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苗药六月雪化学成分及药理作用研究进展



全 文 :第 12 卷第 17 期·总第 193 期
2 0 1 4 年 9 月 · 上 半 月 刊
六月雪, 首载于 《本草拾遗》, 又名白马骨, 满
天星 (《阳春县志 》), 苗族药记载名为苗语名Reib
ghueub mes-“锐过买 ” 或 “唣本 ” (湘西 ) , Det
vilaheib-“豆野给” 或 “加厄陔” (贵州黔东南)。 六月
雪来源于茜草科植物小灌木白马骨 Serissa foetida
Comm.的全草或根, 主要含有挥发油类, 甾体类、 萜
类以及糖类等化学成分; 其性凉、 味苦、 微辛, 归
肺、 脾、 肝、 胃经[1]。 具有疏风利湿、清热解毒的功效,
临床上主要用于时行感冒, 咳嗽咽痛, 牙龈肿痛, 目
赤肿痛, 湿热黄疸, 暑湿泻痢, 淋浊带下, 风湿关节
痛, 历节风痛, 跌打损伤以及痈疽肿毒, 瘰疬恶疮等
症。 亦还可用于治疗毒蛇咬伤。 六月雪主要分布在我
国西南、 两广一带。 而贵州一带的苗族民间医生习用
六月雪治疗风湿痹痛以及一些疑难杂症。 因其药理作
用广泛, 治疗效果显著, 采集方便, 而被黔南一带的
苗族民间地区广泛应用。
1 化学成分
1.1 挥发油类成分 倪士峰等 [2]针对六月雪在不同季节
所含的化学成分进行了比较深入的研究: 采用水蒸气
蒸馏提取法, 乙醚萃取挥发油, 用GC/MS法对样品进
行分析发现, 深秋季节与夏季六月雪中分别鉴定出
43、 72个挥发油组分。 其中含量在3%以上的组分有甲
基亚麻酸酯, 石竹烯, 2-甲氧-4-乙烯基苯酚, 3-己烯-
1-醇,乙苯,库贝醇,1b,5,5,6a-tetramethyl-octahydro-1-
oxa-cyclopropa [a] inden-6-one, δ-9 (10) -四氢广木香
内酯-1-酮, 大根香叶酮D以及5-丙酰基-2-氯-苯乙酸甲
酯等10种挥发油成分。 六月雪不同季节挥发油类化学
成分的差异, 揭示了该植物在生理活跃期时能够产生
较多的二次代谢产物, 反映了该植物在药用价值上的
微妙差异, 建议把采收季节作为该植物的质控点。
1.2 萜类化合物与甾体类成分 王少芳等 [3]将六月雪全
草粉碎得到的粗粉, 用工业酒精回流提取后浓缩, 然
后用有机溶剂进行梯度萃取, 采用柱层析技术、 薄层
层析技术等, 最终从六月雪中得到了三个单体化合
物, 分别是齐墩果酸、 齐墩果酸的乙酰化物和β-谷甾
醇。 韦万兴等 [4]从六月雪中分离得到豆甾醇。 冯顺卿
等 [5]对瑶药白马骨开展化学研究,得到了乌索酸,即熊
果酸, 为五环三萜类化合物。 危莉等 [6]将六月雪的全
草粗粉用甲醇提取, 提取物作为供试品溶液, 以车叶
草苷为对照品, 用薄层层析技术, 以氯仿: 乙酸乙
酯: 异丙醇 (1∶2∶2) 展开, 发现与对照品相应位置上
显示有相同的斑点, 证明生药六月雪中含车叶草苷。
张强等 [8]从白马骨叶中得到胡萝卜苷, 即谷甾醇-3-0-
葡萄糖苷。
随着六月雪物质基础研究的深入, 针对六月雪中
的具代表性、 指标性化学成分的含量研究逐渐得到开
展。 程齐来等 [7]采用RP-HPLC方法, 对生药六月雪中
齐墩果酸的含量进行了检测, 为该药质量标准的制订
与药物的开发应用奠定了基础。
1.3 木脂素成分 韦万兴等 [4]从六月雪中分离得到5-乙
酰基-6-羟基-2-异丙烯苯并呋喃与5-乙酰基-6-羟基-2-
丙酮苯并呋喃, 二者为首次从该植物中分离得到, 属
于新木脂素类化合物。 张强等 [8]从白马骨叶中得到(+)
-松脂素、 (+) -麦迪奥脂素, 二者均为从该属植物中
首次分离得到的木脂素类化合物。
1.4 醌类成分 冯顺卿等 [5]对瑶药白马骨开展化学研究
中, 通过95%乙醇浸泡, 有机溶剂萃取, 经过柱层析
技术, 光谱鉴别技术等手段, 得到了1, 4-二羟基-6甲
基蒽醌与1, 3, 5, 7-四甲氧基蒽醌, 这两者均为醌类
化合物。
1.5 金属元素 朱修援等 [9]采用火焰原子吸收光谱法对
六月雪中茎部的Ca、 Zn、 Mg、 Fe、 Cu的含量进行了
研究, 回收率较好, 为生药六月雪中金属元素的检测
提供了技术支撑。
苗药六月雪化学成分及药理作用研究进展
鲁利民1 陆锦锐2* 韩忠耀2
(1 中国中医科学院西苑医院药剂科, 北京 100091; 2 贵州省黔南民族医学高等专科学校药学系, 都匀 558000)
摘 要: 目的 介绍苗药六月雪的研究现状, 为相关科研工作、 临床用药指导及新药研发利用等提供参考。 方法 通过查阅近
年来苗药六月雪相关研究报道的文献, 综述苗药六月雪化学成分及其药理作用的研究进展。 结果 六月雪含有挥发油、 糖类以
及一些其它类成分, 而这些化学成分具有抗菌, 解热, 抗肝炎病毒, 保肝, 提高免疫力等作用。 结论 六月雪具有多种药效作
用, 具有可研究价值, 在医疗保健以及食品防腐方面表现出良好的开发前景。
关键词: 苗药; 六月雪; 化学成分; 药理作用; 研究进展
doi:10.3969/j.issn.1672-2779.2014.1 .097文章编号:1672-2779(2014)-17-0158-03
* 通讯作者
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1.6 其他成分 六月雪也含有其他化学成分, 如邻苯二
甲酸二乙酯[4]、 多糖[10]等。
2 药理作用
2.1 抗菌、解热作用 刘敏等[11]采用平板测定法研究发
现, 六月雪的水提液对金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌、
枯草杆菌以及痢疾杆菌和绿脓杆菌有抑制作用, 且对
大肠杆菌和枯草杆菌的抑制作用较为显著, 效果好于
异戊酸钠。 王爱红等 [12]采用阿司匹林为阳性对照组研
究发现, 六月雪的水提液可以使由干酵母所导致发热
的大鼠以及由大肠杆菌内毒素引起发热的家兔体温下
降, 且与阳性对照组无显著差异, 说明六月雪的水提
液具有很明显的解热作用。 Lien-Chai CHENG等[13]通过
抗病毒活性离体实验证明六月雪提取物具有一定的抗
病毒生物活性, 值得深入研究。
2.2 对免疫功能的作用 朱秋萍等[14]研究发现, 六月雪
水提取物可以显著提高小鼠的食欲, 从而有效增加小
鼠体重, 促进其生长发育。 此外还发现六月雪的水提
取物可以明显增加小鼠胸腺重量, 提高胸腺指数, 且
此作用呈现剂量依赖性。 韦金育等 [15]对六月雪的根部
用甲醇提取后浓缩得到六月雪浸膏。 而后采用体外抗
肿瘤药物筛选法 (MTT) 法测定发现六月雪提取原液
及其稀释液有很强的抗肿瘤活性, 对肿瘤细胞的杀伤
率最高可达85.30%。 以上结果说明六月雪水提取物具
有增强机体免疫力, 抗肿瘤等作用。 但其作用机理有
待进一步研究。
2.3 抗乙肝病毒作用与保肝作用 针对复方六月雪及
六月雪提取物抗乙肝病毒与保肝作用,开展了比较系
统与深入的研究。 张士军等 [16]阐述了其对 HepG2.2.15
细胞 HBsAg 和 HBeAg 的抑制作用;张士军等 [16]通过
MTT法,研究了其对 HepG2.2.15 细胞HBV DNA的抑制
作用;张士军等 [18]采用血清药理学法进行实验,通过
ELISA法测定, 研究了其对HepG2.2.15细胞HBsAg和
HBeAg的抑制作用; 杨霞芳等 [19]通过体外实验研究,
阐述了其对H BsAg和H BeAg的抑制作用;杨霞芳等 [20]
采用实时荧光定量 PCR 法考察了复方六月雪的抗
HBV作用; 针对复方六月雪对鸭乙型肝炎病毒的抑制
作用[21-22],通过药理实验及生物活性实验等方法, 研究
者也进行了相对深入的考察与研究。 同时, 研究表
明,复方六月雪对急性化学性肝损伤 [23]、六月雪提取物
对小鼠实验性肝损伤 [24]均具有显著的保护作用, 说明
复方六月雪或六月雪提取物具有较好的保肝作用。
2.4 抗关节炎作用 宋振玉等 [25]通过大鼠蛋白性及甲醛
性关节炎动物模型, 在对多种民方、 经方等中医临床
上常用的或民间常用的单方进行抗关节炎活性筛选研
究考察中发现, 六月雪对大鼠甲醛性关节炎具有一定
的抑制作用, 揭示了六月雪能够抗关节炎, 具有抗关
节炎的生物活性。
2.5 耐缺氧作用 宓静英等[26]通过常压耐缺氧实验动物
模型与异丙肾上腺素增加心肌耗氧量实验动物模型,
考察了六月雪提取物耐缺氧的作用, 结果证明六月雪
提取物具有比较显著的耐缺氧作用。
2.6 对肾脏作用 孙响波等[27]在对六月雪治疗肾脏疾病
探源中指出, 六月雪通过降低蛋白尿、 血尿素氮及肌
酐水平, 对于肾脏疾病的治疗具有独特的优势。
2.7 祛黄褐斑作用 在对白附子、 金银花、 白及、 六
月雪4味中药乙醇提取物祛黄褐斑作用的考察研究中,
发现六月雪乙醇提取物具有一定强度的祛黄褐斑作
用, 且六月雪乙醇提取物只在特定的质量浓度时才有
祛黄褐斑作用[28]。
2.8 对胃黏膜损伤的保护作用 通过无水乙醇法、 阿
司匹林法、 水浸应激法及利血平法实验小鼠胃黏膜损
伤动物模型, 测定给药后胃黏膜损伤面积, 结果证明
六月雪对胃黏膜损伤具有保护作用 [29]。在对无水乙醇胃
饲诱发急性胃黏膜损伤的动物模型考察研究中发现,
六月雪提取物对实验性胃黏膜损伤具有显著的修复作
用[30]。
2.9 抑制酪氨酸酶作用 用多巴色素法测定对酪氨酸
酶的抑制作用,傅国强等[31]发现六月雪能够抑制酪氨酸
酶作用, 治疗针对因酪氨酸酶活性异常所致的色素增
加性皮肤病具有较好的应用前景。
2.10 毒性 夏勇等[32]对六月雪进行系统的毒理学研究:
六月雪大、 小鼠急性经口毒性LD50, 雌雄两性均大于
5g/kg B.W., 最高可达10g/kg B.W., 按急性毒性分级
属实际无毒类。 又对其进行三项诱变实验, 结果显示
阴性; 进而对其进行Ames试验以及小鼠骨髓细胞微核
试验和小鼠精子畸形试验, 结果均显示为阴性, 且阳
性组均显示阳性结果。 试验结果说明六月雪无毒, 无
致突变作用, 对人体无害。
3 结语
六月雪是极具地方特色的苗药, 在民间具有广泛
的应用。 六月雪资源丰富, 具有较高的药用价值, 对
民族医学、 民族药学具有突出的贡献。 苗药六月雪丰
富的化学成分是其具多种生物活性的物质基础。 本文
通过对苗药六月雪化学成分及药理作用的收集整理,
旨在为后期的研究开发奠定基础, 挖掘其潜在功能,
从而达到对苗药六月雪的开发应用及对苗药发扬光大
的目的。
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(上接第155页) 结果的平均值为6.25mg·g-1, 按含量结
果平均值的80%折算成每片的含量作为含量测定的指
标 , 暂 定 本 品 每 片 含 何 首 乌 以 二 苯 乙 烯 苷
(C20H22O9) 计, 不得少于5mg。
3 讨论
3.1 指标选定依据 何首乌为方中君药, 具有解毒、
消痈、 截疟、 润肠通便的疗效, 用于疮痈, 瘰疬, 风
疹瘙痒, 久疟体虚, 肠燥便秘。 制法中一部分何首乌
与黑豆煎煮浓缩成稠膏, 具有补肝肾、 益精血、 乌须
发、 强筋骨、 化浊降脂的功效, 主要用于血虚萎黄,
眩晕耳鸣, 须发早白, 腰膝酸软, 肢体麻木, 崩漏带
下, 高脂血症。 二苯乙烯苷是何首乌的主要药理活性
成分, 因此将鉴别何首乌对照药材和何首乌中二苯乙
烯苷的定量列入本品质量标准。 豨莶草为方中臣药,
具有祛风湿、 利关节、 解毒的功效, 用于风湿痹痛,
筋骨无力, 腰膝酸软, 四肢麻痹, 半身不遂, 风疹湿
疮。 选定豨莶草列入本品鉴别项。
3.2 薄层鉴别方法选定过程 薄层色谱研究中, 曾选
定对桑叶、 地黄、 牛膝进行鉴别研究, 结果供试品色
谱相应的位置上, 斑点微弱不易见, 同时阴性对照有
干扰。 考虑是处方投料较少, 同时处方药味较多。 考
虑暂不列入标准。
3.3 含量测定方法的选择 参照相关文献, 二苯乙烯苷
含量测定方法比较成熟, 而且HPLC方法准确度高,
专属性好。
3.4 含量测定提取方法选择 含量测定中, 对供试液
提取溶剂选用了甲醇、 70%甲醇、 乙醇、 稀乙醇四种,
结果只有稀乙醇提取的二苯乙烯苷含量相对较高, 且
药典何首乌项下也是用稀乙醇提取, 故选定稀乙醇作
为提取溶剂。 提取方法比较了超声提取和回流提取,
结果同为30分钟时间条件下, 回流所得含量更高; 加
入稀乙醇量比较了10ml、 25ml、 50ml, 结果同样条件
下, 10ml所得含量结果较小, 而25ml与50ml的结果接
近, 故选用加入稀乙醇25ml, 回流30分钟作为本品的
提取方法。
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(本文编辑:苏 玲 本文校对:马宏伟 收稿日期:2014-05-12)
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(本文编辑:杨 杰 本文校对:席桂同 收稿日期:2014-06-10)
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