全 文 ：收稿日期:2010-01-18;　修订日期:2010-05-05
基金项目:国家中医药管理局 “西部 ”重点学科建设资助项目
(No.200414)
作者简介:王祥培(1975-),男(侗族),贵州天柱人 ,现为贵阳中医学院副
教授 ,博士学位 ,主要从事中药及民族药品种、品质与资源开发研究工作.
不同采收期头花蓼药材指纹图谱相似度评价
王祥培1 ,吴红梅 1 ,王祥森 2 ,刘　霞1
(1.贵阳中医学院 ,贵州 贵阳　550002;　2.西藏墨脱县墨脱镇人民政府 ,西藏 墨脱　860016)
摘要:目的 对不同采收期头花蓼药材进行指纹图谱相似度评价 , 探索最佳采收期。方法 用 RP-HPLC(DAD)法 ,梯度
洗脱 , 测定不同采收期头花蓼的指纹图谱 , 并作相似度比较分析。结果 不同采收期头花蓼的指纹图谱有明显差异。 结
论 应注意不同采收季节对头花蓼药材的质量影响。
关键词:头花蓼药材;　HPLC指纹图谱;　相似度
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.11.128
中图分类号:R282.5　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)11-2980-01
　　头花蓼为蓼科植物头花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Han.
exD.Don的干燥全草或地上部分 , 具有清热利湿 , 解毒止痛 , 活
血散瘀以及利尿通淋之功效 , 主治泌尿系统感染 、血尿 、湿疹 、肾
盂肾炎等症 [ 1] 。目前测定不同产地 、不同采收期头花蓼药材中
化学成分的含量已有研究报道 [ 2 ～ 5] , 但头花蓼化学成分复杂 ,并
且随着采收期的不同存在差异 。因此 , 为了更全面评价头花蓼药
材质量和控制质量的稳定性 , 本文对不同采收期共 15批头花蓼
药材进行了高效液相指纹图谱研究 ,并采用国家药典委员会推荐
使用的 “中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2004A)”对不同采
收期头花蓼药材的指纹图谱进行相似度评价 ,并以相似度数据进
行系统聚类分析 , 以期为头花蓼最佳采收期的确定提供参考。
1　材料与仪器
1.1　材料 采自西藏墨脱县墨脱镇 , 共 15批 ,经贵阳中医学院王
祥培副教授鉴定为蓼科植物头花蓼 PolygonumcapitatumBuch.-
Ham.exD.Don的干燥全草。具体见表 1。没食子酸对照品(中
国药品生物制品检定所 , 批号:0638 -9501), 槲皮素对照品(中
国药品生物制品检定所 , 批号:081 -90003), 槲皮苷对照品(自
制 , 纯度﹥ 98%);乙腈为色谱纯 ,其余试剂均为分析纯 , 水为重
蒸镏水。
1.2　仪器 Agilent1100型高效液相色谱仪(自动进样品), 二极
管阵列检测器(DAD);《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A
版》(国家药典委员会)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 采用依利特 HypersilODS色谱柱(4.6 mm×150
mm, 5 μm),乙腈 -0.4%磷酸二元梯度洗脱 , 体积流量:0.8 ml/
min,检测波长:310 nm,柱温 25℃。
2.2　流动相条件 [ 6] 0 ～ 5min:乙腈 0% ～ 5%, 0.4%磷酸 100%
～ 95%;5 ～ 55 min:乙腈 5% ～ 25%, 0.4%磷酸 95% ～ 75%;55
～ 70 min:25% ～ 30%, 0.4%磷酸 75% ～ 70%;70 ～ 80 min:乙腈
0%, 0.4%磷酸 100%;80 ～ 85 min:乙腈 0%, 0.4%磷酸 100%。
2.3 　供试品溶液的制备 [ 6] 取头花蓼细粉(3号筛)2 g, 精密称
定 , 置圆底烧瓶中 ,分别加 100 ml80%乙醇 , 置水浴中加热回流 2
h,滤过 , 残渣加 100ml80%乙醇回流提取 1 h,滤过 , 合并滤液。
滤液置蒸发皿中挥干 , 残渣加 80%乙醇定容置 10 ml容量瓶中。
用微孔滤膜(0.45μm)滤过 , 取续滤液 ,即得。
2.4 　对照品溶液的制备 精密称取没食子酸 、槲皮素和槲皮苷
对照品适量 , 加 50%甲醇溶解分别制成 0.031 5, 0.028 1和
0.061 3 mg/ml的溶液 , 即得。
2.5　指纹图谱方法学考察 [ 6]
2.5.1　精密度实验 取同一份供试品溶液 ,重复进样 6次 , 测得
各共有色谱峰相对留时间及相对峰面积的 RSD均低于 3%,表明
精密度良好。
2.5.2 　稳定性实验 取同一份供试品溶液 , 分别在 0, 2, 6, 12,
20, 30h进行检测 , 测得各共有色谱峰相对保留时间及相对峰面
积的 RSD均低于 3%, 表明样品溶液在 30 h内稳定。
2.5.3　重复性实验 取同一采收期的供试品 5份 , 精密称量 , 按
“ 2.3”项下制备供试品溶液 , 分别进样 , 测得各共有色谱峰相对
留时间及相对峰面积的 RSD均低于 3%,表明重复性良好。
2.6 　指纹图谱建立 精密吸取对照品与供试品溶液各 10μl, 注
入高效液相色谱仪 ,按选定的色谱条件 , 进行检测。同一实验条
件下 , 测定所有供试品 HPLC色谱图。根据不同采收时间供试品
测定结果所给出的峰数 、峰值(积分值)和峰位(相对保留时间)
等相关参数进行分析 、比较 , 制定优化的指纹图谱 ,见图 1。
图 1　不同采收期头花蓼药材指纹图谱
2.7　指纹图谱分析 [ 6]
2.7.1　共有指纹峰标定 比较不同采收期头花蓼供试品溶液给
出的相关参数 ,其中 13个峰是各批供试品共有 , 因此确定这 13
个峰为其共有指纹峰 , 其中槲皮苷峰较没食子酸峰及槲皮素峰
大 , 选作为参照峰。
2.7.2　头花蓼指纹图谱相似度评价 将 15个不同采收期头花
蓼样品测定数据导入中药指纹图谱相似度计算软件 , 经选峰 , 设
定匹配模板 ,将峰自动匹配 , 然后设定标准模板 ,进行谱峰差异性
评价和整体相似性评价。通过中药指纹图谱相似度计算软件得
出头花蓼 HPLC指纹图谱共有模式 , 与共有模式比较 , 15批次不
同采收期头花蓼药材的相似度结果见表 1。
2.8　头花蓼 HPLC指纹图谱相似度的分类研究 采用 SPSS10.0
统计软件对 15个样品的指纹图谱相似度数据进行系统聚类分
析。结果见图 2。
从聚类分析结果可以看出 ,系统将 15个样品分为 2大组 , 2,
3, 4, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14为一组 , 其中 4, 11, 3, 12, 13为一小
组 , 2, 7, 8, 9, 10, 14为另一小组 , 1, 5, 6, 15为一组 , 说明不同采收
期头花蓼药材分为 2大类 , 其中以 1 ～ 4月采收的为一大类 , 5 ～
12月的为一大类 ,但 9 ～ 11月为一小类 , 5 ～ 8月为一小类。
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.11
表 1　不同采收期头花蓼药材相似度结果
编号 产地 采收时间 相似度
1 西藏墨脱县墨脱镇 2005-03 0.351
2 西藏墨脱县墨脱镇 2005-08 0.897
3 西藏墨脱县墨脱镇 2005-09 0.963
4 西藏墨脱县墨脱镇 2005-10 0.954
5 西藏墨脱县墨脱镇 2007-03 0.371
6 西藏墨脱县墨脱镇 2007-04 0.465
7 西藏墨脱县墨脱镇 2007-05 0.824
8 西藏墨脱县墨脱镇 2007-06 0.851
9 西藏墨脱县墨脱镇 2007-07 0.891
10 西藏墨脱县墨脱镇 2007-08 0.899
11 西藏墨脱县墨脱镇 2007-09 0.955
12 西藏墨脱县墨脱镇 2007-10 0.968
13 西藏墨脱县墨脱镇 2007-11 0.981
14 西藏墨脱县墨脱镇 2007-12 0.852
15 西藏墨脱县墨脱镇 2008-01 0.621
1-2005.03, 2-2005.08, 3-2005.09, 4-2005.10, 5-2007.03,
6-2007.04, 7-2007.05, 8-2007.06, 9-2007.07, 10-2007.08
11-2007.09, 12-2007.10, 13-2007.11, 14-2007.12, 15-2008.01
图 2　 15批头花蓼 HPLC指纹图谱相似度聚类谱系图
3　讨论
本文对西藏墨脱县墨脱镇同一产地的不同采收期头花蓼药
材进行指纹图谱相似度及其系统聚类分析 , 研究结果显示 1 ～ 4
月份采收的头花蓼指纹图谱相似度较低并归为一大类 , 5 ～ 12月
份采收的头花蓼指纹图谱相似度较高 , 归为一大类 , 其中 9 ～ 11
月份采收的头花蓼指纹图谱相似度最高 ,从不同采收期头花蓼药
材相似度评价结果和笔者对采收到的药材性状来看 ,建议头花蓼
药材采收应在 5 ～ 12月份。研究结果与文献报道 [ 5]的基本相符 ,
与 2003年版 《贵州省中药材 、民族药材质量标准》中称头花蓼
春 、夏 、秋三季采收有一定的差异。
参考文献:
[ 1 ] 　贵州省药品监督管理局.贵州省中药材 、民族药材质量标准 [ S] .贵
阳:贵州科技出版社 , 2003:147.
[ 2 ] 　王祥培 ,万德光 ,王　强 ,等.HPLC测定不同产地的头花蓼中没食
子酸的含量 [ J] .华西药学杂志 , 2007, 22(2):204.
[ 3 ] 　王祥培 ,万德光 ,王祥森 , 等.不同产地野生与栽培头花蓼中总黄
酮的含量分析 [ J] .时珍国医国药 , 2006, 17(9):1713.
[ 4 ] 　杨立勇 ,王祥培 ,吴红梅 ,等.HPLC测定不同产地的头花蓼中槲皮
苷的含量 [ J] .贵阳中医学院学报 , 2009, 31(4):67.
[ 5 ] 　张丽艳 ,杨玉琴 ,高言明 ,等.贵州不同产地 、不同物候期头花蓼中
总黄酮的动态变化研究 [ J].中国中药杂志 , 2003, 28(9):889.
[ 6 ] 　万德光.中药品质研究—理论 、方法与实践 [ M] .上海:上海科学技
术出版社 , 2008:333.
收稿日期:2009-12-20;　修订日期:2010-03-27
基金项目:广东省科技计划项目资助(No.2008B071101032)
作者简介:张秋燕(1971-),女(汉族),广东饶平人 ,现任韩山师范学院主
治医师 ,主要从事药用植物资源开发利用研究工作.
粤东地区唇形科药用植物资源
张秋燕 ,张福平
(韩山师范学院 ,广东 潮州　521041)
摘要:对粤东地区唇形科药用植物资源进行初步调查 , 记录到该地区共有唇形科药用植物 25属 、 53种(含变种),介绍
了粤东地区唇形科药用植物的种类 、生境 、药用功效 ,提出了保护及开发利用唇形科植物资源的一些建议。
关键词:粤东地区;　唇形科;　药用植物;　建议
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.11.129
中图分类号:Q949.777　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)11-2981-03
　　唇形科(Labiatae)植物为草本或灌木 , 极少乔木状。 茎和分
枝通常有四棱 , 表皮内含芳香油。叶对生或有时轮生 , 极少互生。
轮状花序有花 2至多朵;常几个至多个复合成顶生或腋生的总状
花序式 、穗状花序式 、圆锥花序式或头状花序式;花两性 , 很少单
性 , 两侧对称 ,很少辐射对称;萼 5或有时 4裂 ,通常二唇形 ,裂片
近等大或不等大;花冠合瓣 ,冠管筒状或有时卵状 ,檐部多少二唇
形 , 上唇 2裂 ,下唇 3裂 , 或有时上唇退化成单唇形;雄蕊 4, 着生
冠管内壁 , 2长 2短或近等长 , 有时其中 2枚退化或消失 , 因而仅
有 2枚发育雄蕊 , 花药 2室 ,平行或叉开 , 纵裂 ,有时汇合为 1室;
花盘发达 , 全缘或分裂;子房上位 ,由 2心皮组成 , 浅 4裂或 2全
裂 , 假 4室 ,每室有 1胚珠 , 花柱着生于子房裂片间 ,通常基生 ,柱
头 2裂 , 很少微凹。小坚果 4个或有时退化而仅存 1 ～ 2个 ,藏于
宿萼的基部 [ 1] 。唇形科植物广泛应用于药用 、食用 、油用 、香料
等方面 ,有着较为广阔的发展前景。因此 , 对粤东地区唇形科药
用植物资源进行详细调查 ,对发掘本地区药用植物资源 , 促进本
地区生物资源保护和可持续发展具有重要的理论意义和实践意
义。
1　粤东地区唇形科药用植物资源
粤东地区位于广东省东部 , 北回归线横贯本区中部 , 包括潮
州 、汕头 、揭阳 、汕尾四市 ,地处欧亚大陆东南沿海 ,太平洋西岸中
段 , 东连福建省 , 北接梅州市 , 西邻惠州市 , 南濒南海。复杂的地
理因素及优越的自然条件使得区内植物生长较为繁茂 ,并在植被
生态上形成了自己的特色。我们通过对粤东地区唇形科药用植
物资源进行较详细的调查 ,记录到粤东地区唇形科药用植物资源
计有 25属 , 53种(含变种)[ 2 ～ 8] , 这说明粤东地区唇形科药用植
物资源非常丰富 ,调查结果反映了粤东地区作为一个独立的自然
区域 , 其植物多样性的特点。 2　唇形科药用植物的利用价值
唇形科植物主要用于药用 、食用 、油用、香料等方面 , 有着较为
广阔的发展前景。绝大多数唇形科植物都含有挥发性芳香油 , 如
藿香 、益母草 、薄荷 、香薷 、紫苏 、夏枯草等。许多唇形科植物资源
是日常生活中重要的中药材。藿香为唇形科多年生草本植物 , 富
含挥发油 ,具有芳香化湿 、健胃 、止呕 、发表之功效 , 常用于治疗脾
失健运 、食欲不振 、体乏倦怠之症 ,全株可用作提取芳香油的原料,
藿香食用部分主要是鲜嫩叶 , 用开水焯一下冲凉后凉拌 , 也可腌
制 , 阴干后可用于酱菜提味 ,在民间 ,炖制河鱼时加入少许 , 有去腥
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.11 时珍国医国药 2010年第 21卷第 11期