全 文 ：— 1 —现代中药研究与实践2015年第29卷第2期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.2
·药材生产·
作者简介：范　源， （1966-）男，在读博士，副教授，硕士生导师，研究方向：天然产物活性及机制研究。E-mail ：1647909799@qq.com
通讯作者： 林　青， （1961-）女，教授， 研究方向：中药药效与物质基础研究、中医治则治法对机体微环境调节作用的研究。E-mail ：13619639329@139.com
不同防腐方法对民族药余甘子汁褐变的影响及分析

范　源 1，徐志平 2，张建博 1，赵江盛 2，楼牧梦 2，郭　雪 1，
周国丽 1，郑仕萍 1，林　青 1*
(1. 云南中医学院，云南 昆明 650500 ；2. 云南龙润集团有限公司，云南 昆明 650101）
摘　要：目的　比较不同防腐方法对余甘子汁褐变的影响。方法　在余甘子汁中分别加入 0.03% 山梨
酸钾、1.2% 氯化钠溶液、20% 蔗糖溶液、0.005% 茶多酚溶液、0.005% 普洱茶提取物溶液，应用高效液相色
谱法及紫外分光法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性及没食子酸、维生素C含量变化。结果　与其它组相
比，加入 0.005% 普洱茶提取物、1.2% 氯化钠、20% 蔗糖的混合溶液的余甘子汁组其没食子酸含量上升的幅
度最小；加入 1.2% 氯化钠溶液的余甘子汁组其维生素C含量和 SOD活性变化最小。结论　应用天然防腐
剂（0.005% 普洱茶提取物溶液）与传统防腐剂（1.2% 氯化钠溶液、20% 蔗糖溶液）的混合溶液防止余甘子
褐变的效果最好；应用传统防腐剂（1.2% 氯化钠溶液）可较好的保护 SOD活性及维持维生素C含量，其
结果优于化学防腐剂（0.03% 山梨酸钾溶液）组。
关键词：余甘子汁；褐变；防腐；没食子酸；维生素C；超氧化物歧化酶
中图分类号：S567 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)02-01-04
doi: 10.13728/j. 1673-6427. 2015. 02. 001
The Analysis of Different Methods in Preventing the Emblic Fruit Juice from Browning
FAN Yuan1, XU Zhi-ping2, ZHANG Jian-bo1, ZHAO Jiang-sheng2, LOU Mu-meng2,
GUO Xue1, ZHOU Guo-li1, ZHENG Shi-Ping1, LIN Qing1*
(1. Yunnan University of Traditional Chinese Medicine, Kunming 650500, China;
2. Longrun Group, Kunming 650101, China)
Abstract: Objective To compare the effect on the emblic juice browning in different anti-corrosion methods.
Methods The 0.03% of sorbic acid potassium solution, 1.2% of the salt solution, 20% of the sugar solution,
0.005% of tea polyphenols solution, 0.005% of pu-erh tea extract solution were added respectively in emblic
juice and the activity of superoxide dismutase ( SOD), the content of gallic acid and vitamin C were measured
by UV spectrophotometry and high performance liquid chromatography(HPLC). Results Compared with other
groups ,the rise of the content of gallic acid in the emblic fruit juice which mixed the 0.005% of pu-erh tea extract
solution, 1.2% of the salt solution and 20% of the sugar solution was most unobvious; the change of the content
of vitamin C and the activity of SOD in the emblic fruit juice which added the 1.2% of the salt solution was
least. Conclusion The mixed of natural preservatives(0.005% of pu-erh tea extract solution) and the traditional
preservatives (1.2% of the salt solution, 20% of the sugar solution) prevents emblic fruit juice browning effect is
best. Using traditional preservatives(1.2% of the salt solution, 20% of the sugar solution) can preferably protect
the activity of SOD and the content of vitamin C, the result is better than the chemical preservatives (0.03% of
sorbic acid potassium solution).
Key words: emblic juice; browning; anti-corrosion; gallic acid; vitamin C; SOD
余甘子Phyllanthus emblica L. 是大戟科叶下珠
属。主要生长在中国亚热带、热带部分地区，特别是
干热河谷地区的落叶乔木或灌木资源植物。主要分布
于云南、广西、广东、福建等省区 [1]。在药用上，余
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甘子具有清热凉血，健胃消食，生津止渴等作用 [2]。
在食品中，余甘子含有多种维生素、单宁、超氧化物
歧化酶 (SOD) 等，具有较强的抗氧化作用，是美容护
肤延缓衰老的极佳食品 [3]。由于余甘子在生产过程中
易发生褐变，贮藏时间短，影响产品质量，导致不必
要的资源浪费 [4]。本文对余甘子汁加工过程中防止褐
变的不同防腐方法与结果进行分析，为提高余甘子汁
的生产质量提供一定依据及参考。
1　实验材料与方法
1.1　实验材料
余甘子汁：云南省临沧地区采摘新鲜余甘子，
由云南中医学院赵荣华教授鉴定为余甘子Phyllanthus
emblica L. 的果实，经清洗、风干、粉碎、压榨、过
滤、灭菌等工序加工而成。分组如下：敞口保存组；
密闭保存组；1.2 % 氯化钠溶液密封保存组；20 % 蔗
糖溶液密封保存组；0.005 % 茶多酚溶液密封保存组；
0.005 % 普洱茶提取物溶液密封保存组；0.03 % 山梨
酸钾溶液密封保存组；20 % 蔗糖、1.2 % 氯化钠、0.00
5% 普洱茶提取物混合溶液密封保存组。
1.2　实验方法
1.2.1　没食子酸含量测定方法
（1）试剂与仪器　　甲醇（色谱纯）；磷酸；纯
化水；没食子酸对照品（购自云南省药检所，含量为
98%）。Agilent1100型高效液相色谱仪（VWD检测器）。
（2）方法　　色谱条件与系统适用性试验：以
十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；以甲醇：0.2 % 磷
酸溶液（5：95）为流动相；检测波长为 273 nm，恒
温 25℃；进样量 10 μl ；流速：1 ml·min-1。理论塔
板数按没食子酸峰计算应不低于 2 000。
对照品溶液的制备：取没食子酸对照品适量，精
密称定，加50 %甲醇制成每1 ml含0.025 mg的溶液，
即得。
供试品溶液的制备：取约 200 g 余甘子果实榨汁
后，称取原果汁约 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
精密加入 50 % 甲醇 50 ml，称定重量，加热回流 1 h，
放冷，再称定重量，用 50% 甲醇补足减失的重量，
摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：应用 Agilent1100 高效液相色谱仪分别
精密吸取对照品溶液 0.01 ml 与供试品溶液 0.01 ml，
测定，即得。
计算方法：外标法计算。
1.2.2　余甘子中超氧化物歧化酶活性的测定
（1）试剂与仪器　　 A 液：pH 8.20 的 0.1
mol·L-1 三羟甲基氨基甲烷 - 盐酸缓冲液（内含 1
mmol·L-1 EDTA·2Na）。称取 1.211 4 g 三羟甲基
氨基甲烷和 37.2 mgEDTA·2Na 溶于 0.1 mol·L-1 盐
酸溶液 62.4 ml，用蒸馏水定溶至 100 ml。B 液：4.5
mmol·L-1 邻苯三酚盐酸溶液。称取邻苯三酚 56.7 mg
溶于少量 10 mmol·L-1 盐酸溶液，并用蒸馏水定容
至 100 ml。10 mmol·L-1 盐酸溶液。蒸馏水。样液的
制备：称取鲜余甘子果实约 200 g 榨汁，取原汁约 10
ml 经 4 000 r·min-1 离心 15 min，再精密量取上清液
1 ml 于 25 ml 容量瓶中用蒸馏水定容至刻度待测。
紫外 - 可见分光光度计：岛津 UV2450 型；精
密酸度计（0.01 pH）；离心机：10 ml 比色管；10 ml
离心管；玻璃乳钵。
（2）方法　　邻苯三酚自氧化速率测定：在
25℃左右，于 10 ml 比色管中依次加入 A 液 2.35
ml，蒸馏水 2.00 ml，B 液 0.15 ml。加入 B液后立即
混合并倾入比色皿，分别测定在 325 nm 波长条件
下初始时和 1 min 后吸光值，二者之差即邻苯三酚
自氧化速率△ A325（min-1） （步骤一）。本试验确定
△ A325（min-1）为 0.060。
样液和SOD酶液抑制邻苯三酚自氧化速率测定：
在步骤一的基础上分别加入一定量样液和酶液使抑
制邻苯三酚自氧化速率约为 1/2 △ A325（min-1），即
△ A325（min-1）为 0.030。
SOD 活性测定加样程序见表 1。
表 1 SOD活性测定加样表
Tab.1 SOD activity was measured sample table
试液 空白 样液 SOD液
A液 /ml 2.35 2.35 2.35
蒸馏水 /ml 2.00 1.80 1.80
橄榄汁样液 /ml — 0.02 0.02
B 液 /ml 0.15 0.15 0.15
计算公式为：
式中：U/ml—SOD 酶活力单位；△ A325—邻苯
三酚自氧化速率；△ A325—样液或酶液抑制邻苯三
酚自氧化速率；V—所加酶液或样液体积，单位为毫
升（ml）；D—酶液或样液的稀释倍数；4.5—反应液
总体积，单位为毫升（ml）。
1.2.3　余甘子中总抗坏血酸 ( 维生素 C) 含量的测定
（1）试剂与仪器　　 4.5 mol·L-1 硫酸溶液；
85 % 硫酸溶液；2，4- 二硝基苯肼溶液（20 g·L-1）；
草酸溶液（20 g·L-1）；草酸溶液（10 g·L-1）；硫脲
溶液（10 g·L-1）：5 g 硫脲溶解于 500 ml 草酸溶液（10
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g·L-1）中；硫脲溶液（20 g·L-1）：10 g 硫脲溶解于
500 ml 草酸溶液（10 g·L-1）中。1 mol·L-1 盐酸溶液；
抗坏血酸标准溶液：精密称取 100 mg 纯抗坏血酸溶
解于 100 ml 草酸溶液（20 g·L-1）中，此溶液每毫
升相当于 1 mg 抗坏血酸；活性炭：将 100 g 活性炭
加入1 mol·L-1盐酸溶液750 ml，回流1 h至2 h，过滤，
用水洗数次，至滤液中无铁离子（Fe3+）为止，然后
置于 110℃烘箱中烘干 ( 检验铁离子方法：利用普鲁
士蓝反应。将 20 g·L-1 亚铁氰化钾溶液与 1 % 盐酸
溶液等量混合，将上述洗出滤液滴入，如有铁离子则
产生蓝色沉淀 )。
恒温箱：37±0.5℃；可见 -紫外分光光度仪 : 岛
津 UV2450 型；捣碎机。
（2）方法　　试样准备全过程中避光处理。称
取 100 g 鲜余甘子果肉并吸取 100 ml 浓度为 20 g·L-1
的草酸溶液，倒入捣碎机中打成匀浆，取 0.2 ~ 1 g 匀
浆（含 1 ~ 2 mg 抗坏血酸）倒入 100 ml 容量瓶中，
用10 g·L-1草酸溶液稀释至刻度，混匀。将溶液过滤，
不易过滤的试样可用离心机离心后，倾出上清液过
滤，取 25 ml 滤液，加入 2 g 活性炭，振摇 1 min，过滤，
弃去最初数毫升滤液。取 10 ml 滤液，加入 10 ml 浓
度为 20 g·L-1 的硫脲溶液，混匀，此试样为稀释液。
于三个试管中各加入 4 ml 稀释液，一个试管作为空
白，在其余试管中加入 1.0 ml 浓度为 20 g·L-1 的 2、4-
二硝基苯肼溶液，将所有试管放入 37℃±0.5℃恒温
箱或水浴中，保温 3 h 后取出，除空白管外，将所有
试管放入冰水中。空白管取出后使其冷却到室温，
然后加入 1.0 ml 浓度为 20 g·L-1 的 2，4- 二硝基苯
肼溶液，在室温中放置 10 ~ 15 min 后放入冰水内，
其余步骤同试样。当试管放入冰水后，向每一试管
加入 5 ml 浓度为 85 % 的硫酸溶液，滴加时间至少需
要 1 min，需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，
在室温放置 30 min 后比色。用 1 cm 比色皿，以空白
液调零后，于 500 nm 波长测吸光值。
（3）标准曲线的绘制　　加 2 g 活性炭于 50 ml
标准溶液中，振摇 1 min，过滤。取 10ml 滤液放入
500 ml 容量瓶中，加 5.0 g 硫脲，用 10 g·L-1 草酸
溶液稀释至刻度，抗坏血酸浓度 0.02 mg·ml-1。取
5, 10, 20, 25, 40, 50, 60 ml 稀释液，分别放入 7个 100
ml 容量瓶中，用 10 g·L-1 硫脲溶液稀释至刻度，
使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为 0.001, 0.002,
0.004, 0.005, 0.008, 0.01, 0.012 mg·ml-1。按顺序脎并
比色。以吸光值为纵坐标，抗坏血酸浓度（mg·ml-1）
为横坐标绘制标准曲线。
计算公式为：
式中 X—试样中总抗坏血酸含量，单位为毫克每
百克（mg/100 g）；c—由标准曲线查得或由回归方程
算得“试样氧化液”—中总抗坏血酸的浓度，单位为
微克每毫升（mg·ml-1）；V—试样用 10 g·L-1 草酸
溶液定容的体积，单位为毫升（ml）；F—试样氧化
处理过程中的稀释倍数；m—试样的质量，单位为克
（g）；计算结果表示小数点后两位。
精密度：在重复性条件下获得的两次独立测定结
果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。
2　结果与分析
按每 10 d 一次测定周期测定的余甘子中没食子
酸含量见表 2，维生素 C含量见表 3，超氧化物岐化
酶活力见表 4。
表 2 余甘子中没食子酸含量
Tab. 2 The content of gallic acid of Phyllanthus emblica
测定数据（%） 平均值（%）
P 值
第一次 第二次 第一次 第二次
敞口保存组（CK）
0.223 1.00
0.22 0.95 0.0060.218 1.02
0.224 0.85
密封保存
(MF)
0.223 0.93
0.22 0.96 0.0010.218 1.00
0.224 0.94
20% 的蔗糖密封保
存 (20%TM)
0.223 0.76
0.22 0.76 0.0010.218 0.75
0.224 0.76
1.2% 的氯化钠密
封保存 (1.2%YM)
0.223 0.88
0.22 0.88 0.0010.218 0.89
0.224 0.88
0.005% 的茶
多酚密封保存
(0.005%CDFM)
0.223 1.03
0.22 1.02 0.0010.218 1.02
0.224 1.00
0.005% 普茶提
取物密封保存
(0.005%CTQWM)
0.223 0.95
0.22 0.99 0.0010.218 1.04
0.224 0.99
0.03% 的山梨
酸钾密封保存
(0.03%SJM)
0.223 0.74
0.22 0.71 0.0040.218 0.65
0.224 0.75
蔗糖、氯化钠、普
洱茶提取物密封保
存 (HFM)
0.223 0.43
0.22 0.45 0.0040.218 0.45
0.224 0.48
注：第一次实验数据都是原汁的测定数据。
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表 3 余甘子中维生素C含量
Tab.3 The content of vitamin C of Phyllanthus emblica
测定数据（mg/100g） 平均值（mg/100g） P 值第一次 第二次 第一次 第二次
敞口保存
（CK）
36.3 30.15
36.6 30.15 0.00136.69 30.15
36.70 30.15
密封保存
(MF)
36.3 32.90
36.6 32.3 0.00936.69 32.00
36.70 32.14
20% 的蔗糖密封保
存 (20%TM)
36.3 28.76
36.6 28.5 0.00236.69 28.68
36.70 27.97
1.2% 的氯化钠密
封保存 (1.2%YM)
36.3 34.72
36.6 34.2 0.02636.69 33.99
36.70 33.94
0.005% 的茶
多酚密封保存
(0.005%CDFM)
36.3 31.65
36.6 31.6 0.00336.69 31.97
36.70 31.16
0.005% 普茶提
取物密封保存
(0.005%CTQWM)
36.3 31.89
36.6 32.0 0.00136.69 32.10
36.70 32.05
0.03% 的山梨
酸钾密封保存
(0.03%SJM)
36.3 23.45
36.6 23.5 0.00136.69 23.21
36.70 23.73
蔗糖、氯化钠、普
洱茶提取物密封保
存 (HFM)
36.3 27.55
36.6 28.0 0.00136.69 28.28
36.70 28.05
表 4 余甘子中超氧化物岐化酶活力
Tab.4 The activity of SOD of Phyllanthus emblica
测定数据 (μ·ml-1) 平均值 (μ·ml-1) P 值第一次 第二次 第一次 第二次
敞口保存
(CK)
4 877.6 2 879.5
4 786.4 2 879.5 0.0084 515.0 2 946.4
4 966.6 2 812.5
密封保存
(MF)
4 877.6 4 650.0
4 786.4 4 660.4 0.6164 515.0 4 800.0
4 966.6 4 531.2
20% 的蔗糖密封保
存 (20%TM)
4 877.6 4 023.8
4 786.4 4 113.3 0.0514 515.0 4 158.0
4 966.6 4 158.0
1.2% 的氯化钠密
封保存 (1.2%YM)
4 877.6 4 764.3
4 786.4 4 765.6 0.8724 515.0 4 721.3
4 966.6 4 811.1
0.005% 的茶
多酚密封保存
(0.005%CDFM)
4 877.6 4 573.8
4 786.4 4 573.8 0.2644 515.0 4 573.8
4 966.6 4 573.8
0.005% 普茶提
取物密封保存
(0.005%CTQWM)
4 877.6 4 375.0
4 786.4 4 267.2 0.0074 515.0 4 062.5
4 966.6 4 364.2
0.03% 的山梨酸钾
密封保存
4 877.6 3 889.7
4 786.4 3 822.6 0.0064 515.0 3 688.5
4 966.6 3 889.7
蔗糖、氯化钠、普
洱茶提取物密封保
存 (HFM)
4 877.6 4 158.0
4 786.4 4 158.0 0.0454 515.0 4 158.0
4 966.6 4 158.0
图 1 根据以上数据的平均值统计的柱状图
Fig.1 According to statistical data, the average of the above histogram
注：系列 1为第一次试验数据
　　系列 2为第二次试验数据
图 2 根据以上数据的平均值统计的柱状图
Fig.2 According to statistical data, the average of the above histogram
注：系列 1为第一次试验数据
　　系列 2为第二次试验数据
图 3 根据以上数据的平均值统计的柱状图
Fig. 3 According to the statistics of the histogram above the average of
the data
注：系列 1为第一次试验数据
　　系列 2为第二次试验数据
试验数据显示：在余甘子汁中加入 20 % 蔗糖、1.2
% 氯化钠、0.005 % 普洱茶提取物混合溶液其没食子
酸含量上升幅度最小，加入 0.03 % 山梨酸钾溶液密
封保存组效果次之，密封保存组和敞口保存组没食子
酸含量上升最为明显；加入 1.2 % 氯化钠溶液的余甘
（下转第 7页）
— 7 —现代中药研究与实践2015年第29卷第2期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.2
5.4.1　灰斑病　　病原为真菌中的一种半知菌，以
5～ 7月多发，为害叶片。初期产生褐色病斑，后期
病斑产生灰色霉状物。防治方法：（1）清洁田园，发
现病株及时拔除烧毁。（2）发病初期用 40％灭菌丹
400 ～ 500 倍液喷雾。
5.4.2　轮纹病　　为害茎、叶、果荚。病斑近圆形，
轮纹不明显，后期密生黑色小点。防治方法：（1）清
洁田园，发现病株及时拔除烧毁。（2）发病初期用
40％灭菌丹 400 ～ 500 倍液喷雾。
5.4.3　蚜虫　　苗期为害严重。防治方法：40% 乐
果 2 000 倍液喷雾防治。
6 　采收加工
草决明秋分时节即可逐渐成熟，当桓株上的荚果
由绿变为黄褐色或黄白色时，可摘除荚果晾晒收打，
打出的种子去杂晒干，贮存在通风干燥阴凉处。种子
以颗粒饱满、色绿棕者为佳。
7　质量要求 [2]
药材质量应符合 2010 年版《中华人民共和国药
典》（一部）的要求。
8　包装贮运 [3]
8.1　包装
经干燥、检验合格后的决明子装入聚乙烯薄膜袋
中并密封，包装材料应符合国家 GB6264—86《中药
材袋运输包装件》的要求。
8.2　贮藏
将包装好的决明子置干燥、阴凉、通风处贮藏。
8.3　运输
运输过程中严禁与有毒货物混装。要求运输车辆
清洁、干燥、通风、防潮。
参考文献
[1]　尚文艳 . 决明子种植密度研究 [J]，《北方园艺》，2013 (22) : 167-169.
[2]　国家药典委员会 . 中华人民共和国药典（一部）[S]，北京 : 中国医药科
技出版社，2010:135 - 136.
[3]　任德权，周荣汉 . 中药材生产质量管理规范（GAP）实施指南［M］，北京 :
中国农业出版社，2003: 221 - 236.
收稿日期：2014-05-28
（上接第 4页）
子汁组其维生素 C含量变化最小，密封保存组的 Vc
含量高于敞口保存组，加入 0.03 % 山梨酸钾溶液密
封保存组其 Vc 含量下降最为明显；加入 1.2 % 氯化
钠溶液密封保存组超氧化物岐化酶活性下降幅度最
小，0.03 % 山梨酸钾溶液组下降明显，敞口保存组
下降最为明显。
结果提示：采用 20 % 蔗糖、1.2 % 氯化钠、0.005
% 普洱茶提取物混合溶液防腐的方法抑制没食子酸
上升效果最佳，没食子酸是余甘子褐变的早期敏感指
标 [5]，天然防腐法及传统防腐法的恰当组合有防止余
甘子汁褐变的作用；运用传统防腐方法（1.2 % 氯化
钠溶液）可有效保持余甘子汁维生素 C含量和超氧
化物岐化酶活性稳定。
有研究报道：褐变与多酚化合物、氧的含量及多
酚氧化酶（PPO）等密切相关 [6]。普洱茶提取物对羟
自由基和 DPPH·自由基有清除作用 [7-9]，可有效抑
制果汁的褐变。果汁中由于温度、含氧量等一些环
境因素的变化容易使维生素含量降低 [9] ；利用氯化钠
溶液等传统防腐方法可以防止余甘子果汁产生微生
物，保持果汁中 Vc 的含量。而山梨酸钾等化学防腐
方法起防腐作用的是利用未解离的分子与微生物酶
系统中的巯基结合 , 破坏许多重要酶系 , 从而起到抗
菌、防腐作用 [10]。
3　结论
余甘子汁在加工过程中较易发生褐变，应用天然
防腐剂普洱茶提取物和传统防腐剂蔗糖及氯化钠对
防止褐变发生、Vc 含量下降及超氧化物岐化酶活性
降低有较为明显的保护作用，进一步研究其详尽机制
对提升相关中药生产质量有一定价值。
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收稿日期：2014-05-16