放射医学研究 所 )
提 要 研究 不 同药量 0( ~ 2 5 0 “ g / m l ) 小红参醒对 4 株人癌 细胞 ( H e L a 、 A G Z Y -
8 3 a
、
M G G 一 80 3
、
H 6L 0) 和 正常人血 T 淋 巴细 胞增殖的影响 。 观察到药量大 于 1郎g / m l 时 ,
时癌细 胞和淋 巴细胞 的增殖均可抑制 , 抑制程度随药量增加而更 明 显 , 作者一认 为可能是
一种细 胞毒作用 。
关键词 小红参醛 ; 癌细胞 ; 妹 巴细胞 ; 细胞培养 : 细胞毒
小红参 ( R助 i a y 。 。 。 a o e 。 5 1。 D i e l 、 ) 是民间
用于活血化病的天然药物川。 昆 明市延安医院
报道它对缓解心绞痛症状有效率达 9 0形 〔2〕。 分
离 、 提取 、 制备出小红参贰粗品后 , 经药理研究
证明它具有抗块氧作用 , 对防治心肌缺血型冠
心病有效 。 分离出的 小 红 参 醒 (代号为 R A -
ZN a )
, 用来探 讨它是否具有抗癌活性 。
材 料 与 方 法
药 物 小红参醒为粉针 剂 , 用 p H 7 . 6的
R PM I 16 4 0液稀释成 6 种浓度 , 备用 。
细 胞 H e L a 、 A G Z Y 一 8 3 a 、 M G C 一 8 0 3 、
H L 6 0 (分别系人的宫颈癌 、 胃癌 、 肺癌 、 粒系
白血病细胞株 )均由本所供给。 人血淋巴细胞来
源于健康人血培养 。
培 养 每个培养瓶加 1 . 6 m l R P M x 1 6 4 ( )
培养液 (内含青 、 链霉素各 2 0 Ou , 10 % 小牛血 清 ,
用5 % N a H C O 。将 p H调至 7 . 6 ) , 对照 组加 O , Zm l
培养液 , 实验组分别加 0 . 2m l不同 浓度的 R A -
ZN a , 加入正处于生长期的癌 细 胞悬液 o . Zm l
(内含 3 . 0一 4 . o x l护细胞 / Iln ) , 使药物最终浓
度达到实验所需药量 , 混合摇匀 , 用橡皮塞将
瓶口塞紧 , 在 37 ℃恒温箱内培养 。 健康人血淋
巴细胞培养 , 方法见前文阁 。
检 测 除 H L 60 细胞可直接混匀 计 数细
胞外 , 其余三株癌细胞均系贴壁生长细胞 。 培
养 9 6 h倒去培养液 , 将瓶 口向下倒置于吸水纸上
3 ~ 4 m i n
. 使液体流 尽 。 每 个 培 养 瓶 加 2 m l
0
.
02 形 E D T A二钠生理盐水溶液 , 使贴壁细胞
消化分散 , 充分混匀 , 镜检计数 。 检查淋巴细
胞生长数和细胞分裂指数的方法见前文闭 。 `H -
T d R掺入用量为 l 拜C i/ m ! 培养液 , 加入时间为
9 6 h培养终止前 h4 , 采用滤片液闪测定法 , 见文
献 t 卜〕。
结 果 与 讨 论
小红参酿对癌细胞生长的影响 对照组的
H e L a
、
M G C 一 8 0 3 、 A G Z Y 一 8乏3a 、 日 L 6 O细 胞
经 4 天培养 , 其细胞数量分别 为 种 人 细胞的
6
.
5
、
4
.
8
、
4
.
9
、
5
.
3倍 , 表 明细胞处于增殖之
中 。 五种浓度小红参醒对 4 株癌细胞生长的影
响结果见表 l 。 从表 1 可见 : ① 当小红 参醒药
量大于 5~ 10拼g /m !时 , 对这 4 株 癌 细 胞生长
均有抑制作用 , 抑制程度随药量增加而更明显 。
② 4 株癌细胞对小红参醒钦感性不完全相同 ,
A G Z Y 一 8 3 a 比H e L a敏感性高 , H e L a又比 M G C
一
80 3
、
H L 60 敏感性高 。 上述结果表明 小 红参
浓度达到一定量时具有抑制癌细胞生长作用 。
权文于 195 8年 5 月 7 门收到
军事医学科学院院刊
表 1小红参酿对翻细胞生长的影响
药物浓度
(户 g /l m)
细 胞 数 ( x2 5 0 0 /瓶
He L
a
Z G Y A
一
83 a
及 相 对 生 长 率 ( ) %
MC G
一
8 03 H L6 0
12 2士 1 3 0 0
1 1 8士 9 7 8
91土 2 * *7 5
4 9士 4 * *4 0
2 9土 l * *24
5士 1 * *4
5 8士 1 5 0 0
6 6土 4 *7 8
4 4士 2 * *52
2 3士 l * *2 7
12士 l * *14
7士 l * *8
1 7 0士 6 1 0 0
1 04土 2 9 7
1 8 0土 6 1 01
1 9土 l水 5 8
3 8士 l * *6 3
1 1士 I * *1 0
91土 14 1 0 0
3 8士 14 91
51土 86 5
34土 6 *3 7
8土 2串 *9
0* * 0
01
一乃 nó口二ǎ U
1 0白ó O
平均数 _ :标谁口 :水 泪差显著 ;水 *胭差非洁显 著 (下同 )
小红参醒对正常人血淋巴细胞增殖能力的
影响 用含有 H P A的培养体 系闭 , 经 4 天 培
养 , 对照组的淋巴细胞数量增殖为种入细胞数
的 3 . 6倍 , 细胞分裂指数为 14 筋 , ’ H一 T d R掺入
量 C p m值为 25 5 14 。 表 明淋巴细胞处于增殖 培
养条件之中 。 六种浓度小红参醒对淋巴细胞增
殖能力影响的结果见表 2 。 从表 2 可见 , 药量
在 5 ~ 2 5 0拼g / m l之内对T 淋巴细胞生长 也 有抑
制作用 , 抑制程度随药量增加而更明显 。 当药
量大于 10鲍 /m l时 , 呈现出对 ’ H 一 T d R 掺 入和
细胞分裂指数明 显 的 抑 制 作 用 , 药 量 大于
50 崛 / ml 时 , ’ H 一 T d R掺入极少 , 细胞分裂指数
为 O沁 。
红参醒对淋巴细胞产生抗癌因子 活 性 不 受影
响 , 抑癌率为 53 % 左右 。 当药量 大于2 5拼g / m l
时 , 抗癌因子活性随药量增 加 而 明 显降低 ,
2 5 0拼g /m l药量组与对照组之间统计 学无差别 ,
表 明完全抑制淋巴细胞产生抗癌因子 。
表 3 含小红参酿的人血淋巴细胞培并上清液
对 H o L。细胞生长的影响
药物浓度 (召幻 m l) 细饱数 ( x 2 5 0 o /瓶 ) 生 长率 ( ;们
讨 J圈组
0
,
::
::
表 2 小红参酿对淋巴细胞 “ H一刊 R掺人量 、
分裂 、 生长的影响
l ( )
2 5
5O
2 5 0
]5 0 士 8
7 0 士 4半 : :
7 1士 4* 率
7 1 士 4* : :`
6 0土 4* ’卜
108 士 3 * ,`
1 2 5 士 3 ’ :`
13 6 士 3
{:
;:
药物浓度
(拼吕/ I n l )
分裂指 致
(个输 ) 理 抱 致x 2 5 U0 / }瓶 ) 狂勺玫 士标准涅、 .夕才砚tt,1JnJ户r汉一t、卜卜口了、、且nùU
2 5 5 14 工 6 0 0 1 ( 二. GO )
2 】0 78 士 2 } 43 (0 . 8 3)
I J 乙18 6 士 13 4 8 ( 0 . 5 7 )
1 00 6了土 4 2 2 * ( 0 . 3 9 )
2 3 3 7 士 2 0 3 , l“ : : (气) . 0 9 )
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38 3 士 J石 ( 1 . 0 0 )
芝1 0士 6 ( 1 . 0了)
3 2 5 士 4 宇 (0 . 8 5 )
2 9 1 土 14 水 名 ( 0 . 76 )
2 0 7 土 4 城: 肠` 〔0 . 5通夕
8 0 士 2绪’ 水 (0 . 2 1 )
6 2 士 2 :毛,水 (0 、 16 )
自曰J一月八éù乃ǎ口
19ú5
平向数 士 标 `化涅 ( {们钊指娄幼
本实验室以往的观察表明离体正常人血淋
巴细胞在 P H A 刺激下 , 经培养 4 天它的上清液
内含有抗癌因子 。 因此 , 我们将表 2 所列灼 7
组 (小红参醒 3~ 2 5 0拼g / m l) 淋巴细胞培 养上清
液取 出 , 观察它对 H e L a细胞生长的影响 , 结果
见表 3 。 从表 3 可见 , 小于 10“ g / m l药量的 小
上述结果表明小红参 醒大于 10户s,/ m l不仅
能抑制 4株人癌细胞生长 , 而且也能抑制正常
人血 T淋巴细胞的D N A合成和细胞分裂增殖 。
当药量达 2 5拼g / m 吏时 , 就明显地抑制了 淋巴细
胞产生抗癌因子的能力 , 而且抑癌药量与抑淋
巴细胞增殖药量基本相同 。 小红参醒对癌细胞
的抑制是非特异性的 , 由于同时抑制了 T 淋巴
细胞 , 故是否适用于抗癌尚需做进一步工作 。
本文承刘雪桐教授审阅 、 修改 , 特此致谢 。
参 考 文 献
〔 1 〕 怒江傈僳族自治州药品标堆办公室等 : 云南医
药 19 7 7 : ( I ) : 5 4
2 8 9 9年第 1 3卷第 4期 ()凉第 6 2期 )
一
2〕 昆明市延安医院冠心病小组 :心血管疾病 防治
药物研究资料 一 975 : (l ), 5 2 5 1
〔 3 〕 黎文亮等 : 军事医 学科 学 院 院刊 19 86 ; 10
2 43
( l ) : 1 1
〔 4 〕 赵桐茂主编 : 《 H L A 分型原理和 应用 》 . 上海 :
L海科学技术出版社 . 1 9 8 :4 2 8 9
IN H旧 IT O R Y “ E F F E C T O F R U B IQ U IN O N三 O N G RO W T H
O F C A N C E R C E L L S IN V !T R O
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A e a d e m y o f M il i t a r y M e d ie a l S e i e n e e s )
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T h e e f f e e t s o f v a r io u s d o s e s (0 一 2 5 0 一`g /m l ) o f r u b i q u i n o n e o n g r o w t h o f 4 e a n e e r e e l l
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8 3 a a n d H L 6 O) a n d p r o li f e r a t i v e a e t i v i t y o f h : l m a n b l o o d 了’
Iy m Ph o e y t o s i n v i t r o a r e r e p o r t e d
.
I t w a s f o u n d t ha t t h e g r o w t h o f e a xz e e r e e l ls w a s s ig n i f i
-
e a n t l y i n h i b i t e d i n e t l lt u r es e o n t a i n i n g a b o v e 1 0户g / n l l r t一b i q t一i n o l l e . T h e e f f e 二t i v e i n h i b i t io n
d o s e s o f t h e a g e n t o n g r o w t h o f c a n e e r e e l ls a n d o n P r o l i f e r a t i v e a e t i v it y o f F o r m a l ly l n p h o
-
e v t e s w e r e s im i l a r
.
T h e m e e h a n is m o f a n t i e a n e e r a e t i o n o f r 一 b iq u i n o n e 15 d i s e u s s e d
.
K E Y W O RD S
r :一b i q u i n o n e ; e a r e i n o m a e e ll ; l y m p h o e y t 。 ; e e l l e u l t u r 。 : e y t o t o x i n
F e
Z 十一次黄缥吟一黄嘿吟氧化酶产生的
活性氧损伤脱氧核糖的研究
张佃志 方允中
( 军事医学科学院放射医 学研究所 )
提 要 F e Z + 一次黄嘿吟一黄嚓吟氧化酶体 系产生的 活性氧能诱发脱氧核糖 的损伤 ,
使之转变为硫代 巴比安酸反应物 ( T B A )S 。 增加黄 漂吟氧化晦或脱氧核糖 的浓度 都增加
T B A S的生 成量 。 F e +2 促进 T B A S的生成 , 此促进作用随着 F e +2 浓度 的升高而很 快 达到
饱和 。 超氧化物吱化晦 (S O D ) 或过氧化氢晦 ( C A T ) 都能抑制 T B A S的生成 。 间接证明体
来中的 T B A S是 由 活性 氧攻击脱氧核糖而 形成的 。 并且羚 自由 基 是 起 主 要作 用 的活性
氧 。
关键词 脱氧核糖 : 活性氧 : 黄漂吟氧化酶 : 硫代 巴比妥酸反应
方允中等 (1) 曾观察到 A D P一 F e C 13一黄 嘿吟 制备难以控制质量 , 以及铁离子本 身可诱发脂
一黄嗦吟氧化酶体系产生的活性 氧 可引发卵磷 - - -一—脂脂质体的脂类过氧化 。 我们考虑到脂质体的 权汀 f ,。 8 8年 8 月 , 2 : 、 :女到