全 文 ：五叶地锦叶中黄酮的提取与含量测定
盖春宇， 柳鸿敏， 李娟， 李静※
（吉林大学公共卫生学院，吉林 长春 130021）
摘要：探索超声提取五叶地锦中总黄酮的最佳提取条件及含量测定。采用正交实验法确定超声提取五叶地锦中总黄酮的最佳条
件，用分光光度法测定吸光度值并计算总黄酮含量。最佳提取条件为：温度 50℃，50%乙醇，料液比 1∶40，超声提取 60min，总
黄酮的提取率可达 4.07%。五叶地锦中总黄酮含量较高，试验结果对五叶地锦中生物活性成分的开发利用具有一定意义。
关键词：五叶地锦；总黄酮；超声提取；正交试验
中图分类号：S682.36；R284.2 文献标识码：A
Extraction and Content Determination of Total Flavonoid in
Parthenocissus Quinquefolia
GAI Chun- yu，LIUHong- min，LI Juan，LI Jing※
（School of Public Health，Jilin University，Changchun 130021，China）
Abstract：To study the ultrasonic extraction conditions and monitor the content of flavonids in parthenocissus quinquefolia. The orthogonal
experimental method was used to determine the best conditions for extraction of flavonoids in parthenocissus quinquefolia by using ultra-
sonic. The content of total flavonoid was determined by using spectrophotometry. The optimum extract of total flavonoids was obtained under
the conditions of 50℃，ratio of dry parthenocissus quinquefolia leaves to solvent 1：40，ethanol concentration 50% and for 60min. With the
optimized technology，the content of total flavonoids in the final product was 4.07%. Flavonids content of parthenocissus quinquefolia is
high，which is of important significance for the further development and utilization of the biological active component in parthenocissus
quinquefolia.
Key words：Parthenocissus quinquefolia；Flavonoid；Sultrasonic extraction；Orthogonal experiment.
收稿日期：2009- 11- 25
作者简介：盖春宇（1985-），女，吉林省大安市人，硕士研究生，主要从事天然植物与人体健康关系的研究工作。
※通讯作者：李静（1955-），E- mail：jli92003@yahoo.com.cn.
五叶地锦[ Parthenocissus quinquefolia（Linn.）]是葡
萄科爬山虎属的一种落叶藤本植物。卷须与叶对生，顶
端吸盘大，掌状复叶。原产美国东部，我国引种栽培。地
锦分布极广，广泛分布于亚洲、北美洲，在我国主要分
布于辽宁、吉林、河北、山东、陕西、浙江、湖南、广东、湖
北等省[1~3]。地锦有较强的攀缘性，是墙面、道路护坡、垂
直绿化的好材料。地锦叶中含有矢车菊素，冠瘿中含羧
基赖氨酸及鸟氨酸等，地锦具有活血、祛风、止痛的作
用，可用于治疗风湿性关节炎[4]；地锦果实中的多糖对
金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有一定的抑制作用[5]。地锦
文章编号：1001- 4721（2010）02- 0059- 03
特 产 研 究 Special Wild Economic Animal and Plant Research 59
易于栽培，资源丰富，集观赏、绿化、药用价值于一体，
是一种具有潜在开发利用价值的优良园林绿化及药用
植物。目前，国内外对地锦的化学成分、冠瘿组织生长
发育以及卷须发育附着特性、爬山虎属植物资源开发
利用方面已取得一定进展[6]。但有关地锦中黄酮类化合
物的提取及含量测定方面的研究报道较少。
本研究以地锦叶片为材料，采用正交试验方法探
讨超声波方法提取其黄酮类成分的最佳条件，采用分
光光度法，测定了五叶地锦中总黄酮的含量，为其活性
物质的开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 生药 新鲜五叶地锦叶于 2009年 10月采集于
吉林大学校园，经李平亚教授鉴定为五叶地锦叶片。将
叶片洗净、阴干、粉碎，石油醚热回流除去原料中的脂
类等物质，自然挥去石油醚后备用。
1.1.2 仪器 1457A MP8- 2 电子天平（SARTORIUS
GMBH GOTTINGEN）、KQ- 500VDV型双频数控超声波
清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、UV- 754型紫外可
见分光光度计（山东高密彩虹分析仪器有限公司）。
1.1.3 试剂 芦丁对照品（中国药品生物制品检定
所），乙醇、石油醚、亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸铝等试剂
（分析纯，北京化工厂）。
1.2 方法
1.2.1 正交试验因素水平设计 根据黄酮类化合物的
特性，采用 L9（34）正交表 [7]优化提取条件，考察温度
（A）、乙醇浓度（B）、料液比（C）、提取时间（D）4个因素
对提取效率的影响，每个因素选择 3个水平。见表 1。
1.2.2 正交试验 准确称取 1.0g备用的五叶地锦叶于
大试管中，按正交工艺设计超声提取 2次，过滤，合并
滤液，定容至 100mL。取 0.5mL置于 10mL容量瓶中，依
标准曲线制备方法测定吸光度，计算总黄酮含量。
1.2.3 标准溶液的配制及测定 准确称取芦丁对照品
20mg，75%乙醇溶解，定容至 100mL容量瓶中，摇匀。准
确 移 取 芦 丁 标 准 溶 液 0mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、
1.6mL、2.0mL于 10mL容量瓶中, 加入 5% NaNO2溶液
0.4mL，6min后加入 10% Al（NO3）3溶液 0.4mL，摇匀，间
隔 6min加入 4% NaOH溶液 4mL，放置 15min，75%乙
醇定容至刻度，以水作空白，1cm比色杯于波长 510nm
处测其吸光度，用芦丁对照品溶液浓度（X）对吸光度
（Y）进行线性回归，得回归方程为 y=14.70x+0.05 R＝
0.997 5，用于五叶地锦叶总黄酮含量的测定。
2 结果
由表 2直观分析 R值，结果表明，最佳超声提取工
艺为 A3B1C3D2，即在 50℃、50%乙醇、料液比 1∶40、
提取时间 60min的条件下黄酮的提取率最高。影响五
叶地锦总黄酮提取率的主次因素为 A>D>C>B，即：温
度 >提取时间 >料液比 >乙醇浓度。
按照正交试验方差分析无空白组的分析方法，在
数据统计时选择了离均差平方和最小的一组（D）作空
白。方差分析结果见表 3。
由表 3可见，各因素对结果影响均不显著。分析其
原因可能是本例试验误差自由度小，使检验的灵敏度
低，从而掩盖了考察因素的显著性。
3 讨论
正交试验设计是利用正交表科学地安排与分析多
因素试验的方法，是科学研究中最常用的试验设计方
法之一，也是找出最佳试验方案的一种方法[8，9]。
正交试验在医药学研究中应用较为广泛，如药物
的拆分、药品制备工艺条件的优化筛选等。它对多因
表 1 L9（34）试验因素水平表
1
2
3
A温度（min）
30
40
50
B乙醇浓度（%）
50
60
70
C料液比（倍）
1：20
1：30
1：40
D提取时间（min）
30
60
90
因 素
水平
表 2 L9（34）正交试验结果
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
k1
k2
k3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
9.94
9.40
11.11
3.31
3.13
3.70
0.57
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
10.89
10.39
9.97
3.36
3.46
3.32
0.14
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
9.66
10.20
10.59
3.22
3.40
3.53
0.31
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
9.31
10.87
10.27
3.10
3.62
3.42
0.52
总黄酮含量（%）
2.85
3.65
3.44
3.17
3.08
3.15
4.07
3.66
3.38
表 3 正交试验方差分析
方差来源
A
B
C
离均差平方和
0.138
0.593
0.310
自由度
2
2
2
方差
0.069
0.296
0.155
F
2.386
10.244
5.358
P
0.295
0.089
0.157
F0.05（2，2）=19.00
特 产 研 究 2010年第 2期60
盖春宇，等：五叶地锦叶中黄酮的提取与含量测定
（上接第 52页）
1.36倍。为了保证药材质量，节省生产管理费用，可在
4~5年生采收。
3.2 栽培刺五加产量（根和叶片的折干率）决定药材质
量和经济效益。刺五加根采收时期愈延迟，其折干率和
含苷量越高，晚秋植株自然落叶后进入休眠期至翌年
的 3月下旬采收，根的折干率和总皂苷含量最高，但此
时期我国东北地区的土壤已冻结，不利于采收，因此可
在 10月下旬土层封冻之前采收，根的折干率和总皂苷
含量较高。7月上旬采收叶片，其折干率和总皂苷含量
最高，但此时期采收叶片会导致植株生长不良，因此，
建议 10月下旬采收，此时叶片的折干率和总皂苷含量
适宜。
参 考 文 献
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（上接第 48页）
奠定了基础，有利于进一步的新药研发工作。
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素、多水平的试验具有试验次数少、效率高等特点[10]。
本试验采用了超声提取法对地锦中总黄酮提取并
对其含量测定，确定最佳提取条件。超声波为一种弹性
波，振动可产生极强的能量。超声波还具有机械振动、
乳化、扩散、击碎等多级效应，有利于植物中有效成分
的转移，并充分与溶剂混合，可使提取效率提高。
黄酮类化合物属植物还原性次生代谢组分，自然
界中分布广泛，存在于多种植物当中，具有抗氧化、清
除自由基、抑菌杀菌、止咳消炎、保肝护肝、消脂、防止
高血压、防骨质疏松、提高机体免疫力等多种生理活性
和药理作用[11，12]。本试验结果中显示，五叶地锦叶中总
黄酮含量较高，且原材料丰富，为五叶地锦活性成分的
开发提供了一定的依据。
参 考 文 献
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第 2期 61