全 文 ：中国自然医学杂志 ( X 2泛 年 1月第 4卷第 4期 伽 nJ a N tM d, No , e闹祀】 2X( 滩 , Vol 4 oN 4
I实验研究 ]
新型 G A B A 受体拮抗剂左旋一叶
荻碱的中枢升压作用
赵晓燕` 白洁 “ 彭建中3 蒋正尧 4
【摘要】 目的 探讨新型 了一 氨基丁酸 (以BA ) 受体拮抗剂左旋一叶荻碱中枢升压作用的 C AB A 能机制与肾交
感神经紧张性的关系。 方法 在麻醉大鼠侧脑室注射左旋一叶荻碱 ( l 一 反 C ) , 记录动脉血压 (AP )及肾交感神经放电
( sR ND )
。 结果 ( 1 ) 1 一阮 和 CBA A人受体拮抗剂荷包牡丹碱 ( B ic )均可引起 sR ND 增加 、 AP 升高 , 并呈一定剂量 一 效
应关系 ; c AB凡受体激动剂蝇覃醇 ( M us )和 c AB八B受体激动剂巴氯酚 ( B二 )使 sR ND 减少 、 廿 降低 ; ( 2) 1一 cse 既能拮
抗 M us (c A B A ) 、 又能拮抗 B ac 引起的 “ 交感抑制和降压反应 ” 。 结论 前脑室周部位存在 “ G AB A 能抑制机制 ” ,
1 一阮 解除了 C A BA 对交感心血管中枢的紧张性抑制 , 使交感神经系统传出活动增强 , 因而产生升压作用 ; 1一 ceS 可
能是一种非选择性的 CAB A 受体拮抗剂 。
[关键词】 了 一 氨基丁酸 ; 一叶荻碱 ; 动脉血压 ; 肾交感神经放电
M eC h an is m of ( 笼成 ar l p丫e义扣瞪 E fe c t of l 一 s 改川血山祝 . 2 杜今。 叉汇侧 ) 一 ,娜几 ` , 丑月了批 ’ , 尸刀佑 J众巩 一幼切 w , J朋八 C hZ e 了诏 -
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【A bS 健拍 c t】 仪垃iect ve oT ivne ist 脚 e het inet r a c t ion 玩一 n C ABA e匆。 ~ h别心sm of e l llat l衅 s sor e拓沈 t and 。耐 sym aP -
het ict ne 、 ton e ind uce d by l 一阮 . M七ht 侧如 五买比石毗ntS ~ 盆洲” 肠m 犯d on an e st he 币翻比 娜 n 犯 o司 i邓 a n e n习 p比 5 5二 (AP )
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id sc ha 乓罗 ( RSN D ) w l记 n l 一 、 面~ ( 1 一阮 )。 a d m i n is t e l记 inot het la t e司 in tr a c e花 bm v e面d e .
R es ul st ( 1 ) 1
一
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C AB戈 此 c e p怕r an 里码扣 n is砚 ibc u c t曲 , ( icB )场 t卜山 ic以 a dO eS 一 由 光`以 k址 i一 in RNS D耐 PA ;以 B从 , e otP r ago in st m us ic oml ( M u s ) adn C AB AB~ p t o r ag o ll l s t ab c lo fe n ( BaC ) e vo dke a dce er ase in RSN D耐 PA . ( 2) 1一阮
ant
之堪。 n l, d ht 。 “ s y n l pa t ll o 一 iihn ib ot yr 出 ld de erP s so r e压沈矿 e t’o k司 场 b ” h M l巧 a l l d B ac . C翻义 l比幻 nS I 一触 翻川汕 idet hat
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~s y’ln p alt 1e ict ou 田 o w , thus er s己团 in tha erP ~ e玉亡t . eP her sP , 1 一阮 is an 山玛d e e t ive CABA ~ p t o r 田 1喊即 n肠t .【eK y 铸, n卜】 GBA A ; 卜 se ~ 垃 ne ; An 启 ir址 p er s s以吧 ; 珑耐 吕y l” s拍 dcl it c ~ id CS h娜 ,
左旋一叶荻碱 ( 1 一 cse iur in en , 1 一 S ce )系自大戟科
植物一叶荻 (叶底珠 , eS cu ir en ga s u ft h l it c osa , R e l记 )叶中
提取的一种生物碱 , 具有中枢兴奋作用 〔`〕 , eB iul e :
等川研究表明 1 一 se 。 是一种新型 以B A 受体拮抗剂 ,
类似 GA BA A受体拮抗剂荷包牡丹碱 ( b i e u e u l li n e , B IC ) 。
有观点认为在前脑室周系统尤其是下丘脑存在着一个
内源性 “ GAB A 能抑制机制 ” , 对中枢交感心血管系
统具有紧张性抑制作用 , 以 BA 受体拮抗剂可 以解除
这种紧张性抑制3)[ , 从而使心率 ( H R )加快和动脉血
压 ( A )P 升高 。 由于下丘脑室旁核和延髓头端腹外
侧区是调节交感神经传出活动的主要中枢之一 , 本实
验室曾在上述部位微量注射 1一 撇 , 初步观察到 AP
升高和 H R 加快 , 推测可能是 1 一 灰 c 拮抗 以BA 能
神经的抑制性调节作用 , 导致交感神经兴奋 的结
果闭 。 因肾交感神经参与血压的调节 , 并与高血压的
发生和维持密切相关 , 本工作采用侧脑室注射 ( ic v )
l 一触 ,同步记 录 AP 和 肾交感神经传出放电 ( , 耐
s犯 I , 〕 a ht e ti c n e vr e d is c ll缨 e , Rs ND ) , 旨在研究 l 一 阮
中枢升压效应的作用机制 。
1 材料和方法
作者单位 : l . 7 5C联抖 银川市 , 中国人民解放军第五医院心肾科 ;
2
. 宁夏医学院生理教研室 ; 3 . 宁夏医学院药理教研
室 ; 4 . 青岛医学院生理教研室
1
.
1 一般操作 : 实验用雄性 W is tar 大鼠 120 只 , 体
重 250 一 30 9
,
20 % 氨基甲酸乙醋 ( 1 . 0 『k g )腹腔麻
醉 , 气管插管 , 左颈总动脉插管连接压力换能器 ,
妙 经压力前置放大器连续描记于热阵式多导记录仪
(BA I
, 一 n o
,
N ih o n Eb l ld e 们 )
。
1
.
2 侧脑室微量注射 : 参照 P助 inos 鼠脑图谱 , 借助
1) FS一8 立体定位仪 ,将外径为 0 . 5 ~ 的不锈钢套管插人右侧脑室 ( AP : 一 0 . 8 ~ ; :R 1
.
8 ~
; :H 3
.
5 ~ )
,
另一端和微量注射器相连 , 用以注射微量药液 , 每次
注射容量恒为 10 讨 , 用电动微量推注仪于 1而 n 内自
中国 自然医学杂志 2田 2年 1月第 4卷第 4期 Chi n JN at M记 , N voe n l l祀 r ZX( 犯 , vo L4 No
.
4
动匀速注射 。
1
.
3 肾交感神经放电的记录 : 动物取右侧卧位 , 经
腹膜后暴露左肾 , 借助双目解剖显微镜 , 沿肾动 、 静
脉寻找并分离肾交感神经 , 尽量靠近肾门处切断 , 仔
细剥除附着的结缔组织 , 进一步分离成细束 , 将其中
枢端置于双极银丝电极上 (两极相距 1 . 5 一 2 . 0 ~ ) ,
以 3 7℃ 凡士林和石蜡油混合覆盖神经标本 。 SR N D
经生物电前置放大器放大后输人神经冲动计数仪 , 打
印出每秒钟的传出冲动个数 (次 / S ) 。
上述观察指标均显示于 VC 一 1 1 记忆示波器 ( iN -
h on K o ll den )上进行监测 。 每次实验前至少记录 30 而 n
正常值及正常曲线后再进行各项观察 , 比较给药前 1
而 n 和给药后效应达高峰时的 AP 和 RSN D 变化 。 整
个实验过程中直肠温度维持于 ( 37 士 0 . 5 ) ℃ 。 实验结
束后于给药部位注人谤胺天蓝 or 川 以进行组织学定
位检查 。
1
.
4 药 品 : 左旋 一 叶荻碱 ( l 一 Sec iur in en , 1 一 Sec
C 13 H 15 O ZN
,相对分子质量 2 17 ) , 由中国医学科学院
药物研究所提供 ; 荷包牡丹碱 ( b i e it e u l i n e , B IC ) 、 蝇覃
醇 (mu s e imo l , M u s )和 巴氯酚 ( b ac lofe n , Bac )均由 S ig l l a
公司生产 。 所有药品均用等量生理盐水配成实验所需
浓度 , p H 值调至 6 一 o7
1
.
5 统计分析 : 结果以 无 士 、 表示 , 数据输人微机
进行统计学处理 , 给药前后行配对 t 检验 , 以 尸 <
0
.
05 作为有显著性意义 。
2 结果
2
.
1 侧脑室注射 1 一 反 c 对 RNS D 和 A P 的影响 : 生
理盐水 ic v 对 SH ND 和 AP 均无显著影响 ( P > 0 . 0 5 ) 。
1 一 eS e ie v 3
.
7 5 一 3 0 拼g , ” 升 高 、 sR N D 增 加
( 尸 < 0
.
05 ) ; RS ND 和 AP 的变化过程非常相似 , 即潜
伏期为 1 一 2 而 n 〔R SND 略短于 妙 ,分别为 ( 1 . 5 土 0 . 2 )
和 ( 2 . 0 士 0 . 3 而 n) , 尸 < .0 01 〕 , 给药后 3 一 4 而 n 反
应达高峰 , 作用维持时间为 5 一 12 而 n , 而且这两种
效应均呈明显 的剂量 一 效应关系 (表 1 ) 。 另外 , iB c
i e v 0
.
5 拜g ( n = 10 ) , SR N D 增加 ( 5 . 5 9 士 0 . 钓 ) 次 / s
( 尸 < 0
. 的 l ) , AP 升高 ( 4 . 7 9 * 0 . 3 6 ) kaP ; ’ B i。 i e v 1 . 0
鸿 , SR N D 和 A P 的增加值分别为 ( 9 . 73 士 0 . 5 1) 次 s/
和 ( 7 . 9 9 土 0 . 4 6 ) kP a ( P < 0 . 0 1 ) 。 相反 , M u s ie v 1 . 0
腮 ( n 二 一。 )和 玩C i e v Z . o 扛g ( n = 10 )均引起 Rs N D 减
少 〔分别为 ( 一 3 . 86 士 0 . 4 2 )和 ( 一 3 . 2 1 士 0 . 5 7 )次 / s ,
尸 < 0 . 0 月和 AP 降低 〔分别 为 ( 一 3 . 43 士 0 . 31 ) 和
(
一 2 . 86 士 .0 40 ) k aP
, 尸 < .0 0 1〕 。 上 述 结果 表 明
l 一 Se e 和 B IC 具有 “ 交感兴奋和加压效应 ” , 而 M u s
和 B` 则产生 “ 交感抑制和减压效应 ” 。
2
.
2 1 一 eS C 对 M u s 及 B ac 引起交感抑制和减压效应
的影响 : M u s i e v 1 . 0 拼g , 反应达最高峰时 , 分别 ie v
15 拼g ( n = 8 ) , 3 0 拜g ( n = s )和 6() 拼g ( n = 7 )一 se c ,
结果 巧 拜9 1 一 eS 。 不能反转 M u s 产生的 SR ND 减少和
AP 降低 , 30 鸿 和 60 鸿 l 一 ecS 均可反转 M us 的上述
作用 (表 2) 。 同法观察到 巧 滩 ( n = 9 ) l 一 eS 。 不能反
转 2 . 0 拜9 B ac 的作用 , 而 3 0 拜g ( n = 9 ) , 60 “ g ( n =
8) 和 120 咫 ( n = 8 ) l 一 se C 均可同时反转 B ae 引起的
SR ND 减少和 AP 降低 (表 3 ) 。 以上结果表明 1 一 ecS
既能拮抗 M us 、 又能拮抗 B ac 的交感抑制和减压效
应 , 并呈明显的剂量 一 效应关系 。
表 1 侧脑室注射 1一 eS e 对肾交感神经放电 ( RSN D )和动脉血压 (AP )的影响 (无 士 : )
剂量
(拜g )
生理盐水
l 一 映℃ :
动物数
(只 )
肾交感神经放电 (次s/ ) 动脉血压 ( k l、 )
用药前 用药后 用药前 用药后
8
8
8
10
l 5
9
.
0 8 土 0 . 19
9
.
25 土 0
.
5 2
9
.
6 1 士 0 . 3 1
8
.
7 8 土 0
.
3 7
9
.《 ) 士 0 . 2 8
0
.
16 士 0
.
2
9
.
6 3 士 0 . 6 1
10
.
34
士 0
.
65
粉
1 1
.
92
士 0 . 3 3 “ 将 甘
14
.
9 8 士 0
.肠 长 赞 畏
12
.
5 8 土 0 . 39
1 1
.
88 士 0 49
13
.
X()
士 0
.
33
1 1
.
8 3 土 0
.
9 3
1 1
.
5 1 土 0 . 36
12
.
54
士 0 . 5 3
12
.
7 2 士 0 . 9 1任
14
.
7 7 士 0 . 5 1赞 份
14
.
67 士 0
.
7 6
骨 .
巧 . 65 土 0 . 86 赞 务 份
750
,j11ù0
胜`内凡à
注 : 与用药前相比 二 P < 0 . 05 , , * P < 0 0 1 , “ ` P < 0 X() l 。
表 2 侧脑室注射 1 一 灰 C 对 M us 引起的交感抑制和减压效应的影响 ( 无 土 : )
M u。 i e v 1
.
0 拌g 预处理
1 一 Sec 剂量
(咫)
动物数
(只 ) 肾交感神经放电 (次s/ ) 动脉血压 (
k aP )
l 一 S 戈 i e v 后
10
.
X()
士 0 . 5 3
30
田
I 一 S 兄 i e v 前
5
.司4 土 0 . 2 1
7
.
10 土 0 . 29
7
.
3 3 土 0 . 4 8
l 一 反咒 i e v 后
5
.
80 士 0
.
3 0
9
.
05 士 0
.
10
.
37 士 0 .
75
’
92 一
l 一 段℃ fe v 前
9
.
38 士 0 . 35
10
.
2 1 土 0 . 4
9
.
0
士 0 . 36
12
.以 土 。 .
13
.
X()
士 0 .
6 3
份 怪
5 6
, 电
注 : 与 l 一 S曰止 ivc 前相比 , , 尸 < 0 . 05 , 二 , 尸 < 0 . 01
中国自然医学杂志 2以投年 n 月第 4卷第 4期 h Cn iJ t NaM侧」, N。卿通冷 2X( 双 , Vol .4 南 4
侧脑室注射 1 一阮 对 B a c 引起的交感抑制和减压效应的影响 (无 士 : )
ù知
阮 ivc 2 . 0腮 预处理
1 一 阮 c 剂量
(鸿 ) 动物数 肾交感神经放电 (次
s/ ) 动脉血压 ( kl、 )
30
印
l 一 S e c i e v 前
4
.
94 土 0
.
3 0
6
.
8 1 士 0 . 月O
6
.
25 土 0
.
28
5
.
62 土 0 . 3 5
1 一 S曰巴 ivc 后
4
.
74
士 0 . 2 1
l 一 反 c ie v 前
9 89 土 .0 46
1.0 价 士 .0 49
1 1
,
17 土 0 . 38
10
.
58 士 0 . 4()
1 一 反 c icv 后
8
.
36
土 0 .肠 怪 份
8
.
89
士 0 . 58 赞 份
9
.
73 土 0 . 56
. 份 岭
1.0 26
土 .0 46
11
.
37 士 0
.
68
.
13
.
7 1 士 0 .肠 . 甘
14
,
46
士 0 5 7 , , .
注 : 与 1 一 S犯 ivc 前相比 , ` 尸 < 0 . 05 , “ 尸 < .0 01 , “ ` P < .0 0 1
2
.
3 BI C 对 M u s 和 aB c 引起的交感抑制和减压效应
的影响 : 本组实验发现 B IC i e v 0 . 5 拜g ( n = 8 )和 1 . 0
滩 ( n 二 s) 均可显著反转 M us 1 . 0 鸿 引起的 RS ND 减
少和 ” 降低 , 而 B i c i e v 0 . 5 鸿 ( n = 8 )和 1 . 0 此 ( n
=
s) 则不能反转 aB c ic 、 2 . 0 鸿 的作用 。 以 1 . 0 滩 的
B IC 对 M u s 和 Bac 作用的影响为例 , M u S i e v 1 . 0 此 ,待
SR ND 及 廿 变化达最低峰 〔分别为 ( 一 4 . 3 土 0 . 3 6 )
次 / s 和 ( 一 3 . 6 8 土 0 . 4 7 ) k几 , 尸 < 0 . 田 l 〕, 此时 B i e i e v
1
.
0 鸿 , 很快引起 RS N D 显著增加及 AP 回升〔分别为
( + 6
.
8 1 士 0
.
60 ) 次 / s 和 ( + 7 . 0 3 土 O ` 5 2 ) k aP , P <
0
.
0 1)
。
B ac ic
v
2
.
0 滩 , 交感抑制和减压效应达最大
〔分别为 ( 一 3 . 07 土 0 . 29 )次 / s 和 ( 一 2 . 40 士 0 . 42 ) k p a ,
p < 0
.
0 1〕 时 , B i e i e v 1 . 0 此 , 连续观察 30 而 n ,
SR ND 及 AP 均无明显改变 ( 尸 > 0 . 05 ) 。 由此证实 iB c
只能拮抗 M u s 的作用 , 对 aB C 的作用无显著影响 。
3 讨论
根据 Beu let r 等图的研究 , l 一 撇 的作用机制类
似 BI C , 是 以 BA 识别位点的竞争性拮抗剂 , 该研究
采用侧脑室微量注射法 , 发现由国产中草药提取的新
型 以B A 受体拮抗剂 l 一 Sec 和 BI C 一样 , 所引起的
心血管效应是通过交感神经介导的 , 因为 AP 升高的
同时 , SR N D 呈同步性增加 , 交感兴奋反应和升压反
应的变化具有相似的时间过程 , 咫ND 增加的潜伏期
〔( 1 . 5 士 0 . 2) m in 〕 略短于 妙 升高的潜伏期 ( ( 2 . 0 士
0
.
3 )而 n 〕, 二者相比 , 差异有非常显著性 ( P < 0 . 0 1 ) 。
与此相反 , M u s 和 B ac 引起 AP 下降的同时 , RS ND
呈同步性减少 , 这就更进一步证明了内源性 C ABA 对
前脑室周系统参与心血管调节 的交感紧张性活动具有
调制作用 。 也就是说 , 前脑室周系统存在交感兴奋神
经元 , 而正常静息状态下 内源性 以B A 对交感兴奋神
经元具有紧张性抑制作用 , 侧脑室注射 1一 ceS 和 iB c
解除了 以B A 紧张性抑制而引起 RS ND 增加 、 ” 升
高。 这一中枢心血管反应的生理意义还不十分清楚 。
值得注意的是 , 我们还发现 1 一 S ec 和 BI C 不同 ,
iB c 只能拮抗 M u S 的交感抑制和降压效应 . 1 一 S ec 既
能拮抗 uM s 、 又能拮抗 B ac 诱发的交感抑制和降压效
应 , 这一点以往的文献均未报道 , 而 B eu de r 等的研
究只证明了 1 一骊 可以抑制 3 H标记的GA BA 同其受体结合 , 但未做 B ac 配体结合竞争性抑制实验〔2〕。 本
研究提示 1一 ecS 可能是一种非选择性的 CAB A 受体
拮抗剂 。 确切结论需要体外放射性配体结合实验予以
进一步证明 。 需要指出 , 我们 ivc l 一 S e e 时 , 并没有
阻断中脑导水管 ( a q u educ t of s y l vius ) 。 因此 , 关于 1 -
eS C 中枢心血管效应的作用部位 , 还不能排除 1 一 ecS
对脑桥和延髓 , 特别是延髓头端腹外侧区的作用 。 已
有研究发现 , 阻断中脑导水管后 ivc icB 不但依然有
效 , 而且引起相同程度的心血管效应时 , BI C 的剂量
可以减小 , 表明 ivc iB 。 引起心血管效应的中枢定位
在前脑 , 而且主要在下丘脑阎 , 因下丘脑位于第 m脑
室周围 , 含有大量 GA BA 及其合成酶 , 下丘脑后部和
室旁核的 GA B A 对下丘脑交感兴奋神经元的紧张性抑
制可以影响心血管活动的机能 。 本实验室也曾观察到
下丘脑室旁核注射 1 一触 产生升压作用 。闭 。 进一步
的工作需要明确 1 一 eS 。 中枢心血管效应的确切作用
部位和调节肾交感神经紧张性活动的 GA B A 能神经通
路 。
参 考 文 献
陶上乘 , 彭建中 , 陆满文 一叶荻碱的中枢惊厥作用 . 中国药
理学报 , 19 86 , :7 9 一 12 ·
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140
.
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、J.r.护t工
2
矛..k沪.且ó