全 文 ：北方药学 2011年第 8卷第 4期
3.3耐用性
在不同时间、不同温度、不同相对湿度及不同展开方式
下，均可获得满意效果。耐用性良好。
4 讨 论
4.1原方法鉴别项：取本品内容物 10g，研细，加水 10ml，振摇 5
分钟，滤过，取药渣，加 75%乙醇 10ml，超声处理 30 分钟，滤
过，滤液作为供试品溶液。另取天麻素对照品适量，加乙醇制
成每 1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[《中
国药典》2005年版一部（附录Ⅵ B）]试验，吸取上述两种溶液
各 3～5ul，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以氯仿-甲醇（7∶3）
为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%磷钼酸乙醇溶液，在
105℃加热约 10分钟。
结果：此方法样品预处理为取本品内容物 10g，研细，加水
10ml，振摇 5分钟，滤过，实际操作加水后即变成糊状，无法过
滤进行下一步处理，而且即便增加水的体积，过滤也十分困
难，操作也相对繁琐。
4.2研究的方法操作简洁，检验效果明显，方法较为独特，可为
其他含天麻制剂的质量标准制订和修订提供参考。
参考文献
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析杂志.2007,27(9):1437-1440.
图 3薄层色谱图紫外光谱扫描图谱
HPLC法测定飞龙掌血中白屈菜红碱的含量
徐世霞（广西北海食品药品检验所 北海 536000）
摘要：目的：建立飞龙掌血中白屈菜红碱的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为 Phenomenex Gemini C18柱
（250mm×4.6mm，5μm )，流动相为乙腈-1%三乙胺（磷酸调 pH值 3）（28∶72），检测波长为 269nm，流速为 1.0ml·ml-1。结果：白屈
菜红碱的线性范围为 0.07～7.40μg（r=0.9998）；浓度范围内进样量与峰面积线性关系良好。平均回收率为 100.07%，RSD=1.24%
(n=9)。结论：所建方法简单、快速、准确，可用于飞龙掌血的质量控制。
关键词：飞龙掌血 白屈菜红碱 高效液相色谱法
中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1672-8351（2011）04-0005-02
Determination of chelerythrine in Toddalia Asiatica by HP LC
XU Shixia(GuangxiBeihaiInstituteforFoodandDrugControlBeihai536000 China)
ABSTRACT：Objective：To establish a method for determination ofchelerythrine in Toddalia Asiatica.Method：The separation was
performedonPhenomenexGeminiC18柱 (250mm×4.6mm,5μm )columm withdetectionwavelengthof269nm.Themobilephasewas
mixtureofacetonitrileand1% triethylamine(adjustedtoaPH 3.0withphosphoricacid)（28∶72）withflow rateof1.0ml·ml-1.Result：The
linearrangesofnitidinechloridewereat0.07～7.40μg(r=0.9998)，theaveragerecoveries(n=9)were100.07%（RSD=1.24%）。Co clusion:
Thismethodissimple,accurateandsuitableforthedeterminationofnitidinechlorideinToddaliaAsiatica.
KEY WORDS：ToddaliaAsiatica Chelerythrine HPLC
飞龙掌血为芸香科植物飞龙掌血 Toddalia asiatica（L.）
Lam的根或根皮 ,为民间常用药材，主要用于风湿疼痛，胃痛，
跌打损伤，吐血，刀伤出血，经闭，痛经等症的治疗。飞龙掌血
中含白屈菜红碱等多种生物碱和香豆精类成分[1]，其中白屈菜
红碱是其有效成分之一，其含量测定的方法未见报道。为此，
我们建立了飞龙掌血中白屈菜红碱的含量测定方法，以控制
该药材的质量。试验结果表明，所建方法简单、快速、准确，可
用于飞龙掌血的质量控制。
1仪器与试药
1200型高效液相色谱仪（美国 Agilent 公司）；CP225D型
电子天平（德国赛多利斯公司）；AW-120型电子天平（西班牙
COBOS 公司）。白屈菜红碱对照品（中国药品生物制品检定所
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北方药学 2011年第 8卷第 4期
A B
A. 对照品 B. 供试品 1. 白屈菜红碱
图 1 HPLC色谱图
提供；批号为 111718-200501）；飞龙掌血（采购自广西南宁，经
鉴定为芸香科飞龙掌血 Toddalia asiatica（L.）Lam 的干燥根及
根皮）；乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1色谱条件
采用 Phenomenex Gemini C18柱（250mm×4.6mm，5μm )；流
动相为乙腈—1%三乙胺（磷酸调 pH 值 3）（28∶72）；检测波长：
269nm；流速：1.0ml·ml-1；柱温：30℃；进样量：10μl。在以上条件
下，对照品溶液和供试品溶液的色谱图见图 1。
2.2溶液的制备
精密称取白屈菜红碱对照品适量，加甲醇制成含白屈菜
红碱 0.07mg·ml-1的对照品溶液。取药材粉末（过 3号筛）约
1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加 70%甲醇 20ml，浸泡过夜
（16h）后超声处理 20分钟，放冷，滤过，滤液置 50ml量瓶中，
滤渣和滤纸加 70%甲醇洗涤 3次，洗液并入同一量瓶中，加
70%甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.3线性关系考察
精密称取白屈菜红碱对照品适量，加甲醇制成 0.74mg·
ml-1的对照品贮备液，再精密量取对照品贮备液加水制成
0.007、0.04、0.07、0.22、0.44、0.74mg·ml-1系列浓度的对照品溶
液。分别依次进样 10ul，测定峰面积，以对照品进样量 X（μg）
为横坐标，峰面积 Y 为纵坐标，进行线性回归。测得回归方程
为 Y=7.73×103X-257.92，r=0.9998，线性范围为 0.07～7.40μg。
2.4精密度试验
精密吸取对照品溶液 10ul，在相同的色谱条件下连续进
样 6次，分别测定峰面积的积分值。结果白屈菜红碱峰面积的
RSD为 0.35%（n=6），表明仪器精密度良好。
2.5重复性试验
取同一批药材共 6份，按“2.2”项下的方法制备供试品溶
液，按“2.1”项下色谱条件测定，测得白屈菜红碱的平均含量为
1.07mg·g-1，RSD为 1.23%（n=6），表明分析方法重复性良好。
2.6稳定性试验
取同一供试品溶液，于室温下 0、2、4、6、8、12、24h分别按
上述色谱条件测定，结果白屈菜红碱的 RSD为 0.53（n=6），表
明供试品溶液在 24h内基本稳定。
2.7加样回收率试验
取已知含量的同一批药材粉末（过 3号筛）约 0.5g，分别
加入适量白屈菜红碱对照品，按“2.2”项下的方法制备供试品溶
液，按“2.1”项下色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表 1。
2.8耐用性试验
按“2.1”项下条件，分别使用 Phenomenex Gemini C18 柱
（250mm×4.6mm )、Agilent HC-C18柱（150mm×4.6mm )、Waters
Symmery C18柱（250mm×4.6mm）这 3种色谱柱对供试品溶液
进行分离，结果表明，在不同的色谱柱上，被测成分均与相邻
的组分达到基线分离，说明方法的耐用性好。
2.9样品测定
取 3批样品，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”
项下色谱条件进样分析，计算含量，结果见表 2。
表 2 样品含量测定结果（n=2）
3 讨 论
参考中国药典[2]，为了克服其色谱峰拖尾的问题，在流动
相中加入了改善峰形的三乙胺，并调节 pH 为 3，避免了碱性
物质在酸性硅醇基上的化学吸附问题，本试验选用的乙腈—
1%三乙胺（磷酸调 pH值 3）（28﹕72）系统较之其他系统，如甲
醇-乙腈-水-三乙胺[3]、乙腈-水-磷酸[4]系统等，能达到更好的
分离效果，样品峰形对称性好，保留时间适宜，故选其为流动
相。
取白屈菜红碱对照品溶液和供试品溶液，用二极管阵列
检测器分别进行检测，结果白屈菜红碱在 269nm处有最大吸
收，供试品色谱峰和对照品一致，故测定波长定为 269nm。
以白屈菜红碱的含量为指标，分别考察了加热回流和超
声提取两种方法，结果表明，加热回流和超声两种方法的提取
率相差不大，故选取较为简单的超声法。根据白屈菜红碱易溶
于醇的性质，分别以不同浓度的甲醇和乙醇作为溶剂提取，结
果显示，当用 70%甲醇作为提取溶剂时，白屈菜红碱的提取率
最高。我们以 70%甲醇为溶剂，将样品分别浸泡 1、5、16h（浸泡
过夜）后，超声处理 10分钟，进样分析。结果表明，浸泡过夜
（16h）的样品含量最高，因此，将浸泡时间定为 16h。将浸泡过
夜的样品分别超声 10、20、30min，测定结果显示，在浸泡 16h
后，超声处理时间对白屈菜红碱的提出量无明显影响，所以，
将超声处理的时间定为 20min。
参考文献
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碱和白屈菜红碱的含量[J].中成药，2001,23（11）：824-825.
组分名
称
称样量
（g）
样品含
量（mg）
加入量
（mg）
回收率
（%）
平均回收
率（%）
RSD
(%)
白屈菜
红碱
0.5006
0.5107
0.5008
0.5115
0.5003
0.5021
0.5036
0.5103
0.5078
0.5106
0.5209
0.5108
0.5217
0.5103
0.5121
0.5137
0.5205
0.5180
0.2552
0.2552
0.2552
0.5103
0.5103
0.5103
0.7655
0.7655
0.7655
101.31
99.00
101.50
99.13
99.06
98.70
99.54
100.54
101.87
100.07 1.24
测得量
（mg）
0.7691
0.7735
0.7698
1.0276
1.0158
1.0158
1.2756
1.2901
1.2977
样品编号 样品含量（mg·g-1）
1 1.02
2 0.73
3 0.81
表 1 加样回收率测定结果（n=9）
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