全 文 :民 族 医 药
Ethnomedicine and Ethnopharmacy
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究项目,黔教科 (2007)074 号。
作者简介:刘亮 (1981 ~) ,男,汉,硕士研究生,主要从事中药、民族药化学成分及质量研究,联系电话:18212120284
苗药观音草中总皂苷的含量测定
刘 亮1* 杜 江2 潘炉台2 冯 华3
1. 遵义医药高等专科学校,贵州 遵义 563002;2. 贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002;
3. 遵义市药品检验所,贵州 遵义 563000
【摘 要】 目的:建立观音草总皂苷含量测定的方法。方法:以薯蓣皂苷为对照品,采用紫外分光光度法,高氯酸显色,在 460nm
处测定吸光度,计算观音草中总皂苷的含量。结果:薯蓣皂苷的质量浓度在 4 ~ 24μg·mL -1与吸光度成良好线形关系,r = 0. 9995 (n = 6) ,
平均回收率为 98. 96%,RSD = 1. 78%。结论:该法可用于观音草的含量测定。
【关键词】 苗药观音草;总皂苷;含量测定
【中图分类号】R284. 1 【文献标识码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2011)04 - 0002 - 02
观音草 Reineckia carnea (Andr.)Kunth 为百合科植物
吉祥草的带根全草,苗医理论认为其药性为性冷,质征为
气微味甜,入热经,走肺、肝二架,表、中、里三关。治
疗肺热咳嗽,跌打损伤,疮毒等。观音草是苗族地区常用
药之一。现在观音草主要作为止咳化痰药来使用,如贵州
省安顺制药厂生产的“咳速停糖浆”;贵州联盟药业生产的
“咳清胶囊”;遵义万才药业公司生产的 “复方吉祥草含
片”。通过查阅文献,我们发现以观音草为主药的制剂在质
量控制,含量测定方面的研究较少,难以进行深入开发,
本文通过紫外法,以薯蓣皂苷为对照品对观音草中总皂苷
的含量测定进行了方法学的考察,为苗药观音草的质量控
制提供了新思路,新尝试。
1 仪器与试药
UV75 - 18 可见分光光度计 (天津市拓普仪器有限公
司) ;DHG 90AOA型电热恒温鼓风干燥箱 (宁波江南仪器
厂) ;Senco R系列旋转蒸发仪 (上海申生科技有限公司) ;
FY130 型药物粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司) ;DKS
- 26 型电热恒温水浴锅 (宁波江南仪器厂) ;FA20048 型
电子天平 (上海越平科学仪器有限公司)。
薯蓣皂苷对照品购于上海华壹生物科技有限公司 (批
号:19057 - 60 - 4) ;观音草药材采集于贵州遵义,经遵义
医药高等专科学校张学愈副教授鉴定为百合科植物观音草
Reineckia carnea (Andr.)Kunth;其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液的制备
精密称取观音草药材粗粉 5 克,置索氏提取器中用甲
醇回流提取 4h,提取液回收甲醇后加入蒸馏水溶解,过滤,
并转移至 100mL 的容量瓶中加蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
准确吸取 10mL于分液漏斗中,用石油醚分 6 次萃取 (15,
10,10,10,10,10mL) ,弃去石油醚液,水液再用水饱合
正丁醇分 4 次萃取 (15,10,10,10mL) ,正丁醇萃取液用
正丁醇饱和的水 20mL洗涤,减压回收正丁醇至干,残渣用
甲醇溶解并定容于 25mL容量瓶中,作为供试品溶液。
2. 2 对照品溶液的制备
精密称取薯蓣皂苷对照品 1. 2mg,置于 10mL 容量瓶
中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2. 3 测定波长的选择
分别精密吸取对照品溶液 1. 0mL、供试品溶液 0. 3mL
置于 10mL具塞试管中,挥干甲醇,再分别加入 5%的香草
醛冰醋酸溶液 0. 2mL 和高氯酸 0. 8mL,摇匀,密塞,60℃
水浴显色 15min,取出后立即用冰水冷却 5min,再加入 5mL
冰醋酸稀释,摇匀,静置 10min,在 400 ~ 800nm进行扫描,
结果见图 1 及图 2,两者均在 460nm 处有最大吸收峰 (在
410nm以下出现无限吸收)。
2. 4 标准曲线的制备
分别精密移取薯蓣皂苷对照品溶液 0. 0,0. 2,0. 4,
0. 6,0. 8,1. 0 和 1. 2mL 置于 10mL 具塞试管内,挥干甲
醇,再分别加入 5%的香草醛冰醋酸溶液 0. 2mL 和高氯酸
0. 8mL,摇匀,密塞,60℃水浴显色 15min,取出后立即用
冰水冷却 5min,再加入 5mL 冰醋酸稀释,摇匀,静置
10min,于 460nm处测定其吸光度。以吸光度 (A)为纵坐
标,质量浓度 (C)为横坐标进行线性回归。结果表明,薯
蓣皂苷在 4 ~ 24μg /mL 吸光度呈良好的线性关系。回归方
程为 A =0. 019121C + 0. 006133,r = 0. 9995。
图 1 对照品溶液波长扫描
图 2 供试品溶液波长扫描
2. 5 稳定定性试验
精密吸取样品溶液 0. 2mL,按 2. 4 项下的操作方法显
色,于 460nm 处分别在 0,15,30,45,60,90,120min
测定吸光度,结果表明样品液显色后在 120min 内稳定,
RSD = 0. 59%。
2. 6 精密度试验
精密吸取对照液 0. 4mL,共 6 份,按 2. 4 项下的操作方
法显色,于 460nm 处测定吸光度,计算 RSD = 1. 60%。结
果表明方法的精密度良好。
2. 7 重复性试验
精密称取同一批样品 6 份,按 2. 1 项下方法制备供试
品溶液,按 2. 4 项下操作方法显色,于 460nm 处测定吸光
度,并计算含量,结果平均含量为 2. 82%,RSD = 0. 71%。
结果表明方法的重复性良好。
2. 8 加样回收率试验
精密吸取已知含量的样品溶液 0. 1mL 于具塞试管中,
加入对照品溶液 0. 5mL (浓度为 91. 23μg /mL) ,按 2. 4 项
下操作方法显色,于 460nm处测定吸光度,结果见表 1。
·2·
中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
民 族 医 药
Ethnomedicine and Ethnopharmacy
基金项目:科技部基础项目 (2006FY110700)。
通讯作者:李先恩,电话:010 - 62810019。
沧源县佤族民间验方录
彭朝忠1 祁建军2 李先恩2
1. 中国医学科学院药用植物研究所云南分所,云南 景洪 666100;2. 中国医学科学院药用植物研究所,北京 100094
【关键词】 佤族民间验方
【中图分类号】R289. 5 【文献标识码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2011)04 - 0003 - 01
我们参加“云南及周边地区农业生物资源调查”2008
年 6 月 9 日至 2008 年 7 月 12 日,对云南省沧源县佤族医药
文化进行实地调查,杂用中药学佤族药用植物学与人类学
相结合的方法,沧源县植物资源十分丰富,有 4000 多种,
中草药有 2000 多种,佤族常用的有 150 多种,佤族就用当
地的植物来防病治病,有的药效为价值高、验方在当地广
泛流传,有地方特色和民族特色,现介绍如下。
验方 1:山大黄 15g、血满草 15g、肾茶 30g、大树甘草
15g、大仙茅 15g、扫把茶 15g、通光散 10g,水煎 30 分钟当
茶服用,1 日 3 次,1 次 800ml,3 日一个疗程,冶痛风。
验方 2:钩藤鲜品 20g、艾纳香鲜品 30g、千里光鲜品
40g、小红蒜鲜品 50g、小叶臭黄皮鲜品 70g、血满草根
20g、蒿枝鲜品 20g,水煎,洗患部,治风湿病。
验方 3:螃蟹脚 30g,盾翅藤 20g,肾茶 30g,海金沙
30g,藤茶 20g,水剪服,酒为引,治肾结石。1 日 3 次,1
次 500ml,6 日有 1 个疗程。
验方 4:大苦藤 20g,锅铲叶 30g,叶下珠 30g,干张纸
树皮 20g,白花蛇舌草 30g,水煎服,红糖引,1 日 1 剂,1
日 3 次,1 次 500ml,主治肝炎,9 日为一疗程。
验方 5:三丫苦 20g,三对节 20g,鱼子兰 20g,小白芨
20g,石斛 40g,水煎 30ml,蜂蜜引,主治上呼吸道感染,1
日 1 剂,1 日 3 次,1 次 500ml,9 日为一疗程。
验方 6:小丁香 25g,虎杖 20g,十大功劳 20g,绞股蓝
30g,水煎服,治气管炎,1 日 1 剂,1 日 3 次,1 次 500ml,
3 日为一疗程。
验方 7:大苦藤根 30g,美登木 20g,白花蛇舌草 20g,
蚕豆七 10g,重阳木叶 20g,水煎服,治癌症,1 日 1 剂,1
日 3 次,1 次 600ml,9 日为一疗程。
验方 8:山堆堆 15g,红山乌龟 20g,金线吊葫芦 20g,
芦子 30g,水煎服,1 日 1 剂,1 日 3 次,1 次 300ml,连渣
带汤服,治胃病,9 日为 1 个疗程。
验方 9:白花丹鲜叶 20g,红花丹鲜品 20g,大树跌打
树皮 20g,血满草根皮 20g,重楼 30g,姜黄 10g,冲细,包
于患处,治骨质增生,7 天换一次药,21 天为 1 疗程。
(收稿日期:2011. 01. 04
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
表 1 观音草加样回收率试验结果 (n = 6)
试验号 取样量 (g) 样品含量 (μg) 加标量 (μg) 测得量 (μg) 回收率 (%) 平均回收率 (%) RSD (%)
1 5. 002 55. 677 45. 615 9. 744 96. 61 98. 96 1. 78
2 5. 012 56. 775 45. 615 102. 254 99. 70
3 5. 005 56. 305 45. 615 101. 313 98. 67
4 5. 013 56. 775 45. 615 102. 882 101. 08
5 5. 001 56. 305 45. 615 100. 685 97. 29
6 5. 011 56. 462 45. 615 102. 254 100. 39
2. 9 样品的含量测定
按照 2. 1 项下操作方法,制备 3 批供试品溶液,精密
吸取 0. 2mL,按 2. 4 项下操作方法显色,于 460nm处测定吸
光度,结果见表 2。
表 2 样品含量测定结果
样品号
取样量
(g)
含量
(%)
平均含量
(%)
RSD
(%)
1 5. 012 2. 86 2. 87 0. 40
2 5. 006 2. 86
3 5. 010 2. 88
3 讨论
根据前期化学成分的研究,结合紫外法的显色特点,
实验以薯蓣皂苷为对照品,采用香草醛 -高氯酸法显色,
对观音草中总皂苷的含量测定进行了方法学考察,实验过
程中应严格控制温度和时间,本法具有操作简单,准确等
优点,为观音草的质量控制提供了新的有效手段。
参考文献
[1]王旭,舒国伟. 蒺藜甾体皂苷的测定 [J]. 食品研究与开发,2006,27
(7) :171 - 173.
[2]宋艺军,王昌利,郭涛. 正交试验法优选穿山龙总皂苷的提取工艺
[J]. 西北药学杂志,2010,25 (2) :101 - 102.
[3]熊山,陈玉武,叶祖光. 楮实子中总皂苷含量测定 [J]. 中国现代中
药,2009,11 (7) :26 - 27.
[4]丁宁,杜江,贾宪生. 黄褐毛忍冬总皂甙的含量测定 [J]. 贵阳中医学
院学报,2001,23 (2) :39 - 40.
(收稿日期:2014. 01. 03)
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中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy