免费文献传递   相关文献

地锦草提取物对体外α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究



全 文 :地锦草提取物对体外 α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究
郑 巧 , 杨二磊, 朱 影, 屠 洁*
(江苏科技大学生物技术学院,江苏 镇江 212018)
收稿日期:2015-07-08
基金项目:江苏科技大学本科生创新计划 (2014 年)
作者简介:郑 巧 (1994—) ,女,研究方向为天然药物活性成分。Tel:18362894635,E-mail:1300205004@ qq. com
* 通信作者:屠 洁 (1977—) ,女,硕士,副教授,研究方向为食品生物技术。Tel:13921581995,E-mail:tujie@ just. edu. cn
摘要:目的 研究地锦草 (Euphorbia humifusa Willd.)提取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性及其体外抗氧化活性。方法
从地锦草 40%、70%、95%乙醇提取物对 α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性中选择最适乙醇体积分数,再对该提取物
用乙醚、氯仿、水饱和正丁醇和水相进行萃取分离,比较对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性、自由基清除能力、铁离子还原
能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力。结果 地锦草 95%乙醇提取物的抑制活性较优,再经乙醚萃取获
得萃取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性最强,IC50值为 78. 8 μg /mL,化学成分分析显示其含有较多的酚性成分。乙醚萃
取物具有较好的抗氧化能力,其自由基清除能力 EC50值为 132. 9 μg /mL,铁离子还原能力 EC50值为 76. 9 μg /mL,羟自
由基清除能力 EC50值为 182. 7 μg /mL,超氧阴离子清除能力 EC50值为 31. 3 μg /mL。结论 地锦草 95%乙醇提取物的乙
醚萃取物具有较强的 α-葡萄糖苷酶抑制活性,同时具有一定的抗氧化活性。
关键词:地锦草;乙醇提取物;α-葡萄糖苷酶抑制活性;抗氧化活性
中图分类号:R285. 5 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)02-0252-06
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2016. 02. 005
Antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities of Euphorbia Humifusa ex-
tracts
ZHENG Qiao, YANG Er-lei, ZHU Ying, TU Jie*
(School of Biotechnology,Jiangsu University of Science and Technology,Zhenjiang 212018,China)
ABSTRACT:AIM To study antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities of Euphorbia Humifusa extracts in
vitro. METHODS The α-glucosidase inhibitory activities of 40%,70%,and 95% ethanol extracts from E. Hu-
mifusa were tested,of which the higher inhibitory activity of ethanol extract was selected for further extraction.
Tested extraction solvents were diethyl ether,chloroform,water-satureted n-butanol,and water. Free radical-,hy-
droxyl free radical-,superoxide anion- scavenging capacity,and iron ion reducing capacity were examined. RE-
SULTS 95% ethanol extracts from E. Humifusa had the stronest α-glucosidase inhibitory activity and the diethyl
ether extract had the strongest α-glucosidase inhibitory activity of them,with its IC50 value at 78. 8 μg /mL. The
preliminary chemical compositions of diethyl ether extract showed phenolic compounds;their free radical scavenging
capacity EC50 was 132. 9 μg /mL;iron ion reducing capacity was 76. 9 μg /mL;hydroxyl free radical scavenging ca-
pacity was 182. 7 μg /mL;superoxide anion scavenging capacity was 31. 3 μg /mL. CONCLUSION The diethyl
ether extract of 95% ethanol extracts from E. Humifusa has the antioxidant and relatively the strongest α-glucosi-
dase inhibitory activity.
KEY WORDS:Euphorbia humifusa;ethanol extract;α-glucosidase inhibitory activity;antioxidant activity
地锦草 (Euphorbia humifusa Willd.)又名血见
愁,是大戟科大戟属植物地锦草的全草,为一年生
匍匐小草本植物。广泛分布于我国各地,具有清热
解毒、凉血止血、抗氧化、抗真菌和抗乙型肝炎病
252
2016 年 2 月
第 38 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2016
Vol. 38 No. 2
毒等作用[1-5]。董福轮等[6]研究表明,地锦草配合
其他中西医治疗能有效控制糖尿病患者空腹血糖,
表明地锦草具有潜在的治疗糖尿病的作用。但是,
地锦草降糖活性物质基础以及作用机制尚未阐明。
α-葡萄糖苷酶 (EC. 3. 2. 1. 20,α-glucosidase)
是一类存在于人体小肠刷状缘上的水解酶,能够催
化碳水化合物非还原末端的 α-1,4 糖苷键的水解,
释放葡萄糖,主要包括蔗糖酶、麦芽糖酶、异麦芽
糖酶和海藻糖酶等。α-葡萄糖苷酶的酶活性可以影
响人体对蔗糖、淀粉、糊精等碳水化合物的吸收利
用[7]。有报道指出通过抑制 α-葡萄糖苷酶活性来
治疗某些疾病已经成为一种有效的临床治疗手段,
其中,α-葡萄糖苷酶抑制剂在糖尿病治疗中的运用
最为成熟。目前 α-葡萄糖苷酶抑制剂已被第三次
亚太地区糖尿病治疗药物指南推荐为降低餐后血糖
的一线药物[8],如阿卡波糖 (acarbose)、伏格列
波糖 (voglibose)、米格列醇 (miglitol)等。α-葡
萄糖苷酶抑制剂通过可逆性抑制或竞争性抑制小肠
刷状缘上的 α-葡萄糖苷酶活性,从而阻抑酶活性
的发挥,阻滞双糖水解为单糖,后延葡萄糖或单糖
的吸收时间,减缓餐后高血糖的发生[9]。本研究
将以 α-葡萄糖苷酶体外抑制活性为追踪指标,测
定地锦草乙醇提取物对 α-葡糖糖苷酶的抑制活性,
进一步采用不同极性溶剂系统分离,并对各分离部
位进行初步的化学成分分析,最后测定 α-葡萄糖
苷酶的抑制活性部位的抗氧化活性。以期为高效、
安全的地锦草 α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发运用提
供实验基础。
1 实验材料与仪器
1. 1 实验材料 地锦草,取材于江苏科技大学西
校区,经植物学讲师褚衍亮鉴定为大戟属植物地
锦草。
实验小鼠:昆明小鼠,雄性,清洁级,(25 ±
2) g,江苏大学实验动物中心,许可证号,
SCXK2012-0011。
1. 2 实验仪器 UV-9600 紫外可见分光光度计
(北京瑞利分析仪器公司) ;RE-52D 旋转蒸发仪
(上海青浦沪西仪器厂) ;601 超级恒温水浴锅 (金
坛市国旺实验仪器厂) ;TGL-16G 冷冻离心机 (上
海安亭科学仪器厂) ;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼
(DPPH) (日本和光纯药工业株式会社) ;葡萄糖
测定试剂盒购自南京建成科技有限公司;4-硝基酚
为国产化学纯;三羟甲基氨基甲烷 (Tris)为国产
生化试剂;甲醇为国产色谱纯;磷酸氢二钠、磷酸
二氢钠、铁氰酸钾、三氯乙酸、氯化铁、氯化钠、
蔗糖、碳酸钠、醋酸、盐酸等均为国产分析纯。
2 实验方法
2. 1 地锦草样品的预处理 将新鲜的地锦草全草
清洗干净,自然晾晒,挥发水分至样品恒重,放入
粉碎机中粉碎至粉末状过 80 目筛,干燥低温
(4 ℃)保存备用。
2. 2 地锦草 95%乙醇提取物的制备 取 3 份地锦
草粉末,分别加入 100 mL 的 95%、70%、40%乙
醇,搅拌浸提 12 h,取上清液,重复 3 次,合并提
取液,50 ℃减压浓缩干燥,即得地锦草醇提取物。
将得到的提取物冷冻干燥,4 ℃保存备用。
2. 3 蔗糖酶的抑制实验
2. 3. 1 蔗糖酶的提取 蔗糖酶制备方法参照文献
[10-11]略加修改而来,取成年小鼠小肠,用生理
盐水冲洗干净并剪碎,加入少许石英砂和聚乙烯吡
咯烷酮,研磨至匀浆,在 0 ~ 4 ℃下 8 000 r /min离
心 15 min。取上清液,即为粗酶液。以蔗糖作为底
物测定蔗糖酶的活性。
2. 3. 2 蔗糖酶的抑制活性测定 蔗糖酶抑制活性
的测定参照 Kim[12]的方法略加修改而来,反应体
系如下:10 μL 2 mol /L 蔗糖溶液,加入 70 μL
0. 05 mol /L pH 6. 8 的磷酸缓冲液,再加入 10 μL
提取物,37 ℃预热 5 min后,加入 10 μL酶液 (约
0. 1 U,实验条件下 1 min 内水解麦芽糖产生
1 μmol葡萄糖所需酶量,定义为一个酶活力单位)
启动 反 应。37℃ 反 应 30 min,加 入 100 μL
0. 05 mol /L pH 8. 8 Tris-HCl 缓冲液终止反应。以
提取溶液代替抑制剂作为全酶管;以缓冲液代替酶
液作为校正管。酶促反应产生的葡萄糖的测定采用
葡萄糖测定试剂盒 (葡萄糖氧化酶-过氧化物酶
法)。在酶促反应体系中分别加入不同质量浓度的
抑制剂,测定其对蔗糖酶活性的影响。按公式 1 计
算抑制率。
抑制率 =全酶管吸光值-实验管吸光值
全酶管吸光值-校正管吸光值
× 100% (1)
2. 3. 3 IC50值的测定 以横坐标为酶促反应体系
中抑制剂的质量浓度,纵坐标为抑制率,绘图,计
算并生成公式,其抑制率为 50%时的抑制剂浓度,
即为 IC50值。
2. 4 95%乙醇提取物的分部萃取 将所得的 95%
乙醇提取物,用少量的水混悬,再倒入 3 倍体积的
乙醚混匀,接着倒入分液漏斗中,剧烈振荡
30 min,室温下静置至两相完全分离,即得上相乙
352
2016 年 2 月
第 38 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2016
Vol. 38 No. 2
醚相,下相继续依次用氯仿、水饱和正丁醇萃取,
分别得到氯仿相、正丁醇相和萃余相 (水相)。将
各萃取液减压浓缩至膏状体,4 ℃保存,待用。
2. 5 地锦草萃取物的化学成分分析 化学成分分
析按照谢奇[13]的方法略加修改而来。采用三氯化
铁法分析酚性成分,pH 值法分析脂肪酸成分,醋
酸铅法分析黄酮类成分,碘-碘化钾法和泡沫实验
分析生物碱成分,氯仿-浓硫酸法分析三萜类成分,
苯酚浓硫酸法分析多糖类成分。
2. 6 地锦草乙醚萃取物 (DEEF)抗氧化性能的
测定
2. 6. 1 DEEF 的 DPPH 自由基清除能力的测定
DPPH自由基清除能力的测定参考 Liu[14]的方法略
加修改而来。以甲醇梯度稀释地锦草提取液,取
1. 5 mL 样 品 加 入 2. 5 mL DPPH, 1. 5 mL
0. 06 mmol /L甲醇溶液,混匀,20 min 后测定
517 nm处吸光度;同法 1. 5 mL 甲醇加入 2. 5 mL
DPPH溶液混匀测定吸光度。每份样品平行操作 3
次,取平均值,以维生素 (Vc)为阳性对照。按
照公式 2 计算清除率。清除能力以 IC50来表示,
IC50即清除率为 50%时所需的提取物质量浓度。其
中 A0为空白对照;Ai为反应液的吸光度值;Aj为不
加 DPPH应用液时提取液自身的吸光度值。
清除率(%)= [1 - (Αi - Α j)/Α0]× 100% (2)
2. 6. 2 DEEF的铁离子还原力的测定 铁离子还
原力的测定按照 Liu[14]的方法略加修改而来。
1. 0 mL提取液中,加入 2. 5 mL 0. 2 mol /L pH 6. 6
磷酸缓冲液,然后加入 2. 5 mL 1%六氰合铁酸钾,
50 ℃水浴 30 min后加入 2. 5 mL 10%三氯乙酸,混
均后以 4 000 r /min离心 10 min,取上清液 2 mL同
2 mL 甲醇和 0. 4 mL 0. 1% 三氯化铁混均,于
700 nm比色测定。同时以 Vc 作为阳性对照,考察
样品的还原力。还原力以 IC50来表示,IC50为吸光
值为 0. 5 时的提取液质量浓度值。
2. 6. 3 DEEF的羟自由基清除能力的测定 羟自
由基清除能力的测定按照梁鹏[15]的方法略加修改
而来,以甲醇溶液梯度稀释地锦草提取液至 2 mL,
依次加入 6 mmol /L的 FeSO4 2 mL,2. 4 mmol /L 的
H2O2 溶液 2 mL,摇匀,静置 10 min,再加入
6 mmol /L的水杨酸溶液 2 mL摇匀,然后 37 ℃水浴
30 min,离心 (3 000 r /min,10 min) ,取上清液
于 510 nm处测吸光值,以 Vc作为阳性对照。按照
公式 3 计算清除率。清除能力以 IC50来表示,IC50
即清除率为 50%时所需的提取物浓度。其中 A0为
空白对照;Ai为反应液的吸光度值;Aj为不加水杨
酸时提取液自身的吸光度值。
清除率(%)= [1 - (Αi - Α j)/Α0]× 100% (3)
2. 6. 4 DEEF的超氧阴离子清除能力的测定 超
氧阴离子清除能力的测定按照李明静[16]的方法略
加修改而来。甲醇溶液梯度稀释地锦草提取液至
1. 0 mL,加入 3 mL Tris-HCl (pH = 8. 2) ,25 ℃水
浴 20 min 后,加入 100 μL 10 mmol /L 邻苯三酚,
精确反应 4 min,滴入 100 μL 6 mol /L HCl 终止反
应,在 325 nm 处测定吸光值。每个试验作 3 个平
行样。空白组以蒸馏水代替样品溶液。以抗坏血酸
作为阳性对照,考察样品清除·O -2 的能力。清除
能力以 IC50来表示,IC50即清除率为 50%时所需的
提取物浓度。按照公式 4 计算清除率。
清除率(%)=[(Α空白 - Α样品)/Α空白]× 100% (4)
3 结果与分析
3. 1 不同体积分数乙醇溶液对地锦草提取率的影
响 10 g 地锦草粉末经 95%、70%、40%乙醇提
取,过滤并旋转蒸发,以及减压浓缩干燥之后,得
到 3 种提取物。提取率如图 1 所示。实验结果表
明:40%乙醇提取地锦草的提取率为 11. 001%;
70%乙醇提取地锦草的提取率为 15. 872%;95%
乙醇提取地锦草的提取率为 10. 594%。
图 1 不同体积分数乙醇对地锦草的提取率的
影响
Fig. 1 Effects of different ethanol concentrations
on the extraction rate from Euphorbia Hu-
mifusa
3. 2 地锦草提取物对鼠肠蔗糖酶的抑制活性 将
所得到的 95% 乙醇提取物、70% 乙醇提取物、
40%乙醇提取物与二甲亚砜混匀配成溶液,使得反
应体系的抑制剂最终的质量浓度为 1、5、10、50、
100 μg /mL。测得其对鼠肠蔗糖酶抑制率,结果如
图 2 所示。
地锦草 95%乙醇提取物对蔗糖酶的抑制活性
明显好于 40%乙醇提取物和 75%乙醇提取物。在
1 ~ 100 μg /mL范围内,地锦草 40%与 95%乙醇提
452
2016 年 2 月
第 38 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2016
Vol. 38 No. 2
图 2 地锦草提取物对鼠肠蔗糖酶的抑制率
Fig. 2 Inhibitory activities of Euphorbia Humifusa at
different concentrations on α-glucosidase
取物对蔗糖酶的抑制呈现先上升后下降的趋势,在
1 ~ 10 μg /mL范围内随着抑制剂质量浓度的增加,
抑制率增高;在 10 μg /mL时,地锦草 95%乙醇提
取物对蔗糖酶的抑制率达到 48%;在 10 ~
100 μg /mL之后随着抑制剂质量浓度的增加,抑制
率降低。
3. 3 95%乙醇提取物的萃取分离 由前面实验得
到的最好的抑制酶活性的相是 95%乙醇相,我们
对该相进一步进行物质的萃取分离,选择不同极性
的溶剂:乙醚、氯仿、水饱和的正丁醇进行萃取分
离,加上最后水相,得到四相。各萃取物的得率结
果如图 3 所示。
图 3 地锦草 95%乙醇提取物各萃取物的萃取率
Fig. 3 Extraction of 95% ethanol extract of Eu-
phorbia humifusa extracts rate
萃取 率 分 别 为 乙 醚 相 7. 093%,氯 仿 相
0. 569%,水 饱 和 正 丁 醇 相 14. 450%, 水
相 9. 821%。
3. 4 不同萃取物对蔗糖酶的抑制率 将所得到的
乙醚萃取物与二甲亚砜混匀,使得反应体系的抑制
剂最 终 的 质 量 浓 度 为 1、 10、 25、 50、 75、
100 μg /mL,测其抑制率,同样将氯仿相、水饱和
的正丁醇相和水相分别配成相同质量浓度,得到对
鼠肠蔗糖酶抑制率,结果如图 4 所示。
图 4 不同萃取物对蔗糖酶的抑制率
Fig. 4 Inhibition ratio of different extracts on
α-glucosidase
95%地锦草乙醚萃取物对蔗糖酶的抑制率在
1 ~ 100 μg /mL范围内随着抑制剂质量浓度的增加
而增高;95%地锦草水饱和正丁醇萃取物对蔗糖酶
的抑制率在 1 ~ 100 μg /mL 范围内并不明显,在
100 μg /mL时抑制率仅达到 22%;95%地锦草氯
仿萃取物对蔗糖酶抑制率在 1 ~ 100 μg /mL 范围内
随质量浓度增大呈现先上升后下降的趋势,在
50 μg /mL时抑制率达到 33%;95%地锦草水提取
物对蔗糖酶的抑制率在 1 ~ 100 μg /mL 范围内变化
并不明显。按公式 1 计算得到的抑制率通过作图计
算可得 DEEF IC50值为 78. 8 μg /mL。曹乃峰
[17]等
用甲醇提取地锦草中降糖活性物质,其石油醚提取
物 IC50 = 279. 40 μg /mL、正丁醇提取物 IC50 =
130. 70 μg /mL。本实验得到的 DEEF 的 IC50值为
78. 8 μg /mL,比曹乃峰得到甲醇石油醚提取物和
正丁醇提取物低,说明 DEEF 具有较好的 α-葡萄
糖苷酶抑制活性。
3. 5 不同萃取物的化学成分分析 不同的萃取物
经过化学成分分析,结果显示各萃取物中含有酚性
成分、脂肪酸成分、三萜类成分等。乙醚相、氯仿
相、水饱和正丁醇相及水相的结果如表 1 所示。
由化学显色分析可知,95%地锦草的醇提物
中,经过乙醚、氯仿、水饱和正丁醇萃取后,萃取
物的组成成分各不相同。其中 DEEF中的三萜类成
分少于其他三相,而酚性成分多余其余三相,而其
余成分与其他萃取物所含大致相同。根据 DEEF为
地锦草体外抑制 α-葡萄糖苷酶活性最强组分,初
步推测 DEEF中的酚性成分可能是地锦草降糖活性
物质的基础。田瑛[18]等从地锦草 70%乙醇提取物
中分离得到 7 个酚性化合物如短叶苏木酚 (brev-
ifolin)、短 叶 苏 木 酚 酸 (brevifolin carboxylic
acid)、短叶苏木酚酸甲酯 (methyl brevifolincarbox-
ylate)等。
552
2016 年 2 月
第 38 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2016
Vol. 38 No. 2
表 1 萃取物的化学成分分析
Tab. 1 Preliminary chemical composition analysis of dif-
ferent extracts
萃取物 乙醚相 氯仿相 水饱和的正丁醇相 水相
酚性成分 + + + + +
脂肪酸 + + + +
黄酮类成分 — — + —
生物碱 — — + —
三萜类 + + + + + + +
多糖 — — — +
注: +表示含有,—表示不含有
3. 6 95%地锦草醇提物的乙醚萃取物抗氧化活性
的测定 按“2. 6”项实验方法从 4 个方面进一步
考察了 DEEF 的体外抗氧化能力。结果如表 2
所示。
表 2 地锦草乙醚萃取物的抗氧化活性
Tab. 2 Antioxidant activities of DEEF
检测项目
乙醚萃取物 /
(μg·mL-1)
Vc /
(μg·mL-1)
DPPH自由基清除能力 EC50 132. 9 1. 2
铁离子还原能力 EC50 76. 9 3. 1
羟自由基清除能力 EC50 182. 7 12. 3
超氧阴离子清除能力 EC50 31. 3 31. 8
DEEF 的超氧阴离子清除能力 EC50 值为
31. 3 μg /mL,Vc 的 EC50值为 31. 8 μg /mL,表明
DEEF具有较好的超氧阴离子清除能力。李容[19]
等研究表明白茅根多糖对羟基自由基有清除作用,
EC50为 1. 1 mg /mL,王卫东
[20]等研究表明陈皮提
取物质量浓度为 600 mg /L 时对羟基自由基抑制率
为 51. 23%。DEEF对羟自由基的清除率为 EC50 =
182. 7 μg /mL,可见 DEEF 对羟自由基的清除能力
比白茅根多糖与陈皮提取物好。
4 讨论
糖尿病 (diabetes mellitus,DM)是在遗传和
环境因素相互作用下,产生胰岛素分泌相对不足、
绝对不足、胰岛素抵抗,继而引起体内的糖、蛋白
质、脂肪、水、电解质等代谢紊乱,其中以 2 型糖
尿病居多。国际糖尿病联盟 (IDF)2013 年公布的
第六版“IDF糖尿病地图”显示,中国糖尿病人数
居于世界首位,为 9 840 万。糖尿病的治疗和防治
给社会经济带来沉重的经济负担。α-葡萄糖苷酶抑
制剂是治疗糖尿病的一种有效口服药物[7],其可
通过抑制小肠 α-葡萄糖苷酶的活性,延缓多糖的
降解,减少葡萄糖的吸收,抑制餐后血糖的升高。
因此,探寻高效、安全的 α-葡萄糖苷酶抑制剂是
糖尿病干预或治疗的重要研究内容。
王翼[21]等研究表明植物中的多糖、皂苷、黄
酮、生物碱、酚类这 5 类化学成分在降血糖方面有
显著效果,本实验化学成分分析结果表明 DEEF中
含有较多的酚性成分,且 DEEF 对 α-葡萄糖苷酶
活性抑制作用最强。田瑛[18]等从地锦草 70%乙醇
提取物中分离得到 7 个酚性化合物,有短叶苏木酚
(brevifolin)、短叶苏木酚酸 (brevifolin carboxylic
acid)、短叶苏木酚酸甲酯 (methyl brevifolincarbox-
ylate)等。由此可见,地锦草中的酚类物质可能为
降糖活性物质基础。曹乃峰[17]等首先提出地锦草
甲醇提取物具有较好的 α-葡萄糖苷酶抑制活性,
活性物质为地锦草石油醚提取物、乙酸乙酯提取
物、正丁醇提取物。本实验以 α-葡萄糖苷酶体外
抑制活性为追踪指标,测得地锦草的 95%乙醇提
取物具有最高的 α-葡萄糖苷酶的抑制活性 (IC50 =
78. 8 μg /mL) ,进一步采用不同极性的溶剂对 95%
地锦草醇提物进行萃取分离,得到 α-葡萄糖苷酶
的抑制活性最强的 DEEF部位,实验表明 DEEF 部
位同时具有较好的抗氧化活性。
Brownlee[22]等提出氧化应激是糖尿病并发症的
发生的机制之一。氧化应激是体内大量活性分子的
产生和抗氧化防御能力不平衡的一种状态,其会导
致组织受损。活性氧 (ROS)是氧化应激的主要来
源之一,主要包括超氧阴离子、羟自由基、过氧化
氢等[23]。本实验以 DEEF 对 DPPH 自由基、羟自
由基、超氧阴离子的清除能力以及铁离子的还原能
力研究了 DEEF 的抗氧化能力,结果表明,DEEF
清除超氧阴离子的 EC50值为 31. 3 μg /mL,羟自由
基清除能力 EC50值为 182. 7 μg /mL,铁离子还原能
力 EC50值为 76. 9 μg /mL,DPPH 自由基清除能力
EC50值为 132. 9 μg /mL。李洁
[24]等研究表明昆仑
雪菊多糖具有 α-葡萄糖苷酶抑制活性,质量浓度
为 0. 091 72 mg /mL时,对 α-葡萄糖苷酶抑制作用
达到 50%,DPPH 自由基清除能力 EC50 值为
0. 939 4 mg /mL,具有一定的抗氧化能力;李荣[19]
等研究表明,白茅根多糖对羟基自由基有清除作
用,EC50为 1. 1 mg /mL,但对 α-葡萄糖苷酶抑制作
用较低。由此可见,DEEF具有良好的 α-葡萄糖苷
酶抑制能力且同时具有较好的抗氧化活性。因此,
本实验在为地锦草的降糖活性机制研究提供实验基
础,同时也为地锦草的进一步开发及其在降糖活性
保健产品中的利用奠定基础。
参考文献:
[1] 柳润辉,王汉波,孔令文. 地锦草化学成分的研究[J].
652
2016 年 2 月
第 38 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2016
Vol. 38 No. 2
中草药,2001,32(2) :107-108.
[2] 安惠霞,古力娜·达吾提,李治建,等. 地锦草有效部位
抗真菌作用及其机制研究[J]. 中国药理学通报,2010,
26(9) :1162-1165.
[3] Tian Y,Sun L M,Liu X Q,et al. Anti-HBV active flavone
glucosides from Euphorbia humifusa Willd. [J]. Fitoterapia,
2010,81(7) :799-802.
[4] Shinkai H,Onogi S,Tanaka M, et al. Isoxazolidie-3,5-
dipne and noncyclicl,3-dicarbonyl compounds as hypoglycemic
agents[J]. J Med Chem,1998,41(11) :19-27.
[5] Zhou J M,Wang G Y,Wu J H. Synthesis and in vitro charac-
terization of ionone-based chalcones as novel antiandrogens ef-
fective against multiple clinically relevant androgen receptor mu-
tants[J]. Invest New Drugs,2010,28(3) :291-298.
[6] 董福轮,季 蓓,陈英群. 鸟不宿、地锦草降低血糖的临
床研究[J]. 四川中医,2002,20(4) :24-25.
[7] Asano N,Nishida M,Kizu H,et al. Fagomine isomers and
glycosides from Xanthocercis zambesiaca[J]. J Nat Prod,
1997,60(3) :98-102.
[8] Baron A D. Postprandial hyperglycemia and alpha-glucosidase
inhibitors[J]. Diabetes Res Clin Pract,1998,40 (3) :
51-55.
[9] 马庆一,陈春涛,时国庆,等. 天然 α-葡萄糖苷酶抑制剂
的研究[J]. 食品工业科技,2005,26(8) :51-53.
[10] 陈百泉,李吕勤,常 星,等. 头花蓼对 α-葡萄糖苷酶的
抑制活性研究[J]. 中国实验方剂学杂志,2010,16(8) :
151-53.
[11] 李晓媛,胡桂雨,王碧川. 白藜芦醇对大鼠 α-葡萄糖苷酶
活性影响[J]. 华北煤炭医学院学报,2010,12(1) :
151-153.
[12] Kim J S,Kwon C S,Son K H. Inhibition of alphα-glucosi-
dase and amylase by luteolin a flavonoid[J]. Biosci Biotech
Bioch,2000,64(11) :2458-2461.
[13] 谢 奇,李治建,斯拉普·艾白,等. 地锦草提取物以及
有效部位化学成分的初步研究[J]. 时珍国医国药,2011,
2(8) :1814-1816.
[14] Liu S C,Lin J T,Wang C K,et al. Antioxidant properties of
various solvent extracts from lychee (Litchi chinenesis Sonn.)
flower[J]. Food Chem,2008,9(88) :1-5.
[15] 梁 鹏,甄润英. 辣木茎叶中水溶性多糖的提取及抗氧化
活性的研究[J]. 食品研究与开发,,2013,34(14) :
25-28.
[16] 李明静,庆伟霞,杨玉霞,等. 七种天然黄酮类化合物对
超氧阴离子自由基的清除活性[J]. 化学研究,2006,17
(4) :73-75.
[17] 曹乃峰. 费菜和地锦草生物活性成分研究[D]. 开封:河
南大学,2011:5.
[18] 田 瑛,孙立敏,刘细桥,等. 中药地锦草酚性成分[J].
中国中药杂志,2010,35(5) :613-615.
[19] 李 容,梁榕珊,覃 涛,等. 白茅根多糖抗氧化活性及
抑制 α-葡萄糖苷酶活性研究[J]. 食品研究与开发,2014,
35(7) :9-11.
[20] 王卫东,赵志鸿,张小俊,等. 陈皮提取物中黄酮类化合
物及抗氧化的研究[J]. 食品工业科技,,2007,28(9) :
98-103.
[21] 王 翼,张 旭. α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究进展[J].
海峡药学,2009,21(9) :4-6.
[22] Brownlee M. Biochemistry and molecular cell biology of diabet-
ic complications[J]. Nature,2001,414(6865) :813-820.
[23] Rosen P,Nawroth P P,King G,et al. The role of oxidative
stress in the onset and progression of diabetes and its complica-
tions:a summary of a Congress Series sponsored by UNESCO-
MCBN,the American Diabetes Association,and the German
Diabetes Society[J]. Diabetes Metab Res,2001,17(3) :
189-212.
[24] 李 洁,曾 红,吕喜凤,等. 昆仑雪菊多糖抗氧化及 α-
淀粉酶和 α-葡萄糖苷酶的抑制[J]. 中国酿造,2014,33
(9) :124-128.
752
2016 年 2 月
第 38 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2016
Vol. 38 No. 2