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苘麻子油中游离脂肪酸的含量测定



全 文 :实验研究 43中国医药指南 2010 年 2 月第 8 卷 第 6 期 Guide of China Medicine, February 2010, Vol.8, No.6
苘麻子为锦葵科植物苘麻属植物苘麻子(Abutilon theophrasti
Medic.)的干燥成熟种子。秋季采收成熟果实,晒干,打下种子,除
去杂质。具有清热利湿,解毒,退翳的功效,用于赤白痢疾、淋病涩
痛、痈肿、目翳 [1]。据报道,化学成分为种子含脂肪油 15%~17%油
中含亚油酸,并含球蛋白、蛋白质,水解后得组酸、精氨酸、酪氨酸、
赖氨酸等 [2]。蒙药名叫黑玛音 -乌热或扫玛然砸,燥协日乌系、杀
虫,主治协日乌素症、陶赖、赫如呼、巴木病、浊热、白脉病、疥癣、
秃疮。“祛皮肤病,协日乌素症”[3]。据文献苘麻子之中含有十二碳酸、
十四碳酸、十六碳酸、十八碳酸、十八碳酸一烯酸、十八碳酸二烯
酸、十八碳酸三烯酸等脂肪酸 [4]。对于苘麻子油的研究报道非常少,
苘麻子油的提取过程还处于探索阶段,本研究对苘麻子油提取及其
游离脂肪酸的含量测定方法进行初步的试验探索,对苘麻子在药学、
食用、化妆品等方面的进一步开发利用奠定基础。
1 仪器、试药与溶液
1.1 仪器
分析天平、AUY120型电子天平、电热干燥箱:(103±2)℃、索
氏提取器带 250mL接收瓶、干燥器、50mL碱试滴定管、最小分度
0.1mL、滤纸筒(与索氏提取器适宜规格)。
1.2 试药与溶液
60~90℃石油醚、95%乙醇、氢氧化钠、乙醚、95%乙醇等体积混
合溶液、0.1mol/L氢氧化钠95%乙醇标准溶液:需在5d前配制,使用
前过滤用邻苯二甲酸氢钾准确标定,1%酚酞指示剂:1g/100mL 95%
乙醇酚酞指示剂溶液。
所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。苘麻子采集于内蒙古大兴安
岭林区,由内蒙古民族大学蒙医药学院蒙药生药教研室鉴定。
2 方法与结果
2.1 苘麻子中水分的测定
取供试品 3份,每份约 2.0g平铺于干燥器至恒重的扁形称重瓶中,
厚度不超过 5mm,疏松供试品不超过 10mm,精密称定,打开瓶盖在
103℃干燥 5h,将瓶盖盖好,移置于干燥器中,冷却 30min,精密称
定,在上述温度干燥 1h,冷却,称重,至连续 2次称重的差异不超过
5mg,根据减失的重量,计算供试品中含水量(%),结果见表 1。
表1 苘麻子中水分的测定结果
号 水分(%) 平均(%)
1 0.48
2 0.49 0.47
3 0.44
1 内蒙古民族大学化学化工学院(028000)
2 内蒙古库伦蒙药厂 内蒙古库伦(028200)
实验研究
苘麻子油中游离脂肪酸的含量测定
白淑珍1 徐玉莲2
【摘要】目的 建立苘麻子油中游离脂肪酸含量的测定方法。方法 采用石油醚为溶剂,用索氏提取器连续回流提取法,提取苘麻子油脂再
用滴定法进行游离脂肪酸的含量测定。结果 苘麻子油脂为 13.6%,其油脂中游离脂肪酸的含量为 7.0%。结论 该法简单易行,不需要特
殊仪器和试剂,可作为苘麻子油中游离脂肪酸的含量测定方法。
【关键词】苘麻子;滴定法;含量测定
中图分类号:R284 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2010)06-0043-02
2.2 NaOH的标定
氢氧化钠溶液用邻苯二甲酸氢钾溶液进行标定,以酚酞指示剂变
色显示终点,记录所消耗的氢氧化钠溶液体积,并计算出氢氧化钠溶
液的浓度,标定结果见表2。
表2 NaOH的标定结果
号 V(mL) m(g) CNaOH(mol/L) CNaOH(mol/L)
1 0.7 0.0120 0.0840
2 0.7 0.0130 0.0910 0.09
3 1.0 0.0193 0.0950
2.3 苘麻子油中游离脂肪酸含量测定
取苘麻子 3份,每份约 30g置索氏提取器回流,加石油醚(60~90℃)
150mL回流 4h,恒重胶皮塞小瓶记录数据,减压回收石油醚,取得苘
麻子油脂放入已恒重的胶皮塞小瓶称重,记录数据,并计算苘麻子中
油脂含量,结果见表 3。配制乙醚、95%乙醇等体积混合洗涤液,洗
涤锥形小瓶恒重,用已标定的 0.09mol/L NaOH溶液滴定至油脂粉红色,
颜色持续 1min,即为滴定终点,记录所消耗的氢氧化钠溶液体积,并
计算油脂中游离脂肪酸的含量,测定结果见表 4。
油脂中的游离脂肪酸含量按下式计算:
X%=0.09V/ m×282
式中:V—标准碱液体积(mL);0.09—碱液的标定浓度(mol/L);
282—油酸的摩尔质量(g/mol);m—油脂的质量(g);X—游离脂肪
酸含量(%)。
表3 苘麻子中油脂含量的测定结果(n=3)
苘麻子(g) 苘麻子油脂(g) x(%) (%) RSD(%)
30.0096 4.1363 13.8
30.0497 3.9768 13.2 13.6 2.6
30.0341 4.1503 13.8
3 小结与讨论
该研究选用石油醚提取蒙药材苘麻子中的油脂,然后用滴定法对
其测定游离脂肪酸的含量。即苘麻子油脂中的游离脂肪酸用已标定的
氢氧化钠标准溶液滴定,以酚酞变色显示终点,根据每毫升油脂所消
耗氢氧化钠溶液的量计算出油脂中的游离脂肪酸的含量。该法直接、
简单易行,不需要特殊仪器和试剂。
目前油脂中游离脂肪酸含量测定方法很多,虽然发展至今已有滴
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2010.06.025
实验研究44 中国医药指南 2010 年 2 月第 8 卷 第 6 期 Guide of China Medicine, February 2010, Vol.8, No.6
取的苘麻子中油脂中的游离脂肪酸含量进行比较,结果以石油醚为溶
剂连续回流提取,回收溶剂后得到的油脂最多游离脂肪酸含量最高。
参考文献
[1] 中国药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:化工华学
出版社,2005:142.
[2] 张海玉,阿拉探巴干.蒙药苘麻子和冬葵子的鉴别应用[J].中国民
族医药杂志,2008,1(4):33.
[3] 布和巴特,额尔敦宝力高.蒙药手册[M].沈阳:辽宁民族出版社,
1995:179-180.
[4] 马爱华,张俊慧,赵仲坤.冬葵子与苘麻子中脂肪酸的对比分析[J].
时珍国药研究,1996,7(3):153.
表4 苘麻子油脂中游离脂肪酸含量的测定结果
试验号 质量(mg) 体积(mL) 百分含量(x%) RSD(%)
1
① 0.8788 1.6 51.34
0.16
② 0.8782 1.6 51.38
2
③ 0.8782 1.6 51.38
④ 0.8759 1.6 51.51
3
⑤ 0.8758 1.6 51.52
⑥ 0.8797 1.6 51.29
*连续进行的两次测定结果之允许差不得超过0.2%
定法、比色法、色谱法近红外测定法等多种测定脂肪酸值方法,使用
最广的国标法(粮食)仍然采用滴定法。本文用该方法对不同工艺提
胆红素是血红素的代谢产物,主要在肝脏内经结合作用转化排泄,
它在血清中以未结合胆红素(即游离胆红素)、结合胆红素(即单葡
萄糖醛酸和双葡萄糖醛酸胆红素之和)及δ-胆红素(清蛋白共价连
接胆红素) 3种形式存在。临床上测定血清胆红素是黄疸性疾病诊断
与鉴别诊断的重要指标,对了解疾病的发展、转归有重要意义 [1-3]。本
文对Siemens Healthcare Diagnostics inc.生产的试剂盒进行评价和探讨,
现报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器
Dimension RXL全自动生化分析仪。
1.2 试剂
试剂盒由Siemens Healthcare Diagnostics inc.生产;试剂Ⅰ成
分:0.5%亚硝酸钠、0.5mol/L盐酸;试剂Ⅱ成分:0.45%对氨基苯磺
酸、1.09%盐酸。
1.3 原理
重氮化对氨基苯磺酸是通过亚硝酸钠和对氨基苯磺酸在低pH的环
境中结合而生成的。用0.05mol/L的HCL稀释样本。先记下空白读数以
消除非胆红素色素的干扰。加入重氮化对氨基苯磺酸,结合的胆红素
会转化成重氮基胆红素。
1.4 方法
主要分析参数设置测定方法:主波长540nm,副波长700nm,样
品体积31μL,试剂体积R1为30μL,R2为60μL,读取终点ΔA。试
验过程全部由Dimension RXL全自动生化分析仪完成。
2 结 果 广西玉林市第二人民医院检验科(537000)
测定直接胆红素方法的分析
唐礼新 邱春红
【摘要】目的 对 Siemens Healthcare Diagnostics inc. 生产的试剂盒进行评价。方法 加入重氮化对氨基苯磺酸,结合的胆红素会转化成
重氮基胆红素,它是一种在 540nm 处吸光的红色发色团,用双波长(540、700nm)终点技术测定直接胆红素(DBIL)。结果 本仪器
与 ACE 离散临床分析仪上及在减少的样本量比标准样本量上具有良好的相关性,直线回归方程分别为 Y1=0.978X1+0.060,r=0.992 ;
Y2=0.984X2+0.03,r=0.999。血红蛋白< 3.2g/L、抗坏血酸< 1.5g/L 时不干扰测试。该法 DBIL 在 342μmol/L 范围内线性良好。低、
中、高血清标本的批内变异系数(CV)值分别为 2.4%、1.79% 和 0.96%,批间 CV 值分别为 3.20%、2.36% 和 1.11%。结论 Siemens
Healthcare Diagnostics inc 检测试剂的准确性和精密度均符合临床要求。
【关键词】直接胆红素;亚硝酸钠;重氮化
中图分类号:R446.11 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2010)06-0044-02
2.1 精密度
按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)评价方案,取低、中、
高 3个不同浓度的 DBIL样品上、下午双份测定,连续测 20d,再每
天测 1次,共测 20d,结果见表 1。
表1 批内和批间精密度测定结果(μmol/L)
标本 次数
批内
次数
批间
X S CV% X S CV%
1低值 20 7.30 0.17 2.40 20 7.30 0.23 3.20
2中值 20 26.20 0.47 1.79 20 26.20 0.62 2.36
3高值 20 84.10 0.81 0.96 20 84.10 0.94 1.11
2.2 线性和回归分析[2]
按NCCLS的评价方案,选择低浓度(31.4μmol/L)和高浓度
(360.0μmol/L)的混合血清2份,然后把这2份样品等量混匀产生中
间值,再分别将中间值和低值、中间值和高值等量混匀,共产生5个
不同值的样品。在Dimension RXL全自动分析仪上用本法从低值到高
值,然后从高值到低值测定,求得均值为Y,以理论值为X进行回归
分析,回归方程为:Y=0.9914X+0.075,r=0.9998。结果表明DBIL在
350μmol/L内仍保持良好的相关性。
2.3 回收试验
取1份DBIL含量为6.4μmol/L的血清0.8mL,加入DBIL含量
为56.3μmol/L的血清0.2mL,计算浓度。结果测定浓度为16.32和
16.98μmol/L,回收率为104.10%。