免费文献传递   相关文献

飞龙掌血茎的化学成分研究



全 文 :http://XBYZ.cbpt.cnki.net
确定的A2B1C1D3提取工艺合理、稳定、可行。
3 讨论
  由于多酚类化合物结构中有多个酚羟基,因此可
以用甲醇、乙醇、水、丙酮等极性溶剂作为提取溶剂。
笔者在前期实验中,采用甲醇、乙醇、水、丙酮作为提
取溶剂提取啤酒花多酚,并比较了4种溶剂的提取
率,其中乙醇提取率和丙酮提取率相差不大,但均高
于甲醇和水的提取率,由于乙醇相对丙酮来说,有价
格低、更易回收等特点。因此,本实验选择乙醇作为
啤酒花多酚的提取溶剂。同时比较了溶剂浸泡法、回
流法和超声辅助提取3种方法的提取效率。实验结
果表明,3种方法对啤酒花多酚的提取率依次为超声
波法(37.25mg·g-1)、回流法(29.61mg·g-1)、溶
剂浸泡法(20.03mg·g-1)。因此,本实验对啤酒花
多酚进行超声波辅助提取工艺的优化研究。
  在单因素实验中,笔者还对溶剂体积分数、料液
比、超声波提取的频率、超声波提取的功率、啤酒花粉
末粒度、提取温度、提取时间和次数进行筛选,由数据
结果得知超声波提取频率、提取温度、啤酒花粉末粒
度及提取次数对提取率影响并不明显,因此,在本次
正交实验设计中,选择对啤酒花多酚提取率影响比较
明显的乙醇体积分数、料液比、超声提取时间和超声
功率作为考察因素,优选啤酒花多酚的最佳提取
工艺。
参考文献:
[1] 周娟,邹翔,季宇彬.啤酒花的有效成分及活性研究[J].
哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2005,21(4):414-
417.
[2] 汪江碧,罗蓉,田雪松,等.啤酒花对去卵巢肥胖大鼠的
影响[J].中药材,2004,27(2):105-107.
[3] 关黎红,沙尼亚.新疆啤酒花及啤酒花叶体外抗滴虫实
验[J].内蒙古中医药,2004(3):30-31.
[4] 刘玉梅,汤坚.啤酒花苦味酸对血糖调节作用的研究
[J].食品科学,2009,30(3):257-259.
[5] 季宇彬,田松,邹翔,等.啤酒花中蛇麻酮体外诱导人胃
癌SGC-7901细胞凋亡作用研究[J].哈尔滨医药,2007,
27(6):1-2.
[6] 李明泽,田松,于蕾,等.啤酒花中异葎草酮体外抗肿瘤
作用及机制研究[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学
版,2007,23(2):1-2.
[7] 王世岭,余明莲,杨君,等.复方啤酒花提取物对小鼠雌
激素水平影响的初步研究[J].中国微生态学杂志,
2000,13(5):249-251.
[8] Miligan S R,Kalita J C,Pocock V,et al.The endocrine
activities of 8-prenylnaringenin and related hop(Humu-
lus lupulus L.)flavonoids[J].J Clin Endocrin &
Metab,2000,85:4912-4915.
[9] 霍文,孙广利,刘鹏,等.正交实验法优选茯苓多糖提取
工艺[J].西北药学杂志,2006,21(1):18-19.
(收稿日期:2013-01-07)
飞龙掌血茎的化学成分研究
陈小雪1,2,热合曼·司马义1,龙盛京2*(1.新疆喀什地区药检所,喀什 844000;2.广西医科大学药学院,南宁 530021)
摘要:目的 研究飞龙掌血茎的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱、制备高效液相色谱及反复重结晶等方法进行分离纯化,根据
波谱数据进行结构鉴定。结果 从飞龙掌血茎的乙酸乙酯部位中分离并鉴定了7个化合物,分别为:飞龙掌血素(1),飞龙掌血
双香豆素(2),8′-(2′,3′-二羟基-3′-甲丁基)-5,7-二甲氧基香豆素(3),飞龙掌血新双香豆素(4),白屈菜红碱(5),橙皮素(6)和橙
皮苷(7)。结论 化合物1~7均为首次从飞龙掌血茎中分离得到,其中化合物6为首次从飞龙掌血属植物中分离得到。
关键词:飞龙掌血;化学成分;结构鉴定
doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2013.04.004
中图分类号:R284   文献标志码:A   文章编号:1004-2407(2013)04-0337-03
Studies on chemical constituents of Toddalia asiatica stems
CHEN Xiaoxue1,2,Reheman SIMAYI1,LONG Shengjing2*(1.Kashi Institute for Drug Control,Kashi 844000,China;2.Depart-
ment of Pharmacy,Guangxi Medical University,Nanning 530021,China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of the stems of Toddalia asiatica.Method The chemical constituents were
isolated and purified via silica gel column chromatography,preparative high-performance liquid chromatography as wel as recrys-
talization.Their structures were determined on the basis of spectral analysis and physicochemical properties.Result Seven com-
pounds were isolated and obtained from the ethyl acetate fractions.Their structures were identified as toddaculine(1),toddasin
(2),mexoticin(3),toddalosin(4),chelerythrine(5),hesperitin(6),and hesperidin(7).Conclusion Al of the seven compounds
were isolated from the stems of Toddalia asiaticafor the first time,among which compound6 was isolated from this genus for the
first time.
Key words:Toddalia asiatica;chemical constituent;structure identification
作者简介:陈小雪,女,硕士研究生
*通信作者:龙盛京,男,教授
   
733西北药学杂志 2013年7月 第28卷 第4期
http://XBYZ.cbpt.cnki.net
飞龙掌血别名见血飞,为芸香科植物飞龙掌血Tod-
dalia asiatica的干燥根或根皮,化学成分研究显示,
飞龙掌血主要含生碱类、香豆素类和三萜类化合物。
药理学研究显示,飞龙掌血具有止血、镇痛、抗炎、抗
菌、抗病毒、抗心肌缺血等作用[1-5]。目前,据市场调
查发现,90%以上的飞龙掌血药材多为根、茎混用,甚
至有些基本上以茎入药,但茎是否可代替根入药需进
一步证实。目前关于飞龙掌血化学成分的研究主要
集中于根,茎的化学成分很少有相关报道。为此,本
课题对飞龙掌血的茎进行了化学成分研究,从飞龙掌
血茎中初步分离得到7个化合物。化合物1~7均为
首次从飞龙掌血该部位分离得到,其中化合物6为首
次从飞龙掌血植物中分离得到。
1 仪器与试药
1.1 仪器 320-MS液相色谱质谱联用仪(美国
Varian公司);VNMR 600MHz核磁共振仪(美国
Varian公司);Waters Autospec Premier-高分辨磁质
谱气质联用仪;X-5精密显微熔点测定仪(北京和众
视野科技有限公司);Spectrum One FT-IR红外光谱
仪(美国Perkin-Elmer公司);ZF-Ⅰ型三用紫外分析
仪(上海顾村电光仪器厂);DrFlash-s中压制备液相
色谱仪(利穗科技有限公司);柱色谱和薄层色谱硅胶
(青岛海洋化工厂)。
1.2 试药 飞龙掌血采自广西南宁百济乡,由广西
医科大学药学院朱丹鉴定为飞龙掌血Toddalia asi-
atica(Linn.)Lam的茎。
2 提取与分离
  将阴干的飞龙掌血茎粉碎成粗粉(10kg),用体
积分数70%乙醇冷浸提取3次,合并提取液,滤过,
减压蒸馏,干燥,得乙醇浸膏945.2g。将得到的浸
膏分散于适量水中,分散均匀后,依次用石油醚、乙酸
乙酯、正丁醇萃取,每种溶剂各萃取3次,得到石油
醚相29.2g,乙酸乙酯相166.7g,正丁醇相234.8g。
将乙酸乙酯浸膏上硅胶柱,以石油醚-乙酸乙酯
梯度洗脱,500mL/流份,共收集流份110瓶。流份
Fr.4放置有结晶析出,反复重结晶,得到无色针状结
晶(化合物1,32mg)。流份Fr.5用中压制备液相色
谱进一步纯化,流动相石油醚-乙酸乙酯,收集波长
316和365nm,得到无色结晶(化合物2,17mg)。流
份Fr.7放置有结晶析出,反复重结晶,得到无色结晶
(化合物3,650mg)。流份Fr.13用中压制备液相色
谱进一步纯化,流动相石油醚-乙酸乙酯,收集波长
258和318nm,得到无色结晶(化合物4,32mg)。流
份Fr.24反复用硅胶柱色谱,乙酸乙酯-甲醇梯度洗
脱,得到黄色粉末(化合物5,20mg)和淡黄色结晶
(化合物6,26mg)。流份Fr.47放置有白色物析出,
用甲醇反复处理,得到白色粉末(化合物7,32mg)。
3 结构鉴定
  化合物1:无色针状结晶(石油醚),易溶于乙酸
乙酯,mp 95~96℃。ESI-MS:m/z 572.3[M×2+
Na]+,274.9[M+H]+。1 H NMR(600Hz,CDCl3)
δ:6.23(1H,d,J=9.6Hz H-3),7.87(1H,d,J=9.6
Hz,H-4),6.61(1H,s,H-8),3.81,3.87(each 3H,s,
-OCH3),3.35(2H,d,J=6.8Hz,H-1′),5.14(1H,
d,J=6.8Hz,H-2′),1.67(3H,s,4′-CH3),1.77
(3H,s,5′-CH3)。13 C NMR(150 MHz,CDCl3)δ:
161.8(C-2),112.3(C-3),139.1(C-4),155.3(C-5),
120.4(C-6),161.4(C-7),95.5(C-8),154.8(C-9),
107.2(C-10),63.2(5-OCH3),56.1(7-OCH3),22.8
(C-1′),122.2(C-2′),132(C-3′),25.8(C-4′),17.9
(C-5′)。上述波谱数据与文献的波谱数据[6]一致,故
鉴定化合物1为飞龙掌血素(toddaculine)。
化合物2:无色结晶(乙酸乙酯),易溶于氯仿,
mp 249~252 ℃。EI-MS:m/z 544(M+)(C32H32
O8),272(100%)(C16H16O4),257(C15H13O4),241
(C15 H13O3),213,189,161。1 H NMR(600 Hz,
CDCl3):δ6.10,6.18(each 1H,H-3,3′),7.83,7.89
(each 1H,H-4,4′),6.22,6.23(each 1H,s,H-6,6′),
7.19(1H,a-H),6.17(1H,b-H),1.54(1H,d-H),
1.73(1H,d-H),1.98(1H,e-H),2.01(1H,e-H),
5.99(1H,g-H),3.49(1H,h-H),1.09,1.18(each
3H,s,-CH3),3.78,3.82,3.85,3.89(each 3H,
-OCH3)。13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:160.7,160.8
(C-2,2′),111.7(C-3,3′),137.6,137.6(C-4,4′),
159.5,159.7(C-5,5′),109.3,109.7(C-6,6′),160.0,160.1
(C-7,7′),102.3,102.6(C-8,8′),153.1,153.7(C-9,
9′),108.9,109.0(C-10,10′),54.39,54.65,54.88,
54.93(-OCH3),22.4,24.5(-CH3)。上述波谱数据
与文献的波谱数据[7]一致,故鉴定化合物2为飞龙掌
血双香豆素(toddasin)。
化合物3:无色针状结晶(乙酸乙酯),易溶于氯
仿,mp 148~152℃。ESI-MS:m/z 639.2[M×2+
Na]+,309.4[M+H]+。1 H NMR(600Hz,CDCl3)
δ:6.27(1H,d,J=9.6Hz,H-3),7.86(1H,d,J=9.6
Hz,H-4),6.65(1H,s,H-6),3.88(6H,s,2×
OCH3),2.94(1H,dd,J=13.7,0.3Hz,H-1′),2.75
(1H,dd,J=13.7,10.3Hz,H-1′),3.60(1H,dd,J
=13.7,10.3Hz,H-2′),1.30(6H,s,3′,4′-CH3)。
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:161.5(C-2),112.9
(C-3),138.8(C-4),156.1(C-5),95.9(C-6),161.0
(C-7),107.4(C-8),155.2(C-9),117.9(C-10),63.3
(5-OCH3),56.4(7-OCH3),26.2(C-1′),78.2(C-2′),
833 西北药学杂志 2013年7月 第28卷 第4期
http://XBYZ.cbpt.cnki.net
73.0(C-3′),23.8(C-4′),26.3(C-5′)。上述波谱数据
与文献的波谱数据[8]一致,故鉴定化合物3为8′-(2′,3′-
二羟基-3′-甲丁基)-5,7-二甲氧基香豆素(mexoticin)。
化合物4:无色结晶(乙酸乙酯),易溶于氯仿,
mp 265~270 ℃。EI-MS m/z:544(M+-18),235
(100%)。1 H NMR(600Hz,CDCl3)δ:5.20,5.24
(each 1H,H-3,3′),7.80,7.91(each 1H,H-4,4′),
6.05,6.07(each 1H,H-6,6′),3.64(1H,a-H),4.77
(1H,b-H),1.67(1H,d-H),2.01(1H,d-H),3.13
(1H,f-H),5.35(1H,g-H),1.10,1.12(each 3H,
-CH3),1.85(6H,-CH3),3.70,3.77,3.81,3.97
(each 3H,-OCH3)。13 C NMR(150MHz,CDCl3)δ:
160.3,161.6(C-2,2′),113.3,113.9(C-3,3′),138.1,
137.8(C-4,4′),154.2,154.3(C-5,5′),94.1,94.0
(C-6,6′),153.8,(C-7,7′),109.4,109.7(C-8,8′),
153.0,153.1(C-9,9′),106.3(C-10,10′),54.37,
54.76,54.85,54.98(-OCH3),22.39,24.59,26.76
(-CH3)。上述波谱数据与文献的波谱数据[6]一致,故
鉴定化合物4为飞龙掌血新双香豆素(toddalosin)。
化合物5:黄色粉末,mp 195~205℃。1 H NMR
(600Hz,DMSO-d6)δ:7.31(1H,s,H-1),7.59(1H,
s,H-4),10.08(1H,s,H-6),7.85(1H,d,H-9),7.77
(1H,d,H-10),8.84(1H,d,H-11),8.30(1H,d,H-
12),6.26(2H,s,-OCH2O-),4.99(3H,s,NCH3),
4.17(3H,s,7-OCH3),3.88(3H,s,8-OCH3)。
13C NMR(150 MHz,DMSO-d6)δ:105.7(C-1),
148.7(C-2),147.7(C-3),104.3(C-4),120.1(C-4a),
131.0(C-4b),151.7(C-6),119.6(C-6a),145.9(C-7),
150.7(C-8),126.1(C-9),118.7(C-10),126.1(C-
10a),125.2(C-10b),119.2(C-11),62.1(7-OCH3),
57.0(8-OCH3),128.0(C-12),132.2(C-12a),104.3
(-OCH2O-),53.1(N-CH3)。上述波谱数据与文献
的波谱数据[9]一致,故鉴定化合物5为白屈菜红碱
(chelerythrine)。
化合物6:淡黄色结晶,易溶于乙酸乙酯,mp 228
~231℃,EI-MS:m/z 302,274,271,153,150,137,
135。1 H NMR(600Hz,DMSO-d6)δ:5.44(1H,H-
2),2.72(1H,H-3),3.21(1H,H-3),12.12(1H,5-
OH),5.89(1H,H-6),10.75(1H,7-OH),5.89(1H,
H-8),6.94(1H,H-2′),9.05(1H,3′-OH),6.87
(1H,H-5′),6.94(1H,H-6′),3.77(3H,-OCH3)。
13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δ:78.1(C-2),39.7
(C-3),196.0(C-4),163.7(C-5),95.7(C-6),166.5
(C-7),94.9(C-8),162.7(C-9),101.7(C-10),113.1
(C-1′),112.0(C-2′),146.4(C-3′),147.8(C-4′),
114.0(C-5′),117.5(C-6′),55.6(-OCH3)。上述波
谱数据与文献的波谱数据[10]一致,故鉴定化合物6
为橙皮素(hesperitin)。
化合物7:白色粉末,mp 267~260℃,EI-MS m/z:
610[M+H]+。1 H NMR(600Hz,DMSO-d6)δ:5.40
(1H,H-2),3.43(1H,H-3),3.17(1H,H-3),12.01
(1H,5-OH),6.13(1H,H-6),6.13(1H,H-8),6.94
(1H,H-2′),6.90(1H,H-5′),6.93(1H,H-6′),3.76
(3H,-OCH3),4.51(1H,H-1″),3.12~3.66(6H,H-
2″~6″),1.08(3H,rha-CH3)。13 C NMR(150MHz,
DMSO-d6)δ:78.3(C-2),42.0(C-3),197.0C-4),
163.0(C-5),96.4(C-6),165.1(C-7),95.5(C-8),
163.0(C-9),103.3(C-10),130.9(C-1′),114.1(C-
2′),147.9(C-3′),146.4(C-4′),112.0(C-5′),117.9
(C-6′),55.7(-OCH3),100.6(C-1″),73.0(C-2″)76.2
(C-3″),70.2(C-4″),75.5(C-5″),66.0(C-6″),99.4
(C-a),68.3(C-b),70.7(C-c),72.0(C-d),68.3(C-
e),17.8(C-f)。以上波谱数据与橙皮苷的文献数
据[11]一致,故鉴定化合物7为橙皮苷(hesperidin)。
参考文献:
[1] 赵琦,张军武.见血飞止血作用的实验研究[J].陕西中
医学院学报,2009,31(5):71-73.
[2] 郝小燕,彭琳,叶兰.飞龙掌血生物总碱抗炎镇痛作用的
研究[J].中西医结合学报,2004,11(2):450-452.
[3] 丁文,文赤夫,陈建华,等.飞龙掌血提取物抑菌作用初
步研究[J].生物质化学工程,2007,41(5):33-34.
[4] 栗世袖,乔延江,肖培根,等.飞龙掌血抗 A 型流感病毒
活性的鉴定[J].中国中药杂志,2005,30(13):998-1000.
[5] 叶开和,任先达,熊爱华,等.飞龙掌血水提物对心肌缺
血兔心功能和血液动力学的影响[J].中国病理生理杂
志,2000,16(7):606-608.
[6] Ishi H,Tan S,Wang JP.Studies on the chemical con-
stituents of rutaceous plants.LXVII.The chemical con-
stituents of Toddalia asiatica (L.)Lam.[J].J Pharm
Soc Jap,1991,111(7):365-375.
[7] Padam N,Shakma,Aroo shoph.Toddasin,a new di-
meric coumarin from Toddalla astatica [J].Phyto-
chemisty,1980,9:1258-1260.
[8] Chakraborty DP,Chowdhury BK.Mexoticin,a new cou-
marin from Murraya exotica [J].Tetrahed Lett,1967,
36(9):3471-3473.
[9] Fang Miao,Xin-Juan Yang,Le Zhou.Structural modifica-
tion of sanguinarineand chelerythrine and their antibacterial
activity[J].Nat Prod Res,2011,25(9):863-875.
[10]何桂霞,裴刚,杜方麓,等,藤茶化学成分的研究[J].中
国现代中药,2007,9(12):11-13.
[11]伍彬.荆芥穗化学成分研究[J].药物研究,2009,18(1):
8-9.
(收稿日期:2013-01-17)
933西北药学杂志 2013年7月 第28卷 第4期