全 文 ：收稿日期:2011-10-18; 修订日期:2012-01-10
基金项目:海南省自然科学基金(No． 809016)
作者简介:韩 丽(1978-) ，女(汉族) ，河北保定人，现任海南医学院讲师，
硕士学位，主要从事药理学研究工作．
* 通讯作者简介:周 丹(1981-) ，女(汉族) ，湖南望城人，现任海南医学
院讲师，硕士学位，主要从事药物的萃取拆分和植物化学成分的研究工
作．
山地五月茶急性毒性及抗炎作用实验研究
韩 丽，刘月丽，王小蒙，周 丹*
(海南医学院，海南 海口 571101)
摘要:目的 研究山地五月茶的急性毒性和抗炎活性部位。方法 用最大浓度、最大给药体积的药液灌胃给药，观察急性
毒性;萃取法制备不同极性部位，采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加模型筛选抗炎活
性部位。结果 山地五月茶乙醇浸膏小鼠最大耐受量为 495． 2 g /kg。醋酸乙酯部位能明显抑制二甲苯引起的耳肿胀和醋
酸引起的毛细血管通透性增加。结论 山地五月茶乙醇提取物无明显毒性，醋酸乙酯部位为山地五月茶的抗炎活性部
位。此实验为进一步进行该植物抗炎活性成分的提取分离提供了实验基础。
关键词:山地五月茶; 急性毒性; 抗炎作用; 活性部位
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 06． 031
中图分类号:R285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)06-1391-02
Acute Toxicity and Anti － inflammatory Effect of Antidesma montanum
HAN Li，LIU Yue-li，WANG Xiao-meng，ZHOU Dan*
(Hainan Medical College，Haikou，Hainan，571101，China)
Abstract:Objective To investigate the acute toxicity and the active fraction with anti － inflammatory effect of Antidesma monta-
num．Methods Maximum tolerable dose (MTD)of Antidesma montanum was determined via i． g． route in mice． Different polar
fractions were prepared by extraction with organic solvents． The inflammatory models of xylene － induced ear edema in mice and
acetic acid － induced celiac capillary permeability increase were applied to evaluate their anti － inflammatory effect． Results MTD
of ethanol extracts of Antidesma montanum in mice was 495． 2 g /kg． The ethyl acetate fraction could significantly inhibit xylene －
induced ear edema and acetic acid － induced celiac capillary permeability increase． Conclusion The ethanol extracts of Antidesma
montanum have no obvious toxicity． The ethyl acetate fraction is the active fraction with anti － inflammatory effect of Antidesma
montanum． This research provides foundation for further extraction of active compositions of Antidesma montanum with anti － in-
flammatory effect．
Key words:Antidesma montanum; Acute toxicity; Anti － inflammatory effect; Active fraction
山地五月茶(Antidesma montanum)属于大戟科(Euphorbiace-
ae)五月茶属(Antidesma) ，是一种热带、亚热带的特色药用植物，
在我国主要产于广东、海南、广西、贵州、云南和西藏等省区［1，2］。
五月茶属植物在民间药用历史悠久，通常以根、叶、茎入药，具有
健脾、抗炎、抗菌、镇痛、生津、活血、收敛、解毒之功效，主治食少
泄泻、津伤口渴、跌打损伤、痈肿疮毒等［3 ～ 6］。山地五月茶为五月
茶属植物之一，在海南分布广泛，民间常用其与眼树莲合用治疗
眼疾。目前尚未见有关山地五月茶急性毒性和药理活性研究的
报道。本实验对山地五月茶地上部分的急性毒性和抗炎活性进
行了研究，初步筛选出其抗炎活性部位，为其进一步开发研究和
利用提供有力的科学依据。
1 材料与仪器
1． 1 药物 山地五月茶地上部分采自海南省万宁市兴隆县，经海
南医学院中药学教研室曾念开老师鉴定为山地五月茶 Antidesma
montanum。二甲苯(天津大茂制药化学试剂厂，生产许可证:
XK13 － 201 － 00110) ;阿司匹林肠溶片(昆明云健制药有限公司，
批号:H53021845) ;伊文思蓝(国药集团化学试剂有限公司，批
号:WC20080125)。
1． 2 动物 SPF级昆明种小鼠，体质量 18 ～ 22 g，由广东省医学
实验动物中心提供，许可证号:SCXK(粤)2008 － 0002。适应环境
1 周，自由饮水进食。
1． 3 仪器 AL104 型电子天平(梅特勒 －托利多仪器上海有限公
司) ;U －2900 型双光束紫外 －可见分光光度计(日本株式会社日
立高新技术那珂事业所) ;TD5M型台式低速离心机(长沙湘智离
心机仪器有限公司)。
1． 4 数据处理 采用 SPSS11． 5 统计软件，各指标均以 珋x ± s 表
示，两组间比较采用 t检验，多组间比较采用方差分析和 q检验。
2 方法与结果
2． 1 供试样品的制备 山地五月茶地上部分 1 kg，粉碎后以 95%
乙醇热回流提取 3 次，每次 3 h，提取液经滤过、减压回收溶剂得
乙醇浸膏(56． 54 g)。将乙醇浸膏加适量水悬浮，依次用石油醚、
醋酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂，得石油醚浸膏(7． 30 g)、
醋酸乙酯浸膏(7． 54 g)、正丁醇浸膏(7． 19 g)和水相浸膏(5． 32
g)。乙醇浸膏溶于蒸馏水，其余 5 种浸膏分别加入一定量的阿拉
伯胶和西黄蓍胶，混匀后用蒸馏水溶解，作为供试样品。
2． 2 急性毒性实验［7，8］ 经预实验当山地五月茶乙醇浸膏以最
大浓度 0． 7 g /ml(相当于生药量 28 g /ml)、最大灌胃容量 40 ml /
kg灌胃给药时，连续观察 1 周，小鼠未见死亡，故确定本品急性
毒性按最大耐受量(maximum tolerated dose，MTD)进行正式实
验。取昆明种小鼠 40 只，雌雄各半，随机分为 2 组:药物组和对
照组，每组 20 只。小鼠禁食 12 h后，给药组以最大浓度、最大灌
胃容量灌胃给药 1 次，对照组给予等体积的蒸馏水，给药后观察
小鼠急性毒性反应，记录动物的外观、行为活动、精神状态、摄食、
大小便及其颜色、被毛、肤色、呼吸，鼻、眼、口腔有无异常分泌物，
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体质量变化以及死亡等情况，给药后连续观察 4 h，其后每天固定
时间观察 1 次，连续观察 14 d。给药后第 7 天、第 14 天称重，末
次称重后，脱颈椎将其处死，进行大体解剖观察，若发现肉眼可见
病变，则进行病理组织学检查。采用 t检验比较两组间体质量变
化。
结果表明，给药后小鼠精神行为状态正常，毛色光亮，摄食饮
水情况良好，未见躁动不安、惊厥 、呼吸困难、心动过速、突眼等
急性毒性表现，连续观察 14 d，小鼠均健康存活，未见明显毒性反
应。小鼠 MTD为 28 g /kg，相当于生药量 495． 2 g /kg。小鼠体质
量变化见表 1。
由表 1 可知，给药后第 7 天、第 14 天给药组小鼠体质量与对
照组比较均无显著差异，说明山地五月茶乙醇浸膏对小鼠正常生
长影响小，安全性高。
表 1 山地五月茶乙醇浸膏对小鼠体质量的影响(珋x ± s)
组别
体质量 m / g
给药前 给药后 7 d 给药后 14 d
对照 20． 2 ± 1． 0 25． 2 ± 2． 1 31． 4 ± 3． 3
药物 20． 5 ± 1． 1 26． 4 ± 2． 2 32． 9 ± 2． 8
与对照组比较，P ＞ 0． 05;n = 20
2． 3 抗炎活性部位筛选
2． 3． 1 山地五月茶乙醇浸膏抗炎活性实验
2． 3． 1． 1 二甲苯致小鼠耳肿胀实验［8］ 取昆明种小鼠 50 只，雌
雄各半，随机分为 5 组:空白组、阳性药物组、山地五月茶乙醇浸
膏高、中、低剂量组，每组 10 只。其中，空白组灌服等量蒸馏水，
阳性对照组灌服阿司匹林 0． 5 g /kg，山地五月茶高、中、低剂量组
分别灌服山地五月茶乙醇浸膏生药 99． 04，49． 52，24． 76 g /kg，连
续给药 5 d。末次给药后 1 h，用可调式移液器将 100%二甲苯按
20μl /只涂于小鼠右耳两侧致炎，左耳不做任何处理。致炎后 1 h
脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用直径 8mm的打孔器在
同一部位冲下圆形耳片，精密称重，以左右耳片重量差表示肿胀
度，采用 q检验比较各组间耳肿胀度，并计算肿胀抑制率。
肿胀抑制率(%)=
空白组平均耳肿胀度 －给药组平均耳肿胀度
空白组平均耳肿胀度
× 100(%)
结果表明，山地五月茶乙醇浸膏中、低剂量组对二甲苯所致
小鼠耳肿胀的抑制作用均非常明显(P ＜ 0． 05) ，其抑制作用与阿
司匹林组相比无显著差异。结果见表 2。
表 2 山地五月茶乙醇浸膏对小鼠耳肿胀度的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C / g生药量·kg －1
肿胀度
m /mg
抑制率(%)
空白 － 11． 44 ± 2． 36# －
阿司匹林 0． 5 5． 62 ± 1． 71* 50． 87
中药高剂量 99． 04 8． 77 ± 1． 12 23． 34
中药中剂量 49． 52 7． 28 ± 1． 87* 36． 36
中药低剂量 24． 76 7． 34 ± 1． 33* 35． 84
与空白组比较，* P ＜ 0． 05;与阳性药物组比较，#P ＜ 0． 05;n = 10
2． 3． 1． 2 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验［8］ 取昆明种小
鼠 50 只，雌雄各半，分组及给药同“2． 3． 1． 1”项。连续给药 5 d，
末次给药后 2 h，各鼠均尾静脉注射 0． 5%伊文思蓝生理盐水溶
液 0． 1 ml /10g，并立即腹腔注射 0． 6%的醋酸溶液 0． 2 ml /只。20
min后脱颈椎处死小鼠，腹腔注射 6 ml 生理盐水，轻柔小鼠腹部
1 min，剪开腹腔，收集洗涤液，3 000 r /min离心 15 min，取上清液
于波长 590 nm处比色，测定吸光度(A)值，采用 q检验比较各组
间染料渗出量，并计算小鼠腹腔毛细血管通透性增高的抑制率。
抑制率(%)=
空白组 A590 －给药组 A590
空白组 A590
× 100%
结果表明，山地五月茶乙醇浸膏中、低剂量组对醋酸引起的
小鼠腹腔毛细血管通透性增加有非常显著的抑制作用(P ＜
0． 05) ，其抑制作用与阿司匹林组相比无显著差异。结果见表 3。
2． 3． 2 山地五月茶不同萃取部位抗炎活性实验 根据山地五月
茶乙醇浸膏抗炎活性实验结果，按乙醇浸膏中剂量确定各萃取部
位的给药剂量。取昆明种小鼠 70 只，雌雄各半，随机分为 7 组:
空白组、阳性药物组、山地五月茶石油醚组、醋酸乙酯组、正丁醇
组、水相组、不溶物组，每组 10 只。空白组灌服等量蒸馏水(内含
一定量的阿拉伯胶和西黄蓍胶) ，阳性对照组灌服阿司匹林 0． 5
g /kg(内含一定量的阿拉伯胶和西黄蓍胶) ，其余各组分别给予
相应的药物，连续给药 5 d。末次给药后分别按“2． 3． 1． 1”项和
“2． 3． 1． 2”项建立小鼠耳肿胀模型和小鼠腹腔毛细血管通透性
模型，观察山地五月茶乙醇浸膏不同萃取部位的抗炎活性。
结果表明，醋酸乙酯组对二甲苯所致小鼠耳肿胀和醋酸引起
的小鼠腹腔毛细血管通透性增加均有明显的抑制作用(P ＜
0． 05) ，其抑制作用与阿司匹林组相比无显著差异。结果见
表 4 ～ 5。
表 3 山地五月茶乙醇浸膏
对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C / g生药量·kg －1
A值 抑制率(%)
空白 － 0． 43 ± 0． 10# －
阿司匹林 0． 5 0． 05 ± 0． 06* 88． 39
高剂量 99． 04 0． 34 ± 0． 13# 20． 93
中剂量 49． 52 0． 17 ± 0． 08* 60． 47
低剂量 24． 76 0． 23 ± 0． 09* 46． 51
与空白组比较，* P ＜ 0． 05;与阳性药物组比较，# P ＜ 0． 05;n = 10
表 4 山地五月茶各极性部位
对小鼠耳肿胀度的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C / g生药量·kg －1
肿胀度
m /mg
抑制率(%)
空白 － 12． 01 ± 3． 65# －
阿司匹林 0． 5 5． 77 ± 1． 57* 51． 96
石油醚 49． 52 13． 68 ± 4． 04# ﹣ 13． 91
醋酸乙酯 49． 52 6． 49 ± 1． 03* 45． 96
正丁醇 49． 52 11． 89 ± 2． 15# 1． 00
水相 49． 52 11． 21 ± 3． 46# 6． 66
与空白组比较，* P ＜ 0． 05;与阳性药物组比较，#P ＜ 0． 05;n = 10
表 5 山地五月茶各极性部位
对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C / g生药量·kg －1
A值 抑制率(%)
空白 － 0． 54 ± 0． 09# －
阿司匹林 0． 5 0． 05 ± 0． 04* 90． 74
石油醚 49． 52 0． 48 ± 0． 12# 11． 11
醋酸乙酯 49． 52 0． 13 ± 0． 08* 75． 93
正丁醇 49． 52 0． 62 ± 0． 16# ﹣ 14． 81
水相 49． 52 0． 44 ± 0． 14# 18． 52
与空白组比较，* P ＜ 0． 05;与阳性药物组比较，#P ＜ 0． 05;n = 10
3 讨论
急性毒性实验结果表明，山地五月茶最大耐受量为 495． 2 g /
kg，给药后小鼠未出现明显毒性反应和死亡情况，且该药对小鼠
正常生长无明显影响，说明山地五月茶毒性小，在该剂量下研究
该药的抗炎作用是安全的，同时显示出该药具有良好的药用价值
开发前景。
抗炎活性部位筛选实验的结果表明，山地五月茶乙醇浸膏
中、低剂量对二甲苯引起的耳肿胀和醋酸引起的毛细血管通透性
增加均有明显的抑制作用，其抑制作用与阿司匹林相当，说明其
能够有效缓解炎症发生过程的早期症状，这可能与其明显抑制炎
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症早期血管通透性亢进和水肿有关，但具体的抗炎机制还需进一
步阐明;各极性部位中只有醋酸乙酯部位对两个炎症模型均有非
常显著的抑制作用，说明醋酸乙酯部位可能为山地五月茶的抗炎
活性部位。前期的研究工作表明［9］，山地五月茶乙醇提取物中
含有黄酮、蒽醌、甾萜类等具有抗炎活性的化学成分，据此推测其
抗炎作用很可能与其含有的这些化学成分有关。为阐明山地五
月茶抗炎作用的物质基础，本课题组目前正在对醋酸乙酯部位的
抗炎活性成分进行提取分离。
综上所述，本实验为进一步进行该植物抗炎活性成分的提取
分离提供了实验基础，为开发利用该植物提供了有力的科学依
据。
参考文献:
［1］ 陈焕镛．海南植物志(第二卷) ［M］．北京:科学出版社，1965:118．
［2］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［M］．北京:科学
出版社，1974:53．
［3］ Rangasamy O，Raoelison G，Rakotoniriana FE，et al． Screening for anti
－ infective properties of several medicinal plants of the Mauritians flora
［J］． Ethnopharmacol，2007，109(2) :331．
［4］ Boyom FF，Ngouana V，Zollo PH，et al． Composition and anti － plasmo-
dial activities of essential oils from some Cameroonian medicinal plants
［J］． Phytochemistry，2003，64(7) :1269．
［5］ Mahomoodally MF，Fakim AG，Subratty AH． Stimulatory effects of Anti-
desma madagascariense on D － glucose，L － tyrosine，fluid and electro-
lyte transport across rat everted intestine，comparable to insulin action in
vitro［J］ ． Br J Biomed Sci，2006，63(1) :12．
［6］ Buske A，Schmidt J，Hoffmann P． Chemotaxonomy of the tribe Anti-
desmeae (Euphorbiaceae) :antidesmone and related compounds［J］．
Phytochemistry，2002，60(5) :489．
［7］ 中华人民共和国卫生部药政局．中药新药研究指导原则汇编(药学
药理学 毒理学) ［S］． 1994:203．
［8］ 陈 奇．中药药理研究方法学［M］． 北京:人民卫生出版社，1993:
76．
［9］ 周 丹，韩 丽，林连波，等．山地五月茶化学成分预试研究［J］．中
国医药导报，2011，8(13) :37．
收稿日期:2011-10-06; 修订日期:2012-01-15
基金项目:江苏省自然科学基金(No． 09KJD150012) ;
徐州工程学院培育(No． XKY2011102)
作者简介:陈 艳(1968-) ，女(汉族) ，江苏太仓人，现任徐州工程学院化
学化工学院教授，硕士学位，主要从事污染物、药物和食品构效关系研究
工作．
槲叶雪莲花挥发油化学成分色谱保留值的预测
陈 艳
(徐州工程学院·化学化工学院，江苏 徐州 221008)
摘要:依据价连接性指数(Xi)和电性拓扑状态指数(En)构建 56 种槲叶雪莲花挥发性组分色谱保留时间(tR)的数学预
测模型，tR = － 10． 219 + 2． 933X1 + 0． 488E13 + 0． 690E14 + 0． 319E16。该模型的相关系数 R = 0． 974，LOO(levae － one －
out)交互验证相关系数 Rcv为 0． 978，证明所建模型具有良好的稳健性及预测能力。结果表明，价连接性指数和电性拓扑
状态指数能够较全面地表征分子结构特征，有效揭示影响化合物色谱保留时间的本质因素。
关键词:槲叶雪莲花; 分子价连接性指数; 电性拓扑状态指数; 保留时间; 定量结构 －保留相关
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 06． 032
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)06-1393-02
Prediction of Chromatographic Retention Time of Volatile Compounds in Essential Oil
from Saussurea Quercifolia
CHEN Yan
(School of Chemistry and Chemical Engineering，Xuzhou Institute of Technology，Xuzhou 221008，China)
Abstract:Objective On the basis of molecular valence connectivity index(Xi)and electro － topological state index(En) ，A
methamathic prediction model of chromatographic retention time of volatile compounds in essential oil from Saussurea Quercifolia
was built． tR = － 10． 219 + 2． 933 X1 + 0． 488 E13 + 0． 690E14 + 0． 319 E16 ． The correlation coefficient (R)and cross － valida-
tion correlation coefficient (RCV)of leave － one － out(LOO)were 0． 974 and 0． 969，respectively． The model was highly reliable
and had favorable prediction capability． The regression result shows that the Xi and En can characterize molecular structure and
explain the nature of chromatographic retention time．
Key words:Saussurea Quercifolia; Molecular valence connectivity index; Electro － topological state index; Chromato-
graphic retention time; QSRR
雪莲花是高山地区的民间药用植物，具有抗癌、扩张血管、降
血压、抗疲劳等作用。雪莲花属菊科风毛菊属雪兔子亚属高山植
物，其名称随产地而别，云南雪莲花称槲叶雪莲花［1］。达娃卓玛
等［2］采用水蒸气蒸馏法提取其挥发油，并通过 GC － MS 联用技
术对其化学成分进行分析研究，分离出大约 70 个化合物，通过质
谱检索和分析并参考文献报道共鉴定出 56 个化合物，其中含量
较大的化学成分有植酮、姜醇、红没药醇、芹烯等，这些挥发油成
分中有许多具有一定的药理活性［3］。
Randic［4］最早将分子连接性指数(mXt)用于醇类气相色谱保
留指数(RI)的研究，随后许多学者相继建立了烃及其衍生物的
定量结构 － 色谱保留指数相关性模型(QSRR)［5 ～ 8］，现已成为色
谱科学领域中十分活跃的课题［9］。本研究利用 Kier 等［10］提出
的价连接性指数(Xi)和 Hall 等［11，12］提出的电性拓扑状态指数
(En)与 56 种雪莲花挥发油化学成分的气相色谱保留时间(tR)
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