全 文 ：学改善，安慰剂组则否（０／４６），且不良反应轻微［１３］，可
有效治疗对熊脱氧胆酸（ＵＤＣＡ）或ＵＤＣＡ＋甲氨蝶呤
反应不佳的有症状的原发性胆汁性肝硬化（ＰＢＣ）患
者［１４］，尤其是防治慢性乙型肝炎相关的肝硬化及肝
癌［１，２］，揭示了其抗ＨＢＶ作用的意义。
本研究采用国际上公认的检测方法证明了秋水
仙碱体外抗 ＨＢＶ的作用。尚需采用可靠的实验性
乙型肝炎病毒感染动物模型进行体内抗病毒研究，
以进一步明确其抗 ＨＢＶ的作用。
参考文献：
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［收稿日期］２０１２－０４－２０
［基金项目］广西自然科学基金创新研究团队项目“中药新药基础研究”（合同编号：２０１１ＧＸＮＳＦＦ０１８００６）；民族医药创新与产业技术平台的建
设（合同编号：桂科能１０１０００２７－１）　［作者简介］朱华，男，教授，博士，研究方向：中药品种、质量及资源开发研究工作，电话：１８６７７１８９０２９，Ｅ－
ｍａｉｌ：ｚｈｕｈｕａ＠ｇｘｔｃｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　［通讯作者］笪舫芳，女，在读硕士生，研究方向：中药及民族药的鉴定与开发，Ｅ－ｍａｉｌ：６０４１７８０７１＠ｑｑ．ｃｏｍ，电
话：１５９７７７２８０８５
壮药锡叶藤茎总黄酮提取工艺研究及其不同产地的含量测定
朱华，笪舫芳，滕建北　 （广西中医药大学，广西 南宁５３０００１）
［摘要］　目的：优选出锡叶藤茎中总黄酮的最佳提取工艺，建立其总黄酮含量测定方法。方法：采用水浴回流提取锡叶藤茎
中的黄酮化合物，紫外分光光度法测定锡叶藤茎总黄酮含量，通过单因素实验和正交试验，考察乙醇体积分数、液料比、提取
时间及温度对其总黄酮含量提取率的影响。结果：确定了最佳提取工艺为５０％的乙醇，液料比为２５∶１，在温度为８０℃下，加
热回流提取１．２５ｈ，此条件下的总黄酮得率最高为１４．７１％。广西不同产地锡叶藤药材总黄酮含量为６．３５～１５．８８％，平均含
量为１１．５２％。结论：该提取工艺简单可行，含量测定方法重复性好，为壮药锡叶藤药材质量控制提供了依据。
［关键词］　锡叶藤；总黄酮；正交试验
［中图分类号］Ｒ９２７．２　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）２４－１９５１－０４
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＴｅｔｒａｃｅｒａ
ａｓｉａｔｉｃａｓｔｅｍ
ＺＨＵ　Ｈｕａ，ＤＡ　Ｆａｎｇ－ｆａｎｇ，ＴＥＮＧ　Ｊｉａｎ－ｂｅｉ（Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｎａｎｎｉｎｇ　５３０００１，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍａｌｙ　ｓｅｌｅｃｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ
·１５９１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２４期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２４
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＴｅｔｒａｃｅｒａ　ａｓｉａｔｉｃａｓｔａｌｋ，ａ　Ｚｈｕａｎｇ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｗａｔｅｒ　ｂａｔｈ　ｂａｃｋｆｌｏｗ　ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｏｆ　Ｔｅｔｒａｃｅｒａａｓｉａｔｉｃａｓｔａｌｋ，Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ａｎｄ
ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｆａｃｔｏｒｓ（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａ－
ｔｉｏｎ，ｌｉｑｕｉｄ　ｔｏ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗａｙ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ：ｕｓｉｎｇ　５０％ｅｔｈａｎｏｌ　ａｓ　ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ，ｓｅｔｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｔｏ　ｌｉｑｕｉｄ　ａｔ　１∶２５，ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｆｏｒ　１．２５ｈａｔ　８０℃．Ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｗａｓ　ｇｏｔ　ａｓ　１４．７１％．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ｏｆ　Ｔｅｔｒａｃｅｒａ　ａｓｉａｔｉｃａｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｒｅａｓ　ｉｎ　Ｇｕａｎｇｘｉ　ｗａｓ　６．３５－１５．８８ｍｇ·ｇ－１，ａｖｅｒａｇｉｎｇ　１１．５２ｍｇ·ｇ－１．ＣＯＮＣＬＵ－
ＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｆｅａｓｉｂｌｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ，ｂｏｔｈ　ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ　ａ　ｂａ－
ｓｉｓ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｔｅｔｒａｃｅｒａ　ａｓｉａｔｉｃａ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｔｅｔｒａｃｅｒａ　ａｓｉａｔｉｃａ；ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ａｒｒａｙ　ｄｅｓｉｇｎ
　　锡叶藤药材始载于《常用中草药手册》［１］，为五
桠果科植物锡叶藤［Ｔｅｔｒａｃｅｒａ　ａｓｉａｔｉｃａ （Ｌｏｕｒ．）
Ｈｏｏｇｌａｎｄ］的根、茎或叶，性凉，味苦涩，具有收涩、
止泻、固精、消肿、止痛的功效［１－４］。锡叶藤为大型木
质藤本植物，主要分布于广西、广东、云南等热带及
亚热带地区［５］，是广西壮族民间常用的药材［２］。它
的主要成分有黄酮类化合物、鞣质类、多糖、有机酸
等［６］。其中黄酮类主要含有芦丁、鼠李素、山奈酚
等。锡叶藤全株以藤茎占主体，相对于其根、叶而
言，利用藤茎为药材来源更具资源优势。本课题研
究锡叶藤茎总黄酮提取工艺，并对其不同产地进行
含量测定，为锡叶藤资源的利用提供实验依据。
１　材料
１．１　仪器　８４５３紫外－可见分光光度计（Ａｇｉｌｅｎｔ
公司）；Ｂ３５００５－ＭＴ超声清洗仪（上海必能信公
司）；ＭＥＴＴＬＥＲ　ＡＥ２４０电子分析天平（上海梅特勒
一托利多仪器有限公司）；ＨＨ－Ｓ２数显恒温水浴
锅（金坛市医疗器械厂）。
１．２　主要试剂　芦丁对照品（中国食品药品检验研
究院，批号１０００８０－２００３０６，供含量检测用）；亚硝酸
钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇、乙醇均为分析纯，水为
纯净水。
１．３　研究对象　样品采自于广西东兴、上思、宁明、
武鸣、浦北、防城、横县、灵山、博白、容县等１０个产
地，均经广西中医药大学药学院药用植物教研室韦
松基教授鉴定为五桠果科属植物锡叶藤Ｔｅｔｒａｃｅｒａ
ａｓｉａｔｉｃａ（Ｌｏｕｒ．）Ｈｏｏｇｌａｎｄ的茎。药材处理：洗净
→切片→晒干→打粉→过６０目筛。
２　方法与结果
２．１　总黄酮含量测定
２．１．１　对照品溶液的配制　精密称取１０５℃干燥
至恒重的芦丁５ｍｇ，置于２５ｍＬ量瓶中，加适量
６０％乙醇超声溶解，放冷，加６０％乙醇稀释至刻度，
摇匀，即得（每１ｍＬ含无水芦丁０．２ｍｇ）。
２．１．２　供试品溶液的配制　取广西武鸣产锡叶藤茎
粉末约１ｇ，精密称定，置于锥形瓶中，加入６０％乙醇
２５ｍＬ／次，７０℃的水浴回流提取２次，每次１ｈ。过
滤，精密量取滤液１ｍＬ置于２５ｍＬ量瓶中，加６０％
乙醇稀释至刻度，摇匀，即得锡叶藤的样品溶液。
２．１．３　检测波长的选择　取芦丁对照品溶液及供
试品溶液各１ｍＬ置于１０ｍＬ量瓶中，加入５％亚
硝酸钠溶液１ｍＬ，摇匀，静置５ｍｉｎ后，加入１０％
硝酸铝溶液１ｍＬ，摇匀，放置５ｍｉｎ，再加入４％氢
氧化钠溶液１０ｍＬ，用６０％乙醇溶液定容，摇匀，放
置１０ｍｉｎ，以６０％乙醇加入上述作试剂参比。照紫
外－可见分光光度法［７］（中国药典２０１０年版一部附
录ＶＡ），在波长为２００～８００ｎｍ处扫描，结果在５０３
ｎｍ有最大吸收，故选５０３ｎｍ为测定波长。
２．１．４　标准曲线的绘制　精密量取上述对照品溶
液０，１，２，３，４，５ｍＬ分别置于２５ｍＬ量瓶中，加入
５％亚硝酸钠溶液１ｍＬ，摇匀，静置５ｍｉｎ后，加入
１０％硝酸铝溶液１ｍＬ，摇匀，放置５ｍｉｎ，再加入
４％氢氧化钠溶液１０ｍＬ，用６０％乙醇溶液定容，摇
匀，放置１０ｍｉｎ，以６０％乙醇加入上述作试剂参比。
于５０３ｎｍ波长处测定不同浓度芦丁的吸光度，平
行试验３次，得到芦丁标准溶液的校准曲线。用最
小二乘法进行回归，得到吸光度值（Ｙ）与芦丁标准
溶液的浓度（Ｘ）的关系曲线：Ｙ ＝１４．０６１　Ｘ ＋
０．０００　３，Ｒ２＝０．９９９　５。结果表明，芦丁在０．００８～
０．０４ｍｇ·ｍＬ－１范围内与吸光度线性关系良好。
２．１．５　方法学考察
２．１．５．１　精密度试验　取同一对照品溶液１ｍＬ，依
“２．１．３”项下方法显色后，连续测定６次吸光度，对照
品溶液吸光度平均值为０．５７２　４８８，ＲＳＤ为０．１８％，表
明本法精密度良好，符合含量测定的要求。
２．１．５．２　稳定性试验　取广西武鸣产锡叶藤茎供试
品溶液１ｍＬ，依“２．１．３”项下方法显色后，在室温下
放置１５，３０，４５，６０，９０，１２０，１５０，１８０ｍｉｎ，测定吸光度。
实验结果表明：显色后溶液至少在１５０ｍｉｎ内稳定。
总黄酮平均含量为１４．５１％，ＲＳＤ为０．７９％；表明该溶
·２５９１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２４期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２４
液供试品稳定性良好，符合含量测定要求。
２．１．５．３　重复性试验　取同一批广西武鸣产锡叶
藤茎药材粉末６份，每份１ｇ，精密称定，依“２．１．２”
项下方法平行制备，依“２．１．３项下方法显色后，在
紫外下测定吸光度，结果总黄酮平均 含 量 为
１４．６９％，ＲＳＤ为３．７％。
２．１．５．４　加样回收试验　取已知含量的样品６份，
每份约０．１ｇ（含量为１４．７１％），精密称定，分别加入
一定量的芦丁对照品，依“２．１．３”项下方法显色后。
在紫外下测定吸光度，计算总黄酮含量和回收率，结
果见表１。
表１　加样回收率试验结果（ｎ＝６）
Ｔａｂ　１　Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ（ｎ＝６）
序列
取样量
／ｇ
样品含
量／ｇ
对照品加
入量／ｇ
实测量
／ｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１　０．１０４　５　０．０１４　８　 ０．０２　 ０．０３４　９　１００．９４
２　０．１００　５　０．０１４　７　 ０．０２　 ０．０３４　０　 ９６．３８
３　０．１０３　４　０．０１４　８　 ０．０２　 ０．０３５　３　１０２．６１
９９．８２　２．１７
４　０．１０１　４　０．０１４　７　 ０．０４　 ０．０５５　１　１００．９６
５　０．１０２　４　０．０１４　７　 ０．０４　 ０．０５４　４　 ９９．０６
６　０．１０４　８　０．０１４　８　 ０．０４　 ０．０５４　３　 ９８．９６
２．１．６　总黄酮含量计算　总黄酮含量（％）＝Ｘ×Ｖ
×Ｎ／Ｍ×１００％
式中：Ｘ：由标准曲线算得被测液中黄酮浓度
（ｍｇ·ｍＬ－１）；Ｖ：吸取的测量液体积（ｍＬ）；Ｍ：试样
质量（ｇ）；Ｎ：稀释倍数。
２．２　总黄酮提取的单因素试验
２．２．１　提取溶剂体积分数对总黄酮提取量的影响
　取广西武鸣产锡叶藤茎药粉４份，每份约１ｇ，精
密称定，置于回流装置中，分别加入９０％乙醇、７０％
乙醇、５０％乙醇、３０％乙醇各２５ｍＬ，提取２次，每次
回流１ｈ，过滤。取续滤液１ｍＬ定容到２５ｍＬ。依
“２．１．３”项下方法显色后，于波长５０３ｎｍ处测定吸
光度。实验结果表明乙醇在３０％～５０％之间时，黄
酮提取率不断增大，在５０％时最大，但是与７０％差
值不多，故选择５０％，６０％，７０％作为正交试验乙醇
体积分数水平。
２．２．２　提取时间对总黄酮提取量的影响　取广西
武鸣产锡叶藤茎药粉４份，每份约１ｇ，精密称定，分
别置于回流装置中，分别加入６０％乙醇各２５ｍＬ，
分别水浴回流３０，６０，９０，１２０ｍｉｎ，提取２次，过滤。
取续滤液１ｍＬ定容到２５ｍＬ。依“２．１．３”项下方
法测定。实验结果表明提取时间在３０～９０ｍｉｎ之
间，药材总黄酮提取率渐渐增高，当达到９０ｍｉｎ时
最大，之后就降低了。故选６０，７５，９０ｍｉｎ为正交试
验提取时间。
２．２．３　液料比对总黄酮提取量的影响　取广西武
鸣产锡叶藤茎药粉４份，每份约１ｇ，精密称定，置于
回流装置中，分别按１０∶１，２５∶１，５０∶１，１００∶１的液料
比加入７０％乙醇水浴回流１ｈ，提取２次。过滤。
取续滤液１ｍＬ定容到２５ｍＬ。依“２．１．３”项下方
法测定。实验结果表明液料比对总黄酮的提取有一
个很明显的影响，从１０∶１到２５∶１明显增高，２５∶１到
５０∶１明显下降，之后变化即不明显，由此可见并不是
液料比越大越好。故选１５∶１，２５∶１，３５∶１为正交试
验液料比水平。
２．２．４　提取温度对总黄酮提取量的影响　取广西
武鸣产锡叶藤茎药粉４份，每份约１ｇ，精密称定，置
于回流装置中，分别加入６０％乙醇２５ｍＬ，分别将
水浴锅的水温控制在６０，７０，８０，９０，１００℃加热回
流１ｈ，提取２次。过滤。取续滤液１ｍＬ定容到２５
ｍＬ。依“２．１．３”项下方法测定。实验结果表明，水
温从３０℃到７０℃，总黄酮含量是增加的，７０℃时为
最大值，之后则逐渐降低，所以选取６０，７０，８０℃为
正交试验提取温度的水平。
２．３　正交试验　根据单因素结果，确定乙醇体积分
数（Ａ），液料比（Ｂ），提取时间（Ｃ）及提取温度（Ｄ）为
考察因素，每个因素选取３个水平，按照Ｌ９（３４）正
交表进行试验。用ＳＰＳＳ软件进行正交试验数据分
析，以确定最佳提取工艺条件。
表２　因素水平表
Ｔａｂ　２　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ
水平
Ａ
乙醇体积分数／％
Ｂ
液料比
Ｃ
提取时间／ｍｉｎ
Ｄ
提取温度／℃
１　 ５０　 １５∶１　 ６０　 ６０
２　 ６０　 ２５∶１　 ７５　 ７０
３　 ７０　 ３５∶１　 ９０　 ８０
２．３．１　正交试验结果　从直观表（表３）中分析可
知，影响壮药锡叶藤茎总黄酮提取率的主次因素为
Ｂ＞Ｄ＞Ｃ＞Ａ，即液料比＞提取温度＞提取时间＞
乙醇体积分数，三因素中 Ａ１＞Ａ３＞Ａ２，Ｂ２＞Ｂ３＞
Ｂ１，Ｃ２＞Ｃ３＞Ｃ１，Ｄ３＞Ｄ２＞Ｄ１；从方差分析（表４）结
果可知，液料比，提取温度，提取时间及均具有显著
差异（Ｐ＜０．０５），乙醇体积分数在考察的范围内影
响不显著，从节约实验试剂的角度出发，确定最佳提
取工艺为Ａ１Ｂ２Ｃ２Ｄ３，即为５０％的乙醇，液料比为
２５∶１，在温度为８０℃下，加热回流提取７５ｍｉｎ。
２．３．２　验证试验　取样品粉末平行３份，按Ａ１Ｂ２
Ｃ２Ｄ３的条件制备样品，测定总黄酮含量，结果３份
样品的总黄酮平均值为１４．６９％，ＲＳＤ为２．１７％，与
正交试验中提取率最高的工艺的含量相比，提取率
明显增大，表明该提取方法合理、可行。
２．４　不同产地含量测定　分别取广西区内１０批药
·３５９１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２４期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２４
表３　直观分析表
Ｔａｂ　３　Ｉｎｔｕｉｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ
实验号
因素 总黄酮含量／％
Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ　 １　 ２　 ３
合计／％
１　 １　 １　 １　 １　 ９．４１　９．９３　９．７５　 ２９．０９
２　 １　 ２　 ２　 ２　 １２．９６　１２．３６　１２．４７　 ３７．７９
３　 １　 ３　 ３　 ３　 １１．９２　１１．４１　１１．２７　 ３４．６０
４　 ２　 １　 ２　 ３　 １１．７７　１１．４８　１１．３９　 ３４．６４
５　 ２　 ２　 ３　 １　 １０．９０　１０．４１　１０．２４　 ３１．５５
６　 ２　 ３　 １　 ２　 １０．２３　１０．５９　１０．２７　 ３１．０９
７　 ３　 １　 ３　 ２　 １１．６６　１１．４３　１１．２９　 ３４．３８
８　 ３　 ２　 １　 ３　 １１．７９　１１．８６　１１．６５　 ３５．３０
９　 ３　 ３　 ２　 １　 １０．２７　１０．１６　１０．２０　 ３０．６３
Ｋ１ １１．２８　１０．０９　１０．７８　１０．１６
Ｋ２ １０．９２　１１．６８　１１．４７　１１．５８
Ｋ３ １１．２２　１０．８４　１１．１７　１１．６７
Ｒ　 ０．３６　１．５９　０．６９　１．５１
表４　方差分析表
Ｔａｂ　４　Ｖａｒｉａｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ
方差来源 立均差平方和 自由度 均方 Ｆ值 Ｐ值
Ａ　 ０．６６３　 ２　 ０．３３２　 ２．８７８
Ｂ　 ３．９９４　 ２　 １．９９７　１７．３２５ ＜０．０１
Ｃ　 ２．２０３　 ２　 １．１０２　 ９．５５８ ＜０．０１
Ｄ　 １２．９０１　 ２　 ６．４５１　５５．９６５ ＜０．０１
误差 ２．０７５　 １８　 ０．１１５
注：Ｆ０．０５（２，１８）＝３．５５，Ｆ０．０１（２，１８）＝６．０１
材样品粉末３份，每份约１ｇ，精密称定，按“２．３．２”
项下方法平行制备，以相应的试剂为空白，依
“２．１．３”项下方法显色后，在５０３ｎｍ处分别测定吸
光度，按标准曲线法计算含量。结果见表５。
３　讨论
本实验对壮药锡叶藤茎总黄酮含量进行测定，
考察了７种对总黄酮含量测定的影响的因素，如提
取方法、溶剂、溶剂体积、次数、时间、温度及液料比。
对单因素结果讨论，设计正交试验，进一步优化了锡
叶藤茎总黄酮提取工艺，试验结果证明用该工艺提
取锡叶藤总黄酮工艺简单，提取率高、操作简易。
表５　广西１０个不同产地锡叶藤茎药材样品总黄酮的测定
结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ　５Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｏｆ　Ｔｅｔｒａｃｅｒａ　Ａｓｉａｔｉｃａｆｒｏｍ
ｔｅｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｒｅａｓ　ｉｎ　Ｇｕａｎｇｘｉ（ｎ＝３）
产地 含量／％ ＲＳＤ／％
广西武鸣 １４．４６　 １．８７
广西上思 １５．８８　 ２．３２
广西东兴 １１．０２　 ０．０８
广西灵山 １０．１２　 １．９７
广西横县 １２．７６　 ０．１５
广西容县 １０．５４　 ０．０６
广西浦北 １１．１８　 １．６３
广西博白 ９．６０　 ２．０７
广西防城 ６．３５　 ２．１１
广西宁明 １３．３４　 １．８９
　　本研究测得的广西１０个不同产地锡叶藤茎药
材样品总黄酮的含量范围为６．３５％～１５．８８％，最高
值和最低值相差２倍以上，说明广西不同产地锡叶
藤药材的质量存在较大的差异。平均含量为
１１．５２％，其 中 广 西 上 思 （１５．８８％）、广 西 武 鸣
（１４．４６％）、广西宁明（１３．３４％）含量较高。现行尚
无对锡叶藤茎总黄酮的含量测定，因此，有必要增加
总黄酮含量测定，以便更好地控制其药材质量。
参考文献：
［１］　广州部队后勤部卫生部编．常用中草药手册［Ｍ］．人民卫生出
版社，１９６９：２６２．
［２］　梁启成，钟鸣．中国壮药学［Ｍ］．广西民族出版社，２００５：４６４．
［３］　国家中医药管理局编委会．中华本草．第３册．第８卷［Ｍ］．上
海科学技术出版社，１９９９：５１０－５１１．
［４］　广西壮族自治区中医药研究所．广西药用植物名录［Ｍ］．广西
人民出版社，１９８６：１３５．
［５］　陈焕镛．海南植物志．第１卷［Ｍ］．北京：科学出版社，１９６４：
４４６－４４７．
［６］　纳智，李朝明，郑惠兰，等．锡叶藤的化学成分［Ｊ］．云南植物研
究，２００１，２３（１）：４００．
［７］　中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：附录ＶＡ．
［收稿日期］２０１２－０４－２８
［基金项目］江苏省教育厅重大项目，中药醋制入肝效应及炮制机理研究（编号：０９ＫＪＡ３６０００１）；中国中医科学院中药研究所基本科研业务费资助
课题（编号：２０１１ＺＤＸＫ－０２）　［作者简介］王菊，女，２０１０级硕士研究生，研究方向：中药学，电话：１３９１３８９３１３０，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｕ１９８７０９２０＠１２６．ｃｏｍ
［通讯作者］陆兔林，博士，教授，博士生导师，研究方向：中药质量及中药炮制机理研究，电话：０２５－８５８１１８３５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｔｌ２０９＠ｙａｈｏｏ．ｃｎ
高效液相色谱法同时测定不同产地莪术饮片中５种倍半萜类成分的含量
王菊１，陆兔林１，２，毛春芹２，胡俊扬１，张星１，胡颖菲１　 （１．南京中医药大学 江苏省中药炮制重点实验室，江苏 南京
２１００４６；２．南京中医药大学药学院，江苏 南京２１００４６）
［摘要］　目的：建立ＨＰＬＣ法同时测定不同产地莪术中莪术二酮、莪术醇、吉玛酮、呋喃二烯、β－榄香烯等５种倍半萜类成分的
含量。方法：采用Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：乙腈（Ａ）－水（Ｂ），梯度洗脱（０～３５ｍｉｎ，４５％ Ａ→７０％ Ａ；
３５～４０ｍｉｎ，７０％ Ａ→９０％ Ａ；４０～６０ｍｉｎ，９０％ Ａ→９５％ Ａ），流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２１４ｎｍ；柱温２５℃。结果：莪术
二酮、莪术醇、吉玛酮、呋喃二烯、β－榄香烯分别在２７．８８～２７８．８，２０．４２～２０４．２，３．４７５～３４．７５，５．３８０～５３．８０，１０．１２～１０１．２
μｇ·ｍＬ
－１范围内线性关系良好，ｒ≥０．９９９　６。平均加样回收率（ＲＳＤ）分别为９７．３６％（１．８５％），９７．９６％（２．３０％），９７．４７％
（２．０２％），９８．１０％（２．３８％），９８．９４％（２．０１％）。结论：本方法操作简便、准确可靠，适用于莪术中５种倍半萜类成分的定量分
·４５９１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２４期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２４