全 文 ：[论　　著]
地杨桃中游离氨基酸的分析
艾朝辉1 ,郭玲2 ,何萌2
摘要:目的　了解地杨桃(Sebastiania chamaelea)中游离氨基酸的含量。 　方法　采用 HCL超声波提取 , OPA-
FMOC 柱前衍生反相高效液相色谱 ,峰面积外标法定量。 　结果　地杨桃中游离氨基酸含量为全株干重的 0.5%, 人
体必需需氨基酸占总游离氨基酸为 77.5%,较常见大戟科药用植物必需氨基酸含量比例高 ,其中精氨酸含量最高 , 占
总游离氨基酸的 60%。 　结论　地杨桃中的人体必需氨基酸的存在是该植物的有效成分之一 , 为药用研究提供基础
数据。
关键词:地杨桃;游离氨基酸;测定
中图分类号:R282.6　　文献标识码:A　　文章编号:1009-9727(2005)07-1440-02
Analysis of free amino acids in Sebastiania chamaelea.AI Chao-hui , GUO Ling , HE Meng.(Hainan Medical College ,
Haikou 571101 , Hainan , P.R.China)
Abstract:Objective　To determine the free amino acids from Sebastiania chamaelea.　Methods　The free amino acids were
extracted in HcL by ultrasonic and determined on OPA-FMOC column derived RP-HPLC.The content was reckoned with the ra-
tion of peak area by external standard calibration.　Results　The free amino acids content of Sebastiania chamaelea is 0.5% in
whole dry weight , among which human necessary amino acids accounted for 77.5%.Arg was highest and accounted for 60% of the
free amino acids.The ratio of necessary amino acids in total free amino acids from Sebastiania chamaelea was higher than the com-
pared medical plants in Euphorbiaceae family.　Conclusion　The existence of the necessary amino acid in Sebastiania chamaelea ,
had obviously promoted role for its medicament activity , which was one of the active ingredients of this medicinal plant.
Key words:Sebastiania chamaelea;Free amino acid;Determination
　　地杨桃(Sebastiania chamaelea)系大戟科地杨桃
属植物 ,为多年生草本 ,花果期 3 ～ 11月。地杨桃属植
物约有 95 种 ,广布于全世界热带地区 ,主产地在美
洲。而我国仅地杨桃一种 , 且主要分布于广东 、广西
和海南等热带及亚热带省区 。该植物生于山坡 、草
地 、溪旁 ,海南各地常见 ,俗称荔枝草或坡荔枝[ 1] 。民
间广泛用全株入药 ,治疗眩晕和头痛 ,尤其治疗美尼
尔氏综合症效果明显。其汁液具有收敛 、强壮之功
效[ 2] 。本文采用高效液相色谱法(HPLC)对地杨桃全
株游离氨基酸进行测定 ,并对大戟科几种常见药用植
物的游离氨基酸进行比较分析 ,现报道如下。
1　材料与方法
1.1　仪器与材料
1.1.1　仪器　美国惠普 HP1050型高效液相色谱仪 ,
HP1046A荧光检测器;日立GL20A全自动高速冷冻离
心机 。
1.1.2　材料　地杨桃购自海南省海口市草药店 ,经海
南医学院药学系鉴定 。
1.2　方法与处理
1.2.1　样品处理　地杨桃 ,晾干 ,粉碎 ,60目过筛 ,浸
于0.1 mol·L-1 HCL 采用超声波提取 60min , 15 000r/
min离心过滤 ,滤液待测。
1.2.2　色谱条件　Hyersil ODS 色谱柱:4.0×125mm ,
粒径 5μm。流动相(A):10mmol·L-1 Na2HPO4 缓冲液
(PB);流动相(B):PB -甲醇 -乙腈(体积比 50∶35∶
15)。线性梯度:在 0 ～ 25min 内 ,流动相 B 以线性从
0%上升到 100%。流量:1.0ml·min-1。柱温 40℃。
检测波长:0min时 ,激发波长 340nm ,发射波长 450nm ,
检测一级氨基酸的OPA衍生物;20.5min后 ,将波长切
换至激发波长 260nm ,发射波长 305nm 检测二级氨基
酸(脯氨酸)的 FMOC衍生物 。
1.2.3　分析方法　OPA-FMOC 柱前衍生反相高效液
相色谱法 ,峰面积外标法定量 。
2　结果
2.1　地杨桃与几种常见大戟科药用植物游离氨基酸
的种类和含量的比较　采用高效液相色谱法(HPLC)
法在地杨桃采用超声波提取液中共检测到 16种常见
氨基酸 ,由 OPA -FMOC 柱前衍生反相高效液相色谱
1440 　　　　　　　　　　　　　　　　CHINA TROPICAL MEDICINE Vol.5 No.7 October 2005 　中国热带医学 2005年第 5卷第 7期
繱作者单位:1.海南医学院化学分析实验室 ,海南 海口　571101;　2.海南医学院化学教研室 ,海南海口　571101.
作者简介:艾朝辉(1974～ ),女 ,实验师 ,主要从事实验教学.
法 ,峰面积外标法进行定量分析 ,地杨桃游离氨基酸
的种类和相应含量与根据文献报道海南山苦茶
(Mallotus furetianus)[ 3] 、叶下珠(Phyllanthus urinate
I.)、珠子草(Phyllanthus ninuri L.)[ 4] 的游离氨基酸进
行比较 , 结果见表 1。
表 1　几种常见大戟科药用植物游离氨基酸的比较
Table 1　Free amino acids (FAA)Contrast with common
medical plants in Euphorbiaceae family.
氨基酸
海南山苦茶
FAA 含量(%)
叶下珠
FAA含量(%)
珠子草
FAA 含量(%)
地杨桃
FAA含量(%)
天冬氨酸(Asp) 0.002 0.7433 0.8395 0.0178
谷氨酸(Glu) 0.008 1.1038 1.1134 0.0096
丝氨酸(Ser) 0.002 0.3870 0.4056 0.0178
组氨酸(His)﹡﹡ 0.007 0.1705 0.1755 0.0095
甘氨酸(Gly) 0.001 0.458 0.5295 0.0027
苏氨酸(Thr)﹡ 0.3492 0.3977 0.0128
精氨酸(Arg)﹡﹡ 0.009 0.4496 0.4522 0.303
丙氨酸(Ala) 0.5597 0.5900 0.0124
酪氨酸(Tyr) 0.2560 0.2621 0.0278
缬氨酸(Val)﹡ 0.004 0.4495 0.5214 0.0133
蛋氨酸(Met)﹡ 0.003 0.1171 0.0553 0.0227
苯丙氨酸(Phe)﹡ 0.003 0.4034 0.4879 0.0098
异亮氨酸(Ile)﹡ 0.006 0.3409 0.3891 0.0057
亮氨酸(Leu)﹡ 0.001 0.6337 0.7199 0.0052
赖氨酸(Lys)﹡ <0.002 0.4946 0.5384 0.0095
脯氨酸(Pro) 0.114 0.2008 0.3096 0.0262
天冬酰胺(Asa) 0.013
谷氨酰胺(Gln) 0.014
注:﹡人体营养性必需氨基酸 ,﹡﹡人体营养性半必需氨基酸。
3　讨论
3.1　实验结果表明 ,地杨桃含 16种常见的氨基酸 ,其
总量占全株干重的 0.5%,共检测出人体营养性必需
氨基酸和人体营养性半必需氨基酸 9种 ,人体营养性
必需氨基酸和人体营养性半必需氨基酸总含量达
391.5mg ,占总游离氨基酸的 77.5%,其中精氨酸含量
最高 ,达 303mg/100g ,占总游离氨基酸达 60%。人体
营养性必需氨基酸和人体营养性半必需氨基酸共 10
种 ,本实验采用 HCL 超声波提取游离氨基酸 ,仅检测
出人体营养性必需氨基酸和人体营养性半必需氨基
酸9种 ,还有一种人体营养性必需的色氨酸(Trp)没有
检测到 。主要由于HCL对色氨酸有破坏作用 ,导致在
检测时无法检测 。
3.2　海南山苦茶游离氨基酸中人体营养性必需氨基
酸和人体营养性半必需氨基酸仅占干重的 0.036%,
地杨桃约 0.12%,叶下珠约 3.4%,珠子草约 3.74%;
地杨桃中游离氨基酸较木本大戟科药用植物海南山
苦茶含量高 ,特别是人体营养性必需氨基酸和人体营
养性半必需氨基酸较海南山苦茶总含量比例高 3.3
倍 ,较同样为草本植物的珠子草 、叶下珠低 ,但地杨桃
游离氨基酸中人体营养性必需氨基酸和人体营养性
半必需氨基酸比例较海南三苦茶 、珠子草 、叶下珠高 ,
达77.5%。
3.3　在生物体内氨基酸主要用于合成蛋白质 ,维持
氮平衡 ,构成体内各种酶 、抗体及某些激素的原料 ,并
且能调节生理机能 ,供给能量 ,促进生长发育 ,补充代
谢消耗。此外 ,还可以维持毛细血管的正常渗透压 。
地杨桃游离氨基酸中精氨酸含量较高 , 占干重的
0.3%,精氨酸在人体作用广泛 ,是人体必需氨基酸之
一 ,其能参与鸟氨酸循环 ,通过精氨酸-NO途径及促
激素分泌 ,促胰岛素生成 ,介导巨噬细胞的细胞毒作
用等[ 5] ;谷氨酸占游离氨基酸的 2%, 仅占干重的
0.3%,其在人体内具有促进红细胞生成 、改善脑细胞
营养及活跃思维等作用;异亮氨酸 、亮氨酸 、缬氨酸三
种必需氨基酸在地杨桃中为干重的 0.24%,这三种必
需氨基酸对组织蛋白质合成与分解有调节作用 ,可以
防治肝 、肾功能衰竭 ,亮氨酸还有刺激胰岛素的分泌
功能;其余必需氨基酸中 ,尽管在地杨桃中含量不高 ,
但它们在人体具有较重要的生理作用 ,组氨酸有抗溃
疡 、促进细胞再生作用 ,用于贫血及风湿的辅助治疗 ,
在体内经脱羧生成组胺 ,具有降低血压 ,扩张血管 ,促
进胃液分泌等作用;赖氨酸是合成核蛋白 、血红蛋白
及促进大脑神经细胞再生的重要氨基酸 , 对营养不
良 、乙型肝炎 、支气管炎等有一定的辅助疗效;蛋氨酸
是合成表皮中蛋白质及胰岛素所必需的氨基酸 ,有预
防脂肪肝的作用;脯氨酸具有抗高血压作用 ,而乙酰
羟基脯氨酸有用作抗风湿药和用于外伤治疗[ 6] 。
综上表明 ,地杨桃中游离氨基酸尽管含量仅占干
重的 0.5%,但其中人体必需氨基酸含量较高 ,对该药
用植物的药效活性有明显的促进作用 ,是该药用植物
的有效成分之一 。
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收稿日期:2005-07-13
1441中国热带医学 2005年第 5卷第 7期　CHINA TROPICAL MEDICINE Vol.5 No.7 October 2005