全 文 ：书　［收稿日期］　２０１３－１２－１１；２０１４－０８－１２修回
　［基金项目］　国家自然科学基金项目“基于分子生物技术的蜘蛛摄食生态学分析及控虫效能评价”（３１３７２１５９）；珠海市农业科技三项资金
“虾类病毒病的诊断与综合治理技术研究”（２０１１０１４）
　［作者简介］　张　成（１９８１－），男，副教授，博士，从事食品有机化学的研究与教学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｃｈｅｎｇｂｎｕ＠１２６．ｃｏｍ
　＊通讯作者：颜亨梅（１９５０－），男，教授，博导，从事生物学方面的研究与教学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｈｍ２００６＠１６３．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１４）０９－０５５７－０１９６－０４
石楠藤浸提液的最佳提取工艺及其抗氧化能力
张 成１，林绮君２，邢译文１，颜亨梅１
（１北京师范大学珠海分校工程技术学院，广东 珠海５１９０８７；２．香港大学理学院，香港 薄扶林道９９９０７７）
　　［摘　要］为了综合开发石楠藤，采用乙醇回流法获得石楠藤浸提液，对浸提温度、液料比、乙醇浓度以
及浸提时间分别进行单因素试验，并在Ｌ９（３４）正交试验基础上确定了石楠藤浸提液清除·ＯＨ的最佳提取
工艺条件。结果表明：石楠藤浸提液清除·ＯＨ的最佳工艺条件为浸提温度７０℃、液料比５∶１（ｍＬ∶ｇ）、乙
醇浓度４０％，浸提２．５ｈ，该条件下的·ＯＨ清除率为０．５５０；浸提液体积为１．８ｍＬ时，对·ＯＨ清除率达
０．７８３（羟自由基浓度为１．４７×１０－４，以 Ｈ２Ｏ２计）。
［关键词］石楠藤浸提液；羟自由基；抗氧化能力
［中图分类号］Ｓ３９；ＴＳ２０１．２ ［文献标识码］Ａ
Ｏｐｔｉｍｕｍ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ｃａｐａｃｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｐｉｐｅｒ　ｗａｌｉｃｈｉ　Ｅｘｔｒａｃｔ
ＺＨＡＮＧ　Ｃｈｅｎｇ１，ＬＩＮ　Ｑｉｊｕｎ２，ＸＩＮＧ　Ｙｉｗｅｎ１，ＹＡＮ　Ｈｅｎｇｍｅｉ　１
（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｕｈａｉ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５１９０８７；２．Ｆａｃｕｌｔｙ
ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｈｏｎｇｋｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｐｏｋ　ｆｕ　ｌａｍ　Ｒｏａｄ，Ｈｏｎｇｋｏｎｇ６４９４９０，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｌｙ　ｅｘｐｌｏｉｔ　Ｐ．ｗａｌｌｉｃｈｉｉ，ａ　ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ　ｒａｔｉｏ，ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｒｅｆｌｕｘ　ｍｅｔｈｏｄ，
ａｎｄ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　Ｋ　ｖａｌｕｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｉｎｃｌｕｄｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　７０℃，ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ
ｒａｔｉｏ　５∶１，ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　４０％ ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　２．５ｈ．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅｓｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｔｈｅ·ＯＨ
ｃｌｅａｒａｎｃｅ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　０．５５０，ａｎｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　０．７８３ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｖｏｌｕｍｅ　ｗａｓ　１．８ｍＬ（ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　１．４７×１０－４，Ｈ２Ｏ２）．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｉｐｅｒ　ｗａｌｌｉｃｈｉｉ　ｅｘｔｒａｃｔ；ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ；ｃａｐａｃｉｔｙ
　　石楠藤（Ｐｉｐｅｒ　ｗａｌｌｉｃｈｉｉ（Ｍｉｑ．）Ｈａｎｄ－Ｍａｚｚ
ｖａｒ）为胡椒科（Ｐｉｐｅｒａｃｅａｅ）植物，分布于四川、湖南、
云南湖北、广东等地［１－２］。味辛性温，入肝、脾、小肠
三经，有祛风通络、补肾壮阳之功效［３－４］。主治风寒
湿痹、肾虚腰痛、阳萎等症［１］。现代研究表明，石楠
藤主要含酰胺生物碱类、黄酮类物质等［１，５－７］。
国内对石楠藤作为药用植物在药理研究方面作
了大量的工作。许宝华［８－９］研究发现，石楠藤提取物
能明显降低急性出血性坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）大鼠
血清淀粉酶、ＰＡＦ和血浆内毒素的含量，对 ＡＨＮＰ
大鼠内毒素血症有良好的防治作用；石京山等［１０］通
过观察发现，石楠藤提取物对ＣＣｌ４致大鼠慢性肝损
伤、酒精和Ｄ－半乳糖所诱导的急性肝损伤均具有保
护作用；石楠藤还表现出镇痛和镇静作用［１１－１２］；还有
研究发现其具有扩张冠状动脉和抗心律失常的作
用［１３］。石楠藤中含有丰富的南藤素和海风藤酮［１］。
沈传勇等［１４］研究发现，海风藤酮对人红细胞膜的氧
化性损伤有相当程度的保护作用，并具有清除氧自
由基的作用，故石楠藤提取物抗氧化作用在药理研
究方面表现出一定的价值。然而，对其提取物抗氧
化能力的衡量至今尚未见完整详细的报道。因此，
笔者采用不同浓度乙醇水浴回流提取石楠藤，以
Ｆｅｎｔｏｎ反应产生羟自由基，用邻二氮菲－Ｆｅ２＋氧化
比色法测定石楠藤提取物对羟自由基的清除率［１５］。
通过单因素试验及正交试验，研究石楠藤清除羟自
由基的最佳提取工艺条件，并综合考察石楠藤提取
液的抗氧化能力。一方面为抗氧化剂的研究开发提
供更广泛的参考，另一方面也为石楠藤作为药用植
物资源的药学机理研究方面提供一定的理论参考，
有助于人们进一步了解石楠藤的药用功效机理。
１ 材料与方法
１．１ 试材
石楠藤：珠海市金鼎市场旁的健民药店购买的
中药材石楠藤（已干燥），通过粉碎机粉碎，过４０目
筛，放置于干净的容器中封口备用。
试剂：１，１０－菲啰啉（广东光华化学厂有限公
司），磷酸氢二钠（天津市福晨化学试剂厂），过氧化
氢（成都格雷西亚化学技术有限公司），磷酸二氢钾
（天津市福晨化学试剂厂），聚酰胺（成都格雷西亚化
学技术有限公司），硫酸亚铁（ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ）（成都
格雷西亚化学技术有限公司）。
仪器：ＨＷＳ２４型电热恒温水浴锅，电热恒温烘
干箱，ＥＰＥＤ－Ｔ／Ｄ型实验室级超纯水器，ＵＶ７５２型
　贵州农业科学　２０１４，４２（９）：１９６～１９９
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
紫外可见分光光度计，粉碎机，ＪＪ５００型电子天平，
ＰＢ－１０型ｐＨ精密酸度计。
１．２ 溶液配制
邻二氮菲溶液：用一定量的邻菲啰啉固体溶解于
无水乙醇混合配成５．０ｍｍｏｌ／Ｌ溶液。硫酸亚铁溶液：
用ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ固体与蒸馏水混合配成５．０ｍｍｏｌ／Ｌ
硫酸亚铁溶液。双氧水溶液：用过氧化氢溶液与蒸馏
水配成０．１％双氧水溶液。磷酸缓冲液：用磷酸二氢钾
和磷酸氢二钠按照一定比例配制成ｐＨ　７．４的
０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液。
１．３ 试验原理
在Ｆｅ２＋／Ｈ２Ｏ２通过Ｆｅｎｔｏｎ反应产生·ＯＨ 体
系中，邻菲啰啉与Ｆｅ２＋反应生成Ｆｅ２＋ －邻菲啰啉配
合物，形成的配合物在入射光波长为５３６ｎｍ时有最
大吸收峰［１６］。当羟自由基氧化Ｆｅ２＋至Ｆｅ３＋从而形
成新的络合物Ｆｅ３＋ －邻二氮菲时，该配合物在波长
５３６ｎｍ处的最大吸收峰将消失或减弱。但当羟自
由基氧化Ｆｅ２＋离子反应体系中存在能够清除羟自
由基的物质时，该氧化过程必然受到抑制，所以在波
长５３６ｎｍ处的光吸收峰则减弱或消失不明显［１５］，
从而该最大吸收波长５３６ｎｍ处吸光度值的变化反
映了清除剂清除羟自由基能力的大小［１７］，具体反应
式如下［１８］：
Ｆｅ２＋＋ Ｈ２Ｏ２→Ｆｅ３＋＋ ＯＨ－＋·ＯＨ
１．４ 石楠藤浸提液的提取
１．４．１ 单因素试验 准确称取２．０ｇ石楠藤研磨
粉于１００ｍＬ锥形瓶中，依据文献试验方法［１１，１５－１６］，
在液料比、乙醇浓度、浸提时间、浸提温度４个因素
中３个因素不变的条件下分别研究另外一个因素，
即不同的浸提温度（３０℃，４０℃，５０℃，６０℃，７０℃，
８０℃），液料比（５∶１，１０∶１，１５∶１，２０∶１，２５∶
１，３０∶１，４０∶１）、乙醇浓度（３０％，４０％，５０％，
６０％，７０％，８０％，９０％）和浸提时间（０．５ｈ，１．０ｈ，
１．５ｈ，２．０ｈ，２．５ｈ，３．０ｈ，３．５ｈ）下获得的浸提液
对羟自由基清除率的影响。各试验均重复２次，取
平均值。
１．４．２ 最佳浸提条件 为了对石楠藤提取液抑制
羟自由基反应最佳浸提工艺条件进行系统考察，在
单因素试验的基础上，以浸提温度（Ａ）、液料比（Ｂ）、
乙醇浓度（Ｃ）和浸提时间（Ｄ）为考察因素，采用
Ｌ９（３４）正交设计对提取条件进行优化（其因素及水
平见表１），并在最佳工艺条件下进行２次试验，从
而确定以羟自由基清除率为考察指标时的最佳浸提
工艺条件［１９－２０］。
表１ 石楠藤抗氧化物正交试验因素及水平
　　Ｔａｂｌｅ　１　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｄｅｓｉｇｎ
水平
Ｌｅｖｅｌ
Ａ浸提
温度／℃
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
Ｂ液料比
／（ｍＬ／ｇ）
Ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ
ｒａｔｉｏ
Ｃ乙醇
浓度／％
Ｅｔｈａｎｏｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ｄ浸提
时间／ｈ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
１　 ５０　 ５∶１　 ４０　 １．５
２　 ６０　 １０∶１　 ５０　 ２．０
３　 ７０　 １５∶１　 ６０　 ２．５
１．４．３ 石楠藤浸提液清除·ＯＨ所需体积的测定
在最佳浸提条件下获得的石楠藤浸提液，用不同用
量的该浸提液对清除羟自由基的效果进行测定，以
确定该自由基浓度下浸提液清除羟自由基所需的最
低浸提液体积。
１．５ 羟自由基清除率的测定
取３支试管，分别为样品管、损伤管和未损伤
管。在损伤管中依次加入５．０ｍｍｏｌ／Ｌ邻二氮菲溶
液１．０ ｍＬ，０．２ ｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ７．４的磷酸缓冲液
２．０ｍＬ，混匀后加入１．０ｍＬ样液的溶剂，充分混匀
后加入５．０ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸亚铁溶液１．０ｍＬ，接着加
入０．１％双氧水１．０ｍＬ，混和均匀后放置于３７℃
恒温水浴锅中６０ｍｉｎ后在紫外可见分光光度计波
长为５３６ｎｍ处测其吸光度值［２１］，即为损伤管的吸
光度值，记为Ａ（损）。未损伤管则用蒸馏水（１ｍＬ）代
替损伤管中的双氧水（１ｍＬ，浓度为０．１％），试剂添
加顺序均与损伤管相同，测得的吸光值记为 Ａ（未）。
样品管中则用１．０ｍＬ样品溶液代替损伤管中１．０
ｍＬ样液的溶剂，添加顺序和其余的添加剂也均与
损伤管相同，得出吸光度值记为Ａ（样）［２２］。清除率Ｉ
的计算［２３］：
清除率Ｉ＝ ［Ａ（样）－Ａ（损）］／［Ａ（未）－Ａ（损）］
依次按照上述方法，分别取最佳浸提工艺条件
下获得的石楠藤浸提液进行羟自由基清除率的浓度
梯度测定，并计算以每一浓度相对应的清除率Ｉ。
２ 结果与分析
２．１ 不同提取条件对石楠藤提取液抗氧化力的影响
２．１．１ 浸提温度 由表２可知，随着水浴温度的
增加，石楠藤浸提液对羟自由基的清除率呈增加趋
势，当温度达到６０℃时清除率达最大值０．２１７。因
此，初步确定提取温度为６０℃。
　表２ 不同浸提温度对石楠藤提取液的羟自由基清除率
　Ｔａｂｌｅ　２　Ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｕｎｄｅｒ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
浸提温度／℃
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
Ａ（损） Ａ（未） Ａ（样） 清除率
Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｒａｔｅ
３０　 ０．４１８　 １．７４７　 ０．５５０　 ０．０９９
４０　 ０．３９７　 １．７１５　 ０．５８２　 ０．１４０
５０　 ０．４０３　 １．６８３　 ０．６１２　 ０．１６３
６０　 ０．４００　 １．６５６　 ０．６７２　 ０．２１７
７０　 ０．２９０　 １．７０５　 ０．５５３　 ０．１８６
８０　 ０．４２６　 １．７１２　 ０．８２４　 ０．１４５
２．１．２ 液料比 由表３可知，当液料比为１０∶１
时，石楠藤浸提液对羟自由基的清除率达最大值，为
０．３１８，当液料比低于或高于１０∶１时，对羟自由基
清除率均有所下降。因此，浸提液料比为１０∶１左
右较好。
表３ 不同液料比对石楠藤提取液的羟自由基清除率
　Ｔａｂｌｅ　３　Ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｕｎｄｅｒ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｉｑｕｉｄ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｒａｔｉｏ
液料比／（ｍＬ／ｇ）
Ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ
ｒａｔｉｏ
Ａ（损） Ａ（未） Ａ（样） 清除率
Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｒａｔｅ
５∶１　 ０．３６９　 １．６５０　 ０．５５０　 ０．１４１
１０∶１　 ０．３２５　 １．６７８　 ０．７５６　 ０．３１８
１５∶１　 ０．２５２　 １．６７４　 ０．４４４　 ０．１３５
２０∶１　 ０．３７９　 １．７０５　 ０．５０４　 ０．０９４
２５∶１　 ０．４０７　 １．６８５　 ０．４９０　 ０．０６５
３０∶１　 ０．３５５　 １．６５８　 ０．３８５　 ０．０２３
３５∶１　 ０．３７２　 １．６９３　 ０．３９３　 ０．０１６
·７９１·
　张　成 等　石楠藤浸提液的最佳提取工艺及其抗氧化能力
　ＺＨＡＮＧ　Ｃｈｅｎｇ　ｅｔ　ａｌ　Ｏｐｔｉｍｕｍ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ｃａｐａｃｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｐｉｐｅｒ　ｗａｌｌｉｃｈｉｉ　Ｅｘｔｒａｃｔ
　表４ 不同乙醇浓度对石楠藤提取液的羟自由基清除率
　Ｔａｂｌｅ　４　Ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｕｎｄｅｒ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
乙醇浓度／％
Ｅｔｈａｎｏｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ａ（损） Ａ（未） Ａ（样） 清除率
Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｒａｔｅ
３０　 ０．４４６　 １．８１８　 ０．５５４　 ０．０７９
４０　 ０．４０５　 １．６８８　 ０．６３６　 ０．１８０
５０　 ０．３１８　 １．６４２　 ０．６４９　 ０．２５０
６０　 ０．２５７　 １．５９４　 ０．５５１　 ０．２２０
７０　 ０．２５２　 １．６７４　 ０．４４４　 ０．１３６
８０　 ０．２２１　 １．６６２　 ０．３８２　 ０．１１２
９０　 ０．１８４　 １．５７６　 ０．３２４　 ０．１０１
２．１．３ 乙醇浓度 由表４可知，随着乙醇浓度的
增加，石楠藤浸提液对羟自由基的清除率呈增加趋
势，当乙醇浓度为５０％时，羟自由基清除率达到最
大值０．２５０。因此，乙醇浓度为５０％较好。
２．１．４ 浸提时间 由表５可知，随着浸提时间的
延长，石楠藤浸提液对羟自由基的清除率呈增加趋
势，当浸提时间为２．０ｈ时，羟自由基清除率达最大
值０．２２７。因此，浸提时间初步确定为２．０ｈ。
表５ 不同浸提时间对石楠藤提取液的羟自由基清除率
　Ｔａｂｌｅ　５　Ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｕｎｄｅｒ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ
浸提时间／ｈ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
Ａ（损） Ａ（未） Ａ（样） 清除率
Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｒａｔｅ
０．５　 ０．４４８　 １．７５２　 ０．５８１　 ０．１０２
１．０　 ０．４１０　 １．７２２　 ０．６２２　 ０．１６２
１．５　 ０．４１５　 １．６８９　 ０．６５４　 ０．１８８
２．０　 ０．４０８　 １．７３４　 ０．７０９　 ０．２２７
２．５　 ０．３９７　 １．７４５　 ０．５９８　 ０．１４９
３．０　 ０．４５３　 １．７１１　 ０．５９７　 ０．１１４
３．５　 ０．３８１　 １．７３９　 ０．４９８　 ０．０８６
２．２ 最佳浸提工艺条件
由表６可知，石楠藤浸提液各处理对自由基的
清除率。从表７可知，各因素对石楠藤浸提液清
除·ＯＨ效果的影响顺序为Ｂ＞Ａ＞Ｄ＞Ｃ，即影响
石楠藤浸提液清除·ＯＨ 效果的主要因素是液料
比，其次是浸提温度和时间，最后是乙醇浓度。此
外，Ｋ 值分析表明，Ａ 因素 Ｋ３＞Ｋ２＞Ｋ１，Ｂ因素
Ｋ１＞Ｋ２＞Ｋ３，Ｃ 因 素 Ｋ１ ＞ Ｋ３ ＞ Ｋ２，Ｄ 因 素：
Ｋ３＞Ｋ２＞Ｋ１，故最优方案为Ａ３Ｂ１Ｃ１Ｄ３，即石楠藤浸
提液清除·ＯＨ效果最佳的浸提工艺条件为：浸提
温度７０℃、液料比５∶１、乙醇浓度４０％、浸提时间
２．５ｈ。在该条件下，石楠藤浸提液对·ＯＨ的清除
效果最佳，平均清除率为０．５５０，高于表６中正交试
验的任一设计组合，说明正交试验结果可靠。
表６ 石楠藤浸提液正交试验的羟自由基清除率
　Ｔａｂｌｅ　６　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｉｎ
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｏｆ　Ｐ．ｗａｌｌｉｃｈｉｉ　ｅｘｔｒａｃｔ
试验号
Ｎｏ．
Ａ浸提
温度／℃
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
Ｂ液料比／
（ｍＬ／ｇ）
Ｌｉｑｕｉｄ
ｍａｔｅｒｉａｌ
ｒａｔｉｏｎ
Ｃ乙醇
浓度／％
Ｅｔｈａｎｏｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ｄ浸提
时间／ｈ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
消除率
Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｒａｔｅ
１　 ５０　 ５∶１　 ４０　 １．５　 ０．４１３
２　 ５０　 １０∶１　 ５０　 ２．０　 ０．１７６
３　 ５０　 １５∶１　 ６０　 ２．５　 ０．１１２
４　 ６０　 ５∶１　 ５０　 ２．５　 ０．５２６
５　 ６０　 １０∶１　 ６０　 １．５　 ０．２３９
６　 ６０　 １５∶１　 ４０　 ２．０　 ０．１４７
７　 ７０　 ５∶１　 ６０　 ２．０　 ０．５０８
８　 ７０　 １０∶１　 ４０　 ２．５　 ０．３００
９　 ７０　 １５∶１　 ５０　 １．５　 ０．１４９
表７ 石楠藤抗氧化物正交试验的羟自由基清除率均值与极差
Ｔａｂｌｅ　７　Ｍｅａｎ　ａｎｄ　ｒａｎｇｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｉｎ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐｉｐｅｒ　ｗａｌｌｉｃｈｉｉ　ｅｘｔｒａｃｔ
因素
Ｆａｃｔｏｒ
均值Ｋ　Ｍｅａｎ　ｖａｌｕｅ
Ｋ１ Ｋ２ Ｋ３
极差
Ｒａｎｇｅ
Ａ浸提温度／℃ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　 ０．７０２　 ０．９１２　 ０．９５７　 ０．０８５
Ｂ液料比／（ｍＬ／ｇ）Ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｉｌｄ　ｒａｔｉｏ　 １．４４６　 ０．７１４　 ０．４０８　 ０．３４６
Ｃ乙醇浓度／％ Ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　 ０．８６１　 ０．８５２　 ０．８５８　 ０．００３
Ｄ浸提时间／ｈ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　 ０．８０１　 ０．８３１　 ０．９３９　 ０．０４６
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
清
除
率
Sc
av
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Doasge
0.6%%%%%%%%%%%%0.8%%%%%%%%%%%1%%%%%%%%%%%%%1.2%%%%%%%%%%1.4%%%%%%%%%%1.6%%%%%%%%%%%%1.8
加样量 /mL
图示 不同用量石楠藤提取液对羟自由基的清除率
　　Ｆｉｇ．　Ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　Ｐ．ｗａｌｌｉｃｈｉｉ　ｅｘｔｒａｃｔ
２．３ 不同用量的石楠藤浸提液清除羟自由基清除率
由图示可知，当石楠藤浸提液从０．６～１．８ｍＬ
逐步增加时，对羟自由基的清除率呈坡度上升趋势；
当加样量为１．８ｍＬ时，对羟自由基的清除率即达
０．７８３，故羟自由基的浓度为１．４７×１０－４（以 Ｈ２Ｏ２
计），所需的最低浸提液体积为１．８ｍＬ。
３ 结论与讨论
试验采用水浴回流法制备石楠藤浸提液，以石
楠藤浸提液对·ＯＨ 的清除率为考察指标，通过单
因素试验和Ｌ９（３４）正交试验对其浸提工艺参数进
行优化。结果表明，影响石楠藤浸提液清除·ＯＨ
效果的主要因素是液料比，其次是浸提温度和浸提
时间，最后是乙醇浓度；石楠藤浸提液清除·ＯＨ效
果最佳的浸提工艺条件为在浸提水浴温度为７０℃、
液料比５∶１、乙醇浓度４０％条件下浸提２．５ｈ，该条
件下的·ＯＨ 清除率达０．５５０。此外，在最佳提取
工艺条件下，浸提液体积加入量达到１．８ｍＬ时，·
ＯＨ清除率达到０．７８３（溶液中羟自由基浓度为
１．４７×１０－４，以 Ｈ２Ｏ２计）。
石楠藤早已入药多年，在治风寒湿痹和筋骨腰
膝疼痛、腰疼、手术后疼痛，祛风通经和强腰止痛方
面均发挥着非常重要的作用［１，２４］冀治鑫等对药理分
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　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
析也作了大量的工作［１，８－１３，２５］，但其抗氧化功效却尚
未为大家所熟悉。试验对石楠藤浸提液的抗氧化作
用进行了综合研究，未针对浸提液中的黄酮含量、黄
酮含量提取工艺以及该浸提液中黄酮含量与羟自由
基清除作用之间的量效关系作探讨并进行具体研
究，因此，今后的研究方向为石楠藤中黄酮含量的确
定及其抗氧化性的应用分析。
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（责任编辑：孙小岚）
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　张　成 等　石楠藤浸提液的最佳提取工艺及其抗氧化能力
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