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法为主。药理学研究证明诸药合用，可以通过多种途径、
逆转胃癌前病变[4]。
TGF-α是 EGF家族成员，主要促进胃肠道黏膜上皮
的更新及自我修复，在维持消化道黏膜完整性方面具有
重要的作用。文献报道重度不典型增生等胃癌前病变患
者 TGF-α值明显高于正常胃组织（P＜0.01）[5]。关于胃
癌前病变总体检测文献报道较少。我们研究发现治疗组
给予益气活血中药阻癌胃泰治疗后检测 TGF-αmRNA
含量明显低于对照组（P＜0.05），提示阻癌胃泰可影响
胃癌前病变大鼠 TGF-αmRNA含量的表达，肯定了阻癌
胃泰对大鼠胃癌前病变的预防和逆转作用。在胃黏膜存
在炎症反应，自身组织细胞进行修复同时，TGF-α表达
也会随之增强。有研究发现 TGF-α与 EGFR结合后，可
引起细胞本身分泌细胞因子，作用于自身的膜受体，促
进自身组织的增殖，引起不典型增生等癌前病变的发生，
最终致细胞失增殖不受正常凋亡机制的调节而癌变。
文献报道 TGF-α可通过全部或部分诱导 VEGF 表
达刺激新生血管形成，提示 TGF-α与 VEGF对血管生成
的协同作用[6]。但细胞因子作用的整体性，不单纯是它
们作用的互补，亦可能起相互干扰作用，故二者之间的
作用机制尚需进一步研究。
参考文献
[1] 张旭晨.大鼠胃癌前病变模型的建立[J].中国肿瘤,1993,8(3):26-28.
[2] 李春启.实验动物胃黏膜癌前病变的模型建立、发病机制及其逆转治疗
的研究[J].第三军医大学学报,1994,16(1):5.
[3] 刘文忠.重视对胃黏膜萎缩和肠化生的研究[J].中华消化杂志,2003,23(3):
135-136.
[4] 王本祥.现代中药药理学[M].天津:天津科学技术出版社,1997:854.
[5] 易伟莲.血清 CEA、CA50和 TGF-α水平测定对胃癌的诊断价值[J].广东
医学,2001,22(1):40-41.
[6] 任明智,张冬梅,王垂杰.阻癌胃泰对大鼠胃癌癌前病变 VEGF 表达的影
响[J].现代肿瘤医学,2009,17(12):2253-2255.
（本文校对：苏玲 收稿日期：2011-12-27）


大叶钩藤有效成分的分离
张秋翠 郭劲松
（中国中医科学院广安门医院南区，北京 102618）
摘 要：目的 大叶钩藤（ncaria macrophylla Wall）为茜草科（Rubiaceae）钩藤属植物，本课题目的在于对大叶钩藤的 70%乙醇提取
物，依次分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取。氯仿部位分离得到了 2 个三萜类化合物，对它们的结构通过核磁共振和
质谱等进行了鉴定。方法 本课题对钩藤属大叶钩藤的提取液，减压浓缩至无醇味，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，
取氯仿提取物进行化学成分的系统分离，从中得到化合物 1和 2，经 NMR和MS等数据鉴定他们的结构。结果 两个单体化合物的化
学结构被分别鉴定为熊果酸和齐墩果酸。结论 为进一步研究大叶钩藤的药理活性和药材质量提供了物质基础。
关键词：大叶钩藤；氯仿；提取；化学结构
doi：10.3969/j.issn.1672-2779.2012.02.106 文章编号：1672-2779（2012）-02-0150-02

大叶钩藤（Uncaria macrophylla Wall）为茜草科钩藤
属植物，带钩的茎枝入药。大叶钩藤中含有生物碱、三
萜类、黄酮类等化合物，具有诸多的药理活性。现临床
多用于治疗头晕目眩、惊痫抽搐、全身麻木等心血管和
神经系统疾病，且已成为治疗高血压常用药物。
笔者查阅文献后发现，大多文献对钩藤的鉴别方法仅
有性状鉴别和一般鉴别，没有含量测定和薄层鉴定，而
2010 版《中国药典》也仅有钩藤药材的性状鉴别和生物
碱的沉淀反应鉴定。对于不同种钩藤药材，也主要是基于
药材的性状、显微特征以及薄层色谱鉴别，但性状和显微
特征鉴别困难，而且主观性较强，需要具有长期实践经验
的专业人员完成。可见对于钩藤化学成分、质量标准的深
入研究，完善钩藤的质量控制方法十分必要。本课题目的
在于对钩藤的氯仿提取物进行了化学成分的系统分离，将
分离得到的单体化合物进行理化性质测定并结合NMR及
MS等波谱数据鉴定其化学成分，从而完善钩藤的定量质
量标准，并为其药理活性研究提供化学活性物质基础。
1 资料与方法
1.1 材料与仪器
1.1.1 仪器 色谱柱（北京玻璃仪器厂），Bruker AV Ⅲ
600型核磁共振波谱仪，LTQ-Obitrap XL液相质谱仪，
RE-52AA型旋转蒸发仪及恒温水浴锅（上海亚荣生化仪
器厂），ZFI型三用紫外分析仪。
1.1.2 材料 薄层色谱硅胶预制板（烟台市化学工业研
究所），柱层层析硅胶（100～200 目，青岛海洋化工厂
分厂），大叶钩藤药材（产地：广西），乙醇、石油醚、
氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇，均为分析纯，纯化水。
1.2 提取与分离 大叶钩藤带钩茎枝药材用 70%乙醇
加热回流提取 3次，每次 3h，减压回收溶剂的得浸膏。
浸膏加少量水混悬后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、
正丁醇萃取。回收溶剂，得石油醚、氯仿、乙酸乙酯、
正丁醇提取物。
将氯仿提取物用氯仿和适量甲醇溶解，加入 1.5 倍
量的硅胶拌样，减压干燥，过 100目筛得样品[1]。
用氯仿和 30倍量的硅胶湿法装柱，静置 24h，加入
样品，以氯仿-甲醇（100:1～10:1）梯度洗脱，每 500ml
溶剂收集 1次，减压浓缩，进行 TLC跟踪检查并合并相
似组分。
将相似组分加入硅胶拌样，硅胶反复柱层析，氯仿-
甲醇梯度洗脱纯化，得到化合物 1和 2。
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提取分离流程图如下。



2 结果
将分离得到的两个化合物用核磁共振仪和质谱仪进
行结构鉴定，结果如下：
化合物 1 熊果酸（ursolic acid），ESI-MS m/z : 479[M
+ Na]+，分子质量为 456。
1HNMR（Pyridine-d5）δ：0.95（3H，d，J=6.6Hz，
-CH3），1.00（3H，d，J=6.6Hz，-CH3），0.90（3H，s，
-CH3），1.02（3H，s，-CH3），1.05（3H，s，-CH3），1.23
（3H，s，-CH3），1.24（3H，s，-CH3），2.36（1H，d，
J=11.4Hz，H-18），3.45（1H，dd，J=5.4，11.4Hz，H-3
α），5.49（1H，t-like，H-12）。
13CNMR（Pyridine-d5）δ：39.5（C-1），28.5（C-2），
78.5（C-3），39.8（C-4），56.2（C-5），19.2（C-6），34.0
（C-7），40.4（C-8），48.4（C-9），37.7（C-10），25.3
（C-11），126.0（C-12），139.7（C-13），42.9（C-14），
29.1（C-15），24.3（C-16），48.4（C-17），53.9（C-18），
39.9（C-19），39.8（C-20），31.5（C-21），37.8（C-22），
29.2（C-23），17.0（C-24），16.1（C-25），17.9（C-26），
24.0（C-27），180.2（C-28），17.8（C-29），21.8（C-30）。
以上数据与文献报道的齐墩果酸一致。
化学结构如下：
HO
H COOH
H

化合物 2 齐墩果酸（oleanane acid），ESI-MS m/z :
479[M + Na]+，分子质量为 456。
1HNMR（CDCl3）δ：0.77（3H，s，-CH3），0.78
（3H，s，-CH3），0.906（3H，s，-CH3），0.914（3H，s，
-CH3），0.93（3H，s，-CH3），0.99（3H，s，-CH3），1.14
（3H，s，-CH3），2.82（1H，dd，H-5），2.82（1H，dd，
H-5），3.21（1H，dd，H-3），5.29（1H，t，H-12）。
13CNMR（CDCl3）δ：38.6（C-1），27.4（C-2），
79.2（C-3），39.0（C-4），55.4（C-5），18.5（C-6），32.9
（C-7），39.5（C-8），47.8（C-9），37.3（C-10），23.2
（C-11），122.9（C-12），143.8（C-13），41.9（C-14），
27.9（C-15），23.6（C-16），46.7（C-17），41.3（C-18），
46.1（C-19），30.9（C-20），34.0（C-21），32.6（C-22），
28.3（C-23），15.7（C-24），15.5（C-25），17.3（C-26），
26.1（C-27），181.5（C-28），33.2（C-29），23.8（C-30）。
以上数据与文献报道的齐墩果酸一致。
化学结构如下：
HO
H COOH

3 讨论
3.1 钩藤中含有生物碱，游离生物碱易溶于有机溶剂。
甲苯作为提取溶剂，其沸点高，浓缩困难，因此不被采
用；乙醚沸点低，挥发性强，易燃易爆，不安全，最终
也没被采用。而氯仿提取钩藤碱效果好，且价格适中，
适合作为工业化提取的溶剂。
3.2 由于钩藤碱对热不稳定，而且在极性溶剂中又容易
转化成异钩藤碱，因此实验过程中应注意将温度控制在
60℃以下。
3.3 根据药理研究发现，齐墩果酸为五环三萜类化合
物，具有保肝、降转氨酶、促进肝细胞再生、保护肝降
酶、抗炎、强心利尿、抗肿瘤等功能，临床上用于治疗
急性黄疸性肝炎，对慢性肝炎也有一定疗效。熊果酸为
三萜类化合物，具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗
溃疡、降低高血糖等多种生物学效应。另外，大叶钩藤
中还含有生物碱，其中钩藤碱和异钩藤碱有较强的降压
作用，以及对心脏和中枢神经系统的影响等多种药理活
性。钩藤总碱还有较强的逆转肿瘤细胞多药耐药的作用。
因此，有必要对大叶钩藤进行开发性研究，使其发挥更
大的作用，创造更大的价值。
参考文献
[1] 杨君,宋纯清,胡之璧.大叶钩藤的化学成分研究[J].中国中药杂志,2000,
25(8):484-485.
[2] 鞠建华,周亮,林耕.枇杷叶中三帖酸类成分及其抗炎、镇咳活性研究[J].
中国药学杂志,2003,38(10):752-757.
（本文校对：王治华 收稿日期：2011-12-01）