全 文 :基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目 (No. 桂科重 1355001 - 4 - 2);广西壮药质量标准 (第三卷)质量评
价与标准研究 (No. GXZC2014 - G3 - 1577 - YLZB - B - 2);广西壮族自治区卫生厅:铁凉伞等四味壮药
质量标准研究 (No. CZZC13 - 13)
作者简介:陈少锋 (1970 -),男,汉族,广西博白人,副主任药师,学士学位,主要从事中药,民族药药理研究
工作。
通信作者:黄瑞松 (1958 -),男,主任中药师,从事中草药化学成分和质量标准研究。E - mail:hrs. 3130064
@ 163. com
白饭树水提液的急性毒性研究
陈少锋 赵湘培 杨增艳 黄 鑫 黄瑞松*
广西壮族自治区民族医药研究院,广西 南宁 530001
【摘 要】 目的:研究白饭树水提液的急性毒性。方法:采用小鼠急性毒性实验观察白饭树水提液对小鼠急性毒性
半数致死量 (LD50)的作用。结果:小鼠口服给药可测得 LD50值为 (138. 0 ± 23. 3)g / kg,其 95%置信区间为 (153. 21 ~
199. 81)g / kg,相当于人临床拟用日剂量的 1293 倍。结论:白饭树的临床用药在一定剂量范围内,是比较安全的。
【关键词】 白饭树;急性毒性;试验
【中图分类号】R285. 5 【文献标志码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2016)14 - 0015 - 02
白饭树为大戟科植物白饭树 Flueggea virosa
(Willd.)Baill. 的茎叶,又名白鱼眼、鱼眼木、鹊
饭树。白饭树味苦,性凉,具有祛风毒,清热毒,
化淤止痛的功效,用于治疗风湿痹痛、湿热带下、
湿疹、跌打损伤[1 - 3]。王国才等从白饭树叶及嫩枝
乙醇提取物的氯仿部位中分离得到 9 个化合物,分
别为 11 - O -乙酰岩白菜素 (11 - O - acetyl berge-
nin)、岩白菜素 (bergenin)、右旋一叶萩碱 (viros-
ecurinine)、ent-phyllanthidine、山柰酚 (kaempfer-
ol)、槲皮素 (quercetin)、没食子酸 (gallic aicd)、
胡萝卜苷 (daucosterol)和 β -谷甾醇 (β - sitoster-
ol)。刘艳萍等[4 - 5]从白饭树枝叶 90 %乙醇提取物
的石油醚萃取部位分离得到 8 个化合物,分别为一
叶萩碱、一叶萩醇 A、一叶萩醇 B、布比林仙定、
杨芽黄素、香叶木素、羽扇豆醇、羽扇豆醇乙酸酯。
吉月菊等[6 - 7]从白饭树枝叶 90 %乙醇提取物的乙酸
乙酯萃取部位中分离得到 8 个化合物,分别为 secu-
ritinine、phyllanthidine、4 - epiphyllanthine、epibub-
biadine、(+) -松脂酚、8α -羟基松脂酚、龙胆
酸和原儿茶酸[8]。目前对于白饭树的药理学研究较
少[9 - 10],本文对白饭树茎叶水提液进行相关药理学
试验,评价急性毒性,为其的临床安全用药提供了
一定的实验依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 白饭树,采自广西隆安县龙虎山,经
广西民族医药研究院黄瑞松主任药师鉴定为大戟
科植物白饭树 Flueggea virosa (Willd. )Baill. 的
茎叶。
白饭树水提液:取白饭树药材 2kg,切断,加
10 倍量的水煎煮两次,每次 1h,过滤,合并滤液,
滤液加热浓缩至 500mL,再水浴浓缩至 200mL,即
得 10g /mL浓缩液,备用。
实验动物:昆明种小鼠,体重 18 ~ 22g,雌雄
兼用,由广西医科大学实验动物中心提供。
1. 2 方法 以改进寇氏法设计,经预试,分别找
出引起动物 0% (Dn)和 100% (Dm)死亡的白
饭树水提物的剂量。根据预试结果在测得 Dn 和
Dm 剂量范围内设 4 个剂量组,分别为 256g /kg,
204g /kg,160g /kg,128g /kg,每组 10 只小鼠,组
间剂量比值 1∶ 0. 8,禁食 12h 后不禁水,分别灌服
不同剂量的受试药物 (每只小鼠用药体积均为
0. 4mL /10g 体重),连续观察 7d 各小鼠的毒性反
应情况[11]。
2 结果
小鼠给药后自发活动减少、倦卧不动、嗜睡,
动物皮毛光泽,无震颤、惊厥、运动失调、流涎、
流泪、流鼻涕、呼吸困难等现象发生。给药 12h后
开始有小鼠死亡。给药 7d 后观察,4 个剂量组的
小鼠都出现死亡情况。结果如表 1。
经改进寇氏法计算,白饭树小鼠口服给药可
测得 LD50值为 (138. 0 ± 23. 3)g /kg,其 95%置信
区间为 (153. 21 ~ 199. 81)g /kg。
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·51·中国民族民间医药 2016年 7月第 25卷第 14期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2016,Vol. 25,No. 14
30mL振摇提取,取正丁醇部分蒸干,残渣加甲醇
1mL使溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法
试验,吸取上述 3 种溶液各 2 ~ 4μL,分别点于同
一硅胶 G薄层板上,以三氯甲烷 -甲醇 (10∶ 1. 5)
为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 10%硫酸乙
醇溶液,在 105℃加热约 2min 至斑点显色清晰,
置日光下检视。供试品色谱中,在与对照药材色
谱相应的位置上,显一个相同的浅红色主斑点,
而阴性样品在相应的位置无斑点 (见图 4)。
3 讨论
处方中的紫丹参为云南省地方习用中药材,
收载于 2005 年版 《云南省中药材标准》第一册,
其薄层色谱鉴别以丹参酮 IIA 为对照,展开剂为苯
-乙酸乙酯 (19∶1)[1],研究中比较了甲苯 -乙酸
乙酯 (19∶1)[2]及石油醚 (30 ~ 60℃) -乙酸乙酯
(9∶1),采用本文规定的展开剂能获得良好分离,
易于结果判断,并避免了使用有毒试剂,利于检
验者健康及环保。
《中国药典》2015 年版收载的黄芩及含黄芩成
方制剂的薄层色谱鉴别多采用聚酰胺薄膜、硅胶 G
薄层板,展开剂为醋酸、甲苯 -乙酸乙酯 -甲醇
-甲酸 (10∶3∶ 1 ∶ 2)、乙酸乙酯 -丁酮 -甲酸 -水
(5∶3∶1∶1)等[2],经试验比较,使用本文规定的色
谱条件能有效鉴别金水丸中的黄芩。
枳壳的鉴别采用 《中国药典》2015 年版枳壳
项下薄层色谱条件试验时,柚皮苷 Rf 值较小且分
离不佳,经试验通过二次展开可获得有效分离。
麦冬的鉴别采用《中国药典》2015 年版麦冬项
下方法试验时,金水丸样品色谱中斑点较多分离不
佳。根据麦冬所含化学成分[3],采用本文规定的方
法并比较了展开剂①三氯甲烷 -甲醇 -水 (13∶6∶2)
的下层溶液、②三氯甲烷 -甲醇 (10∶4)、③三氯甲
烷 -甲醇 (10∶1. 5),结果用①时斑点分离不佳、阴
性干扰大,用②时目标斑点 Rf值过大,采用③展开
剂斑点分离良好且 Rf值适中。
研究建立的 4 项薄层色谱鉴别,考察不同厂家
的硅胶 G预制板并经不同实验者试验均可获得良
好重现性。同时也比较了不同温湿度条件下的展
开效果,各目标斑点的 Rf 值在不同条件下略有差
异,但斑点能分离清晰,易于结果判断。其中紫
丹参鉴别的供试品溶液制备简便,而黄芩、枳壳、
麦冬鉴别中的供试品溶液制备方法均经过优化实
验建立。
参考文献
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春中医学院学报,2004,20 (1):35.
(收稿日期:2016. 05. 11
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)
(上接第 15 页)
表 1 白饭树水提物毒性实验动物死亡结果
组别 动物数 /只 剂量 / g /Kg 死亡数 /只 死亡率 /%
1 10 256 8 0. 8
2 10 204 6 0. 6
3 10 160 5 0. 5
4 10 128 3 0. 3
3 讨论
综合研究结果,白饭树小鼠口服给药得 LD50
值为 (138. 0 ± 23. 3) g /kg,其 95% 置信区间为
(153. 21 ~ 199. 81) g /kg,相当于人临床拟用日剂
量的 1293 倍 (文献有效剂量为 15g 生药 /60kg 体
重[1])。因此可以得出结论:白饭树在一定剂量范
围内应用是安全的。
参考文献
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(收稿日期:2016. 05. 12)
·81· 中国民族民间医药 2016年 7月第 25卷第 14期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2016,Vol. 25,No. 14