全 文 ：书基金项目:国家社会科学基金( 12XMZ033) 和贵州省科学技术基金( 黔科合 J字 LKM［2011］06 号)
作者简介:何可群( 1971 － ) ，女( 白族) ，云南云龙人，副教授，硕士，研究方向为药用植物学。
民族药飞龙掌血总黄酮含量测定
何可群1，李相兴2
1. 贵州民族大学化学与环境科学学院( 贵州 贵阳 550025) ;
2. 贵州民族大学民族学与社会学学院( 贵州 贵阳 550025)
摘 要 目的:以芦丁为对照品，用紫外 －可见分光光度法测定了民族药飞龙掌血枝叶总黄酮含量。结果表明:
飞龙掌血枝叶中总黄酮的相对百分含量为 10. 56%，精密度实验 ＲSD为 1. 82% ; 卢丁对照品在 0. 01375 ～ 0. 2200mg /
mL范围有良好的线性关系，回归方程为 A =10. 27C + 0. 0138，相关系数 Ｒ2 = 0. 9999。结论:该方法操作简便、结果可
靠，能为飞龙掌血药用价值的开发及扩大资源利用提供科学的依据。
关键词:飞龙掌血叶; 分光光度法; 总黄酮
中图分类号:Ｒ927. 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 2882(2013)01 － 003 － 03
Determination of Total Flavonoids from Toddalia Asiatica Lam.
He Kequn1，et al
1. Chemistry and Environmental Science Department of Guizhou Minzu University;
Abstract:Objective:The percentage of total flavonoids from Toddalia asiatica Lam. was determined by ultraviolet and
visible spectrophotometry at 500nm based on the standard curve with rutin as controlled sample. Ｒesults:The results showed
the percentage of total flavonoids in Toddalia asiatica Lam. was 10. 56% and there was good linearity(Ｒ2 = 0. 9999)during
the range of 0. 01375 ～ 0. 2200mg /mL for rutin，the regression equation:A =10. 27C + 0. 0138. The relative standard deviation
ＲSD was 1. 82% . Conclusion:The ultraviolet and visible spectrophotometry method is simple and reliable to measure the con-
tent of total flavonoids in Toddalia asiatica Lam. It provides a certain referential gist for the exploitation and expand resource
utilization of the Toddalia asiatica Lam. ＇s medical value.
Key words:Toddalia asiatica Lam;spectrophotometry;total flavones content
飞龙掌血(Toddalia asiatica Lam. )为芸香科飞龙掌血
属植物，又名见血飞、散血丹、血棒头、大救架、小金藤、通城
虎、溪椒等。其根、叶入药，具有止血散瘀、祛风除湿、消肿
止痛的功效。用于吐血，衄血，痛经，闭经，子宫出血，胃痛，
细菌性痢疾，风湿肿痛，肋间神经痛，跌打损伤，疮疖肿毒等
症［1 － 3］。已有的研究表明飞龙掌血中主要化学成分为二氢
白屈菜红碱、白屈菜红碱、茵芋碱、小檗碱、飞龙掌血默碱、
香豆精、香茅醇、丁香油酚等［1 － 15］。通过文献检索，国内外
还未见有关飞龙掌血总黄酮测定的研究报道，本实验对飞
龙掌血枝叶 70%乙醇提取液的紫外光谱及总黄酮含量进行
研究，以便为该民族药的进一步开发及扩大资源利用提供
科学依据。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
1. 1. 1 飞龙掌血。采自贵阳市花溪大将山，经贵州民族大
学民族药物研究所卢文芸副教授鉴定为飞龙掌血(Toddalia
asiatica Lam.) ，标本保存于贵州民族大学化学与环境科学
学院药学教研室。
1. 1. 2 仪器。756PC紫外 －可见分光光度计(上海舜宇恒
平科学仪器有限公司) ，METTLEＲAE240 电子分析天平(上
海天平仪器厂) ，BGZ － 30 电热鼓风干燥箱(上海博迅实业
有限公司医疗设备厂) ，SG3200HE超声清洗仪(上海冠特超
声仪器有限公司) ，数显恒温水浴锅(常州博远实验分析仪
器有限公司)
1. 1. 3 试剂。氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、无水乙醇、石油
醚均为分析纯，芦丁对照品(色谱纯，购自贵州迪大科技有
限责任公司)。
1. 2 试验方法
·3·黑龙江医药 Heilongjiang Medicine Journal Vol. 26 No. 6 2013
DOI:10.14035/j.cnki.hljyy.2013.01.018
书1. 2. 1 飞龙掌血枝叶总黄酮的提取方法［16 － 17］。将自然晾
干的飞龙掌血枝叶在电热鼓风干燥箱中于 60 ± 1℃烘干 5h，
精确称取干燥、研碎的飞龙掌血枝叶粉末适量，按 1:20 的固
液比用体积分数为 70 ﹪的乙醇浸泡、超声提取。提取条
件:时间 30 min，超声频率 40kHz，功率 150W，提取结束后，
合并提取液、过滤、冷却、用沸程 30 ～ 60℃的石油醚萃取除
去叶绿素，浓缩、用 70 ﹪的乙醇定容、摇匀备用。
1. 2. 2 芦丁标准曲线的绘制［16 － 17］。1)芦丁标准溶液的制
备。精确称取 120℃干燥至恒质量的芦丁 27. 5mg，置 50mL
容量瓶中，加 70%乙醇适量，置水浴上微热使其溶解、冷却，
加入 70%乙醇至刻度，摇匀，每 1mL含芦丁 0. 550mg。2)标
准曲线的绘制。精确吸取质量浓度 0. 550mg /mL 的芦丁标
准溶液 0，0. 25，0. 50，1. 00，2. 00，3. 00，4. 00mL 分别置于 7
支 10mL 比色管中，加体积分数 70%的乙醇补足至 5. 0mL，
分别加入 50g /L 亚硝酸钠溶液 0. 40mL，摇匀，放置 6min
后，精确加入 50g /L 硝酸铝溶液 0. 40mL，摇匀，放置 6min，
再精确加入 40g /L氢氧化钠溶液 4. 00mL，并用体积分数为
70%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置 12min。以试剂空白为参
比，于 500nm波长下测定吸光度 A，以吸光度为纵坐标，显
色液中芦丁的质量浓度 C(mg /mL)为横坐标，绘制标准曲
线，经回归处理得方程:A = 10. 27C + 0. 0138，相关系数:
Ｒ2 = 0. 9999，芦丁浓度在 0. 01375 ～ 0. 2200mg /mL 范围内吸
光度与质量浓度线性关系良好。
1. 2. 3 芦丁、飞龙掌血枝叶紫外吸收光谱的研究。精确吸
取芦丁标准溶液(0. 550mg /mL)、飞龙掌血枝叶的提取液各
1. 00mL，分别置于 2 支 10mL比色管中，加体积分数 70%的
乙醇补足至 10. 00mL，以 70%的乙醇溶液建立基线，在 200
～ 700nm波长范围进行波长扫描，得到芦丁和飞龙掌血枝叶
提取液显色前的紫外吸收光谱;精确吸取芦丁标准溶液
(0. 550mg /mL)、飞龙掌血枝叶的提取液各 1. 00mL，分别置
于 2 支 10mL 比色管中，加体积分数 70% 的乙醇补足至
5. 0mL，分别加入 50g /L 亚硝酸钠溶液 0. 40mL，摇匀，放置
6min后，精确加入 50g /L 硝酸铝溶液 0. 40mL，摇匀，放置
6min，再精确加入 40g /L 氢氧化钠溶液 4. 00mL，并用体积
分数为 70%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置 12min。以试剂空
白建立基线，在 200 ～ 700nm 波长范围进行波长扫描，得到
芦丁和飞龙掌血枝叶提取液显色后的紫外吸收光谱。
1. 2. 4 样品测定［18 － 22］。精确量取 1. 2. 1 所得飞龙掌血枝
叶乙醇提取液 1. 00mL，按标准曲线的绘制方法加显色剂处
理，于 500nm波长下测得飞龙掌血枝叶的吸光度 A，代入回
归方程得飞龙掌血枝叶的总黄酮类化合物以芦丁计算的质
量浓度 C(mg /mL) ，换算为干燥药材中总黄酮的%含量。
1. 2. 5 重复性试验。精确称取飞龙掌血枝叶样品 5 份，按
含量测定方法进行测定，计算平均含量及 ＲSD%值。
1. 2. 6 加标回收试验。精确称取一定量飞龙掌血枝叶样品
3 份，再精确加入芦丁标准溶液(浓度为 0. 550mg /mL)
4. 00mL，按样品含量测定方法进行提取、测定，计算加标回
收率及 ＲSD%值。
2 结果与分析
2. 1 标准曲线
于 500nm 波长下测定芦丁标准溶液系列的吸光度 A，
以吸光度为纵坐标，显色液中芦丁的质量浓度 C(mg /mL)为
横坐标，绘制标准曲线(图 1) ，经回归处理得方程:A =
10. 27C + 0. 0138，相关系数:Ｒ2 = 0. 9999，芦丁浓度在
0. 01375 ～ 0. 2200mg /mL范围内吸光度与质量浓度线性关
系良好。
图 1 芦丁标准曲线
2. 2 芦丁、飞龙掌血枝叶紫外吸收光谱的研究
图 2、图 3 表明，在加显色剂前后，芦丁标准溶液和飞龙
掌血枝叶样品溶液的紫外吸收光谱均有所改变，显色后在
500nm处有较平缓的吸收峰，适于定量测定。
1. 未加显色剂的芦丁溶液; 2. 加显色剂的芦丁溶液
图 2 芦丁标准溶液的紫外吸收光谱
1. 未加显色剂的样品溶液; 2. 显色后的样品溶液
图 3 飞龙掌血枝叶样品的紫外吸收光谱
·4· 黑龙江医药 Heilongjiang Medicine Journal Vol. 26 No. 6 2013
书2. 3 样品总黄酮含量的测定
由表 1 可知，飞龙掌血枝叶中总黄酮的平均含量为
10. 56%，重复性试验 ＲSD为 1. 82 %，精密度高。
表 1 总黄酮测定及精密度试验结果
测定次数 1 2 3 4 5
样品总黄
酮含量(%) 10. 35 10. 44 10. 49 10. 69 10. 82
平均值(%) 10. 56
ＲSD(%) 1. 82
2. 4 加标回收率
由表 2 可知加标回收率在 96. 94% ～ 98. 20%，ＲSD%为
0. 65%。
表 2 加标回收试验结果
样品重量
/mg
样品黄酮
含量 /mg
加标量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
ＲSD
/%
100. 00 10. 56 2. 200 12. 37 96. 94
100. 00 10. 56 2. 200 12. 43 97. 41 97. 52 0. 65
100. 00 10. 56 2. 200 12. 53 98. 20
3 结论
本文首次对飞龙掌血枝叶的紫外光谱及总黄酮含量进
行研究，结果表明飞龙掌血子叶中黄酮类物质极为丰富，占
干重的百分含量为 10. 56%，为该民族药的药用价值开发及
扩大资源利用提供了一定的科学依据。
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收稿日期:2012 － 11 － 22
·5·黑龙江医药 Heilongjiang Medicine Journal Vol. 26 No. 6 2013