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超声波提取鸡矢藤总黄酮优化工艺研究



全 文 : 37
超声波提取鸡矢藤总黄酮优化工艺研究
叶陈丽,林 敏,郑超宾,许俊楷,肖壮强,典灵辉
(广东医学院,广东 东莞 523808)

摘 要:用正交试验法对鸡矢藤中的总黄酮提取工艺进行优化。以鸡矢藤中的总黄酮含量为考察指标,
采用正交试验 L9(34)表进行实验,对提取过程中的乙醇浓度、提取时间、提取次数及料液比四个影
响因素进行研究。最佳提取工艺是:提取次数 3,乙醇浓度 80%,料液比 1:20,提取时间 15min.。优
选得到的工艺稳定可行。
关键词:鸡矢藤;总黄酮;正交实验



2008 年广东医学院大学生课外科研项目(09ZDP004)
鸡矢藤 Paedria scandens (Lour) Merr属茜草科多年生草
质藤本,是我国传统的中草药,其根及全草均可药用。鸡矢
藤含有多种化学成分,包括挥发油,环烯醚萜苷类,还有三
十一烷、三十一烷醇、蜡醇、棕榈酸、骨甾醇、菜油甾醇、
熊果酸、齐墩果酸等油脂及甾醇类化合物[1]。具有祛风除湿、
消食化积、解毒消肿、活血止痛的功效,用于风湿痹痛、腹
泻、痢疾、脘腹疼痛、气虚浮肿、头昏食少、湿疹,疮伤肿
痛等[2]。鸡矢藤的这一系列功效在临床上起到了重要的作
用,其现代药理研究证明鸡矢藤有镇痛、镇静、降压、抑制
胃肠反应、抗炎、抑菌、抗病毒和抗肿瘤等作用[1]。同时黄
酮类化合物活性广泛,具有抗衰老、预防心血管疾病、调节
免疫和止血镇痛等功效[3],因此,对鸡矢藤有效化学成分的
提取将有利于其药理研究,使其更好地为人类的健康服务。
1 仪器与试剂
KQ5200 DB 型数控超声波清洁器(昆山市超声仪器有
限公司),UV-1800 型紫外可见分光光度计(上海美谱达
仪器有限公司),HH-1 数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有
限公司),SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市予华仪器有
限责任公司),其它试剂均为分析纯,芦丁对照品(中国药品
生物制品检定所),鸡矢藤(市售)。
2 方法与结果
2.1 含量测定
精密称取芦丁对照品适量,加 95%乙醇,超声使其溶解,
配置浓度为 0.2mg/ml 的溶液。分别吸取芦丁对照液 0.00、
1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00ml 于 25ml 容量瓶中,
加水至 6ml,加 5%亚硝酸钠溶液 1.0ml,摇匀,静置 6min;
再加 10%的硝酸铝溶液 1.0ml,摇匀,静置 6min;再加 4%
的氢氧化钠溶液 10ml,用 60%乙醇稀释至刻度,摇匀,静
置 12min,以试剂作空白参比液,照紫外-可见分光光度法
(《中国药典》2005 年版一部附录 VA)[4],于 510nm 处测
吸光度,以吸光度 A 和浓度 C 进行回归,得线性回归方程
A=0.0112C+0.00653 , 相 关 系 数 r=0.9997 , 在
8.16ug/ml~48.96ug/ml 浓度范围线性关系良好。
精密吸取鸡矢藤提取液和对照品溶液各 5ml,按上述方
法显色后在 510nm 处测其吸光度,代入回归方程计算含量。
2.2 总黄酮提取单因素试验
2.2.1 乙醇浓度对提取率的影响
精密提取 1.00g 粉末 5 份,分别加入 50%、60%、70%、
80%、95%的乙醇 20ml,功率 80W,超声提取 20min,过滤,
滤液定容为 50ml,按“2.1 项”下测定总黄酮的含量。结果表
明 80%的乙醇提取的总黄酮含量最高。
2.2.2 料液比对提取率的影响
精密称取 1.00g 粉末 5 份,加入 70%的乙醇使其固液比
分别为 1:10、1:15、1:20、1:25、1:30,功率 80W,
超声提取 20min,过滤,滤液定容为 50ml,按“2.1 项”下测
定总黄酮的含量。结果表明 1:20 的乙醇固液比提取的总黄
酮含量最高。
2.2.3 温度对提取率的影响
精密提取 1.00g 粉末 5 份,分别加入 70%的乙醇 20ml,
分别于 30、40、50、60、70℃水浴超声提取 20min,过滤,
2010 年 第 8 期
2010 年 8 月
化学工程与装备
Chemical Engineering & Equipment
38 叶陈丽:超声波提取鸡矢藤总黄酮优化工艺研究
滤液定容为 50ml,按“2.1 项”下测定总黄酮的含量。结果表
明温度在 60℃下含量高,最稳定。

表 1 试验因素、水平表 L9(34)

提取次数
A
乙醇浓度B 料液比 C
提取时间
D
1 1 70% 1:20 10min
2 2 80% 1:25 15min
3 3 95% 1:30 20min

表 2 L9(34)正交结果(n=3)
实验号 A B C D
总黄酮含
量(%)
1 1 1 1 1 1.0702
2 1 2 2 2 1.1015
3 1 3 3 3 0.8403
4 2 1 2 3 1.0167
5 2 2 3 1 1.1885
6 2 3 1 2 1.2644
7 3 1 3 2 1.4698
8 3 2 1 3 1.4497
9 3 3 2 1 0.7890
K1 1.004 1.186 1.261 1.016
K2 1.157 1.247 0.969 1.279
K3 1.236 0.965 1.166 1.102
R 0.232 0.282 0.292 0.263
2.2.4 超声提取时间对提取率的影响
精密提取 1.00g 粉末 5 份,分别加入 70%的乙醇 20ml,
分别加入 60℃水浴提取 5、10、15、20、25、30min,按“2.1
项”下测定总黄酮的含量。结果表明 15min 提取的总黄酮含
量最高。
2.2.5 提取次数对提取率的影响
精密提取 1.00g 粉末 5 份,分别加入 70%的乙醇 20ml,
于 60℃分别提取 1、2、3、4、5 次,按“2.1 项”下测定总黄
酮的含量。结果表明提取 3 次总黄酮提取基本完全。
2.3 正交试验
2.3.1 正交试验表的设计
为全面考察影响鸡矢藤总黄酮超声提取的因素,根据单
因素试验结果进行分析,可知影响总黄酮提取的主要因素有
提取次数(A)、乙醇浓度(B)、料液比(C)及提取时间(D)。
以总黄酮的含量为评价指标,选用 L9(34)正交表对这 4 个因
素进行综合考察,设计试验因素和水平见表 1。
量最高。
2.3.2 供试品溶液的制备
准确称取鸡矢藤粉末 1.00 g 共 27 份,9 个实验各重复
三次,按表 1 试验条件进行提取,过滤,合并滤液,滤液定
容为 50ml,得 1~27 号样品溶液,备用。
2.3.3 正交设计实验结果与分析
精密量取对照品溶液和供试品溶液各5 mL,按“2.1项”
下处理,计算含量,其结果见表2。
2.3.4 按方差分析理论得方差分析结果见表 3


表 3 正交提取工艺总黄酮的方差分析表
变异来源 偏差平方和 自由度 F 比 F 临界值 显著性
提取次数 0.084 2 0.735 4.460
乙醇浓度 0.132 2 1.155 4.460
料液比 0.133 2 1.164 4.460
提取时间 0.108 2 0.945 4.460
误差 0.084 2
有显著性

2.4 结果分析
从正交分析结果及方差分析表来看,各因素对鸡矢藤中
总黄酮含量的影响程度 C>B>D>A,A、B、C、D 均为显著
性差异因素,C1>C3>C2,B2>B1>B3,D2>D3>D1,A3>A2>A1,
最佳提取条件为 A3B2C1D2,即提取次数 3,乙醇浓度 80%,
料液比 1:20,提取时间 15min 为最佳提取工艺。
3 最佳工艺验证实验
对正交试验得到的最佳工艺进行验证试验。按 2.3.2 实
验方法,取 3 份鸡矢藤分别加入 80%的乙醇 20ml,于超声
波清洗仪中水浴提取 3 次,提取时间 15min;提取得鸡矢藤
总黄酮的含量为 1.538%,1.496%,1.454%(RSD=3.4%)。
表明最佳工艺稳定,值得推广。
4 讨论
超声波强化萃取的最主要原因是由于超声波产生的空
39叶陈丽:超声波提取鸡矢藤总黄酮优化工艺研究
化效应。超声空化是指液体中的微小泡核在声波作用下被激
活,表现为泡核的振荡、生长、收缩乃至崩溃等一系列动力
学过程。超声提取植物有效成分的效果主要取决于超声波的
强度、频率和时间,因此考虑的参数主要有频率、强度和提
取时间。超声提取植物有效成分时,找到适宜的参数是提高
提出率的关键,只有选择合理的参数,使液体达到最大的空
化状态,才能获得良好的提取效果。
超声提取植物有效成分时,温度、溶剂种类及其浓度也
是影响提出率的关键因素。因此,结合植物有效成分(黄酮)
的理化性质进行筛选,本实验采用了在不同温度下、不同浓
度的乙醇溶液,以及在该浓度下不同的料液比进行提取。筛
选出最佳提取工艺为采用乙醇浓度 80%,料液比 1:20,提
取时间 15min,提取 3 次。

参考文献

[1] 余勉.鸡矢藤化学成分及药理作用研究进展[J].卫生职
业教育,2009;27(20):149-150
[2] 钟可,刘苑贵.贵州产民族民间药鸡矢藤的研究进展
[J].贵阳中医学院学报,2009;3(3):40-41
[3] 黄红英,邓斌,张晓军等.青蒿中黄酮类化合物的提取
及其氧化性研究[J].安徽农业科学,2009;37(7):
3037-3039
[4] 林仲茂,方启平.超声波清洗(Ⅱ)[J].化学清洗,1998;
14(5):41-44


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[7] A. Genovese, R. A. Shanks, Simulation of the Specific
Interactions between Polyamide-6 and a Thermoplastic
Polyurethane [J], Computational and Theoretical Polymer
Science, 2001, 11: 57-62.

Abstract: DSC was used to study the impact of the melting temperature and time on the crystallization behavior of PA612 in
PA612/TPU blends. It is concluded from the different influence of melting temperature and time that under the same melting
temperature, Tc of PA612 gets lower with the prolonging of the melting time. Meanwhile, the crystalline enthalpy gets lower and the
width of the peak gets broader. Under the same melting time, Tc of PA612 gets towards a lower temperature with the increase of
melting temperature. Tc gets lower according to the sequence of 200℃>220℃>240℃.
Keyword :PA612; TPU; crystallization; melting time; melting temperature;



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the process for Extraction of Phytosterols from Tall oil pitch
LUO Shi-rong
Fuzhou High-Tech Innovation Service Center,350002 Fuzhou,China

Abstract:tall oil pitch is saponified with alkali, then using organic solvent extraction phytosterol. Through crystallization separate
phytosterol, By recrystallization improve the purity of phytosterol. This method can be extracted to the 9.8% (in terms of tall oil pitch)
phytosterol, one can reach 93.2 % pure by recrystallization.
Key words :phytosterol; tall oil pitch ;extraction.