全 文 ：收稿日期:2010-06-05;　修订日期:2010-09-20
基金项目:海南省自然科学基金(No.20804);
海南省热带药用植物重点实验室资助项目;
海南师范大学大学生创新实验项目
作者简介:鲍长余(1980-),男(汉族),山东济宁人 ,现为海南师范大学
在读硕士研究生 ,主要从事天然药物化学研究工作.
＊通讯作者简介:毕和平(1955-),男(汉族),山西新绛人 ,现任海南师范
大学教授 ,学士学位 ,主要从事天然药物化学研究工作.
破布叶枝和叶中总三萜酸的含量测定
鲍长余 1 , 刘冰晶1 , 毕和平 1, 2＊ , 陈光英1, 2 , 范超君 1 ,辜燕飞1
(1.海南师范大学 化学与化工学院 ,海南 海口 571158;
2.海南省热带药用植物化学重点实验室 ,海南 海口 571158)
摘要:目的 建立了测定破布叶枝和叶中总三萜酸含量的方法。方法 以熊果酸为对照品 , 以质量分数 5 %香草醛 -冰醋
酸和高氯酸溶液系统为显色剂 ,采用紫外分光光度法在 546nm波长处测定样品的吸光度 。结果 熊果酸对照品在 0.20 ～
1.60 μg· ml-1范围内呈良好线性关系 ,回归方程为 Y=0.154 8C+0.028 6, r=0.999 3。破布叶枝和叶中的总三萜酸
含量分别为 1.09 %和 2.77 %。结论 该法操作简便 ,结果可靠 , 重复性好 ,可用作破布叶中总三萜酸的含量测定。
关键词:破布叶;　三萜酸;　紫外分光光度法
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.04.028
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2011)04-0845-02
DeterminationofTriterpenoidicAcidContentinStemsandLeavesofMicrocospaniculataL.
BAOChang-yu1 , LIUBing-jing1 , BIHe-ping1, 2＊ , CHENGuang-ying1, 2 , FANChao-jun1 , GUYan-fei1
(1.ColegeofChemistryandChemicalEngineering, HainanNormalUniversity, Haikou571158, China;
2.KeyLaboratoryofTropicalMedicinalPlantChemistryofHainanProvince, Haikou, 571158, China)
Abstract:ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofthetotaltriterpenoidicacidinstemsandleavesofM.panic-
ulataL.MethodsWithursolicacidasthereference, 5% vanilin-aceticacidandperchloricacidascolordeveloper, thetotal
triterpenoidicacidinstemsandleavesofM.PaniculataL.weredeterminedbyultravioletspectrophotometricmethodat546 nm
wavelength.ResultsSamplesizeshowedagoodlinearrelationshipwithintherangeof0.20 ～ 1.60 μg· mL-1 , andthecurve
wasY=0.154 8 C+0.028 6, r=0.999 3.Thecontenttriterpenoidicacidinstemsandleaveswas1.09% and2.77%, re-
spectively.ConclusionThespectrophotometricmethodissimple, reproducibleandsuitableforthedeterminationoftotaltriterpe-
noidicacid.
Keywords:MicrocospaniculataL;　Triterpenoidicacid;　Ultravioletspectrophotometricmethod
　　破布叶 MicrocospaniculataL属椴树科(Tiliaceae)破布叶属
(Microcos)植物 ,亦称蓑衣子 、麻布叶 、烂布渣、布包木 、破布树 、薢
宝叶等 [ 1] , 是广东 、广西和海南等南方地区常用的民间药, 有清热
解毒 ,消食积及解渴开胃的功效 , 常用于治疗感冒 、咽喉痛 、食滞腹
胀 、黄疸和蜈蚣咬伤等 [ 2～ 4] 。三萜酸类化合物具有广泛的药理作
用 ,如抗肿瘤 、保肝 、解毒、抗衰老等作用 [ 5 ～ 7] 。冯世秀等 [ 8]从破布
叶中分离得到无羁萜和阿江榄仁树葡糖苷等 2个三萜类化合物。
目前未见破布叶中总三萜酸的含量测定报道。药材中总三萜酸的
测定通常采用紫外分光光度法和高效液相色谱法 [ 9～ 10] 。本实验
以熊果酸为对照品 ,采用质量分数 5 %香草醛 -冰醋酸和高氯酸
溶液为显色系统 ,采用紫外分光光度法测定破布叶枝中总三萜酸
的含量 ,为破布叶的进一步开发利用提供科学依据。
1　仪器 、试剂与材料
UV2600紫外可见分光光度计(上海国美科技仪器有限公
司);EYEL4OSB-2100旋转蒸发仪(日本 ,东京理化)。
95 %乙醇 , 无水乙醇 ,香草醛 , 高氯酸 , 冰醋酸等均为国产分
析纯 , 熊果酸标准品购自上海顺勃生物工程有限公司(纯度大于
98.0 %)。
破布叶药材采自海南三亚市 ,经海南师范大学生命科学学院
钟琼芯高级实验师鉴定为椴树科破布叶属植物 M.PaniculataL.
的枝和叶 ,标本现存于海南省热带药用植物化学重点实验室 。
2　方法与结果
2.1　对照品溶液制备 准确称取 105 ℃干燥至恒重的熊果酸对
照品 20.0 mg,置于 50 ml容量瓶中 , 加无水乙醇溶解并稀释至刻
度 , 摇匀 ,得浓度为 0.400 g· L-1溶液 , 精确移取溶液 2.5 ml, 定
容至 100 ml,得浓度为 0.01g· L-1的对照品溶液。
2.2　供试品溶液制备 将粉碎过的破布叶的枝和叶于 50 ℃烘箱
干燥 24h,各准确称取 2.00g, 分别用无水乙醇浸泡 2 h, 索式提
取 8h, 提取液用TLC测定 , 至与浓 H2SO4不显紫色为止 , 提取液
减压回收乙醇 ,放冷至室温 , 用无水乙醇定容至 100 ml。枝和叶
的提取液分别准确吸取 5.0 ml和 2.5 ml于 100 ml容量瓶中 , 用
无水乙醇定容至刻度 ,摇匀 , 制得供试品溶液。
2.3 　测定波长选择 取对照品溶液 5.0 ml, 加质量分数为 5 %
香草醛 -冰醋酸 0.2 ml和高氯酸 0.8 ml显色后 , 进行全波长扫
描 , 随行空白对照。结果表明 , 对照品溶液在 546 nm处有最大吸
收峰(见图 1),故选择 546 nm作为样品测定的波长。
图 1　对照品紫外可见吸收图
2.4 　标准曲线绘制 准确吸取对照品溶液 0.2, 0.4, 0.6, 0.8,
1.0, 1.2, 1.6 ml分别置于 10 ml容量瓶中 , 沸水浴挥去无水乙
醇 , 冷却 ,加入 5 %香草醛 -冰醋酸溶液 0.2 ml, 和高氯酸溶液
·845·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.4 时珍国医国药 2011年第 22卷第 4期
0.8 ml, 将容量瓶放人 70 ℃水浴中加热 15 min,冷却至室温 ,用
冰醋酸定容到刻度 , 摇匀。在 546 nm波长处测定吸光度值 A,随
行进行空白对照。以熊果酸含量为横坐标 , 吸光度 A为纵坐标 ,
作图得到标准曲线(见图 2), 标准方程为 Y=0.154 8C +
0.028 6,式中:C为浓度(μg· L-1), Y为吸收度值 A。相关系数:
r=0.999 3。
2.5 　稳定性实验 分别吸取破布叶枝和叶供试品溶液各 5.0
ml, 按照 “ 2.4”项下方法配制溶液 ,每隔 15min测定 1次 , 结果见
表 1。实验表明 ,在 2 h测定时间内 ,对照品溶液和供试品溶液稳
定性较好。 图 2　标准曲线图
表 1　稳定性实验数据
溶液种类 吸光度
0min 15min 30min 45 min 60 min 75 min 90 min 105min 120min 平均值
RSD
(%)
对照品 0.218 1 0.221 3 0.223 4 0.213 8 0.215 4 0.220 4 0.215 6 0.221 4 0.221 3 0.218 9 1.44
枝提取物 0.188 5 0.192 1 0.186 4 0.188 6 0.192 1 0.189 3 0.192 6 0.187 4 0.191 3 0.189 8 1.13
叶提取物 0.221 4 0.221 8 0.217 6 0.221 6 0.223 5 0.222 1 0.221 1 0.214 5 0.223 5 0.224 3 1.27
2.6　精密度实验 取同一批供试液 , 分别进行 5次平行实验 ,测
定吸光度值。结果见表 2。叶和枝的 RSD分别为 1.03 %(n=5)
和 1.10 %(n=5),精密度实验良好。
表 2　精密度实验数据
提取物 吸光度
1 2 3 4 5
平均值 RSD(%)
枝提取物 0.188 6 0.194 4 0.189 9 0.192 3 0.193 1 0.191 7 1.10
叶提取物 0.224 6 0.223 5 0.221 3 0.219 1 0.225 4 0.222 8 1.03
2.7 　加样回收率实验 准确量取 5份已知含量的破布叶供试液
5.0 ml, 准确加入一定量的熊果酸对照品溶液 , 按 “ 2.4”项下方
法测定。实验结果见表 3。结果表明 ,枝平均回收率为 99.15%,
RSD= 1.24%(n=5);叶平均回收率为 99.63 %, RSD=0.95%
(n=5)。
表 3　加样回收率测定结果表
提取物部
位及编号
总三萜酸含量
m/μg
对照品量
m/μg
测得量
m/μg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 1 091.3 1 000 2 082.5 99.58
2 1 093.4 1 000 2 031.1 97.02
枝 3 1 093.2 1 000 2 095.6 100.1 99.15 1.24
4 1 091.5 1 000 2 095.3 100.2
5 1 091.1 1 000 2 096.4 100.3
1 1 383.5 1 000 2 329.5 97.73
2 1 391.4 1 000 2 393.3 100.1
叶 3 1 392.5 1 000 2 391.4 99.95 99.63 0.95
4 1 381.3 1 000 2 389.6 100.3
5 1 388.5 1 000 2 389.6 100.0
2.8　样品含量测定 准确量取 3份破布叶枝和叶供试品溶液各
5.0 ml, 分别加入到 3个 50 ml容量瓶中 , 余下部分按 “ 2.4”项下
方法测定 , 计算含量。结果见表 4。破布叶枝的总三萜酸含量为
1.09 %, RSD= 2.53%(n=3),其叶中总三萜酸含量为值为 2.
77 %, RSD=1.97 %(n=3)。
表 4　含量测定结果
提取物部
位及编号
测定值
1 2 3
平均值 RSD(%)
总三萜含
量(%)
平均
值(%)
1 0.2079 0.1869 0.1988 0.1979 1.093
枝 2 0.1928 0.1971 0.2032 0.1977 2.53 1.092 1.09
3 0.1981 0.2003 0.1951 0.1978 1.093
1 0.2429 0.2425 0.2426 0.2427 2.766
叶 2 0.2431 0.2428 0.2433 0.2431 1.97 2.771 2.77
3 0.2426 0.2428 0.2423 0.2426 2.765
3　讨论
本文以无水乙醇作为溶剂 ,以香草醛 -冰醋酸和高氯酸溶液
系统为显色剂 ,采用紫外分光光度法测定总三萜酸 , 该法简便可
靠 , 结果稳定 , 重复性好。本法与比色法 [ 11]比较 , 简化了实验步
骤 , 缩短了实验时间。本文测得破布叶枝和叶中总三萜酸含量分
别为 1.09%和 2.77%, 其中叶中总三萜酸含量较多 , 为进一步开
发利用破布叶提供了科学依据。
参考文献:
[ 1 ] 　吴德邻.海南及广东沿海岛屿植物名录 [ M].北京:科学出版社 ,
1994:78.
[ 2 ] 　广东省食品药品监督管理局.广东省中药材标准(第一册)[ J] .广
州:广东科学技术出版社 , 2004 :66.
[ 3 ] 　毕和平 ,韩长日 ,梁振益 , 等.破布叶叶片中挥发油的化学成分研
究 [ J] .林产化学与工业 , 2007, 27(3):124.
[ 4 ] 　毕和平 , 韩长日 , 王　芳 , 等.分光光度法测定破布叶中总黄酮
[ J] .广东化工 , 2006, 33(3):43.
[ 5 ] 　姚新生 ,吴立军.天然药物化学 , 第 4版 [ M] .北京:人民卫生出
版社 , 2003:306.
[ 6 ] 　Minbs, GaoJJ, NakamuraN, etal.TriterpenesfromthesporesofGan-
odermalucidumandtheircytotoxicityagainstMeth-AandLLCtumor
cels[ J] .ChemPhamBul, 2000, 48(7):1026.
[ 7 ] 　王明宇 , 刘　强, 车庆明 , 等.灵芝三萜类化合物对 3种小鼠肝损
伤模型的影响 [ J] .药学学报 , 2000, 35(5):326.
[ 8 ] 　冯世秀 ,刘梅芳 ,魏孝义 , 等.布渣叶中三萜和黄酮类成分的研究
[ J] .热带亚热带植物学报 , 2008, 16(1):51.
[ 9 ] 　莫峥嵘 ,王安伟 ,莫燕琴 , 等.青梅枝中总三萜酸的含量测定 [ J] .
时珍国医国药 , 2008, 19(11):2580.
[ 10]　张瑞芬 ,范杰平 ,朱衷榜 ,等.超声辅助提取柿叶中的总黄酮和总三
萜 [ J] .现代食品科技 , 2008, 24(11):1133.
[ 11]　周俐斐 ,芦柏震 ,侯桂兰.中药三萜类化合物的提取分离及测定方
法研究进展 [ J] .海峡药学 , 2007, 19(3):62.
·846·
时珍国医国药 2011年第 22卷第 4期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.4