全 文 ：第３４卷第２期
２０１５年４月
中 国 海 洋 药 物
ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＭＡＲＩＮＥ　ＤＲＵＧＳ
Ｖｏｌ．３４　Ｎｏ．２
Ａｐｒｉｌ，２０１５
角果木内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４
代谢产物及活性研究△
＊
丘柳明１，２，左文健２，王辉２，蔡彩虹２，戴好富２，梅文莉１，２＊
（１．海南大学 环境与植物保护学院，海南 海口５７０２２８；
２．中国热带农业科学院热带生物技术研究所 农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室，海南 海口５７１１０１）
摘　要：目的 研究红树植物角果木内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４产生的活性次生代谢产物。方法 采用多种
柱色谱技术进行分离纯化，根据化合物的理化常数和波谱数据鉴定结构，利用 ＭＴＴ法测定各化合物的体外
细胞毒活性。结果 从角果木内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４发酵液中分离了８个化合物，分别鉴定为：ａｅｒｖ－
ｅｃｄｙｓｔｅｒｉｏｄ　Ｄ（１）、ｃｉｔｒｏｓｉｄｅ　Ａ（２）、３－ｍｅｔｈｏｘｙｅｐｉｃｏｃｃｏｎｅ（３）、２，４－二羟基－３，５，６－三甲基苯甲醛 （４）、ｍｙｃｏｓ－
ｐｈｉｎｅ　Ｂ（５）、ｍｙｃｏｓｐｈｉｎｅ　Ａ（６）、５－羟甲基糠醛 （７）、对羟基苯乙醇 （８）。结论 其中化合物１～５均为首次从角
果木内生真菌分离得到，并首次报道了化合物４的核磁数据，活性测试结果表明化合物３对肿瘤细胞株 Ｋ－
５６２生长具有抑制作用。
关键词：内生真菌；化学成分；结构鉴定；细胞毒活性
中图分类号：Ｒ９３１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００２－３４６１（２０１５）０２－０１７－０５
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４ｏｆ　Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ
ＱＩＵ　Ｌｉｕ－ｍｉｎｇ１，２，ＺＵＯ　Ｗｅｎ－ｊｉａｎ２，ＷＡＮＧ　Ｈｕｉ　２，ＣＡＩ　Ｃａｉ－ｈｏｎｇ２，ＤＡＩ　Ｈａｏ－ｆｕ２，ＭＥＩ　Ｗｅｎ－ｌｉ　１，２＊
１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｈａｉｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｉｋｏｕ５７０２２８，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｃｒｏｐｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ
Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｉｋｏｕ５７１１０１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４ｏｆ
Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ－
ｐｈｙ，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｔｒａｌ　ｄａｔａ．Ａｌ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ
ｔｅｓｔｅｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｆｏｒ　ｔｈｅｉｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅｓ（Ｋ－５６２）ｂｙ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｅｉｇｈｔ　ｃｏｍ－
ｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒｏｔｈ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｆｕｎｇｕｓ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４．Ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒ－
ｍｉｎｅｄ　ａｓ　ａｅｒｖｅｃｄｙｓｔｅｒｉｏｄ　Ｄ（１），ｃｉｔｒｏｓｉｄｅ　Ａ（２），３－ｍｅｔｈｏｘｙｅｐｉｃｏｃｃｏｎｅ（３），４，６－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－２，３，５－ｔｒｉｍ－
ｅｔｈｙｌｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ（４），ｍｙｃｏｓｐｈｉｎｅ　Ｂ（５），ｍｙｃｏｓｐｈｉｎｅ　Ａ （６），５－ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｆｕｒｆｕｒａｌ（７），ａｎｄ　４－
ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｅｔｈｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ（８）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１～５　ｗｅｒｅ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ
ｆｕｎｇｕｓ　ｏｆ　Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｄａｔａ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　４　ｗａｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｆｏｒ
＊ △基金项目：国家自然科学基金项目（４１４０６０８３）；海南省国际科技合作专项（ＧＪＨＺ２０１３－１７）；海南省自然科学基金项目（３１３０７９）；
中国热带农业科学院青年拔尖人才项目（ＩＴＢＢ１４０４０２）资助
　作者简介：丘柳明（１９８９－），男，硕士研究生，研究方向为微生物天然产物。Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｉｕｌｍ５２０＠１６３．ｃｏｍ
＊通讯作者：梅文莉 （１９７４－），女，研究员。Ｔｅｌ：（０８９８）６６９８７５２９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｅｉｗｅｎｌｉ＠ｉｔｂｂ．ｏｒｇ．ｃｎ
　　收稿日期：２０１４－１０－２９
DOI:10.13400/j.cnki.cjmd.2015.02.003
１８　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．Ｂｉｏａｓｓａｙ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　３　ｈａｄ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｔｏｗａｒｄｓ　ｔｈｅ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｃｅｌ
ｌｉｎｅｓ　ｏｆ　Ｋ－５６２．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｕｓ；ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ；ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　红树植物角果木（Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ）为红树科
（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａｃｅａｅ）角果木属（Ｃｅｒｉｏｐｓ）的常绿植
物，别名剪子树、海枷仔、海淀子。在中国角果木
是１种海南黎族常用药用植物，具有止血、收敛、
通便、止痒等功效［１－２］。红树林作为１种生长于海
洋潮间带特殊的木本植物群落，具有丰富的内生
真菌资源，已成为海洋真菌的第二大类群［３］。在
前期研究中，本课题组已从红树植物角果木根、
枝、叶中分离得到９５株内生真菌，并从菌株ＦＪ－１
和Ｊ６２次生代谢产物中得到萜，蒽酮，脂肪酸等类
型化合物，具有抗肿瘤、抗菌活性［４－６］。为了充分
挖掘红树植物内生真菌的药用资源，本文继续对
来源于角果木叶子的菌株Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４的
次生代谢产物进行了研究，共分离得到８个化合
物，经波谱分析分别鉴定为：ａｅｒｖｅｃｄｙｓｔｅｒｉｏｄ　Ｄ
（１）、ｃｉｔｒｏｓｉｄｅ　Ａ（２）、３－ｍｅｔｈｏｘｙｅｐｉｃｏｃｃｏｎｅ（３）、２，
４－二羟基－３，５，６－三甲基苯甲醛 （４）、ｍｙｃｏｓｐｈｉｎｅ　Ｂ
（５）、ｍｙｃｏｓｐｈｉｎｅ　Ａ （６）、５－羟甲基糠醛 （７）、对羟
基苯乙醇 （８）。生物活性测试结果表明，化合物３
对肿瘤细胞株Ｋ－５６２具有生长抑制活性。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　内生真菌
红树植物角果木（Ｃｅｒｉｏｐｓ　ｔａｇａｌ）于２０１１年７
月采自海南东寨港红树林自然保护区，由中国热
带农业科学院热带生物技术所刘寿柏博士鉴定。
内生真菌Ｊ５４由本课题组从角果木新鲜枝条中分
离得到，通过分子克隆手段，以 ＮＳ１（５＇－ＧＴＡＧＴ－
ＣＡＴＡＴＧＣＴＴＧＴＣＴＣ－３＇）和 ＮＳ６（５＇－ＧＣＡＴＣＡ－
ＣＡＧＡＣＣＴＧＴＴＡＴＴＧＣＣＴＣ－３＇）为引物，对该菌
１８ＳｒＤＮＡ基因序列进行克隆以及测定，并将序列
提交ＮＣＢＩ基因库，再进行ＢＬＡＳＴ数据库同源比
对，发现菌株Ｊ５４与Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．的相似度达
１００％，因此鉴定该菌株为Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４。
菌种保藏于中国热带农业科学院热带生物技术研
究所。
１．１．２　肿瘤细胞株
人慢性髓原白血病细胞株Ｋ－５６２购自中国科
学院细胞库，在含有１０％小牛血清的 ＲＰＭＩ１６４０
培养基中，于５％ＣＯ２、湿度９０％以上、３７℃温箱中
培养，贴壁细胞用０．２５％胰酶消化。
１．１．３　培养基
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ＰＤＡ）：马铃薯
２００．０ｇ，葡萄糖２０．０ｇ，琼脂２３．０ｇ，定容至１Ｌ，
ｐＨ自然；肿瘤细胞株采用 ＲＰ－ＭＩ１６４０完全培
养基。
１．１．４　仪器与试剂
ＭＳ谱在 Ａｕｔｏｓｐｅｃ（３００质谱仪上测定，旋转
蒸发仪（Ｈｅｉｄｏｌｐｈ　Ｌａｂｏｒｏｔａ），核磁共振波谱仪为
Ｂｒｕｋｅｒ　ＡＶ（５００（ＴＭＳ内标），薄层色谱硅胶和柱
色谱硅胶（青岛海洋化工厂产品），Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ
（２０柱（Ｍｅｒｃｋ公司），ＢＳＡ（１００Ａ自动部份收集器
（上海青浦沪西仪器厂），高压湿热灭菌锅，试剂
（工业纯重蒸），ＣＯ２培养箱（ＲＳ　Ｂｉｏｔｅｃｈ　Ｌｔｄ．），酶
标仪（ＢｉｏＴｅｋ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．），四甲基偶氮唑
盐（ＭＴＴ）、ＭＥＭ和平衡盐溶液ＰＢＳ（北京欣经科
公司），紫杉醇（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）等。
１．２　方法
１．２．１　红树植物角果木内生真菌的培养
内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ－５４经ＰＤＡ固体
培养基平板活化，切取黄豆粒大小的菌丝块，接种
于容量为１　０００ｍＬ的装有４００ｍＬ　ＰＤＡ液体培
养基的三角瓶中，室温下，１２０ｒ／ｍｉｎ振荡培养７ｄ
后，静置培养４５ｄ，共发酵２８０瓶，得发酵液１００Ｌ。
１．２．２　化合物提取与分离
将菌株发酵液１００Ｌ，经滤布过滤得到菌丝球
和发酵上清液。将发酵上清液于５５℃减压浓缩至
１０．０Ｌ，依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别得到
乙酸乙酯浸膏 （１０．２ｇ）和正丁醇浸膏 （１１．４ｇ）。
乙酸乙酯浸膏部分，通过减压硅胶柱色谱，以氯仿－
甲醇梯度洗脱得到１０个流份（Ｆｒ．１～Ｆｒ．１０）。Ｆｒ．３
（２．１ｇ）经硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇梯度洗脱得到
９个流份 （Ｆｒ．３－１～Ｆｒ．３－９），Ｆｒ．３－２（１５０ｍｇ）经
Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱色谱，以纯甲醇洗脱，浓缩样
品后再进行硅胶柱色谱分离，以氯仿－甲醇梯度洗
２期 丘柳明，等：角果木内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４代谢产物及活性研究 １９　
脱得到化合物１ （１０．５ ｍｇ）、２ （１５．１ ｍｇ）和
３（８．１ｍｇ）；Ｆｒ．４（１５０．１ｍｇ）经硅胶柱色谱，以
氯仿－甲醇梯度洗脱得到６个流份（Ｆｒ．４－１～Ｆｒ．４－
６），Ｆｒ．４－２（２０．５ｍｇ）经反相柱色谱洗脱后，再进
行硅胶柱色谱处理，以氯仿－甲醇梯度洗脱得到化合
物７（５．４ｍｇ）；Ｆｒ．５（２００．５ｍｇ）经硅胶柱色谱，以
氯仿－甲醇（１００∶１）洗脱得到化合物４（４８．３ｍｇ）。
正丁醇部分，经大孔吸附树脂（ＨＰ－２０）柱色谱处理
后，再进行减压硅胶柱色谱分离，以氯仿－甲醇梯度
洗脱得到６个流份（Ｆｒ．１～Ｆｒ．６）。Ｆｒ．４（１２０．１ｍｇ）
经多次硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇梯度洗脱得到化
合物５（４．５ｍｇ）和６（７．４ｍｇ）；Ｆｒ．５（８０．２ｍｇ）经
硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇（９０∶１）洗脱得到化合物
８（９．５ｍｇ）。
１．２．３　体外肿瘤细胞生长抑制实验（ＭＴＴ法）［７］
实验设阴性对照组（ＤＭＳＯ溶剂对照组）、阳
性对照组（紫杉醇）和５个不同浓度的待测样品，
每个浓度设２个平行。收集对数生长期细胞，血
球计数板计数，按每孔４　５００个癌细胞量接种于
９６孔平底细胞培养板中，置于５％ＣＯ２、湿度９０％
以上、３７℃温箱中培养。２４ｈ后取出加入一定量
的待测样品，继续培养３ｄ后取出置于显微镜下观
察每孔细胞形态，记录细胞形态变化情况，接着每
孔加入５ｍｇ／ｍＬ的 ＭＴＴ溶液（溶于平衡盐溶液
ＰＢＳ）５０μＬ，３７℃反应４ｈ后，将细胞培养液吸
出，每孔加入１００μＬ　ＤＭＳＯ使Ｆｏｒｍａｚａｎｅ充分溶
解后，将细胞培养板置于ＥＬＸ－８００酶标仪上，用
４９０ｎｍ波长测各孔的吸光度 （Ａ），按下列公式求
生长抑制率。而后以样品浓度为横坐标，以抑制
率为纵坐标，作图并求出抑制率为５０％时样品的
浓度（ＩＣ５０），样品活性结果即以半数抑制浓度
（ＩＣ５０）表示。
生长抑制率＝（１－
用药组平均Ａ值
对照组平均Ａ值×１００％
图１　化合物１～８的结构
Ｆｉｇ．１　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１～８
２　结构鉴定
　　化合物１：白色粉末；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：５１５［Ｍ
＋Ｎａ］＋；结合１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ谱推测其分子
式为Ｃ２８Ｈ４４Ｏ７；１　Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，５００ＭＨｚ
）δ：５．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ－７），５．０２（１Ｈ，ｓ，Ｈ－２８ａ），
４．８３（１Ｈ，ｓ，Ｈ－２８ｂ），４．７４（１Ｈ，ｓ，ＯＨ－２５），
４．６２（１Ｈ，ｓ，ＯＨ－１４），４．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２
Ｈｚ，ＯＨ－２２），４．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，ＯＨ－
１），４．３５（１Ｈ，ｓ，ＯＨ－３），３．６８（１Ｈ，ｓ，ＯＨ－
２０），３．７７（１Ｈ，ｓ，Ｈ－３），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
１０．３，４．５ Ｈｚ，Ｈ－１），３．４３ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－２２），
２．９６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－９），２．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，
Ｈ－１７），２．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２３ａ），２．２０（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－５），１．９８（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１２ａ），１．９１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
１６ａ），１．９０（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２３ｂ），１．７６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
１５ａ），１．７４（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１２ｂ），１．６６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
２０　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
１１ａ），１．６４（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１６ｂ），１．５７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
４ａ），１．５６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２ａ），１．５３（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
１１ｂ），１．４８（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１５ｂ），１．４６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
４ｂ），１．２３（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２ｂ），１．２３（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
２６），１．１９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２７），１．０４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２１），
０．８３ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１９），０．７７ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１８）；
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，１２５ＭＨｚ）δ：６７．０（Ｃ－１），
３６．９（Ｃ－２），６６．８（Ｃ－３），３１．８（Ｃ－４），５０．３（Ｃ－
５），２０３．３（Ｃ－６），１２０．７（Ｃ－７），１６５．６（Ｃ－８），
３３．４（Ｃ－９），３７．９（Ｃ－１０），２０．５（Ｃ－１１），３０．６
（Ｃ－１２），４７．１（Ｃ－１３），８３．３（Ｃ－１４），３１．１（Ｃ－
１５），２１．２（Ｃ－１６），４８．９（Ｃ－１７），１７．４（Ｃ－１８），
２４．１（Ｃ－１９），７６．０（Ｃ－２０），２１．２（Ｃ－２１），７６．２
（Ｃ－２２），３３．４（Ｃ－２３），１５４．６（Ｃ－２４），７１．８（Ｃ－
２５），２９．９（Ｃ－２６），２９．７（Ｃ－２７），１０８．６（Ｃ－２８）。
上述波谱数据与文献［８］报道基本一致，因此鉴定
化合物１为ａｅｒｖｅｃｄｙｓｔｅｒｉｏｄ　Ｄ。
化合物２：白色粉末；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：４０９［Ｍ
＋Ｎａ］＋；结合１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ谱推测其分子
式为Ｃ１９Ｈ３０Ｏ８；１　Ｈ　ＮＭＲ （ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）
δ：５．９１（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），４．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８
Ｈｚ，Ｈ－１＇），４．３０（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝１１．３，４．０Ｈｚ，Ｈ－
３），３．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｈ－６ａ＇），３．４２
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，６．０Ｈｚ，Ｈ－６ｂ＇），３．２５（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－３＇），３．２３（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５＇），３．１３（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－４＇），３．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．１，７．８Ｈｚ，Ｈ－２＇），
２．４５ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－４ａ），２．２２ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１０），
１．９２（１Ｈ，ｍ，Ｈ－２ａ），１．４９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．４０
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．５，７．５Ｈｚ　Ｈ－４ｂ），１．３９（３Ｈ，
ｓ，Ｈ－１２），１．３４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．６，１１．１Ｈｚ，Ｈ－
２ｂ），１．１７（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１１）；１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，
１２５ＭＨｚ）δ：３７．０（Ｃ－１），４９．９（Ｃ－２），６３．８（Ｃ－
３），４８．０（Ｃ－４），７８．７（Ｃ－５），１１９．１（Ｃ－６），２１２．９
（Ｃ－７），１０１．４（Ｃ－８），２００．８（Ｃ－９），２６．７（Ｃ－１０），
３０．１（Ｃ－１１），３１．５（Ｃ－１２），２６．６（Ｃ－１３），１００．１
（Ｃ－１＇），７５．３（Ｃ－２＇），７８．６（Ｃ－３＇），７１．７（Ｃ－４＇），
７７．８（Ｃ－５＇），６３．４（Ｃ－６＇）。上述波谱数据与文献［９］
报道基本一致，因此鉴定化合物２为ｃｉｔｒｏｓｉｄｅ　Ａ。
化合物３：黄色无定形固体；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：
２４９［Ｍ＋Ｎａ］＋；结合１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ谱推测
其分子式为Ｃ１０Ｈ１０Ｏ６；１　Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，５００
ＭＨｚ）δ：６．２７（１Ｈ，ｓ，Ｈ－３），３．３８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
８），２．３１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－９）；１３Ｃ　ＮＭＲ （ＤＭＳＯ－ｄ６，
１２５ＭＨｚ）δ：１６９．３（Ｃ－１），１００．４（Ｃ－３），１２３．３
（Ｃ－３ａ），１３９．０（Ｃ－４），１４０．２（Ｃ－５），１４６．５（Ｃ－
６），１１６．６（Ｃ－７），１１４．０（Ｃ－７ａ），５５．２（Ｃ－８），
９．９（Ｃ－９）。上述波谱数据与文献［１０］报道基本一
致，因此鉴定化合物３为３－ｍｅｔｈｏｘｙｅｐｉｃｏｃｃｏｎｅ。
化合物４：黄色无定形固体；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：
２０３［Ｍ＋Ｎａ］＋；结合１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ谱推测
其分子式为Ｃ１０Ｈ１２Ｏ３；１　Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，５００
ＭＨｚ）δ：１２．９（１Ｈ，ｓ，ＯＨ－２），１０．１（１Ｈ，ｓ，
Ｈ－７），７．４（１Ｈ，ｓ，ＯＨ－４），２．３９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
１０），１．９８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－９），２．０４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－８）；
１３Ｃ　ＮＭＲ （ＤＭＳＯ－ｄ６，１２５ＭＨｚ）δ：１１１．３（Ｃ－
１），１６０．４（Ｃ－２），１０６．８（Ｃ－３），１６０．１（Ｃ－４），
１１４．９（Ｃ－５），１３８．０（Ｃ－６），１９３．７（Ｃ－７），６．９
（Ｃ－８），１０．６（Ｃ－９），１２．５（Ｃ－１０）。上述波谱数
据与２，４－二羟基－３，５，６－三甲基苯甲酸甲酯的文献
数据［１１］进行比对，鉴定化合物４为２，４－二羟基－
３，５，６－三甲基苯甲醛。
化合物５：黄色油状；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：３３２［Ｍ
＋Ｎａ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ （ＤＥＰＴ）谱
数据推断其分子式为 Ｃ１７ Ｈ２７ＮＯ４。１　Ｈ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ：７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．６
Ｈｚ，Ｈ－７），３．８５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，Ｈ－１７），
３．６８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），３．５１（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１６），３．００
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１１），１．８９ （２Ｈ，ｍ，Ｈ－８），１．７４
（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１２），１．３２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ－
１４），１．３０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１０），０．９３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４
Ｈｚ，Ｈ－１３），０．７６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ－９）；
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５ ＭＨｚ）δ：２０１．９ （Ｃ－１），
６０．５（Ｃ－２），１９６．７（Ｃ－３），１４３．９（Ｃ－４），１４９．１
（Ｃ－５），１０１．９（Ｃ－６），１５３．８（Ｃ－７），３３．２（Ｃ－８），
９．６（Ｃ－９），２２．８（Ｃ－１０），３４．６（Ｃ－１１），２８．３（Ｃ－
１２），１３．２（Ｃ－１３），１９．３（Ｃ－１４），５９．６（Ｃ－１５），
５１．９（Ｃ－１６），６２．２（Ｃ－１７）。上述波谱数据与文献
［１２］报道基本一致，因此鉴定化合物５为 ｍｙｃｏｓ－
ｐｈｉｎｅ　Ｂ。
化合物６：黄色油状；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２８８［Ｍ
＋Ｎａ］＋。结合１　Ｈ－ＮＭＲ和１３　Ｃ－ＮＭＲ （ＤＥＰＴ）谱
数据推断其分子式为 Ｃ１５ Ｈ２３ＮＯ３。１　Ｈ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ：７．６１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．１，
８．５Ｈｚ，Ｈ－７），３．６５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），３．００（１Ｈ，
２期 丘柳明，等：角果木内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｊ５４代谢产物及活性研究 ２１　
ｍ，Ｈ－１１），１．８５（２Ｈ，ｍ，Ｈ－８），１．７０（２Ｈ，ｍ，
Ｈ－１２），１．２８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，Ｈ－１４），１．２７
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１０），０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ－
１３），０．７４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ－９）；１３Ｃ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，１２５ＭＨｚ）δ：２０２．６（Ｃ－１），６０．９（Ｃ－２），
１９６．９（Ｃ－３），１４３．２（Ｃ－４），１４９．４（Ｃ－５），１０２．７
（Ｃ－６），１５０．６（Ｃ－７），３３．２（Ｃ－８），９．５（Ｃ－９），
２２．３（Ｃ－１０），３４．６（Ｃ－１１），２８．２（Ｃ－１２），１３．１
（Ｃ－１３），１９．３（Ｃ－１４），５９．６（Ｃ－１５）。上述波谱数
据与文献 ［１２］报道基本一致，因此鉴定化合物６
为ｍｙｃｏｓｐｈｉｎｅ　Ａ。
化合物７：黄色油状；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：１４９［Ｍ
＋Ｎａ］＋；结合１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ谱推测其分子
式为Ｃ６Ｈ６Ｏ３；１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ：
９．５５（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１），７．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，
Ｈ－３），６．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ－４），４．６１
（２Ｈ，ｓ，Ｈ－６）；１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）δ：
１７９．５（Ｃ－１），１５３．８（Ｃ－２），１２４．８（Ｃ－３），１１０．９
（Ｃ－４），１６３．２（Ｃ－５），５７．６（Ｃ－６）。上述波谱数据
与文献［１３］报道基本一致，因此鉴定化合物７为
５－羟甲基糠醛。
化合物８：白色粉末；ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：１６１［Ｍ
＋Ｎａ］＋；结合１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ谱推测其分子
式为Ｃ８Ｈ１０Ｏ２；１　Ｈ　ＮＭＲ （ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）
δ：７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ－２，６），６．７２
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ－３，５），３．７０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝
６．６Ｈｚ，Ｈ－８），２．７４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ－７）；
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１２５ＭＨｚ）δ：１３１．０（Ｃ－１），
１３０．９（Ｃ－２，６），１１６．１（Ｃ－３，５），１５６．７（Ｃ－４），
３９．４（Ｃ－７），６４．６（Ｃ－８）。上述波谱数据与文献
［１４］报道基本一致，因此鉴定化合物８为对羟基
苯乙醇。
３　化合物生物活性测试
３．１　体外肿瘤细胞生长抑制实验结果
以 ＭＴＴ法分别对以上９个化合物进行了体
外肿瘤细胞毒活性测试，结果显示化合物３对体
外培养的人慢性髓原性白血病细胞株Ｋ－５６２的增
殖具有抑制作用，其ＩＣ５０值为５２．２μｍｏｌ／Ｌ，以紫
杉醇为阳性对照 （ＩＣ５０＝９．５μｍｏｌ／Ｌ）。
４　结果
通过对红树植物角果木内生真菌Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
ｓｐ．Ｊ５４次生代谢产物研究，采用柱色谱进行分离
并鉴定８个化合物，其中化合物１～５均为首次从
红树植物角果木内生真菌次生代谢产物中分离得
到，并首次报道了化合物４的核磁数据。化合物３
属于聚酮类的化合物，仅在黑附球菌属次生代谢
产物中分离得到［１０］，而本文首次从青霉菌属发酵
液中分离得到，并首次报道了该化合物对肿瘤细
胞株Ｋ－５６２生长具有抑制作用，这为寻找新的活
性化合物提供研究方向，为充分利用红树植物资
源提供科学依据。
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ｐｈｏｔｏｔｒｏｐｈｉｃ　ｐｕｒｐｌｅ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　Ｒｈｏｄｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ　ｒｕｂｒｕｍ１Ｒ
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