全 文 ：中国民族民间医药
Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy
民 族 医 药
EthnomedicineandEthnopharmacy
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究项目 , 黔教科 (2007) 074号。
作者简介:刘亮 (1981～ ), 男 , 汉 , 硕士研究生 , 主要从事中药 、 民族药化学成分及质量研究 , 联系电话 18212120284
苗药观音草乙醇回流提取工艺的研究
刘　亮 1　杜　江 2　罗海明 1　姚　丽 1
1.遵义医药高等专科学校 , 贵州　遵义　563002; 2.贵阳中医学院 , 贵州　贵阳　550002
【摘　要】　目的:优选观音草的乙醇回流提取工艺。方法:采用正交试验法 , 以提取液中总皂苷的含量为考察指标。结果:实验设
计四因素中乙醇浓度 、 提取时间 、 提取次数对提取有显著影响。结论:合理的提取工艺为:用 8倍量 70%乙醇回流提取 2次 , 每次 1.5
小时。
【关键词】　苗药观音草;乙醇回流;提取工艺
【中图分类号】R284.2　　　 【文献标识码】A　　　　 【文章编号】 1007-8517 (2011) 07-0003-02
　　观音草又名结实兰 , 竹叶草 , 佛顶珠 , 小青胆 , 系百
合科植物吉祥草 Reineckiacarnea(Andr.)Kunth的带根全
草 , 是一味著名的苗药 , 苗医药理论认为其药性为性冷 ,
质征为气微味甜 , 入热经 , 走肺 、 肝二架 , 表 、 中 、 里三
关。治疗肺热咳嗽 , 跌打损伤 , 疮毒等。通过查阅文献 ,
我们发现观音草在工艺优选方面的研究极少 , 难以进行深
入开发 , 本文采用正交试验法对观音草的乙醇回流提取工
艺进行了研究。
1　仪器与试药
UV75-18可见分光光度计 (天津市拓普仪器有限公
司);DHG90AOA型电热恒温鼓风干燥箱 (宁波江南仪器
厂);SencoR系列旋转蒸发仪 (上海申生科技有限公司);
FY130型药物粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司);DKS
-26型电热恒温水浴锅 (宁波江南仪器厂);FA2004B型
电子天平 (上海越平科学仪器有限公司)。
薯蓣皂苷对照品购于上海华壹生物科技有限公司 (批
号:19057-60-4);观音草药材采集于贵州遵义 , 经遵义
医药高等专科学校张学愈副教授鉴定为百合科植物观音草
Reineckiacarnea(Andr.)Kunth;其它试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　正交试验设计
本试验以观音草中总皂苷的含量为指标 , 选择影响醇
提效率的乙醇浓度 、 乙醇用量 、 提取时间 、 提取次数四因
素为考察因素 [ 1 ～ 3] , 采用 L9 (34)正交设计表进行试验。
正交因素水平表见表 1。
表 1　正交试验因素水平表
因素水平 乙醇浓度(%)A
液料比
B
提取时间
(h)C
提取次
数 D
1 60 8 1 1
2 70 10 1.5 2
3 80 12 2 3
2.2　供试品溶液的制备
称取观音草粗粉 5g, 共 9份 , 分别按正交表安排进行
回流提取 , 提取液浓缩至干 , 加入蒸馏水溶解 , 并转移至
100mL的容量瓶中加蒸馏水稀释至刻度 , 摇匀 , 准确吸取
10mL于分液漏斗中 , 用石油醚分 6次萃取 (15, 10, 10,
10, 10, 10mL), 弃去石油醚液 , 水液再用水饱合正丁醇
分 4次萃取 (15, 10, 10, 10mL), 正丁醇萃取液用正丁醇
饱和的水 20mL洗涤 , 减压回收正丁醇至干 , 残渣用甲醇溶
解并定容于 25mL容量瓶中 , 作为供试品溶液 [ 4] 。
2.3　对照品溶液的制备
精密称取薯蓣皂苷对照品 1.2mg, 置于 10mL容量瓶
中 , 加甲醇溶解并定容至刻度 , 摇匀 , 作为对照品溶液。
2.4　标准曲线的制备
分别精密移取薯蓣皂苷对照品溶液 0.0, 0.2, 0.4,
0.6, 0.8, 1.0和 1.2mL置于 10mL具塞试管内 , 挥干甲
醇 , 再分别加入 5%的香草醛冰醋酸溶液 0.2mL和高氯酸
0.8mL, 摇匀 , 密塞 , 60℃水浴显色 15min, 取出后立即用
冰水冷却 5min, 再加入 5mL冰醋酸稀释 , 摇匀 , 静置
10min, 于 460nm处测定其吸光度 [ 5] 。以吸光度 (A)为纵
坐标 , 质量浓度 (C)为横坐标进行线性回归。结果表明 ,
薯蓣皂苷在 4 ～ 24μg/mL与吸光度呈良好的线性关系。回
归方程为 A=0.019121C+0.006133, r=0.9995。
2.5　供试品溶液的测定
分别精密吸取供试品溶液 0.2mL, 按 2.4项下的操作
方法显色 , 于 460nm处作含量测定 , 实验设计及数据处理
结果见表 2, 方差分析见表 3。
表 2　L9 (34)正交试验结果
因素试验号 A B C D 观音草总皂苷含量 (%)
实验 1 1 1 1 1 1.69
实验 2 1 2 2 2 2.67
实验 3 1 3 3 3 1.95
实验 4 2 1 2 3 2.77
实验 5 2 2 3 1 2.49
实验 6 2 3 1 2 2.89
实验 7 3 1 3 2 2.85
实验 8 3 2 1 3 2.27
实验 9 3 3 2 1 2.71
K1 2.103 2.437 2.283 2.297
K2 2.717 2.477 2.717 2.803
K3 2.610 2.517 2.430 2.330
R 0.614 0.080 0.434 0.506
2.6　结果与方差分析
由表 2分析可知最佳的提取工艺为 A2B3C2D2。由表 3
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中国民族民间医药
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　　　　民 族 医 药
EthnomedicineandEthnopharmacy
基金项目:科技部基础项目 2006FY110707。
通讯作者:李先恩 , 电话:010-62810019。
沧源佤族医治肾病验方录
彭朝忠 1　祁建国 2　李先恩 2＊
1.中国医学科学院药用植物研究所云南分所 , 云南　景洪　666100;
2.中国医学科学院药用植物研究所 , 北京　 100094
【关键词】　佤族医;治肾病;验方
【中图分类号】R289.5　　　 【文献标识码】A　　　　 【文章编号】 1007-8517 (2011) 07-0004-01
　　我们参加 “云南及周边地区农业生物资源调查” 项目 ,
负责药用植物的调查 , 2007年至现在多次深入沧源佤族地
区进行实地调查 , 采用佤族药用植物学与人类学相结合的
方法 , 当地的佤族民间医药进行全面系统的调查研究 , 佤
族民间对肾病医治有特色 , 现将介绍如下。
验方 1
肾茶 20g、 叶下珠 30g、 重楼 20g, 水煎服 , 酒为引 ,
主治肾炎 , 1日 1剂 1日 3次 , 1次 500ml, 3日为 1个
疗程。
验方 2
木通 10g、 干里光 20g、 通光散 30g、 鱼子兰 30g, 水煎
服 , 酒为引 , 主治肾炎 , 1日 1剂 , 1日 3次 , 1次 600ml,
6日为 1个疗程。
验方 3
叶下珠 30g, 大叶钩藤茎 20g、 片片叶 30g、 小红蒜
20g, 水煎服 , 酒为引 , 主治肾炎 、 肾虚 , 1日 1剂 , 1日 3
次 , 1次 700ml, 9日为 1个疗程。验方 4:螃蟹脚 30g、 棕
叶芦根 20g、 大仙茅 20g, 水煎服 , 酒为引 , 主治肾结石 , 1
日 1剂 , 1日 3次 , 1次 700ml, 6日为 1个疗程。验方 5:
大红黄沧根 20g、 大剑叶木 30g、 盾翅藤 30g, 水煎服 , 酒
为引 , 主治肾炎 、 肾虚 , 1日 1剂 , 1日 3次 , 1次 500ml,
9日为 1个疗程。验方 6:藤子甘草 30g、 定心藤 20g、 无柄
果钩藤茎 30g, 水煎服 , 酒为引 , 主治肾炎 , 1日 1剂 , 1
日 3次 , 1次 600ml, 6日为 1个疗程。验方 7:藤子茶 30g、
肾茶 20g, 石斛 30g, 水煎 30分钟 , 酒为引 , 主治肾炎 , 1
日 1剂 , 1日 3次 , 1次 500ml, 9日为 1个疗程。验方 8:
钩藤 30g、 白花蛇舌草 30g、 野牧丹 20g, 水煎服 , 酒为引 ,
主治肾炎 , 1日 1剂 , 1日 3次 , 1次 500ml, 6日为 1个疗
程。验方 9:盾翅藤 30g、 肾茶 10g、 鱼子兰 20g、 螃蟹脚
30g、 藤子茶 20g、 叶下珠 15g, 水煎服 , 酒为引 , 主治肾
炎 、 肾结石 , 1日 1剂 , 1日 3次 , 1次 600ml, 9日为 1个
疗程。
参考文献
[ 1] 彭朝忠 , 祁建军 , 李先恩.沧佤族民间验方录 , 中国民族医药杂志 ,
2010 (2)27-28.
[ 2] 彭朝忠 , 祁建军 , 李先恩.澜沧佤族医治肾病验方录 , 中国民族民间医
药 , 2010.19 (6)13.
(收稿日期:2011.03.01)
方差分析可知 , 各因素对总皂苷得率的影响大小顺序为 A
﹥ D﹥ C﹥ B, 结果显示液料比对总皂苷的得率无显著影
响 , 其余三因素均有显著性 , 为考虑节约成本提取工艺调
整为 A2B1C2D2即用 8倍量 70%乙醇回流提取 2次 , 每次
1.5小时。
表 3　方差分析表
方差来源 方差平方和 (SS)
自由度
(f) F比值 F临界值
显著性
(P)
A 0.644 2 64.400 19.000 <0.05
B 0.010 2 1.000 19.000
C 0.291 2 29.100 19.000 <0.05
D 0.482 2 48.200 19.000 <0.05
误差 0.01 2
3　讨论
在前期研究的基础上 , 本试验以薯蓣皂苷为对照品 ,
通过对对照液及样品液的波长扫描 , 两者均在 460nm处有
最大吸收 , 故选择在 460nm处测定样品溶液的吸收度。
参考文献
[ 1] 周跃华 , 徐德生 , 冯怡等.麦冬总皂苷提取工艺的研究 [ J] .中草药 ,
2002, 33 (12):1076-1078.
[ 2] 潘跟利 , 纪强 , 孙利方.正交试验法优选人参泽泻混合提取工艺 [ J] .
中国中医药科技 , 2008, 15 (6):450-451.
[ 3] 孙静 , 肖彭莹.正交试验法优选穿山龙总皂苷提取工艺 [ J] .陕西中医
学院学报 , 2010, 33 (4):98-99.
[ 4] 丁宁 , 杜江 , 贾宪生.黄褐毛忍冬总皂甙的含量测定 [ J] .贵阳中医学
院学报 , 2001, 23 (2):39-40.
[ 5] 王旭 , 舒国伟.蒺藜甾体皂苷的测定 [ J] .食品研究与开发 , 2006, 27
(7):171-173.
(收稿日期:2011.03.02)
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