全 文 ：· 2830· China Pharm acy 2007 Vol.18 No.36 中国药房 2007年第 18卷第 36期
正交试验优选岗松挥发油 β -环糊精包合物的制备工艺
姜平川 1 * ,麦少洁 1 ,陈妹娇 2(1.广西中医药研究院 ,南宁市 530022;2.广西中医学院 ,南宁市 530001)
中图分类号 R283;R944 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2007)36-2830-03
摘 要 目的:优选岗松挥发油 β-环糊精包合物的制备工艺 。方法:以岗松挥发油与 β-环糊精的投料比 、包合温度 、搅拌时间为 3
个因素 ,以包合物挥发油的利用率为筛选指标 ,采用正交试验进行优选 。结果:岗松挥发油 β-环糊精包合物制备的最佳工艺条件:
岗松挥发油与 β-环糊精的投料比为 1∶10 、包合温度为 50℃、包合时间为 2h 。在此条件下 ,岗松挥发油的平均利用率为 81.90%。
结论:岗松挥发油 β -环糊精包合物的制备工艺切实可行 ,对提高岗松挥发油制剂的稳定性有一定的参考价值 。
关键词 岗松挥发油;β -环糊精;包合物;正交试验;制备工艺
Optimization of Preparation Technology of Oleum Baeckeae Oil-β -Cyclodextrin Inclusion Complex by
Orthogonal Experiment
JIANG Pingchuan , MA I Shaojie(Guangxi Institute of Tradi tional Chinese M edicine , Nanning 530022 , Chi-
na)
CHEN M eijiao(Guangxi Tradi tional Chinese M edical Co llege , Nanning 530001 , China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To optimize the prepara tion technology of Oleum Baeckeae oil - β -cyclodex trin inclusion
complex.METHODS:The preparation technology f or Oleum Baeckeae o il-β -cyclodex t rin inclusion com plex w as optimized
by orthogonal experiment taking the ratio o f the Oleum Baeckeaee oil to β -cyclodex tr in , the tempera ture fo r clat hration and
the duration o f stir ring as three fac tor s and w ith the utilization ra tio o f the essential oil in Oleum Baeckeae oil inclusion complex
as index.RESU LTS:The optimal techno logical condi tion was as fo llow s:t he ra tio of the Oleum Baeckeae oil to β -cy-
clodex t rin in the inclusion com plex w as 1∶10;t he tem perature f or clathration w as 50℃, and the du ration of stir ring w as 2
hours.U nder this condition , the average utiliza tion ra tio o f Oleum Baeckeae oil w as as high as 81.90%.CONCLUSION :The
optimized preparation technology o f Oleum Baeckeae oil -β-cyclodex trin inclusion complex is feasible and serves as re ference
for the enhancing o f stability o f Oleum Baeckeae oil preparation.
KEY WORDS Oleum Baeckeae o il;β-cyclodex trin;Inclusion com plex ;Orthogonal experiment ;Preparation tech no logy
*副研究员。研究方向:植物学、 新药开发 。电话:0771-
58093113。E-mail:g xyak@126.com
岗松挥发油为桃金娘科植物岗松 Baeckea fr utescens L.
带有花果的枝叶经水蒸气蒸馏得到的挥发油 。本品具有清热利
湿 、杀虫止痒的功效 , 常用于湿疹 、瘙痒 、淋病 、疥疮 、滴虫性阴
道炎 、脚癣等症的治疗 [1 ] 。以岗松挥发油为主药的复方黄松洗
液(原名肤阴洁)具有很好的杀菌止痒作用 。据陈勇等 [ 2 ]研究 ,
岗松挥发油主要由单萜及含氧单萜 、倍半萜及含氧倍半萜 、萜
烯和少量醇 、酚等化合物组成 。岗松挥发油难溶于水 ,易溶于乙
醇;易挥发 、逸散;且为液体 ,不易运输 。有关岗松挥发油稳定措
施的研究尚未见报道 。笔者采用正交试验法考察了岗松挥发油
β -环糊精(β -CD)包合物的制备工艺 , 旨在为临床和工业生
产更好地利用岗松挥发油提供依据 。
1 材料
1.1 仪器
电子天平(上海天平仪器厂);电热套 、三颈瓶 、电动搅拌
器 、温度计 、圆底烧瓶 、球形冷凝管、胶头滴管 、锥形瓶 、漏斗 、抽
滤瓶 、布氏漏斗 、挥发油提取器 、密度计 、移液管(上海医用仪表
厂)。
1.2 试药
岗松挥发油 (广西源安堂药业有限公司);β -CD(陕西礼
泉化工有限实业公司 , 纯度>99%);茴香醛试液 、乙醇 、环己
烷 、乙醚 、乙酸乙酯均为分析纯 。
2 方法与结果
2.1 包合物的制备
准确称取 β -CD 40g , 加 400mL 蒸馏水 , 加热至一定温
度 , 缓缓加入一定量岗松挥发油 (岗松挥发油用等量乙醇稀
释),搅拌一定时间后置于冰箱内(<4℃)冷却 24h ,过滤 , 40℃
以下干燥 ,即得成品 。
2.2 挥发油利用率的测定与计算
按 2005年版《中国药典》(一部)附录 Ⅹ D 挥发油提取法甲
法测定挥发油含量 [3 ] :称取干包合物 , 放入圆底烧瓶 , 加 10倍
量水 , 接上挥发油提取器和球形冷凝管 , 自冷凝管上端加水至
充满挥发油测定器的刻度部分 , 并溢流入圆底烧瓶时为止 。用
电热套加热至有蒸汽冲出挥发油提取器 , 调节调压按钮使液滴
自冷凝管滴下的滴速为每秒 1 ～ 2滴 , 继续加热 5h , 放置片刻 ,
开启测定器下端的活塞 , 将水缓缓放出 , 至岗松挥发油层上端
到达刻度 0线上面 5mm处为止 。放置 1h , 开启活塞使岗松挥
发油层下降至其上端恰与刻度 0线平齐 , 读取岗松挥发油量。
岗松挥发油利用率按下式计算:
挥发油利用率(%)=(包合物中挥发油回收量(mL)×挥
发油密度(g ·mL -1))/(制备时投入的挥发油的量(g)×空白
回收率(%)。
经测定 ,岗松挥发油的密度为 0.891 0g ·mL -1。
中国药房 2007年第 18卷第 36期 Ch ina Pharmacy 2007 V ol.18 No.36 · 2831·
表 5 岗松挥发油包合物挥发油的利用率
Tab 5 Utilizat ion ratio of the essent ial oil of Oleum
Baeckeae oil inclusion complex
编号 投油量/ g 回收油量/mL 挥发油利用率/% x/ %
1 4.000 5 3.22 80.43 81.80
2 4.002 9 3.34 83.37
2.3 空白回收率的测定
精密称取一定量的岗松挥发油 , 加 350mL 水 ,用挥发油提
取器按上法测定挥发油回收量并计算回收率 。结果详见表 1 。
表 1 空白回收率测定结果
Tab 1 Results of blank recovery test
编号 投油量/ g 回收油量/mL 回收率/% x/% RSD /%
1 4.005 6 3.98 88.53
2 4.000 5 4.02 89.53
3 4.009 8 4.08 90.66 89.17 1.06
4 5.000 1 4.98 88.74
5 5.000 4 4.96 88.38
2.4 包合物工艺考察
采用正交试验法 , 选择挥发油与 β-CD的比例(A)、包合
温度(B)、包合时间(C)为考察因素 ,取 3水平进行 L 9(34)正交
试验 。因素水平详见表 2。
表 2 因素水平
Tab 2 Levels of factors
水平 因素
A B/ ℃ C/ h
1 1∶9 50 1
2 1∶8 60 2
3 1∶10 70 3
以岗松挥发油利用率为考察指标 , 筛选最佳工艺条件 。正
交试验结果详见表 3;方差分析结果详见表 4。
表 3 正交试验结果
Tab 3 Results of orthogonal test
编号 因素 挥发油利用率/ %A B C D
1 1 1 1 1 60.24
2 1 2 2 2 60.68
3 1 3 3 3 47.20
4 2 1 2 3 68.02
5 2 2 3 1 59.86
6 2 3 1 2 49.96
7 3 1 3 2 85.23
8 3 2 1 3 81.26
9 3 3 2 1 64.85
K 1 56.04 71.16 63.82 61.65
K 2 59.28 67.27 64.52 65.29
K 3 77.11 54.00 64.10 65.49
R 772.62 485.57 0.74 28.06
表 4 方差分析结果
Tab 4 Analyais of var iance
方差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
A 772.62 2 386.31 27.53 <0.05
B 485.57 2 242.78 17.30
C 0.74 2 0.37 0.026
误差(D) 28.06 2 14.03
注:F 1-0.05(2 , 2)=19.00;F 1-0.0 1(2 , 2)=99.00
note:F1 -0.05(2 , 2)=19.00;F 1-0.01(2 , 2)=99.00
经方差分析 ,发现 A 因素有显著意义 ,B因素接近显著值 ,
C 因素无显著意义 , 表明本试验设计较有意义 。结合 K i水平 ,
得出岗松挥发油与 β-CD 的最佳比例为 1∶10 ,最佳包合温度
为 50℃,最佳包合时间为 2h.即最佳包合工艺为 A 3B1C 2。
2.5 最佳工艺确证
精密称取挥发油 4g , 按上述最佳包合工艺进行 2次包合 ,
制得干燥包合物 ,测定并计算其挥发油利用率 。结果详见表 5。
结果表明 , 按此最佳工艺进行包合所得挥发油的利用率仅
为 81.90%, 利用率较低 , 说明岗松挥发油 β-CD 包合物的制
备工艺仍需进一步研究 。
2.6 包合物鉴别
2.6.1 薄层色谱鉴别岗松挥发油包合前后的变化:量取前述
试验蒸馏回收的岗松挥发油 0.1mL ,加 1mL乙醇稀释 ,作为供
试品溶液 。量取包合前的岗松挥发油 0.1mL , 加 1 mL 乙醇稀
释 ,作为对照品溶液 。取对照品溶液和供试品溶液各 4μL ,点于
同一硅胶 G 板上 , 用环己烷-乙醚-乙酸乙酯(8∶2.2∶1)上
行展开 13cm 左右 ,取出 ,晾干 ,喷茴香醛试液 ,于 105℃加热至
显色 。结果 , 两者在相同位
置上有紫红色斑点 , 详见图
1。表明包合前后岗松挥发
油的薄层图谱基本一致 , 包
合后岗松挥发油无变化 , 其
包合物的制备具有可行
性 。
2.6.2 稳定性考察:称取
包合物 1g , 用 2mL 乙醇溶
解 , 振摇 ,过滤 , 滤液作为供
试品溶液 。分别取供试品及
上述对照品溶液 4μL , 同上
展开 。结果 , 供试品在与对
照品相对应的位置未出现
斑点 ,详见图 2。表明岗松挥
发油包合后进入了 β -CD
分子腔内 , 形成了较为稳定
的包合物 。
3 讨论
包合技术系指一种分
子被包藏于另一种分子的
空穴结构内 , 形成包合物的
技术 。本试验所用的 β-CD
是由 7个 D-葡萄糖分子以
1 , 4糖苷键连接的环状低聚
糖化合物 , 结构为中空圆筒
形 , 内径为 0.7 ～ 0.8nm , 其
孔穴的开口处呈亲水性 , 内
部呈疏水性 , 从而可把分子结构较小 , 且难溶于水的岗松挥发
油包藏起来 ,形成包合物 。经包合后 ,药物水溶性增大 ,稳定性
提高 ,液体药物可粉末化 ,可防止挥发性成分挥发 ,掩盖不良气
味或味道 ,调节释放速率 ,提高药物的生物利用度 ,降低药物的
刺激性与毒副作用等 [4 ]。
挥发油可通过不同的方法进行包合 [5 ～ 7 ] , 本试验采用的是
饱和水溶液法 。岗松挥发油经包合后 ,可粉末化 ,同时可防止挥
发 ,从而可将其制成片剂 、颗粒剂等多种剂型 ,且方便于贮藏及
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·中药检定 ·
HPLC 法测定臁疮丸中丹参酮 ⅡA的含量 Δ
余卫兵* ,毕雪艳 ,张钢平 ,赵作连(河北邯郸市药品检验所 ,邯郸市 056001)
中图分类号 R283.64;R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2007)36-2832-02
摘 要 目的:建立以高效液相色谱法测定臁疮丸中丹参酮ⅡA 含量的方法 。方法:色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18(250mm×
4.6mm ,5μm), 流动相为甲醇-水(75∶25),流速为 1.0mL ·min -1 ,柱温为 25℃,检测波长为 270nm 。结果:丹参酮ⅡA 进样量在
0.020 2 ～ 0.202 0μg 范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r =0.999 9);平均加样回收率为 99.79%, RSD =1.01%(n =
6)。结论:本方法快捷 、简便 ,结果准确 ,可用于该制剂的质量控制 。
关键词 臁疮丸;高效液相色谱法;丹参酮ⅡA ;含量测定
Assaying of Tanshinone ⅡA in Lianchuang Pills by HPLC
YU Weibing , BI Xueyan ,ZHANG Gangping ,ZHAO Zuolian(Hebei Handan Insti tute of Drug Control , Han-
dan 056001 ,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To develop an HPLC met hod fo r the determina tion of Tanshinone ⅡA in Lianchuang pills.
M ETHODS:The chromatog raphic separation w as perfo rmed on Agilent Zorbax SB-C18 (250mm×4.6mm , 5μm)column with
co lum n tempera ture a t 25℃.T he mobile phased consisted of methanol-w ater (75∶25)at a f low rate o f 1.0mL ·min -1.The
de tection w aveleng th w as se t a t 270nm.RESU LTS:The linear range of Tanshinone Ⅱ A w as 0.020 2～ 0.202 0μg(r =0.999 9).
The average recovery w as 99.79%(RSD =1.01%, n =6).CONCLUSION :The method is simple , rapid and accurate , and it
could be used fo r the quality cont rol of Lianchuang pills.
KEY WORDS Lianchuang pills;HPLC;Tanshinone ⅡA ;Assay ing
臁疮丸是河北邯郸市中医院自制中药制剂 ,由黄芪 、丹参 、
金银花 、甘草 、三棱、莪术等中药组成 ,具有舒筋活血 、补气生肌
的作用 ,临床用于臁疮(小腿慢性溃疡)的治疗 。经该医院多年
临床验证 ,疗效较好 。丹参为方中主药 ,丹参酮ⅡA为其主要活
性成分 。该制剂原标准只有黄芪及金银花的定性检测 , 为有效
控制产品质量 , 笔者采用高效液相色谱(HPLC)法对臁疮丸中
丹参酮ⅡA的含量进行测定 , 方法快捷 、简便 , 结果准确 , 可用
于该制剂的质量控制 。
1 仪器与试药
LC-2010AHT 型高效液相色谱仪 , 包括紫外可见检测
器 、LC-So lution色谱工作站(日本岛津公司);T 1810型紫外
可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);AUW 120D型
电子天平(日本岛津公司)。丹参酮ⅡA 对照品(中国药品生物
制品检定所 ,批号:110766-200417);臁疮丸(邯郸市中医院自
制 , 规格:每丸 9g , 批号:060901 、 060902 、 060903 、061006 、
061007 、061008);甲醇为色谱纯 ,水为纯化水 ,其它试剂均为分
析纯 。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱 :Agilent Zorbax SB -C 18(250mm ×4.6mm ,
5μm);流动相:甲醇-水(75∶25);检测波长:270nm;流速:
1.0mL ·min -1 ;柱温:25℃;进样量:5μL 。理论塔板数按丹参
Δ河北省 2006年科学技术攻关项目资助课题(06276464)
*主管药师。研究方向:药物分析。电话:0310-3111576-8007。
E-mail:hdyuweibing8978@sina.com.cn
运输 。若能应用于生产 ,则会带来较大的经济及社会效益 。
参考文献
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(收稿日期:2007-02-18 修回日期:2007-06-20)