全 文 ：·论　著·
用正交设计法优化地锦草中总黄酮的超声提取工艺
张海英，张　红 （新疆医科大学附属中医医院药学部，乌鲁木齐８３００００）
［摘　要］　目的：优化地锦草中总黄酮的超声提取工艺。方法：将地锦草药材粉碎成超微粉末，采用单因素实验考察乙醇浓
度、乙醇用量、提取时间和提取次数对提取效果的影响，以总黄酮含量和浸膏得率为指标，采用Ｌ９（３４）正交试验设计筛选最优
提取工艺条件。结果：最优提取工艺条件为加１２倍量的７０％乙醇，提取２次，每次１．５ｈ，提取得到总黄酮含量为（６．５３±
０．０４）ｍｇ／ｇ，浸膏得率为（１５．２７±０．５５）％（ｎ＝３）。结论：该工艺合理、稳定，可用于提取地锦草中的总黄酮。
［关键词］　地锦草；总黄酮；超声提取；正交试验
［中图分类号］　Ｒ２８４．２　　　［文献标志码］　Ａ　　　［文章编号］　１６７１－２８３８（２０１４）０３－０１７６－０４
ＤＯＩ：１０．５４２８／ｐｃａｒ２０１４０３０６
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｆｒｏｍ　Ｈｅｒｂａ　Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ　Ｈｕｍｉｆｕｓａｅ　ｂｙ
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｄｅｓｉｇｎ
ＺＨＡＮＧ　ＨａｉＹｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｈｏｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　ｔｏ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００００，Ｃｈｉｎａ）
［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｆｒｏｍ　Ｈｅｒｂａ　Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ　Ｈｕｍｉｆｕｓａｅ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｈｅｒｂａ　Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ　Ｈｕｍｉｆｕｓａｅ　ｗａｓ　ｐｕｌｖｅｒｉｚｅｄ　ｉｎｔｏ　ｕｌｔｒａｍｉｃｒｏ－ｐｏｗｄｅｒ．Ｔｈｅ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｖｏｌｕｍｅ　ｏｆ　ａｌｃｏｈｏｌ，ｄｕｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｉｍｅｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏ－
ｇｙ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｕｓｉｎｇ　Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｄｅｓｉｇｎ，ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｙｉｅｌｄ　ａｓ　ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｉｎｄｅｘｅｓ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｗａｓ　ｔｏ　ｕｓｅ　１２－ｆｏｌｄ　７０％ａｌｃｏｈｏｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｓ　ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｗｉｃｅ，
１．５ｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｅａｃｈ　ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｗａｓ（６．５３±０．０４）ｍｇ／ｇ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｙｉｅｌｄ　ｗａｓ（１５．２７±０．５５）％
（ｎ＝３）ｂｙ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｉｓ　ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ　ａｎｄ　ｓｔａｂｌｅ，ｗｈｉｃｈ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ
ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｆｒｏｍ　Ｈｅｒｂａ　Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ　Ｈｕｍｉｆｕｓａｅ．
［ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ］　Ｈｅｒｂａ　Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ　Ｈｕｍｉｆｕｓａｅ；ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
［Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ，２０１４，１４（３）：１７６－１７９］
作者简介　张海英（女），副主任中药师，硕士生导师．
Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｚｈｈｙｙ２５８３＠１２６．ｃｏｍ
　　地锦草为大戟科植物地锦（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ　ｈｕｍｉ－
ｆｕｓａ　Ｗｉｌｄ．）或斑地锦（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ　ｍａｃｕｌａｔａ　Ｌ．）的
干燥全草，具有清热解毒、凉血止血、利湿退黄、增强
肝脾功能的作用，用于治疗痢疾、泄泻、皮肤瘙痒、疮
疖痈肿等疾病［１］。地锦草资源十分丰富，全草含黄
酮类（槲皮素等）、没食子酸、内消旋肌醇等活性成
分。提取地锦草中的黄酮类成分常采用加热回流
法，该方法具有溶剂消耗量大、加热时间长的缺点。
超声提取法利用超声波的空化作用、机械效应和热
效应等加速细胞内有效物质的释放、扩散和溶解，具
有快速、安全、效率高等优点。超微粉碎是指利用机
械或流体力学的途径将物料粉碎至粒径＜１０μｍ微
粒的过程，超微粉末具有良好的溶解性、分散性、吸
附性和化学反应活性等特殊理化性质［２］。本研究将
地锦草药材超微粉碎后，用超声提取法提取其中的
总黄酮，采用单因素实验结合正交试验设计，优化地
锦草中总黄酮的提取工艺条件。
１　材　料
１．１　仪器　ＳＹＦＭ－８型超微粉碎振动磨（济南松岳
机器有限责任公司）；Ｃｉｎｔｒａ－２０紫外－可见分光光度
计 （澳大利亚ＧＢＣ科学仪器公司）；ＳＫ３３００ＬＨ 超
声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。
１．２　药品和试剂　地锦草购于新疆自治区维吾尔
医院，经新疆医科大学附属中医医院李永和主任中
药师鉴定为地锦草（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ　ｈｕｍｉｆｕｓａ　Ｗｉｌｄ．）；
芦丁对照品（批号１０００８０－２００７０７，中国食品药品检
定研究院）；亚硝酸钠（分析纯，天津市福晨化学试剂
有限公司）；硝酸铝、９５％乙醇、石油醚（天津市百世
化工有限公司）；氢氧化钠（分析纯，上海化学试剂集
团公司）。
２　方法和结果
２．１　溶液的配制　（１）芦丁对照品溶液：精密称取
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药学服务与研究　Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ　２０１４Ｊｕｎ；１４（３）
张海英，等．用正交设计法优化地锦草中总黄酮的超声提取工艺
芦丁对照品１０．０ｍｇ，置５０ｍｌ量瓶中，加９５％乙醇
适量，超声１０ｍｉｎ使溶解，加９５％乙醇定容，即得
０．２ｍｇ／ｍｌ的芦丁对照品溶液。（２）供试品溶液：地
锦草药材经超微粉碎振动磨粉碎１５ｍｉｎ，得到超微
粉末。精密称取１０ｇ地锦草超微粉末，将９５％乙醇
加适量蒸馏水稀释成７０％浓度，用７０％乙醇溶液
１００ｍｌ超声提取６０ｍｉｎ，并补足减失的重量。滤纸
过滤，滤液用石油醚脱色后置２５０ｍｌ量瓶中，用
７０％乙醇定容，即得。
２．２　最大吸收波长的选择　精密量取供试品溶液
和芦丁对照品溶液各２ｍｌ，置２５ｍｌ量瓶中，加
７０％乙醇至６ｍｌ，加４％亚硝酸钠溶液１ｍｌ，摇匀，
放置６ｍｉｎ。加１０％硝酸铝溶液１ｍｌ，摇匀，放置
６ｍｉｎ，加１０％氢氧化钠溶液１０ｍｌ，用７０％乙醇定
容至刻度。放置１５ｍｉｎ使反应完全，在紫外－可见
分光光度计下４００～７００ｎｍ扫描，确定最大吸收波
长为５００ｎｍ。
２．３　方法学考察
２．３．１　标准曲线的制备　分别精密量取芦丁对照
品溶液１、２、３、４、５、６ｍｌ置２５ｍｌ量瓶中，加９５％乙
醇５、４、３、２、１、０ｍｌ使至６ｍｌ，按２．２项下自“加
４％亚硝酸钠溶液１ｍｌ”开始操作，以９５％乙醇作为
空白对照，用紫外－可见分光光度计在５００ｎｍ处测
定吸光度（Ａ）［３］。以浓度（ｃ）为横坐标，Ａ为纵坐标
进行线性回归，得到标准曲线方程：Ａ＝１２．８１４　ｃ＋
０．００４　５（ｒ＝０．９９９　９），表明芦丁在８～４８μｇ／ｍｌ范
围内线性关系良好。
２．３．２　精密度实验　精密吸取芦丁对照品溶液
２ｍｌ，按２．２项下操作测定含量，重复测定６次。计
算得到ＲＳＤ＝１．２３％（ｎ＝６），表明该方法精密度良
好。
２．３．３　加样回收率实验　精密称取９份已知总黄
酮含量为６．１８ｍｇ／ｇ的地锦草超微粉末５ｇ，按２．１
项下方法（２）制备供试品溶液。将供试品溶液置于
２５ｍｌ量瓶中，每３份精密加入浓度为０．２ｍｇ／ｍｌ的
芦丁对照品溶液０．５、１．０、１．５ｍｌ，７０％乙醇定容至
刻度，得到低、中、高浓度分别为４、８、１２μｇ／ｍｌ的混
合样品溶液。按２．２项操作测定吸光度，计算加样
回收率，结果低、中、高浓度的加样回收率分别为
（９９．２３±１．２１）％、（１００．７９±１．７６）％、（９９．４７±
２．１４）％ （ｎ＝３）。
２．３．４　重复性实验　称取１０ｇ地锦草超微粉末，
共５份，按２．１项下方法（２）制备供试品溶液，测定
吸光度，根据标准曲线方程计算得到总黄酮的平均
含量为（６．１８±０．１１）ｍｇ／ｇ，ＲＳＤ＝１．７８％（ｎ＝６），
表明本方法重复性良好。
２．３．５　稳定性实验　精密量取供试品溶液２ｍｌ，
按２．２项下操作，在溶液配制后２ｈ内每隔１５ｍｉｎ
测定１次吸光度，计算得到ＲＳＤ＝１．２１％（ｎ＝９），
表明供试品溶液在配制后２ｈ内稳定。
２．４　单因素实验　采用单因素实验对超声提取法
的乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等因素
进行考察。考察某个因素时，其他影响因素固定不
变，评价该因素对提取效果的影响。
２．４．１　提取工艺的评价指标　提取工艺评价指标
是总黄酮含量和浸膏得率的综合评分，其中总黄酮
含量和浸膏得率的权重系数分别是６０和４０。总黄
酮含量评分＝（总黄酮含量／最大总黄酮含量）×６０，
浸膏得率评分＝（浸膏得率／最大浸膏得率）×４０，综
合评分＝总黄酮含量评分＋浸膏得率评分。
２．４．２　乙醇浓度的影响　分别用浓度为１０％、
３０％、５０％、７０％、９０％的１２倍体积的乙醇溶液为溶
媒进行提取，每次提取时间为１ｈ，提取次数为２次，
计算综合评分。结果用１０％和３０％的乙醇提取时，
综合评分几乎相同，分别为（３０．４±０．９）和（３１．２±
１．２）（ｎ＝３）。随着乙醇浓度的增加，综合评分提高，
７０％乙醇提取时综合评分达最高值，为（８７．１±
１．６）（ｎ＝３）；９０％乙醇提取时综合评分为（８６．８±
２．１）（ｎ＝３）。考虑到用高浓度乙醇的成本较高，因
此选用浓度为７０％的乙醇作为提取溶媒。
２．４．３　乙醇用量的影响　分别用６、９、１２、１５、１８倍
体积的７０％乙醇溶液进行提取，提取次数为２次，
提取时间为１ｈ，计算综合评分。结果以６倍和９倍
体积的乙醇提取时，综合评分分别为（７２．１±１．１）和
（８０．５±１．２）（ｎ＝３）；１２倍体积的乙醇提取时综合
评分达最高值，为（８５．２±２．１）（ｎ＝３）；１５倍和１８
倍乙醇提取时，综合评分分别为（８４．８±１．９）和
（８４．６±１．８）（ｎ＝３），与１２倍乙醇提取几乎相同。
考虑到大生产中乙醇用量的增加，会导致后续浓缩、
干燥的工作量大幅增加，从而增加生产成本，故选择
９倍、１２倍、１５倍体积的乙醇用量进入正交试验。
２．４．４　提取时间的影响　用１２倍体积的７０％乙
醇分别提取０．５、１．０、１．５、２．０、２．５ｈ，提取次数为２
次，计算综合评分。结果提取时间为０．５、１．０、
１．５ｈ时，综合评分几乎相同，分别为（８２．１±２．０）、
（７９．８±１．８）和（８１．６±１．７）（ｎ＝３）。随着提取时间
延长，综合评分增加。提取２．０和２．５ｈ时，综合评
分达（８６．４±１．９）和（８５．８±１．７）（ｎ＝３）。考虑到总
黄酮的提取率较高，在较短时间内已经溶出了大部
分，并且随着提取时间的延长，增加了无效物质的溶
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药学服务与研究　Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ　２０１４Ｊｕｎ；１４（３）
张海英，等．用正交设计法优化地锦草中总黄酮的超声提取工艺
出，因此选择０．５、１．０、１．５ｈ三个提取时间进入正
交试验。
２．４．５　提取次数的影响　用１２倍量的７０％乙醇
分别提取１、２、３、４次，每次提取时间为１ｈ，计算综
合评分。结果发现，提取１次和２次时，综合评分分
别为（６１．２±１．２）和（７８．６±１．５）（ｎ＝３）；提取３次
时，综合评分达最高值，为（８９．６±２．２）（ｎ＝３）；提取４
次时，综合评分为（８８．５±１．７）（ｎ＝３），与提取３次几
乎相同。考虑到提取时间过长可能导致总黄酮的分
解，故选择提取１、２、３次三个水平进入正交试验。
２．５　正交试验　设计Ｌ９（３４）正交试验，见表１。分
别精密称取地锦草超微粉末１０ｇ，按正交设计安排
实验［４］，测定不同提取条件得到的总黄酮含量和浸
膏得率，计算综合评分，进行统计分析。正交试验结
果见表２和表３。由表２直观分析可知，各因素对
提取综合评分的影响程度为：提取次数＞提取时
间＞乙醇用量，最佳提取工艺为Ａ２Ｂ２Ｃ３。经方差分
析可见，提取次数对提取效果的影响有统计学意义
（Ｐ＜０．０５），而提取时间和乙醇用量的影响无统计
学意义。故确定最佳提取工艺为Ａ２Ｂ２Ｃ３，即地锦草
超微粉末加１２倍量的７０％乙醇溶液回流提取２
次，每次提取１．５ｈ。
表１　正交试验设计的因素和水平
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｄｅｓｉｇｎ
水平 因素Ａ（提取次数，次）
因素Ｂ
（乙醇用量，倍）
因素Ｃ
（提取时间，ｔ／ｈ）
１　 １　 ９　 ０．５
２　 ２　 １２　 １．０
３　 ３　 １５　 １．５
表２　正交试验设计和结果
Ｔａｂｌｅ　２　Ｄｅｓｉｇｎ　ａｎｄ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
序号
因素
Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ
评价指标
总黄酮含量
（ωＢ／ｍｇ·ｇ－１）
总黄酮含
量评分
浸膏得率
（％）
浸膏得率
评分 综合评分
１　 １　 １　 １　 １　 ５．５５　 ５１．１５　 ９．８０　 ２３．７６　 ７４．９１
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ５．７７　 ５３．１８　 １１．２０　 ２７．１５　 ８０．３３
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ５．９７　 ５５．０２　 １１．７０　 ２８．３６　 ８３．３８
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ６．３５　 ５８．５３　 １５．３０　 ３７．０９　 ９５．６２
５　 ２　 ２　 ３　 １　 ６．３５　 ５８．５３　 １５．２０　 ３６．８５　 ９５．３８
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ６．５１　 ６０．００　 １３．７０　 ３３．２１　 ９３．２１
７　 ３　 １　 ３　 ２　 ６．１４　 ５６．５９　 １４．９０　 ３６．１２　 ９２．７１
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ６．１９　 ５７．０５　 １５．７０　 ３８．０６　 ９５．１１
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ５．３９　 ４９．６８　 １６．５０　 ４０．００　 ８９．６８
Ｋ１ ２３８．６２　 ２６３．２４　 ２６３．２３
Ｋ２ ２８４．２１　 ２７０．８２　 ２６５．６３
Ｋ３ ２７７．５０　 ２６６．２７　 ２７１．４７
Ｒ　 ４５．５９　 ７．５８　 ８．２４
表３　方差分析结果
Ｔａｂｌｅ　３　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ
方差来源 离差平方和 自由度（ｆ） 方差 Ｆ值 Ｐ值
Ａ　 ０．０４０　４　 ２　 ０．０２０　２　 １２．１３９ ＜０．０５
Ｂ　 ０．００１　０　 ２　 ０．０００　５　 ０．２９２ ＞０．０５
Ｃ　 ０．００１　２　 ２　 ０．０００　６　 ０．３６５ ＞０．０５
　Ｄ（误差项） ０．００３　３　 ２　 ０．００１　７
２．６　验证实验　称取地锦草超微粉末５０ｇ，共３
份，加１２倍量７０％乙醇溶液提取２次，每次１．５ｈ。
用７０％乙醇补足减失重复，滤纸过滤，滤液用石油
醚脱色后置２５００ｍｌ量瓶中，用７０％乙醇定容即得
供试品溶液，按２．２项方法显色后测定吸光度。结
果 测 得 药 材 样 品 中 总 黄 酮 含 量 为 （６．５３±
０．０４）ｍｇ／ｇ，浸膏得率为（１５．２７±０．５５）％（ｎ＝３）。
结果表明，检测指标接近或高于正交表中最优值，表
明优选的提取条件稳定、可行。
３　讨　论
　　药理学研究发现，地锦草有良好的抗菌、抗炎和
止血作用，对游离羟基引发的ＤＮＡ氧化损伤有一
定的保护作用，并且可以清除和抑制自由基，是一种
较强的抗氧化植物［５］。地锦草中含有黄酮类（槲皮
素等）、没食子酸、内消旋肌醇等活性化合物，其水提
液和醇提液均具有较强的黄酮反应，因此本研究选
择总黄酮含量和浸膏得率作为提取效果的评价指
·８７１·
ＩＳＳＮ　１６７１－２８３８　ＣＮ　３１－１８７７／Ｒ　Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ　药学服务与研究　２０１４Ｊｕｎ；１４（３）
ｗｗｗ．ｐｃａｒｊｏｕｒｎａｌ．ｎｅｔ．ｃｎ　Ｅ－ｍａｉｌ　ＰｈａｒｍＣＲ＠１６３．ｃｏｍ　Ｐｈｎ／Ｆａｘ　８６－２１－６５５１９８２９　Ｐｈｎ　０２１－３１１６２３３０
　　　　　
标。总黄酮的含量测定方法较多，常用方法有对照
品测定法、金属离子络合法、ＨＰＬＣ法和荧光分光光
度法等［６］。金属离子络合法的原理是基于黄酮类化
合物分子中具有３－羟基、５－羟基或邻二酚羟基，易与
金属盐类如铝盐、锆盐、锶盐、镁盐等反应，生成有色
的金属络合物。亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠显色反
应由于测定结果稳定、可靠、重现性好，常用于黄酮
类化合物的含量测定，本研究也选用该方法测定地
锦草提取液中总黄酮的含量。
　　超声提取主要是利用超声波的空化作用加速植
物有效成分的浸出，另外超声波的次级效应，如机械
振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能促进待提成
分的扩散和释放。与传统回流提取法相比，虽然超
声提取的浸膏得率较低，但有效成分提取率高，提取
时间短，省时、节能，操作方便，尤其对于热敏感成分
更为适宜，因此被广泛用于植物有效成分的提取。
超微粉碎是采用振动磨粉碎药材，提高细胞破壁率，
从而提高化学成分的溶出速率和溶出量；但由于超
微粉末太细，加热回流提取时要持续搅拌，否则容易
糊化，给操作带来困难。本研究将超微粉碎技术和
超声提取工艺相结合用于地锦草中总黄酮的提取，
方法操作简单、提取效率高、生产成本小，适宜在制
剂生产中推广应用。
【参考文献】
［１］　国家药典委员会．中华人民共和国药典．２０１０年版 一部［Ｓ］．
北京：中国医药科技出版社，２０１０：１１８．
Ｓｔａｔｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ　Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ　 ｏｆ　 ｔｈｅ
Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｒｅｐｕｂｌｉｃ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ．２０１０ｅｄ．Ｖｏｌｕｍｅ　１［Ｓ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：
Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｒｅｓｓ，２０１０：１１８．Ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ．
［２］　张海英，刘　飞．超微粉碎对罗勒显微特征及总黄酮体外溶出
的影响［Ｊ］．药学服务与研究，２０１４，１４（１）：３５－３８．
Ｚｈａｎｇ　ＨａｉＹｉｎｇ，Ｌｉｕ　Ｆｅｉ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｕｌｔｒａｍｉｃｒｏ　ｐｕｌｖｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｎ
ｔｈｅ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｏｃｉｍｕｍ　ｂａｃｉｌｉｃｕｍａｎｄ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ，２０１４，
１４（１）：３５－３８．Ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ．
［３］　辛海量，胡　园，张巧艳，等．不同产地蔓荆子中黄酮类成分含
量分析［Ｊ］．药学服务与研究，２０１０，１０（６）：４２９－４３１．
Ｘｉｎ　ＨａｉＬｉａｎｇ，Ｈｕ　Ｙｕａｎ，Ｚｈａｎｇ　ＱｉａｏＹａｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒ－
ｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｖｉｔｅｘ　ｔｒｉｆｏｌｉａ　Ｌ．ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｉｓ－
ｔｒｉｃｔｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ，２０１０，１０（６）：４２９－４３１．Ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂｓｔｒａｃｔ．
［４］　黄家锟，宋学伟，韩泳平，等．正交设计法优化大花红景天多糖
的提取工艺［Ｊ］．华西药学杂志，２００７，２２（６）：６５０－６５１．
Ｈｕａｎｇ　ＪｉａＫｕｎ，Ｓｏｎｇ　ＸｕｅＷｅｉ，Ｈａｎ　ＹｏｎｇＰｉｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｐｔｉｍｉｚａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｒｈｏｄｉｏｌａ　ｃｒｅｎｕｌａｔａ　ｐｏｌｙ－
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２００５，３６（６）：６－１０．Ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ．
［收稿日期］　２０１３－０３－０４ ［修回日期］　２０１３－１１－０２
［本文编辑］　兰　
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
芬
（上接第１７５页）
２０次／ｍｉｎ，血压１５０／７０ｍｍ　Ｈｇ，急性病容，精神差，咽喉充
血，双肺呼吸音粗，未闻及干湿性啰音。入住单间病房隔离，
房间进行紫外线消毒。患者自发热以来，仍间断服用甲巯咪
唑。由于患者严重粒细胞缺乏，因此立即停用甲巯咪唑，给
予重组人粒细胞集落刺激因子注射液 （商品名 瑞白）
３００μｇ，皮下注射，ｑｄ；亚胺培南／西司他汀钠２ｇ，ｉｖｇｔｔ，ｑ８ｈ；
依替米星氯化钠注射液０．２ｇ，ｉｖｇｔｔ，ｑｄ，抗感染治疗，同时采
取心电监护、持续吸氧、物理降温等治疗措施。２０１２－０８－１４
患者感觉胸闷、持续发热，体温最高达３９．８℃，Ｎ　０．０５×
１０９／Ｌ。细菌培养结果示：肺炎克雷伯菌阳性，根据药敏试验
结果继续原抗感染治疗。２０１２－０８－１６患者持续胸闷、高热，
病情 危 重，食 欲 差，血 常 规 示 ＷＢＣ　０．９×１０９／Ｌ，
Ｎ　０．１×１０９／Ｌ，沿用之前的治疗方案。当日下午，应患者家
属的要求，将患者转往上级医院治疗。转院后电话随访，患
者于２０１２－０８－１９出现感染性休克，抢救无效死亡。
２　讨　论
　　甲巯咪唑是一种硫脲类抗甲状腺药物，通过抑制甲状腺
素的产生而发挥作用，主要用于甲亢（包括Ｇｒａｖｅｓ症）、甲状
腺切除术的术前准备、放射性碘治疗的辅助剂以及甲状腺危
象的治疗。常见不良反应有皮肤瘙痒和皮疹，严重不良反应
为血液系统异常，轻度致白细胞减少，严重致粒细胞缺乏［１］。
粒细胞缺乏所致死亡罕见，但文献也有报道［２，３］。当患者的
体温≥３８℃并持续２ｄ以上，感觉不适，咽喉疼痛，同时出现
感冒样症状，医师应高度警惕粒细胞缺乏的可能。当主观症
状和客观检查结果都提示粒细胞缺乏，应该立即停药，检查
ＷＢＣ计数和分类计数。一般认为连续监测 ＷＢＣ是不能预
测粒细胞缺乏的，因为后者的发生非常突然。医师应该告知
患者及其看护人员识别粒细胞缺乏症的方法，并提醒他们如
果发生口腔溃疡、咽喉肿痛、发热、擦伤、身体不适或其他非
特异性疾病时，要立即寻求医疗救护。研究发现，抗甲状腺
药物治疗的前３个月内每周监测 ＷＢＣ及其分类计数，可以
在感染发生前及时发现无症状的粒细胞缺乏症［４］。
　　甲巯咪唑致粒细胞缺乏的发生率约为０．５％，主要发生
在治疗的最初３个月，但其他时间段内也可能发生，最晚发
（下转第２１７页）
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药学服务与研究　Ｐｈａｒｍ　Ｃａｒｅ　Ｒｅｓ　２０１４Ｊｕｎ；１４（３）
张海英，等．用正交设计法优化地锦草中总黄酮的超声提取工艺