全 文 ：HPLC法测定不同时间采集照山白中槲皮素的含量
白金亮，布和巴特
（内蒙古民族大学 蒙医药学院，内蒙古 通辽 028043）
〔摘 要〕目的：比较采集时间不同的照山白中有效成分槲皮素的含量，制定最好的采集时间.方法：采用
HPLC法，Centur SILC18-EPS色谱柱（200×4.6 mm,5μm）流动相为甲醇—0.2%磷酸（40：60）,检测波长为
360nm.测定不同采集时间10批照山白中槲皮素的含量.结果：槲皮素的平均回收率99.94%；RSD为2.14%；10
批样品中槲皮素的含量最高的是9月份采集药材.结论：照山白中槲皮素的含量随着采集时间不同而变化.
〔关键词〕不同采集时间；照山白；槲皮素含量
〔中图分类号〕R927.2 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185（2011）01-0068-03
Determination of Quercetin in Manchurian Rhododendron
Leaf at Different Harvesting Time by HPLC
BAI Jin-liang，Buhebate
（Collage of Mongolian Medicine and Pharmacy, Inner Mongolia
University for Nationalities, Tongliao 028043, China）
Abstract: Objective: To determine the best acquisition time through comparing the content of effective
component of quercetin in manchurian rhododendron leaf at different acquisition time. Methods: The HPLC
separation was performed on Centur SILC18-EPS column （200mm×4.6mm, 5μm）, the mobile phase was
methanol and 0.2% phosphoric acid（40:60）, the detection wavelength was 360nm. The content of quercetin
in 10 batches of manchurian rhododendron leaf which be harvested at different time were determinated.
Results: The average recovery of quercetin was 99.94%, RSD was 2.14%, The highest content of quercetin
in 10 batches of samples was acquisition in September. Conclusion: The content of quercetin in
manchurian rhododendron leaf is changed with the acquisition time.
Key words: Acquisition time; Manchurian rhododendron leaf; Quercetin
照山白是杜鹃花科植物小花杜鹃的枝叶，具有味甘、涩、苦，性温；软、轻、有毒功能；调胃火、祛巴达干、止痛、止咳、祛
痰、消肿、调解体素之功效〔1〕.用于治疗铁垢巴达干、胸痞、胃痛、消化不良、咳不停、不易祛痰、呼吸困难、肺浮肿、营养缺、关
节肿等〔2〕,治烧心、酸水倒流、热痞、睡眠大和沉睡、肾脉肿、胃火下引起的消化不良腹泻、寒性协日引起的眼体变黄病〔3〕;用
于哈日布—11、哈日布—16、哈日布—7、哈日布—6、哈日布—3汤、方解石—3、石榴—16、铁宵—15、满昂—16、五甘露等很
多方中主药和偏药〔4〕.槲皮素是照山白的有效成分之一〔5〕，是一种黄酮类化合物，具有多种生物活性，如扩张冠状动脉、降低
毛细血管通透性和脆性、抗血小板聚等多种药理作用〔6〕.照山白的传统采集时间为秋、冬季.照山白采集是否适时对质量有
很大的影响，过早采收产量不高，质量差，而过迟采集，容易干燥影响其质量.本文采用高效液相色谱法测定10批不同采集
时间的照山白中槲皮素的含量，为照山白的采集提供科学依据，确保临床疗效.
作者简介：白金亮，内蒙古民族大学蒙医药学院讲师.
第26卷 第1期 内蒙古民族大学学报（自然科学版） Vol.26 No.1
2011年1月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Jan.2011
DOI:10.14045/j.cnki.15-1220.2011.01.019
1 仪器与试药
1.1 试药
本实验用槲皮素对照品是中国药品生物制品检定所提供（批号：110081—200406）；实验用药材采自赤峰市巴林右旗，
均由内蒙古民族大学蒙医药学院布和巴特尔教授鉴定为杜鹃花科植物小花杜鹃Rhododendron micranthum Turcz的干燥叶
与枝叶.色谱甲醇，实验所用其他试剂均为分析纯.
1.2 仪器
高效液相色谱仪（日本岛津公司）；SPD—10AVP紫外检测器；KQ—100DA超声仪（昆山市）；电子天平.
1.3 样品
照山白样品为不同时间采集，产地内蒙古赤峰巴林右旗.2008年2月采集的照山白，编号为200802；3月采集的照山白，
编号为200803；5月采集的照山白，编号为200805；6月采集的照山白，编号为200806；7月采集的照山白，编号为200807；8
月采集的照山白，编号为200808；9月采集的照山白，编号为200809；10月采集的照山白，编号为200810；11月采集的照山
白，编号为200811；12月采集的照山白，编号为200812.
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为CenturSILC18——EPS（200mm×4.6mm，5μm）;流动相为甲醇—0.2%磷酸（40：60）；检测波长为360nm;流速
1.0ml/min;进样量10μl;温度为25℃.在色谱条件下，槲皮素峰形良好，无杂质峰干扰，保留时间约为24min与相邻色谱峰的
分离度均大于1.5，结果见图1，图2.
2.2 对照品溶液的制备
精密称取槲皮素对照品2.05mg置50ml量瓶中，加60%甲醇溶解，并定容至刻度，制成浓度为0.041mg/ml的对照品溶
液,即得.
2.3 供试品溶液的制备
取照山白药材，精称0.2g, 加入甲醇25ml超声处理30min，放冷，再称定重量，用60%甲醇溶液补足减失的重量，振摇，
滤过，取续滤液〔7~9〕，即得.
2.4 线性关系考察
精密吸取槲皮的对照品溶液2，4，6，8，10μl注入高效液相色谱仪，记录峰面积，以对照品进样量为横坐标，峰面积分
值为纵坐标.经计算求得回归方程为Y=5284304.878X—2777.1，r=0.9995.且表明槲皮素在0.082 μg~0.41 μg范围内呈现
良好的线性关系.
2.5 精密度实验
吸取对照品和供试品的溶液，各连续进样5次，每次10μl测定对照品和供试品的峰面积值，槲皮素峰面积的RSD为
2.03% 和供试品峰面积的RSD为2.30%.
2.6 稳定性试验
取200809 供试品溶液于0h开始测定，以后间隔2h测定一次，测定峰面积，结果RSD为1.91%，表明供试品溶液至少
10 h内稳定.
2.7 重复性试验
取同一批号（200809）样品5份，精密称定，依法制备5份供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，分别测定含
图1 槲皮素对照品HPLC色谱图
Figure 1 HPLC chromatogram
of control quercetin
图2 照山白样品HPLC色谱图
Figure 2 HPLC chromatogram of manchurian
rhododendron leaf
第1期 白金亮等：HPLC法测定不同时间采集照山白中槲皮素的含量 69
量，结果RSD为1.67%.表明本法重复性良好.
2.8 回收率试验
采用加样回收法.精密称取样品5份，置具塞锥瓶中，分别加入同浓度的对照品溶液，依法制定，计算回收率，结果平均
回收率为99.94%，RSD为2.14%，见表1.
表1 回收率实验结果
Table 1 Experimental results of recovery rate
取样（g）
0.20
0.20
0.20
0.20
0.20
样品含量（μg）
145.21
145.21
145.21
145.21
145.21
对照品加入量（μg）
72
72
72
72
72
测得量（mg）
215.02
217.92
215.79
217.64
216.93
回收率（%）
96.69
100.97
97.92
100.55
99.58
平均回收率（%）
99.94
RSD%
2.14
2.9 样品含量测定
取采集时间不同的10批照山白药材，粉碎，过20目筛，称取0.2g精密称定,按样品溶液的制备项下方法分别制备样品
溶液；精密吸收10μL注入液相色谱仪，依法测定，计算槲皮素的含量，结果见表2.
表2 样品测定结果
Table 2 Determination results of sample
平均含量
(mg/g)
RSD(%)
2月
0.2334
0.2428
0.2269
0.2334
0.2332
0.2339
1.02
3月
0.3834
0.4059
0.4569
0.4124
0.4352
0.4188
2.15
5月
0.4509
0.3719
0.4338
0.4127
0.4146
0.4168
1.20
6月
0.5134
0.5089
0.5147
0.5251
0.4776
0.5079
1.09
7月
0.4087
0.4387
0.4143
0.4139
0.4141
0.4179
1.24
8月
0.4137
0.3870
0.3761
0.3882
0.3693
0.3869
1.26
9月
0.6524
0.6324
0.6168
0.6890
0.6859
0.6499
1.18
10月
0.5527
0.5609
0.6210
0.5489
0.5632
0.5693
1.57
11月
0.3174
0.3387
0.3257
0.2587
0.3164
0.3114
1.14
12月
0.1610
0.1932
0.1651
0.1936
0.1653
0.1756
1.21
3 讨论
本文采用HPLC测定照山白中槲皮素的含量，实验结果表明10批样品中槲皮素的含量都高于0.1610mg/g；但不同时间
照山白中槲皮素的含量差异较大，样品测定表明槲皮素含量最高的是9月份0.6499mg/g；10月份的含量是0.5693mg/g，由
此，证明了蒙药材照山白采集时间是秋、冬季是具有一定科学性的.
本法简便快速，准确度高，灵敏度高，可以作为照山白中槲皮素的含量测定方法，为照山白药材的质量控制提供科学
依据.
参 考 文 献
〔1〕罗布桑.蒙药学〔M〕.北京：民族出版社，2006.130.
〔2〕蒙古学百科全书编委会《医学卷》编辑委员会编.蒙古学百科全书（医学卷）〔M〕.呼和浩特：内蒙古人民出版社，
2002.4，428.
〔3〕巴盟临河县人民医院蒙医科和阜新蒙古族自治县蒙医研究所编·蒙医金 〔M〕. 呼和浩特：内蒙古人民出版社，
1977.542，93，379.
〔4〕昭乌达盟蒙医进修班编.蒙医药方汇编〔M〕.赤峰：内蒙古科学技术出版社，2004.55，77，100，407，428.
〔5〕王先荣.照山白中黄酮类成分的提取、分离和鉴定〔J〕.安微医药，1997，（4）：17.
〔6〕国家中医药管理局中华本草编委.中华本草（蒙药卷）〔M〕.上海：上海科学技术出版社，2004.170.
〔7〕张朝绅,张振秋.HPLC波长切换法测定满山红中杜鹃素和槲皮素的含量〔J〕.中国实用医药，2008，（3）：59.
〔8〕黄齐林.高效液相色谱法快速测定满山红中杜鹃素和槲皮素的研究〔J〕.分析科学学报，2006，（4）：162-163.
〔9〕乔喜勒.牡丹江地区满山红叶中槲皮素的含量测定〔J〕.哈尔滨商业大学学报（自然科学版），2003，（6）：269.
〔责任编辑 赵贤芳〕
内 蒙 古 民 族 大 学 学 报 2011年70