全 文 ：第 19卷　第 4期 文山师范高等专科学校学报 Vo l.19　No.4
2006年 12月 JOURNAL OFWENSHAN TEACHERS COLLEGE Dec.2006
不同季节迎春花茎叶中总黄酮含量的测定
张志信
(文山师范高等专科学校 生化系 , 云南 文山 663000 )
[收稿日期 ] 2006 - 06 -28
[作者简介 ] 张志信(1970 -),云南文山人 , 副教授 ,工学硕士 ,主要从事天然药物活性成分研究。
[摘要 ] 以 75%的乙醇作为溶剂 , 采用索氏提取器进行提取 , 以芦丁作为标准品 , 采用比色法测定了不同
季节中迎春花茎叶中总黄酮含量。
[关键词 ] 迎春花;总黄酮;含量
[中图分类号 ] 　Q949.748.4　[文献标识码 ] 　A　[文章编号 ] 　1671 -3303(2006)04 - 0097 - 03
　　迎春花 [ Jasm inamnad ifloum ] 为木犀科 , 茉莉花
属植物 。有黄梅 、 清明花 、黄素馨 、 金腰带之称 。属
落叶灌木 , 原产于我国云南 , 其茎 、 叶 、 花均可入
药 。《本草纲目》记载迎春花 “气味苦涩 、平 、 无毒 ,
主治肿毒 、 恶疮 , 阴干研末酒服三钱 , 出汗便瘥 ”;
《陕西中草药》载有 “活血散毒 , 消肿止痛 , 治跌打
损伤 , 刀伤出血 , 无名肿毒之功 ”; 《中草药手册》
“治劳肷疮 , 花调麻油擦”;《贵州民间药物》有 “解
热剂 、 治头痛发热 、 小便热病 ” 之述;《全国中草药
汇编》除以上功效外有治口腔炎 、痈疮肿毒 、 外阴瘙
痒等功效[ 1, 2] 。
目前 , 人们已经对迎春花叶的挥发油的化学成
分 、茎叶提取液的作用 、 花色素等多方面进行了研究
报道 , 但对迎春花茎叶中的黄酮类化合物的研究的报
道还比较少 。本文采用比色法测定不同季节中迎春花
茎叶中总黄酮含量 , 为迎春花资源的开发奠定基础 。
1　主要仪器 、 试剂及材料
1.1　主要仪器
721分光光度计 (上海第三分析仪器厂 );分析
天平;电热恒温水浴锅 (江苏南通县通海电器厂 );
索氏提取器 。
1.2　材料和试剂
1.2.1　材料
迎春花茎叶:采收于云南省文山师范高等专科学
校校园内。采收时间:2005年 11月 26日 、 2006年 1
月 4日 、 2006年 3月 8日 。
1.2.2　试剂
芦丁:(Rutin)中国药品生物制品检定所 ;无水
乙醇 、亚硝酸钠 、 硝酸铝 、 盐酸 、 镁粉 、 氢氧化钠等
各种试剂均为分析纯。
2　方　法
2.1　样品的预处理
将采收的样品 120℃烘至恒重 , 用研钵研碎 , 过
20目筛备用 。
2.2　黄酮类化合物的提取
准确称取迎春花茎叶 2 g, 置于索氏提取器中用
75%的乙醇抽提至浸出液无色 , 抽滤 , 得到提取液进
行下一步试验 。
2.3　定性检验黄酮的存在
取少量提取液进行盐酸—镁粉的还原反应
试验 [ 3, 4] 。
2.4　总黄酮含量的测定 [ 5 - 7]
2.4.1　测定方法依据
以芦丁为对照品测定不同季节迎春花茎叶中总黄
酮的含量 , 加入铝离子试剂 , 使黄酮化合物与铝盐形
成络合物 , 在可见区能获得稳定的特征吸收峰。
2.4.2芦丁标准溶液的配制
准确称取芦丁标准试剂 5 m g, 用 30%的乙醇
溶解 , 转入 50 mL容量瓶中 , 用 30%乙醇定容 ,
C。=0. 1 mg /m L。
2.4.3标准曲线的制作
分别取芦丁标准溶液 0mL、 1mL、 2mL、 4 mL、
6mL、 8 mL、 10mL于 7只 50mL容量瓶中 , 用 30%
乙醇补充至 25mL, 分别加 5% N aNO 2溶液 1.4mL摇
匀 , 放置 5m in后加入 10%的 A l (NO3)3溶液 1.4 mL,
再加入 4%NaOH溶液 10 mL摇匀 , 用 30%乙醇稀释至
97
第 19卷 文山师范高等专科学校学报 2006年　第 4期
刻度 , 放置 15m in后于波长 510 nm处测定 , 以取芦丁
标准液为0 mL时所配制的溶液作为空白参比 , 测定不
同浓度下的吸光度 。其结果见表 1。
表 1　芦丁标准液的浓度与吸光度
浓度 (m g /mL) 0 0. 002 0. 004 0.008 0. 012 0. 016 0. 020
吸光度 (A) 0 0. 015 0. 029 0.055 0. 084 0. 126 0. 145
图 1　芦丁标准曲线
　　据表 1的结果用最小二乘法作线性回归。如图
1, 得芦丁浓度与吸光度的回归方程式:
A =7.432 6 C -0.001, 相关系数 R2 =0.994 4, 置信
度 99%。
2.4.4　样品中总黄酮含量的测定
从提取液中精取 0.5 mL, 置于 50 mL容量瓶中 ,
按制备标准曲线同样的条件显色并作比色测定 , 以所
测定得到的吸光度值 , 测定结果用 RSD%数据分析软
件分析处理 , 利用下式计算迎春花茎叶中总黄酮的
含量
C =(A +0.001) ×V提
7.4326×0.5×m样
式中:A为平均吸光度值 , C为总黄酮含量 , 单
位为:mg /g ;V提 为提取液的体积 (mL);m样 为迎
春花茎叶样品质量 。
3　结果与讨论
3.1　不同季节迎春花茎叶提取液的体积 , 其结果见
表 2。
表 2　不同季节迎春花茎叶提取液的体积
采样时间 2005年 11月 26日 2006年 1月 14日 2006年 3月 8日
提取液的体积 (mL) 73.2 62. 5 82.5
3.2　定性检验黄酮的存在
迎春花茎叶的提取液经过盐酸—镁粉的还原反应
试验结果溶液成微樱桃红色 , 说明有黄酮类化合物的
存在[ 3, 4] 。
3.3　不同季节迎春花茎叶提取液的吸光度
对三种样品平行测定 5次 , 测定结果精密度良好
(见表 3)。
表 3　不同季节迎春花茎叶提取液的吸光度
采样时间 吸光度 (A)　1 　　2 　　3 　　4 　　5 　　X 　　S 　RSD%
2005年 11月 26日 0. 15225 0. 15227 0. 15228 0.15224 0.15225 0. 1523 0. 00005 0. 0328%
2006年 1月 14日 0. 10225 0. 10226 0. 10227 0.10223 0.10224 0. 1022 0.000058 0. 0568%
2006年 3月 8日 0. 17525 0. 17526 0. 17526 0.17525 0.17524 0. 1753 0.000054 0. 0308%
98
张志信:不同季节迎春花茎叶中总黄酮含量的测定
　　3.4　不同季节迎春茎叶中总黄酮的含量的比较
根据表 3中的吸光度平均值 , 按照 2.4.4项下的
公式计算出不同季节迎春花茎叶中总黄酮的含量。如
表 4:
表 4　不同季节迎春花茎叶中总黄酮的含量
采样时间 采样地点 总黄酮含量 (mg /g)
2005年 11月 26日 文山师专校园内 75. 03
2006年 1月 14日 文山师专校园内 43. 13
2006年 3月 8日 文山师专校园内 97. 35
　　从表 4可以看出 , 在相同的提取分析条件下 ,
2006年 3月 8日的迎春花茎叶中的黄酮含量最高为
97.35mg /g。由实验结果可知迎春花茎叶中的黄酮含
量随着季节有较大的变化 , 这可能是在春天迎春花茎
叶比较鲜嫩所致 , 如果以迎春花茎叶为原料提取黄酮
类化合物 , 在春天采集为佳。
[参 考 文 献 ]
[ 1] 　黄泰康 , 丁志遵 ,赵守训 等 .现代本草纲目 [ M ] . 北京:中
国医药出版社 , 2001:1352.
[ 2] 　熊辅信 , 寸树芬编著 .现代中药研究荟萃 [M ] .昆明:云南
科技出版社 , 2002:421.
[ 3] 　中国科学院上海药物研究所植物化学研究室编译 .黄酮
体化合物鉴定手册 [ M ] . 北京:科学出版社 , 1981.389
- 392.
[ 4] 　[美 ] K.R.马卡姆著 . 黄酮类化合物结构鉴定技术 [ M ] .
北京:科学出版社 , 1990. 83.
[ 5] 　鲁翠涛 ,梅兴国 ,钟凡 .千层塔植物茎叶中黄酮类物质的
研究 [ J] . 天然产物研究与开发 , 2002, 14(3):27 - 29.
[ 6] 　元哓梅 ,将明蔚 , 胡正芝 . 聚酰胺吸附 -硝酸铝显色法测
定山楂及山楂制品中的总黄酮含量 [ J] . 食品与发酵工
业 , 1996, (4):27 -32.
[ 7] 　李春雁 ,王晓群 ,程立华等 .金露梅叶中总黄酮含量分析
[ J] . 中医药信息 , 2001, 18(4):55.
Determ ination of Total F lavonoids in the Leaves and Stem s
of Jasm inum Nudiflorum L indl in D ifferent Seasons
ZHANG Zh i-xin
(Department of B iochem istry, W enshan Teache rs’ Co llege, Wenshan, Yunnan 663000 , China)
Abstract:De term ination of tota l content o f f lavono ids in the leaves and stem s of Jasm inum Nud if lo rum Lindl in dif-
ferent seasons w as fin ished by the w ay, in wh ich 75% ethano l w as used as a solvent, and Ru tin as a standard , and
meanwh ile ex traction dev ices and co lorime try we re used.
Keywords:Jasm inum Nudif lo rum Lindl;tota l flavonoids;content
99