免费文献传递   相关文献

苗药头花蓼提取物血清药理学研究方法的建立及验证



全 文 :Hainan Med J, Jun. 2016, Vol. 27, No. 11
苗药头花蓼提取物血清药理学研究方法的建立及验证
徐丹 1,2,赵菲菲 1,3,刘俊 1,2,杨馨 1,3,李靖 1,2,徐国波 1,2,廖尚高 1,2
(1.贵州医科大学药学院,贵州 贵阳 550004;
2.民族药与中药开发应用教育部工程研究中心,贵州 贵阳 550004;
3.贵州省药物制剂重点实验室,贵州 贵阳 550004)
【摘要】 目的 建立并验证头花蓼提取物血清药理学研究方法。方法 以大鼠为含药血清的供体,MTT法
确定空白血清及含药血清对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)活性的影响,采用 10 ng/mL脂多糖(LPS)建立
RAW264.7细胞炎症损伤模型,Griess试剂法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的释放量,以确定体系中的血清添加
量和大鼠取血时间。以NO、TNF-α为指标测定含药血清的抗炎活性。结果 大鼠按人临床用药等效剂量的27倍
给予头花蓼水提醇沉提取物,与模型组相比,体系中加入1.5% (V/V)末次给药后90 min的含药血清能够显著抑制
LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO (P<0.001)。同时,该方法制备的含药血清能够显著抑制细胞释放NO和TNF-α
(P<0.01或P<0.001)。结论 本实验条件下制备的头花蓼含药血清具有明显的抗炎作用,该血清药理学方法可用于
头花蓼提取物含药血清药效及作用机制研究。
【关键词】 头花蓼;RAW264.7细胞;血清药理学
【中图分类号】 R965.2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1003—6350(2016)11—1737—05
Establishment and validation of serum pharmacological method for Polygonum capitatum extract (an Ethnic
Miaos Herb). XU Dan 1,2, ZHAO Fei-fei 1,3, LIU Jun 1,2, YANG Xin 1,3, LI Jing 1,2 , XU Guo-bo 1,2, LIAO Shang-gao 1,2.
1. School of Pharmacy, Guizhou Medical University, Guiyang 550004, Guizhou, CHINA; 2. Engineering Research Center for
the Development and Application of Ethnic Medicines and TCM, Ministry of Education, Guiyang 550004, Guizhou, CHINA;
3. Provincial Key Laboratory of Pharmaceutics in Guizhou Province, Guiyang 550004, Guizhou, CHINA
【Abstract】 Objective To establish and validate a serum pharmacological method for Polygonum capitatum ex-
tract. Methods Rats were used as the provider to prepare the drug-containing serum. Cell viability was detected to de-
termine the effect of blank and drug-containing serum on murine mononuclear macrophage cells (RAW264.7 cells) by
MTT assay. The inflammatory cell model was produced by 10 ng/mL lipopolysaccharide (LPS) treated RAW264.7 cells.
Nitric oxide (NO) production was detected by the Griess assay to determine the suitable concentration of serum in cul-
ture system and the time of sample collection. NO and TNF-α were selected to validate the anti-inflammatory activity
of the drug-containing serum. Results Rats were given oral administration of protein-free water extract of Polygonum
capitatum (PCWEP) by 27 times dose of adults. 1.5% (V/V) serum after 90 min of the last administration could signifi-
cantly inhibit the release of NO in LPS-induced RAW264.7 cells compared with the model group (P<0.001). Drug-con-
taining serum prepared by this method could significantly inhibit the productions of NO and TNF-α in RAW264.7
cells (P<0.01, P<0.001). Conclusion Drug-containing serum prepared by this method possesses obvious effect of an-
ti-inflammatory in macrophage cells, and this serum pharmacological method can be applied to evaluate the pharmaco-
logical effect and mechanism of PCWEPS.
【Key words】 Polygonum capitatum; RAW264.7 cells; Serum pharmacology
·论 著·doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2016.11.005
基金项目:国家自然科学基金(编号:81160516、81560570、81260688)
通讯作者:廖尚高。E-mail:lshangg@163.com
头花蓼 (Polygonum capitatum Buch-Ham. Ex D.
Don)为蓼科蓼属植物头花蓼的干燥全草,是贵州地道
药材,收载于 2003版《贵州省中药、民族药质量标准》
中,具有利尿通淋之功效,临床上主要用于泌尿系统
感染疾病的治疗[1]。其水提物单方制剂热淋清颗粒对
尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎的疗效突出[2]。泌尿系统感
染是尿路受到病原微生物侵袭而导致的炎症反应。
抑制炎症反应,防止泌尿系统感染的恶化,对此类疾
病的治疗具有重要意义[3]。
中药血清药理学反映了有效成分在血中的动态
变化及相互作用,避免了药物的物理化学性质对实验
结果的影响,能够更好地模拟药物在体内发挥作用的
过程[4],有利于探讨中药在体内直接发挥药效的物质及
作用机制。前期研究表明,头花蓼中三萜、甾体和黄酮
类化合物与抗炎活性密切相关[5],但其作用机制目前尚
不明确。因此本研究为建立头花蓼提取物血清药理学
研究方法,以大鼠为含药血清供体,RAW264.7细胞为
研究对象,结合药效学实验,考察细胞存活率、空白
血清对细胞的影响及制备含药血清的取血时间等影
响因素,最后以NO、TNF-α为指标对该方法进行验
证,确保该方法准确可靠,以期为头花蓼的抗炎药效
及作用机制的深入研究提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试药与试剂 头花蓼药材购于贵州省施秉
··1737
海南医学2016年6月第27卷第11期
县头花蓼GAP种植基地(经度108.11°,纬度27.03°,药
材购置时间为2014年8月),由贵州医科大学生药学教
研室龙庆德副教授鉴定为蓼科蓼属植物头花蓼的全
草。阳性对照药醋酸地塞米松磷酸钠注射液,贵州光
正制药有限责任公司生产,国药准字H52020793,批号
130315。 DMEM 高糖培养基 (Gibco 公司,批号
8114410),胎牛血清(Hyclone公司,批号 NZE1145),脂
多糖(LPS,Sigma公司,批号102M4017V),MTT (Sigma
公司,批号M1959);磺胺 (批号 30172216),N-(1-萘
基)-乙二胺(批号 80088013),DMSO(批号 302A0323),
均来源于中国医药集团总公司(国药集团)。
1.2 动物与细胞株 Wistar大鼠,雌雄各半,体
质量(200±20) g,SPF级,由贵州医科大学实验动物中
心提供,动物合格证号SCXK(黔)2012-0001。动物适
应性饲养 3 d后,供试。小鼠单核巨噬细胞株购自中
国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。
1.3 仪器 CO2培养箱(美国Thermo scientific公
司),倒置显微镜(日本Nikon 公司),低速台式离心机
(上海安亭科学仪器厂),水浴锅(天津市泰斯特仪器有
限公司),超低温冰箱(Thermo Fisher公司),680型酶标
仪(上海伯乐生命医学产品有限公司),数显立式压力蒸
汽灭菌器(上海博讯实业有限公司医疗仪器厂),超净工
作台(北京东联哈尔仪器制造有限公司),所用细胞培养
瓶、培养板、离心管均为美国Corning公司产品。
1.4 方法
1.4.1 头花蓼提取物血清药理学方法的建立
1.4.1.1 头花蓼水提醇沉提取物(PCWEP)的制
备 [6] 头花蓼全草粉末9.6 kg (一号筛)水提取4次,每
次 2 h,合并滤液回收至浸膏得头花蓼水提物;水提物
用水溶解后加入3倍量95%乙醇沉淀24 h,过滤,合并
滤液回收至浸膏得 890 g PCWEP,得率为 9.3%,每克
PCWEP相当于 10.8 g生药,其中富含槲皮素、没食子
酸、山柰酚、儿茶素以及多种酚酸类等化合物[7]。
1.4.1.2 空白血清和含药血清的制备 [8] Wistar
大鼠 6只,灌胃前 12 h禁食不禁水,尾静脉采集空白
血,然后按 162 g/kg·d生药量(头花蓼单方制剂热淋
清颗粒临床剂量的 27倍)灌胃给予 PCWEP药液,每
天两次,连续 4 d,末次给药后 10 min、20 min、40 min、
60 min、90 min、120 min、180 min、240 min尾静脉取
血。以 2 000 r/min,4℃离心 10 min分离上层血清,过
滤除菌,分装,-20℃保存备用。
1.4.1.3 空白血清及 PCWEPS对细胞活性的影
响 RAW264.7细胞培养于含10%胎牛血清,100 μg/mL
青霉素及100 μg/mL链霉素的DMEM细胞培养液中,
置于温度为37℃、5% CO2培养箱中培养。取对数生长
期细胞,用 0.25%的胰蛋白酶消化,以 2×105个/mL的
浓度接种于 96孔培养板中,每孔体积 100 μL,细胞培
养 24 h后,弃去上清。实验分为:(1)对照组(CON):无
大鼠血清的培养基;(2)实验组:不同体积分数(0.5%、
1.0%、1.5%、2.0%V/V)的空白血清或头花蓼水提醇沉
提取物含药血清(PCWEPS),培养 24 h后,每孔加入
2.5 g/L MTT溶液 10 μL,继续孵育 4 h,移液器吸走上
清液,加入100 μL DMSO,振荡10 min后,在酶标仪上
于 490 nm波长处测定吸光度(A),每组设 6个平行孔。
按照公式:细胞存活率=实验组A/对照组A平均值 ×
100%,计算细胞存活率。通过评价不同体积分数的空
白血清及PCWEPS对RAW264.7细胞活性的影响,确
定实验中对RAW264.7细胞活性无影响的空白血清及
含药血清的体积分数。
1.4.1.4 空白血清和不同时间点含药血清对细胞
释放NO的影响 空白血清对细胞释放NO的影响实
验,参照2.1.3项,每孔体积100 μL。实验分为:(1)对照
组 (CON-1):无大鼠血清的培养基;(2)空白血清组
(CON-2):体积分数(V/V)为1.5%的空白血清培养液;
(3)无血清模型组(LPS-1):终浓度为 10 ng/mL的 LPS
溶液;(4)空白血清模型组(LPS-2):终浓度为10 ng/mL
的LPS和空白血清体积分数(V/V)为 1.5%的培养液。
不同时间点含药血清对细胞的影响实验,分为:(1)对
照组(CON):无大鼠血清的培养基;(2)模型组(LPS):终
浓度为10 ng/mL的LPS溶液;(3) DEXA组(地塞米松):
终浓度为 50 μg/mL的地塞米松和 10 ng/mL的LPS混
合液;(4)不同时间点含药血清组:终浓度为 10 ng/mL
的LPS和体积分数(V/V)为1.5%的不同时间点含药血
清,与细胞共培养24 h后,吸取细胞培养液上清50 μL
至酶标板中,加入等体积的Griess试剂(1%磷酸磺胺
溶液与 0.1% N-(1-萘基)-乙二胺等体积混合液),室
温反应10 min后于540 nm波长处测定其孔吸光度A,
每组设6个平行孔。根据NaNO2标准曲线计算细胞培
养液上清中NO的释放量,通过评价空白血清和不同时
间点含药血清对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的
影响,确定实验中合适的血清添加体积和取血时间。
1.4.2 头花蓼提取物血清药理学方法的验证
1.4.2.1 不同剂量头花蓼水提醇沉提取物含药血
清的制备 Wistar大鼠 50只,灌胃前 12 h禁食不禁
水,根据灌胃剂量随机分成五组:分别为 2 g/(kg·d)、
6 g/(kg·d)、18 g/(kg·d)、54 g/(kg·d)、162 g/(kg·d) (生药
量:0.33倍、1倍、3倍、9倍、27倍的头花蓼单方制剂
热淋清颗粒临床剂量) PCWEP组,每组 10只。分别
灌胃,2次/d,连续 4 d,末次给药后 90 min尾静脉取
血。以 2 000 r/min、4℃离心 10 min分离上层血清,合
并同组血清,过滤除菌,分装,-20℃保存备用。
1.4.2.2 不同剂量PCWEPS对细胞释放NO的影
响 参照 2.1.4项,实验分为(1)正常对照组(CON组):
无大鼠血清的培养基;(2)模型组(LPS组):培养基中加
入终浓度为 10 ng/mL的 LPS;(3)地塞米松组(DEXA
组):培养基中加入终浓度为 50 μg/mL的地塞米松和
10 ng/mL的LPS共培养;(4)不同剂量PCWEPS组:培
养基中加入终浓度为 10 ng/mL的 LPS和体积分数
(V/V)为 1.5%的不同剂量 PCWEP的含药血清共培
养。根据NaNO2标准曲线计算细胞培养液上清中NO
的释放量,以此评价不同剂量的PCWEPS对LPS诱导
RAW264.7细胞释放NO的影响。
··1738
Hainan Med J, Jun. 2016, Vol. 27, No. 11
1.4.2.3 不同剂量 PCWEPS对细胞释放 TNF-α
的影响 参照2.2.2项,每组设6个平行孔。收集细胞
上清液,TNF-α的含量采用ELISA试剂盒提供的方法
进行测定。根据标准曲线计算TNF-α的释放量,以此
评价不同剂量的PCWEPS对LPS诱导RAW264.7细胞
释放TNF-α的影响。
1.5 统计学方法 应用 SPSS19.0统计软件进行
数据分析。计量数据用均数±标准差(x-±s)表示,单因
素方差分析(One-Way ANOVA)后,用Dunnetts test分
析方法比较组间差异。两组间比较采用 t-test法。以
P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结 果
2.1 空白血清及PCWEPS对细胞活性的影响 当
空白血清及不同时间点 PCWEPS体积分数(V/V)为
0.5%~1.5%时,作用细胞24 h,与对照组(CON)比较,细
胞存活率差异均无统计学意义(P>0.05),见表1。
2.2 空白血清对细胞释放 NO的影响 采用
1.5%体积(V/V)的空白血清作用于 10 ng/mL LPS诱
导的RAW264.7细胞 24 h,与空白对照组比较,无血
清模型组(LPS-1相对于CON-1)和空白血清模型组
(LPS-2相对于CON-2)差异均有显著统计学意义(P<
0.01);空白血清组(CON-2)与对照组(CON-1)比较差
异无统计学意义,空白血清模型组(LPS-2)与无血清
模型组(LPS-1)比较差异无统计学意义(P>0.05),见
表 2。
2.3 取血时间点的确定 与对照组 (CON)比
较,模型组 (LPS)显著诱导 RAW264.7细胞释放 NO
(P<0.01);与模型组(LPS)比较,不同时间点的PCWEP
含药血清 (PCWEPS)均能显著抑制 RAW264.7细胞
释放NO (P<0.01),其中 90 min含药血清组抑制NO
释放的作用略优于其他时间含药血清组,见表 3。
2.4 不同剂量 PCWEPS对细胞释放 NO的影
响 与正常组(CON组)相比,模型组(LPS组)显著刺
激 RAW264.7细胞释放 NO (P<0.01);与模型组 (LPS
组)相比,不同剂量的PCWEPS能显著抑制RAW264.7
细胞释放NO (P<0.01),且呈明显的剂量依赖性,见
表 4。
2.5 不同剂量PCWEPS对细胞释放TNF-α的影
响 与正常组(CON组)相比,模型组(LPS组)显著刺激
RAW264.7细胞释放 TNF-α (P<0.01);与模型组(LPS
组)相比,不同给药剂量的 PCWEPS均能显著抑制
RAW264.7细胞释放 TNF-α (P<0.01),且呈明显的剂
量依赖性,见表5。
表1 空白血清及PCWEPS对细胞活性的影响(x-±s,n=6)
组别
对照(CON-1)
空白血清(CON-2)
PCWEPS (10 min)
PCWEPS (20 min)
PCWEPS (40 min)
PCWEPS (60 min)
PCWEPS (90 min)
PCWEPS (120 min)
PCWEPS (180 min)
PCWEPS (240 min)
体积分数(V/V)
-
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
0.5%
1.0%
1.5%
2.0%
细胞存活率(%)
100.00±0.50
100.76±0.36
100.93±0.37
99.62±0.25
94.32±0.43a
100.80±0.39
100.75±0.28
99.60±0.20
94.79±0.34a
100.66±0.43
100.79±0.13
99.72±0.39
95.86±0.34a
101.38±0.51
101.10±0.31
100.00±0.41
94.74±0.38a
101.26±0.46
100.85±0.23
100.30±0.40
96.11±0.21a
101.59±0.53
101.09±0.45
99.88±0.24
94.63±0.44a
100.89±0.31
100.05±0.47
98.54±0.45
95.14±0.25a
100.50±0.21
100.28±0.20
99.57±0.28
95.16±0.47a
100.08±0.22
99.67±0.42
98.40±0.43
95.36±0.41a
P值
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
注:PCWEPS,头花蓼水提醇沉提取物含药血清(表 3~表 5同);a与对照
组比较,P<0.01。
F值
49.182
53.047
29.073
37.144
29.794
31.791
24.308
56.566
19.206
表2 空白血清对RAW264.7细胞释放NO的影响(x-±s,n=6)
组别
对照(CON-1)
空白血清(CON-2)
无血清模型(LPS-1)
空白血清模型(LPS-2)
体积分数(V/V)
1.5%
1.5%
NO (μmol/L)
2.12±0.55
1.85±0.56
18.58±1.34a
18.13±1.29b
注:a与CON-1组比较,P<0.01;b与CON-2组比较,P<0.01。
表3 PCWEPS取血时间对RAW264.7细胞释放NO的影响(x-±s,n=6)
组别
对照
模型
DEXA
PCWEPS
取血时间(min)
10
20
40
60
90
120
180
240
NO (μmol/L)
3.13±0.18
16.30±0.81a
4.46±0.16b
14.41±0.29b
14.29±0.55b
13.97±0.38b
12.99±0.23b
10.82±0.34b
11.73±0.16b
12.36±0.17b
12.79±0.20b
注:DEXA,50 μg/mL地塞米松(表 4~5同);与对照组比较,aP<0.01;与
模型组比较,bP<0.01。
··1739
海南医学2016年6月第27卷第11期
3 讨 论
头花蓼是贵州苗族民间常用药材,广泛用于泌尿
系统感染的治疗,疗效确切。过度的炎症反应是泌尿
系统感染的主要机制之一[9],在机体炎症反应的过程
中,巨噬细胞是一个重要参与者,在被感染过程中,被
激活的巨噬细胞能释放致炎因子一氧化氮(NO),过量
炎症因子的释放会加重炎症反应[10];TNF-α作为一个
重要的早期炎症因子,可诱发 IL-6以及继发性炎症因
子NO的释放[11]。故抑制巨噬细胞中炎症因子NO和
TNF-α的过度释放对炎症性疾病的治疗意义重大。
中药血清药理学与传统的药物直接作用于细胞或器
官的体外实验相比能较好地模拟药物在体内环境中
产生药理效应的真实过程。因此,本研究选择NO为
指标,建立头花蓼提取物含药血清的药理学评价方
法,并以NO、TNF-α为指标测定含药血清的抗炎活
性,从而对该血清药理学方法进行验证。
含药血清加入体外反应体系后可能有促进细胞
增殖或产生细胞毒性的作用,为排除此类影响,本实
验采用 MTT法检测不同体积分数的空白血清及
PCWEPS对RAW264.7细胞活性的影响。结果发现,
当空白血清及含药血清体积分数(V/V)为 0.5%~1.5%
时,作用细胞 24 h,与对照组(CON)比较,细胞存活率
差异无统计学意义,提示在此体积范围内空白血清及
含药血清对RAW264.7细胞本身的生长无显著影响,
超过此添加量,随着血清体积的增加,RAW264.7细胞
的生长受到显著影响。为有效反映药物的药效,在后
续实验中,血清体积分数(V/V)设定为 1.5%。为避免
血清本身的活性化合物带来的假阳性结果,本研究发
现当空白血清体积 (V/V)为 1.5%时,既不影响
RAW264.7细胞的活性,也不影响LPS刺激所产生的
NO释放的检测,故选择1.5% (V/V)含药血清作为体系
中的最佳添加量。由于药物进入体内即被吸收,为了
突出含药血清的药效,将不同时间点含药血清的药效
进行比较后确定取血时间较为科学可靠。本研究发现
末次给药后 90 min含药血清抑制RAW264.7细胞NO
释放的作用略优于其他时间点含药血清,并将该时间
点作为制备含药血清的取血时间。与模型组(LPS组)
相比,不同剂量的PCWEPS能显著抑制RAW264.7细
胞释放NO (P<0.01),且呈明显的剂量依赖性,因此,
PCWEPS的抗炎作用可能与抑制细胞释放NO有关。
与模型组(LPS组)相比,不同给药剂量的 PCWEPS均
能显著抑制RAW264.7细胞释放 TNF-α (P<0.01),且
呈明显的剂量依赖性,因此,PCWEPS的抗炎作用可能
与抑制细胞释放TNF-α有关。
因此,头花蓼提取物含药血清的药理学评价方法
为:Wistar大鼠(200±20) g数只,雌雄各半,随机分组。
分别灌胃不同剂量的头花蓼提取物,2次/d,连续 4 d,
末次给药后90 min尾静脉取血。以2 000 r/min、4℃离
心 10 min分离上层血清,过滤除菌,分装,-20℃保存
备用。含药血清对 LPS诱导RAW264.7细胞释放炎
症因子的影响实验中,分为:(1)对照组;(2)模型组
(10 ng/mL LPS);(3) DEXA组(50 μg/mL地塞米松);
(4)不同剂量含药血清组(1.5% V/V)。
本研究建立了头花蓼提取物含药血清的药理学
研究方法,该方法能够较好地反映头花蓼的药效,为
后续头花蓼作用机理的研究奠定基础,同时也为其他
中药血清药理方法学的建立提供参考。
参考文献
[1] 张丽娟,王永林,王珍,等.头花蓼活性组分化学成分研究[J].中药
材, 2012, 35(9): 1425-1428.
[2] 马风伟.热淋清颗粒的体内代谢动力学研究[D].贵阳:贵州师范大
学, 2014.
[3] Goran B, Bjorn W, Catharina S, et al. Escherichia coli, fimbriae, bacte-
rial persistence and host response induction in the human urinary
tract [J]. Int J Med Microbiol, 2005, 295(6-7): 487-502.
[4] Yin JJ, Luo YQ, Deng HL, et al. Hugan Qingzhi medication amelio-
rates hepatic steatosis by activating AMPK and PPARα pathways in
L02 cells and HepG2 cells [J]. J Ethnopharmacol, 2014, 154(1):
229-239.
[5] Liao SG, Zhang LJ, Sun F, et al. Antibacterial and anti-inflammatory
effects of extracts and fractions from Polygonum capitatum [J]. J Eth-
nopharmacol, 2011, 134(3): 1006-1009.
[6] 张丽娟. 苗药头花蓼抗菌物质基础研究[D]. 贵阳: 贵阳医学院,
2012.
[7] Liao SG, Zhang LJ, Sun F, et al. Identification and haracterization of
phenolics in Polygonum capitatum by ultrahigh-performance liquid
chromatography with photodiode array detection and tandem mass
spectrometry [J]. Phytochem, Anal, 2013, 24(6): 556-568.
[8] 田友清,尚靖,何婷,等.基于中药血清化学及血清药理学方法探讨
香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤物质基础[J].中国中药杂志,
2012, 37(5): 620-624.
表4 不同剂量PCWEPS对RAW264.7细胞释放NO的影响(x-±s,n=6)
组别
对照
模型
DEXA
PCWEPS
剂量(g/kg·d)
2
6
18
54
162
NO (μmol/L)
1.59±0.17
16.22±0.10a
3.30±0.18b
15.97±0.13
14.82±0.15b
14.39±0.19b
12.54±0.12b
10.25±0.24b
注:与对照组比较,aP<0.01;与模型组比较,bP<0.01。
表5 不同剂量PCWEPS对RAW264.7细胞释放TNF-α的影响(x-±s,n=6)
组别
对照
模型
DEXA
PCWEPS
剂量[g/(kg·d)]
2
6
18
54
162
TNF-α (ng/L)
1 265.22±34.11
11 428.26±27.32a
2 741.67±31.96b
9 287.23±21.28b
7 965.13±15.74b
7 113.04±30.71b
6 785.15±17.90b
5 210.87±31.09b
注:与对照组比较,aP<0.01;与模型组比较,bP<0.01。
··1740
Hainan Med J, Jun. 2016, Vol. 27, No. 11
[9] Anju B, Sanjay C, Kusum H. Pseudomonas quinolone signaling sys-
tem: A component of quorum sensing cascade is a crucial player in
the acute urinary tract infection caused by Pseudomonas aeruginosa
[J]. Int J Med Microbiol, 2014, 304(8): 1199-1208.
[10]代艳文,杨莉,万静枝,等.竹节参醇提物对LPS诱导RAW264.7细
胞炎症的保护作用[J].中国实验方剂学杂志, 2014, 20(2): 163-166.
[11] 张晓红, 董莉, 杨雅欣, 等. 紫金龙乙醇组分对脂多糖诱导的
RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响[J]. 中国实验方剂学杂志,
2014, 20(21): 149-152.
(收稿日期:2016-03-31)
心率变异性与动态血压持续监测
在肾性高血压与原发性高血压中的应用
裴林林 1,姜国刚 2,刘玮 1,孙卫红 1,陈宗建 1,章向东 1
(1.昆山市第二人民医院心内科,江苏 昆山 215300;
2.昆山市第三人民医院,江苏 昆山 215300)
【摘要】 目的 探讨心率变异性(HRV)与动态血压持续监测在肾性高血压与原发性高血压中的临床应用效
果。方法 选择2012年4月至2014年12月昆山第二人民医院心内科收治的肾性性高血压、原发性高血压患者及
健康体检者共118例,分为肾性高血压组42例、原发性高血压组46例和正常对照组30例,对三组受检者同时进行
24 h动态血压及动态心电图监测,观察动态血压变量、心律失常发生率及HRV时域指标并进行统计分析。结果 肾性
高血压组、原发性高血压组与正常对照组非勺型高血压发生率分别为73.8% (31/42)、23.9% (11/46)、10.0% (3/30);心律
失常发生率分别为69.0% (29/42)、43.4% (20/46)、10.0% (3/30),肾性高血压组非勺型高血压与心律失常的发生率较原
发性高血压增高(P=0.01、0.01),较正常对照组明显增高。肾性高血压24 h内全部窦性心律RR间期平均值的标准差
(SDNN)与24 h内每5 min窦性RR间期标准差的平均值(SDNN index)低于原发性高血压[分别为(59.2±19.5) ms vs
(95.4±25.2) ms、(17.5±6.3) ms vs (40.4±12.5) ms,P<0.05],但 24 h平均心率,相邻R-R间期的差值超过 50 ms的心搏
数占监测心搏数的百分比(PNN50),相邻R-R间期差的均方根(RMSSD)与原发性高血压差异无统计学意义(P>
0.05)。结论 肾性高血压患者非勺型高血压较正常及原发性高血压明显增多,心率变异性降低,夜间更易发生心
律失常。
【关键词】 肾性高血压;原发性高血压;动态血压;心率变异性
【中图分类号】 R544.1+4 【文献标识码】 A 【文章编号】 1003—6350(2016)11—1741—03
Clinical application of heart rate variability and ambulatory blood pressure monitoring in renal hypertension and
essential hypertension. PEI Lin-lin 1, JIANG Guo-gang 2, LIU Wei 1, SUN Wei-hong 1, CHEN Zong-jian 1, ZHANG
Xiang-dong 1. 1. Department of Cardiology, the Second Peoples Hospital of Kunshan, Kunshan 215300, Jiangsu, CHINA; 2.
The Third Peoples Hospital of Kunshan, Kunshan 215300, Jiangsu, CHINA
【Abstract】 Objective To explore clinical application of heart rate variability (HRV) and ambulatory blood
pressure monitoring in renal hypertension and essential hypertension. Methods A total of 118 patients with renal hyper-
tension and essential hypertension in the Second Peoples Hospital of Kunshan from April 2012 to December 2014 were se-
lected and divided into renal hypertension group (42 cases), essential hypertension group (46 cases) and normal control
group (30 cases). 24 hours ambulatory blood pressure and ambulatory ECG monitoring were performed in three groups, to
observe the dynamic blood pressure, the incidence rate of arrhythmia and the HRV time domain indexes. Results The in-
cidence of nondipper hypertension in renal hypentension group, essential hypertension group and normal control group
were 73.8% (31/42), 23.9% (11/46) and 10.0% (3/30), respectively, and incidence of arrhythmia in three groups were
69.0% (26/42), 43.4% (20/42) and 10.0% (3/30), respectively. The incidences were higher in renal hypertension group
than essential hypertension group (P=0.01, 0.01), and significantly higher than normal control group. Standard devia-
tion of NN intervals (SDNN) and SDNN index in renal hypertension group was lower than those in essential hyperten-
sion group [(59.2±19.5) ms vs (95.4±25.2) ms, (17.5±6.3) ms vs (40.4±12.5) ms, P<0.05]. The 24 hours mean heart rate,
percentage of differences between adjacent normal RR intervals exceeding 50 milliseconds, PNN50 and root mean
square of successive differences of R-R intervals (RMSSD) were not significantly different between two groups (P>
0.05). Conclusion The ratio of renal hypertension patients with nondipper type hypertension is significantly increased
compared with normal and essential hypertension, and heart rate variability is reduced. The night is more prone to cardi-
ac arrhythmia.
【Key words】 Renal hypertension; Essential hypertension; Ambulatory blood pressure; Heart rate variability
·论 著·doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2016.11.006
基金项目:江苏省昆山市社会发展科技项目(编号:KS1222)
通讯作者:裴林林。E-mail:ningmeng1112@163.com
􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲􀤲
··1741