全 文 ：［收稿日期］ 20130901(001)
［基金项目］ 2015 版中国药典项目
［第一作者］ 王佰灵，在读硕士，从事中药质量控制研究，Tel:
13760711317，E-mail:wbling6@ 126． com
［通讯作者］ * 梁生旺，教授，从事中药质量控制研究，Tel:020-
39352172，E-mail:swliang371@ 163． com
鸡骨香药材中 Chettaphanin Ⅱ的含量测定
王佰灵，王国才，梁生旺* ，黄天山，阎微
( 广东药学院，广州 510006)
［摘要］ 目的:建立 HPLC测定鸡骨香中的药效成分 chettaphaninⅡ的含量的方法，并比较不同批次鸡骨香的含量差异，
为该药材质量标准的制定提供依据。方法:Phenomenex Luna(2)C18色谱柱 (4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，乙腈-0. 1%磷酸水洗
脱系统，梯度洗脱，检测波长 355 nm，柱温 30 ℃。结果:ChettaphaninⅡ的回归方程为 Y = 2 × 106X － 166 725(r = 0. 999 8) ，在
0. 255 ～ 7. 65 μg线性关系良好。鸡骨香中 chettaphanie含量在 0. 472 ～ 1. 069 mg·g －1。结论:该法准确灵敏，稳定可靠，可用于
鸡骨香药材质量控制。
［关键词］ 鸡骨香;chettaphaninⅡ;高效液相色谱
［中图分类号］ Ｒ284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2014)13-0061-03
［doi］ 10． 13422 / j． cnki． syfjx． 2014130061
［网络出版地址］ http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /11． 3495． Ｒ． 20140513． 1540． 022． html
［网络出版时间］ 2014-05-13 15:40
Determinations chttaphanin Ⅱ of Ｒadix Cortonis Crassifolii
WANG Bai-ling，WANG Guo-cai，LIANG Sheng-wang* ，HUANG Tian-shan，YAN Wei
(Guangdong Phmaceutical University，Guangzhou 510006，China)
［Abstract］ Objective:To study the content of active principle and main content in Ｒadix Cortonis
Crassifolii in order to provide some academic basis for quality criterion of Ｒadix Cortonis Crassifolii． Method:The
method of HPLC was used to determine the content of chettaphaninⅡ in different batches． The method was
established on a Phenomenex Luna (2)C18 column (4. 6 mm ×250 mm，5 μm)with the mobile phase on stepwise
gradient elution of acetonitrile-0. 1%H3PO4and the temperature at 30 ℃，the detection wavelength was set at 355
nm． Ｒesult:The calibration curves of chettaphaninⅡ was Y = 2 × 106X － 166 725 (r = 0. 999 8) ，showing good
linearity in the range of 0. 255-7. 65 μg． The content of Ｒadix Cortonis Crassifolii was 0. 472-1. 069 mg·g －1 ．
Conclusion:This method is accurate，sensitive，stable and reliable and can be used for quality control of Ｒadix
Cortonis Crassifolii．
［Key words］ Ｒadix Cortonis Crassifolii;chettaphaninⅡ;HPLC
鸡骨香在历代本草中均有记载，但关于其含量
测定在《中国药典》2010 年版及之前各版均未见收
载，地方标准中也未见其含量测定的报道，为了确保
鸡骨香药材的质量，有必要对其药效成分和主要成
分进行含量测定。
鸡骨香为大戟科巴豆属植物鸡骨香的根，别名
千人打、山豆根、驳骨消(《岭南采药录》)、土沉香
(《生草药性备要》)、黄牛香(广州部队《常用中草
药手册》)、过山香(福建)、鸡角香、透地龙等［1］。味
辛、苦，性温，入心、肺、肝、胃、肾五经，具有理气止
痛、祛风除湿、舒筋活络的功效［2-3］，主要用于风湿
痹痛、腰腿痛、胃及十二指肠溃疡、胃肠功能紊乱、胃
肠胀气、咽喉肿痛、黄疸、疝痛、跌打肿痛、外治毒蛇
咬伤等［4］。分布于我国南部地区及越南、老挝、泰
国等国。泰国学者 Laddawan Boonyarathanakomkit
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第 20 卷第 13 期
2014 年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 20，No． 13
Jul．，2014
等［5］报道该植物具有抗癌活性。为了补充和丰富
该植物的研究内容，为该植物的药用提供理论基础，
本实验对鸡骨香药材药效成分 chettaphaninⅡ［6-7］进
行含量测定，并比较不同批次鸡骨香的含量差异，为
鸡骨香药材质量评价提供依据。
1 材料
1. 1 仪器 Waters 2695 型高效液相色谱仪(Waters
2996 二极管阵检测器，美国 Waters) ，BP211D 型 1 /
10 万电子天平(Sartorius)。
1. 2 试药 鸡骨香药材购自广西及广州清平药材
市场，经广东药学院李书渊教授鉴定为大戟科巴豆
属植 物 鸡 骨 香 Croton crassifolius Geisel 的 根;
ChettaphaninⅡ［8］对照品由暨南大学提供，甲醇、乙
腈均色谱纯(欧普森) ，其他试剂为分析纯，水为超
纯水。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Phenomenex Luna (2)C18色谱柱
(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流动相乙腈(A)-0. 1%
磷酸水(B)梯度洗脱(0 ～ 25 min，60% A;25 ～ 40
min，60% ～ 90% A) ，检测波长 355 nm，流速
1 mL·min －1。
1. chettaphaninⅡ;A．对照品;B．鸡骨香样品
图 1 鸡骨香药材的 HPLC
2. 2 对照品溶液的制备 精密称定对照品
chettaphaninⅡ 5. 10 mg，置于 5 mL 量瓶中，加甲醇
至刻度，配成 1. 02 g·L －1的储备液。吸取上述对照
品储备液 0. 5 mL，置于 2 mL 量瓶中，加甲醇至刻
度，即得。
2. 3 供试品溶液的制备 精密称定鸡骨香药材(2
号筛)1. 0 g，置锥形瓶中，加入甲醇 10 mL，称定质
量，超声处理 30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足
减失的质量，摇匀，滤过，即得。
2. 4 对照品纯度检查 精密吸取 chettaphaninⅡ对
照品溶液各 15 μL，注入液相色谱仪中，测定
chettaphaninⅡ的峰形、峰位，由峰面积归一化分析
法得出，对照品 chettaphaninⅡ的纯度为 98. 28%。
2. 5 方法学考察
2. 5. 1 线性关系考察试验 取 2. 2 项下的对照品
溶液，分别进样 1，2，5，10，15，20，30 μL，以质量浓
度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归计算，得回归
方程为 Y = 2 × 106X － 166 725(r = 0. 999 8) ，结果发
现 chettaphaninⅡ在 0. 255 ～ 7. 65 μg线性关系良好。
2. 5. 2 精密度试验 精密吸取 2. 2 项对照品溶液
10 μL，按 2. 1 项下的色谱条件重复进样 5 次，结果
chettaphaninⅡ峰面积的 ＲSD 0. 275%，表明仪器精
密度良好。
2. 5. 3 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于
0，2，4，6，12，24 h精密吸取 15 μL进行测定，记录峰
面积，结果表明 chettaphaninⅡ的峰面积的 ＲSD
1. 488%，表明供试品溶液在 12 h内稳定。
2. 5. 4 重复性试验 精密称定同一鸡骨香药材粉
末 5 份，各 1. 0 g，按 2. 3 项下的方法制备供试品溶
液，分别精密吸取 15 μL，按 2. 1 项下的色谱条件测
定。结 果 表 明 chettaphanin Ⅱ 峰 面 积 的 ＲSD
2. 418%，表明该方法重复性良好。
2. 5. 5 加样回收率试验 精密称定鸡骨香药材 9
份，各 0. 5 g，分别加入适量对照品，按 2. 3 项下方法
制备，分别精密吸取滤液 15 μL，按 2. 1 色谱条件测
定，计算加样回收率，见表 1。
表 1 鸡骨香中 chettaphaninⅡ的加样回收率
取样量
/ g
样品
中量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
ＲSD
/%
0. 500 0 0. 534 5 0. 427 0 0. 952 6 0. 979 1
0. 500 0 0. 534 5 0. 425 3 0. 947 9 0. 972 0
0. 500 1 0. 534 6 0. 427 6 0. 962 7 1. 001 3
0. 500 0 0. 534 2 0. 530 1 1. 042 0 0. 957 9
0. 500 1 0. 534 0 0. 529 0 1. 071 0 1. 015 2 97. 89 1. 93
0. 500 1 0. 534 4 0. 531 5 1. 046 0 0. 962 7
0. 500 0 0. 531 9 0. 640 0 1. 149 0 0. 964 2
0. 500 0 0. 522 2 0. 631 9 1. 137 0 0. 972 9
0. 500 0 0. 531 7 0. 643 3 1. 165 0 0. 984 5
2. 6 样品含量测定 取 10 批鸡骨香药材(过 2 号
筛)各 1. 0 g，精密称定。按 2. 3 项下方法制备供试
品溶液，分别精密吸取供试品溶液 15 μL，进样，按
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第 20 卷第 13 期
2014 年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 20，No． 13
Jul．，2014
上述色谱条件测定，计算样品中 chettaphaninⅡ的含
量见表 2。
表 2 不同批次鸡骨香含量测定 mg·g － 1
No． 购买日期 来源 含量
1 2012-09-05 清平药材市场 1. 069
2 2012-09-05 清平东药材市场 0. 721
3 2013-03-01 清平药材市场 0. 472
4 2013-03-01 清平药材市场 0. 192
5 2013-03-01 清平东药材市场 0. 963
6 2013-03-21 广州致信 0. 828
7 2013-04-03 广西玉林市中桂药材有限公司 0. 735
8 2013-05-09 清平药材市场 0. 655
9 2013-05-09 清平药材市场 0. 730
10 2013-05-18 广州采芝林 0. 756
3 讨论
本实验采用 HPLC法测定了鸡骨香中药效成分
chettaphaninⅡ，方法简单、准确，重复性好，为鸡骨
香质量标准的建立提供了一定的科学依据。
考察了回流、冷浸和超声 3 种提取方法，结果发
现冷浸法提取的有效成分含量最低，超声和回流提
取的有效成分量相似，而超声较回流操作简单，故本
实验采用超声的提取方法。超声提取时主要考察了
提取时间(20，30，40 min)、溶剂的种类(甲醇、石油
醚、乙酸乙酯)以及溶剂的用量(5，10，15 mL) ，鉴于
节约溶剂、时间及有效成分的量考虑，本实验采用甲
醇作为提取溶剂，超声 30 min 对有效成分进行
提取。
本实验对 10 批不同产地鸡骨香药材进行了药
效成 分 和 主 要 成 分 的 含 量 测 定，结 果 表 明
chettaphaninⅡ的含量分别在 0. 192 ～ 1. 069 mg·g －1，
含量相差较大，可能与鸡骨香的产地、采收、加工有
关。为了保证鸡骨香的质量，有必要建立鸡骨香的
GAP基地［9］。
［参考文献］
［1］ 广东省食品药品监督管理局．广东省中药材标准．第
二册［S］．广州:广东科技出版社，2011:190.
［2］ 广西壮族自治区卫生厅．广西中药材标准［S］．南宁:
广西科学技术出版社，1990:59.
［3］ 邓世明．海南常用中草药名录［M］． 北京:中国科学
技术出版社，2006:19.
［4］ 朱耀魁，胡颖，程妮，等．鸡骨香化学与分研究［J］．中
草药，2013，44(10) :1231.
［5］ Laddawan Boonyarethanakomkit，Chun-tao Che，Harry
H S Fong，et al． Constituents of Croton crassifolius
Ｒoots［J］． Plantamedica，1988，54(1) :61.
［6］ 杨先会，邓世明，梁振益，等．鸡骨香挥发油成分分析
［J］，海南大学学报:自然科学版，2007，25(3) :262.
［7］ 陈书红，任凤芝，李丽红，等． 鸡骨香化学成分研究
［J］．中国药学杂志，2010，45(24) :1907.
［8］ 李甲桂． 鸡骨香化学成分研究［D］． 广州:暨南大
学，2013.
［9］ 杨先会，陈尚文，林强，等． 鸡骨香的萜类成分研究
［J］．广西植物 2009，29(2) :272.
［责任编辑 顾雪竹］
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