全 文 ：书ＤＯＩ：１０．１６８７２／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７１－４６５２．２０１６．０３．００６
长梗冬青苷对小鼠肝损伤及大鼠肌损伤的影响
戎　毅１，３，沈彦君２，王　娟２，张亚琦２，范　云２，孙　云２，孙卫东２，３＊
（１．南京中医药大学 中医学院，江苏 南京２１００４６；２．扬州大学 医学院，江苏 扬州２２５００１；
３．南京中医药大学 扬州附属医院，江苏 扬州２２５００９）
摘　要：为建立小鼠化学性、药物性肝损伤模型及大鼠腓肠肌损伤模型，给予长梗冬青苷（ＰＥ）及辛伐他汀（ＳＩＭ）干预，
分别检测小鼠血清谷草转氨酶（ＡＳＴ）、Ｔ淋巴细胞白血病（ＡＬＴ）水平和大鼠血清肌酸激酶（ＣＫ）、肌酸激酶同工酶（ＭＢ）
水平。制备小鼠肝脏、大鼠腓肠肌组织切片，光镜观察组织形态学变化，分析ＰＥ对肝损伤、肌损伤有无影响。结果表
明：ＰＥ对肝损伤小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平升高、肌损伤大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平上升均呈抑制作用；组织形态学观察显示
ＰＥ可改善肝损伤小鼠肝纤维化，抑制肝脏炎性细胞浸润。ＰＥ对肌损伤大鼠肌纤维断裂、肌间质肿胀有显著改善作用。
说明ＰＥ对化学性与药物性肝损伤及物理性肌损伤无不良影响且有改善作用；ＰＥ对ＳＩＭ加重的肝损伤与肌损伤亦有一
定的改善作用。
关键词：长梗冬青苷；肝损伤；腓肠肌损伤
中图分类号：Ｒ　２８５．５　　　　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７１－４６５２（２０１６）０３－００２４－０６
Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｅｄｕｎｃｕｌｏｓｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ
ｔｈｅ　ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｄａｍａｇｅ　ｉｎ　ｒａｔ
ＲＯＮＧ　Ｙｉ　１，３，ＳＨＥＮ　Ｙａｎｊｕｎ２，ＷＡＮＧ　Ｊｕａｎ２，ＺＨＡＮＧ　Ｙａｑｉ　２，
ＦＡＮ　Ｙｕｎ２，ＳＵＮ　Ｙｕｎ２，ＳＵＮ　Ｗｅｉｄｏｎｇ２，３
（１．Ｃｏｌｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄ，Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｕｎｉｖ　ｏｆ　Ｔｒａｄ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００４６，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｃｏｌｌ　ｏｆ　Ｍｅｄ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　２２５００１，Ｃｈｉｎａ；
３．Ａｆｆｉｌ　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｈｏｓｐ，Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｕｎｉｖ　ｏｆ　Ｔｒａｄ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　２２５００９，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｅｄｕｎｃｕｌｏｓｉｄｅ（ＰＥ）ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　ｄｒｕｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｄａｍａｇｅ　ｉｎ　ｒａｔ．Ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌｓ　ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ　ａｂｏｖｅ　ｗｅｒｅ　ｇａｖａｇｅｄ　ｗｉｔｈ　ＰＥ　ｏｒ　ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ（ＳＩＭ）ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＰＥ　ｏｎ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ　ｒａｔ．Ｗｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＡＳＴ，ＡＬＴ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ＣＫ，ＭＢ　ｉｎ　ｒａｔ，ａｎｄ
ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＰＥ　ｃｏｕｌｄ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ
ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＡＳＴ　ａｎｄ　ＡＬＴ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ，ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ＣＫ　ａｎｄ　ＭＢ　ｉｎ　ｒａｔ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｉｎｊｕｒｙ．
Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ＰＥ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｔｈｅ　ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌ，ａｎｄ　ｒｅｖｅｒｓｅｄ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｓ　ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈ
ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ａｄｄｉｔｉｏｎａｌｙ，ＰＥ　ｃｏｕｌｄ
ｉｍｐｒｏｖｅ　ｂｏｔｈ　ｍｙｏｆｉｂｒｉｌ　ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ　ｍｕｓｃｌｅ　ｓｗｅｌｉｎｇ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ＰＥ　ｃｏｕｌｄ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｓ
ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ．Ｉｔ　ｗａｓ　ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ　ｔｈａｔ　ＰＥ　ｈａｄ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｏｒ　ｄｒｕｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ
ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｄａｍａｇｅ　ｉｎ　ｒａｔ．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ＰＥ　ｃｏｕｌｄ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｔｈｅ　ｄａｍａｇｅ　ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ　ｂｙ　ＳＩＭ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｐｅｄｕｎｃｕｌｏｓｉｄｅ；ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ；ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｄａｍａｇｅ
长梗冬青苷（ＰＥ）又名具栖冬青苷或救必应甲素，对大鼠高脂血症具有调节作用，得自冬青科冬青
属植物铁冬青（Ｉｌｅｘ　ｒｏｔｕｎｄａ　Ｔｈｕｎｂ．）的树皮（中药名称“救必应”，具有清热解毒，消肿止痛等功效）。
他汀类药物为目前调脂－抗动脉粥样硬化的代表药，广泛用于临床已有多年，调脂作用明显，有报
道［１］认为２０％患者对其不敏感，且不良反应较多，常见的不良反应为肝毒性和肌肉毒性。１９９９年
收稿日期：２０１５－１２－１０
基金项目：江苏省自然科学基金面上项目（ＨＫ２０１６１３４０）；扬州市社会发展项目（ＹＺ２０１４１８７）
作者简介：戎毅（１９９４－　），女，江苏扬州人，南京中医药大学本科生，主要从事中医药研究。
＊ 通信作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｙｙｋｊｃ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
第３７卷第３期 扬州大学学报（农业与生命科学版） Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．３
２０１６年９月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｓｅｐ．２０１６
书Ｆａｒｂｏｏｄｎｉａｙ等［２］研究表明ＰＥ具有降低血脂作用，迄今尚未见ＰＥ对肝脏和肌组织影响的研究报道，如
果ＰＥ可有效调脂且安全性高，这将对研发成新型抗动脉粥样硬化药物具有良好的前景。
本试验通过建立小鼠化学性、药物性肝损伤模型、大鼠物理牵拉腓肠肌损伤模型，分别给予ＰＥ干
预，初步评价ＰＥ对试验动物模型肝脏及肌肉组织的影响。
１　材料与方法
１．１　药品与试剂
长梗冬青苷（ＰＥ）为白色粉末，含量＞９８．５％，由安士制药（中山）公司提供；辛伐他汀（ＳＩＭ）杭州默
沙东制药公司产品，批号为１２０９８４。异烟肼（ＩＮＨ）上海信谊黄河制药公司产品，批号为１３０１０１；利福平
（ＲＦＰ）上海信谊黄河制药公司产品，批号为Ｓ１２１１０３。天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）
试剂盒、肌酸激酶（ＣＫ）和肌红蛋白（ＭＢ）试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品，批号分别为
２０１３１２１７、２１３１２２４、２０１３１２１１、２０１３１２１０。
１．２　试验动物
清洁级ＩＣＲ雄性小鼠１４４只，体重（２０±２）ｇ，由扬州大学比较医学中心提供［许可证号ＳＣＸＫ
（苏）２０１２－０００９］；清洁级 Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠６０只，体重１６０～１８０ｇ，由扬州大学比较医学中心提供［许
可证号ＳＣＸＫ（苏）２０１２－０００９］。适应性喂养１周，自由进食和饮水，环境温度（２２±２）℃，相对湿度（５０
±５）％，灯光明暗各１２ｈ。
１．３　试验仪器
酶标仪（美国伯腾仪器公司）；低温冷冻离心机（德国Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司）；正置显微镜（日本尼康公
司）；电子天平（上海越平科学仪器公司）。
１．４　分组给药及造模
１）ＣＣｌ４ 诱导小鼠肝损伤：ＩＣＲ小鼠随机分为正常组、模型组、ＳＩＭ 组（ＳＩＭ　５０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＰＥ低
剂量组（ＰＥ－Ｌ，ＰＥ　１０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＰＥ高剂量组（ＰＥ－Ｈ，ＰＥ　２０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组（ＳＩＭ＋
ＰＥ－Ｈ，ＳＩＭ　５０ｍｇ·ｋｇ－１＋ＰＥ　２０ｍｇ·ｋｇ－１），每组１２只。每天上午８时，分别灌胃予相应的受试品，正
常组、模型组给予等容量０．５％ＣＭＣ－Ｎａ溶液，连续给予１０ｄ。末次给予后１ｈ，各组按０．０１ｍＬ·ｇ－１剂量
腹腔注射０．２％ＣＣｌ４ 橄榄油溶液，正常组腹腔注射等体积橄榄油。
２）ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导小鼠肝损伤：ＩＣＲ小鼠随机分为正常组、模型组、ＳＩＭ 组（ＳＩＭ　５０ｍｇ·ｋｇ－１）、
ＰＥ低剂量组（ＰＥ－Ｌ，ＰＥ　１０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＰＥ高剂量组（ＰＥ－Ｈ，ＰＥ　２０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组
（ＳＩＭ＋ＰＥ－Ｈ，ＳＩＭ　５０ｍｇ·ｋｇ－１＋ＰＥ　２０ｍｇ·ｋｇ－１），每组１２只。每天上午８时，各组小鼠均灌胃给
予ＩＮＨ＋ＲＦＰ（１００ｍｇ·ｋｇ－１），间隔２ｈ灌胃给予相应的受试品，正常组、模型组给予等容量０．５％
ＣＭＣ－Ｎａ溶液，连续给予１５ｄ。
３）负重引发大鼠腓肠肌损伤：Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为正常组、模型组、ＳＩＭ 组（ＳＩＭ　２０ｍｇ·ｋｇ－１）、
ＰＥ低剂量组（ＰＥ－Ｌ，ＰＥ　１０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＳＩＭ＋ＰＥ低剂量组（ＳＩＭ＋ＰＥ－Ｌ，ＳＩＭ　２０ｍｇ·ｋｇ－１＋ＰＥ
１０ｍｇ·ｋｇ－１）、ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组（ＳＩＭ＋ＰＥ－Ｈ，ＳＩＭ　２０ｍｇ·ｋｇ－１＋ＰＥ　２０ｍｇ·ｋｇ－１），每组１０只。
各组灌胃给予相应剂量的受试品，正常组、模型组给予等容量０．５％ ＣＭＣ－Ｎａ溶液，连续１５ｄ。给药
至试验第１３天，除正常组外，其余大鼠腹腔注射（ｉｐ）１０％水合氯醛（３ｍＬ·ｋｇ－１）麻醉，将大鼠固定，
后肢定位，使膝盖延伸与踝关节呈９０°。将相对于大鼠体重１．５倍的沙袋分别悬挂于大鼠左、右后肢，持
续负重２０ｍｉｎ，休息５ｍｉｎ，再负重２０ｍｉｎ［３］，造模后继续干预至第１５天。
１．５　指标检测
化学性、药物性肝损伤小鼠试验末内眦取血，分离血清，测定血清ＡＳＴ、ＡＬＴ活力；腓肠肌损伤大
鼠试验末内眦取血，分离血清，测定血清ＣＫ、ＭＢ水平；处死小鼠取肝左叶、分离腓肠肌，置于１０％甲醛
溶液固定，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，制作组织切片，Ｈ＆Ｅ染色，光学显微镜下观察组织
病理学改变。
１．６　统计学处理
用ＳＰＳＳ　２０．０统计软件进行分析，各组均数比较采用单因素方差分析法，组间比较采用ｔ检验。
５２第３期 戎　毅等：长梗冬青苷对小鼠肝损伤及大鼠肌损伤的影响
２　结果与分析
２．１　ＰＥ对ＣＣｌ４ 和ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导的肝损伤小鼠血清ＡＳＴ和ＡＬＴ水平的影响
ＣＣｌ４ 及ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导的肝损伤模型小鼠血清 ＡＳＴ、ＡＬＴ水平均显著升高，与正常组比较，差异
显著（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１），表明成功建立小鼠肝损伤模型。ＰＥ对ＣＣｌ４ 诱导的肝损伤小鼠血清ＡＳＴ、
ＡＬＴ水平无不良影响，且可显著降低肝损伤小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平，与模型组比较，差异显著（Ｐ＜
０．００１、Ｐ＜０．０１）；高剂量的ＰＥ可显著降低ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导的肝损伤小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平，与模
型组比较，差异显著（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）；而ＳＩＭ 对ＣＣｌ４ 诱导的肝损伤小鼠可促发其血清ＡＳＴ、ＡＬＴ
水平显著增高，与模型组比较，差异显著（Ｐ＜０．０５）。与ＳＩＭ 组比较，高剂量的ＰＥ对ＳＩＭ 引发的小鼠
血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平增高有显著下调作用（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１，表１）。
表１　ＰＥ对肝损伤小鼠血清ＡＳＴ和ＡＬＴ水平的影响☆（ｎ＝１０）
Ｔａｂ．１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＰＥ　ｏｎ　ＡＳＴ，ＡＬＴ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ（ｎ＝１０）
组别
剂量／
ｍｇ·（ｋｇ·ｄ）－１
ＣＣｌ４诱导肝损伤／Ｕ·Ｌ－１
ＡＳＴ　 ＡＬＴ
ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导肝损伤／Ｕ·Ｌ－１
ＡＳＴ　 ＡＬＴ
正常组 － １２４．４７±９．８８　 ２７．７２±３．２６　 ３４．６９±１０．０４　 ２４．６８±７．８１
模型组 － ２６２．２８±２８．２９＊＊＊ １１３．９７±２．１０＊＊＊ １００．１１±１４．９６＊＊ ４０．１３±５．３４＊＊
ＳＩＭ组 ５０　 ２８３．８６±３７．０１＃ １２４．１５±４．２９＃ １０６．９８±１６．１０　 ４６．１９±８．５３
ＰＥ高剂量组 ２０　 ２０３．４７±２０．３５＃＃＃ １００．７６±１３．６１＃＃ ４６．３５±２４．１４＃＃ ２９．８８±７．１８＃
ＰＥ低剂量组 １０　 ２２０．５２±２７．８７＃＃ １０７．３０±７．７２　 ８７．６６±１２．１１　 ３０．０４±６．６２＃
ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组 ５０＋２０　 ２４０．３６±２６．５１▲▲▲ ９６．８０±１１．６１▲▲▲ ６７．７９±１４．１３▲▲ ２９．７１±２．５４▲▲
　　☆ 与正常组比较，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃Ｐ＜０．００１；与ＳＩＭ组比较，
▲▲Ｐ＜０．０１，▲▲▲Ｐ＜０．００１。
２．２　ＰＥ对腓肠肌损伤大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平的影响
腓肠肌损伤模型大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平显著升高，与正常组比较，差异极显著（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．００１）；
与模型组比较，ＰＥ对肌损伤模型血清ＣＫ、ＭＫ水平无不良影响，且低剂量下即可显著下调大鼠血清ＣＫ、
ＭＢ水平（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１）；而ＳＩＭ组则可促使大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平显著增高，高于模型组，差异显
著（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０５）；与ＳＩＭ组比较，ＳＩＭ＋ＰＥ低剂量组大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平显著降低（Ｐ＜０．０１、
Ｐ＜０．０１），ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平亦显著降低（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１），表明ＰＥ可拮抗
ＳＩＭ引发的ＣＫ、ＭＢ水平升高（表２）。
表２　ＰＥ对肌损伤大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平的影响☆（ｎ＝８）
Ｔａｂ．２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＰＥ　ｏｎ　ＣＫ，ＭＢ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｒａｔ　ｗｉｔｈ　ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｄａｍａｇｅ（ｎ＝８）
组别 剂量／ｍｇ·（ｋｇ·ｄ）－１　 ＣＫ／Ｕ·ｍＬ－１　 ＭＢ／ｎｇ·ｍＬ－１
正常组 － ０．８２６±０．０２６　 ５．０８±０．２１
模型组 － １．７６５±０．１１４＊＊＊ １０．４４±０．２９＊＊＊
ＳＩＭ组 ２０　 ２．６５８±０．１６０＃＃＃ １１．３１±０．２０＃
ＰＥ低剂量组 １０　 １．０８０±０．０４２＃＃＃ ８．６３±０．２４＃＃
ＳＩＭ＋ＰＥ低剂量组 ２０＋１０　 １．７４０±０．０８６▲▲ ８．９６±０．２４▲▲
ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组 ２０＋２０　 １．４７４±０．０４９▲▲▲ ８．７５±０．１０▲▲
　　☆ 与正常组比较，＊＊＊Ｐ＜０．００１；与模型组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１，＃＃＃Ｐ＜０．００１；与ＳＩＭ组比较，▲Ｐ＜０．０５，
▲▲Ｐ＜０．００１，▲▲▲Ｐ＜０．０１。
２．３　ＰＥ对肝损伤小鼠肝脏组织病理形态的影响
１）ＰＥ对ＣＣｌ４ 诱导的急性肝损伤小鼠肝脏组织病理形态的影响：显微镜下观察可见肝小叶结构完
整，细胞排列整齐，大小均匀，分界清楚；模型组小鼠肝体积增大、质地硬而较脆，边缘钝而厚，表面呈黄褐
色［４］。镜下观察肝小叶结构破坏，肝细胞普遍呈现浊肿，出现以中央静脉为中心的局灶性细胞变性、坏死，
炎细胞浸润；ＳＩＭ组小鼠肝组织病变较模型组更为严重，肝细胞坏死面积与程度较严重，并可见肝细胞纤
维化，伴有大量炎性细胞浸润［５］；ＰＥ高、低剂量组虽可见肝细胞坏死、炎性细胞浸润等病理改变，但未见明
显的肝纤维化，病变与模型组比较有明显减轻，ＰＥ高剂量组病变改善尤为明显；与ＳＩＭ组比较，ＳＩＭ＋ＰＥ
高剂量组的小鼠肝病变、损伤程度亦有所减轻（图１）。
６２ 扬州大学学报（农业与生命科学版）（原江苏农学院学报） 第３７卷
２）ＰＥ对ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导的肝损伤小鼠肝脏组织病理形态的影响：显微镜下可见模型组小鼠肝组织结
构破坏，细胞排列紊乱，部分肝细胞出现变性、坏死，空泡变性，伴有轻度肝纤维化，并可见大量炎细胞浸
润［６］；ＳＩＭ使模型组小鼠肝损伤程度加重，可见肝细胞肿胀，空泡变性严重，炎细胞显著增多；ＰＥ高、低剂
量组对模型组肝细胞变性均有不同程度的改善，未见肝组织纤维化病变，空泡变性程度有所减轻，炎细胞
浸润显著减少，其中以高剂量组改善最为明显。ＰＥ对ＳＩＭ加重的肝损伤程度亦有所减轻（图２）。
图１　ＰＥ对ＣＣｌ４ 诱导的肝损伤小鼠肝脏组织病理形态的影响（×１００）
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＰＥ　ｏｎ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｃａｒｂｏｎ　Ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ（×１００）
ａ．正常组；ｂ．模型组；ｃ．ＳＩＭ组；ｄ．ＰＥ高剂量组；ｅ．ＰＥ低剂量组；ｆ．ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组
图２　ＰＥ对ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导的肝损伤小鼠肝脏组织病理形态的影响（×１００）
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＰＥ　ｏｎ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｓｏｎｉａｚｉｄ　ａｎｄ　ｒｉｆａｍｐｉｃｉｎ（×１００）
ａ．正常组；ｂ．模型组；ｃ．ＳＩＭ组；ｄ．ＰＥ高剂量组；ｅ．ＰＥ低剂量组；ｆ．ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组
２．４　ＰＥ对肌损伤大鼠腓肠肌组织病理形态的影响
显微镜下可见正常大鼠腓肠肌肌纤维纹理清晰，肌纤维分布整齐，排列规则，肌纤维中偶见散在的淋
巴细胞［７］；模型组肌纤维间质肿胀，纤维簇间隔增大，肌纤维中有大量淋巴细胞集聚；ＳＩＭ组肌纤维断裂
且分布紊乱、间质肿胀，淋巴细胞集聚明显，可见肌溶解及局灶性坏死［８］；ＰＥ低剂量组肌间质呈轻度肿
胀，偶见少量淋巴细胞；ＳＩＭ＋ＰＥ低剂量组、ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组与ＳＩＭ组比较，肌纤维损伤较轻微，且肌纤
维分布较均匀，淋巴细胞数量亦有所减少（图３）。
７２第３期 戎　毅等：长梗冬青苷对小鼠肝损伤及大鼠肌损伤的影响
图３　ＰＥ对肌损伤大鼠腓肠肌组织病理形态的影响（×２００）
Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＰＥ　ｏｎ　ｍｕｓｃｌｅ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ　ｄａｍａｇｅ（×２００）
ａ．正常组；ｂ．模型组；ｃ．ＳＩＭ组；ｄ．ＰＥ低剂量组；ｅ．ＳＩＭ＋ＰＥ低剂量组；ｆ．ＳＩＭ＋ＰＥ高剂量组
３　讨论
长梗冬青苷（ＰＥ）提取自铁冬青树皮，为五环三萜化合物。Ｆａｒｂｏｏｄｎｉａｙ等［９－１０］认为ＰＥ可显著降低高
脂血症大鼠血清总胆固醇、三酰甘油以及低密度脂蛋白含量，表明ＰＥ具有调脂、治疗动脉粥样硬化的潜
力。本试验通过用ＰＥ干预小鼠化学性、药物性肝损伤模型及大鼠腓肠肌损伤模型，以期探讨ＰＥ在降脂
的同时对肝脏和腓肠肌组织的影响。
ＣＣｌ４可诱发肝细胞内脂质过氧化，损伤肝细胞膜，并增加细胞膜通透性［１１－１２］。当肝细胞膜受损时，肝
细胞内转氨酶大量进入血液。因而ＡＳＴ、ＡＬＴ水平可反应肝细胞损伤的病理改变程度［１３－１５］。本试验结果
表明，与正常组比较，模型组小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平显著升高，表明小鼠化学性肝损伤造模成功。ＳＩＭ
有增高模型小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平。肝组织病理学显示ＳＩＭ组小鼠肝组织出现了严重的肝细胞坏死及
肝细胞纤维化，并伴有大量炎细胞浸润，提示ＳＩＭ加重了ＣＣｌ４ 诱导的肝损伤。高、低剂量的ＰＥ可降低肝
损伤小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平，病理学观察亦显示出肝纤维化程度与模型组比较亦明显减轻，表明ＰＥ对
ＣＣｌ４ 诱导的肝损伤具有一定的保护作用。此外，模型联合ＳＩＭ的基础上给予ＰＥ干预，结果显示ＰＥ可改
善ＳＩＭ加重ＣＣｌ４ 诱导的肝损伤。
异烟肼和利福平联合使用出现典型的肝脏毒性，异烟肼代谢过程形成的肼及具有毒性的单乙酰衍生
物可通过肝细胞色素Ｐ４５０酶系代谢产生毒性产物，破坏肝细胞结构、对肝脏造成严重损伤。利福平为异
烟肼乙酰化提供乙酰基，加速异烟肼代谢，从而加重异烟肼的肝毒性［１６－１７］。模型小鼠用ＳＩＭ后血清ＡＳＴ、
ＡＬＴ水平显著升高，病理形态显示肝细胞肿胀、空泡变性有所加重，炎性细胞浸润增多，表明ＳＩＭ对ＩＮＨ－
ＲＦＰ诱导的肝损伤有所加重。ＰＥ高、低剂量可不同程度地降低药物性肝损伤小鼠血清ＡＳＴ、ＡＬＴ水平，
不同程度改善肝细胞病变，肝组织纤维化亦不明显，炎细胞浸润显著减少，提示ＰＥ对ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导小鼠
肝损伤有改善作用。模型联合ＳＩＭ的基础上给予ＰＥ，结果表明ＰＥ高剂量对ＳＩＭ加重的ＩＮＨ－ＲＦＰ诱导
的肝损伤有改善作用。
ＣＫ、ＭＢ为骨骼肌损伤代表性酶，正常情况下由于肌细胞膜屏障作用很少溢出细胞外，因此血清含量
甚微［１８］。负重牵拉引发腓肠肌损伤，肌细胞膜结构破坏、通透性增加，致使酶大量溢出，测定血清ＣＫ、ＭＢ
水平可反映肌损伤程度［１９］。与模型组比较，ＳＩＭ组大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平升高，病理学观察显示肌纤维断
裂且分布紊乱、间质肿胀，淋巴细胞集聚明显，可见肌溶解及局灶性坏死，表明ＳＩＭ可加重负重引发的肌损
伤。对此模型给予ＰＥ干预，大鼠血清ＣＫ、ＭＢ水平显著降低，肌间质轻度肿胀，偶见少量淋巴细胞，表明
ＰＥ对肌损伤有一定的改善作用。ＰＥ高、低剂量对ＳＩＭ加重的肌损伤均有改善作用。前期有研究表明ＰＥ
８２ 扬州大学学报（农业与生命科学版）（原江苏农学院学报） 第３７卷
具有较强的抗感染活性［２０－２２］。
综上所述，ＰＥ不仅对小鼠化学性、药物性肝损伤以及大鼠腓肠肌损伤无不良影响，而且对小鼠肝损
伤和大鼠腓肠肌损伤有改善或保护作用。近年来五环三萜类化合物的研究报道越来越深入［２１，２３］，但ＰＥ
对ＳＩＭ加重的肝损伤、腓肠肌损伤具一定的改善作用的报道尚未见报道。本试验为ＰＥ在安全性方面提
供了试验数据，其作用机制有待于进一步研究。
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（责任编辑　刘明寿）
９２第３期 戎　毅等：长梗冬青苷对小鼠肝损伤及大鼠肌损伤的影响