全 文 ：收稿日期:2012 － 12 － 23;修回日期:2013 － 03 － 11
基金项目:民族药材飞龙掌血标准修订及研究［黔科合中药字(2011)5027 号］
作者简介:冉勇华(1986 －) ，男，贵州松桃人。研究方向:中药活性成分及结构修饰。
通讯作者:周 强。E － mail:gyidyyzc@ sina． com
紫外分光光度法测飞龙掌血中
总内酯类成分的含量
冉勇华1，2，周 强2* ，杨世林1，周 英1． 3
(1．贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳 550025;2．贵阳春科药业技术研发有限公司，贵州 贵阳 550081;
3．贵州大学 贵州省中药(民族药)创制工程中心，贵州 贵阳 550025)
摘 要:以飞龙掌血内酯作为对照品，采用紫外分光光度法，于 329 nm 波长处测定对照品溶液和样品溶液吸光
度。所得回归方程为: A =48． 36 × 10 －3C － 6． 98 × 10 －3 ( r = 0． 999 9，n = 6) ，线性范围为 2． 08 ～ 20． 76 μg /mL( r =
0． 999 9) ，回收率为 101． 44%，RSD% ( n = 6) = 2． 49。此方法具有较好的稳定性和精密度，用此方法测定飞龙掌
血中总内酯含量为 8． 0%以上。该方法准确、快速，重现性好，可用于飞龙掌血药材中总内酯类成分的测定。
关键词:飞龙掌血;总内酯;紫外分光光度法;含量测定
中图分类号:R931． 71 文献标识码:A 文章编号:1008 － 0457(2013)02 － 0143 － 03
Determination of Total Content of Lactones in Toddalia asiatica by UV Spectrophotometry
RAN Yong-hua1，2，ZHOU Qiang2* ，YANG Shi-lin1，ZHOU ying1，3(1． College of Life Sciences，Guizhou Univer-
sity，Guiyang Guizhou 550025，China;2． Guiyang Spring Section Pharmaceutical Research and Development
Co． Ltd，Guiyang Guizhou 550081，China;3． Engineering Center for Innovative Traditional Chinese Medinice
and Ethnic Medicine of Guizhou Province，Guizhou University，Guiyang Guizhou 550025，China)
Abstract:Total content of lactones in Toddalia asiatica was detected at 329 nm by UV spectrophotometry u-
sing toddalolatone as standard． The standard curve was then obtained as A = 48． 36 × 10 －3 C － 6． 98 × 10 －3
(r = 0． 999 9，n = 6) ，and the detection concentration of the total lactones showed good linearity with its ab-
sorbability within the range of 2． 076 ～ 20． 76 μg /mL (r = 0． 999 9)． The average recovery rate was 101．
44% (n = 6)with RSD of 2． 49% ． The content of total lactones in Toddalia asiatica was as high as 8． 0% ．
This method was proven to be precise，fast and reproducible，thereby could be used to quantify total content
of lactones in Toddalia asiatica．
Key words:Toddalia asiatica;total lactones;UV Spectrophotometry;content determination
飞龙掌血为芸香科(Rutaceae)飞龙掌血属
(Toddalia A． Juss)植物飞龙掌血 Toddalia asiatica
(L)Lam．，主要分布于非洲东部、亚洲东南部、南部
及澳洲等地，我国主产于湖南、湖北、陕西、福建、台
湾、浙江、四川、云南、贵州、广西等地［1］。飞龙掌血
是贵州省少数民族习用中药材之一，药用部位主要
为根、根皮及叶［2］。具有散瘀止血、祛风除湿、消肿
解毒之功效［3］。据文献报道，其根皮主要含有香豆
素类化合物和生物碱，以及三萜类化合物及其他物
质。而根皮中含有飞龙掌血双香豆素、茴芹香豆
素、异茴芹香豆素和飞龙掌血内酯(又名毛两面针
素)等药材的重要成分［4］，且以上 4 种成分均是香
山 地农业生物学报 32(2) :143 ～ 145，2013
Journal of Mountain Agriculture and Biology
豆素类化合物，属内酯类成分。目前，尚未见到对
飞龙掌血根皮中总内酯含量测定的相关报道。因
此，本试验采用紫外分光光度法，以毛两面针素为
对照品，对其总内酯含量进行测定，旨在建立飞龙
掌血中总内酯含量的测定方法。同时，测定了贵州
省不同产地、不同采收时间的根皮中总内酯类成分
的含量。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 供试材料 10 批试验药材均购自贵阳市
万东桥下药材交易市场，经原贵州省食品药品检验
所林开忠副研究员鉴定均为飞龙掌血的干燥根皮。
1． 1． 2 试剂与仪器 电子天平 AUW －220D型(赛
多利斯，十万分之一) ;超声波提取器 CHXIN CH －
250型(北京创新德超声电子研究所) ;数显恒温水
浴锅 HH －4(国华电器有限公司) ;TU － 1901 双光
束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责
任公司)。飞龙掌血内酯对照品(中国药品生物制
品检定所，批号:1531 － 200001) ;乙腈为色谱纯，水
为去离子水，其余试剂均为分析纯。
1． 2 方法
1． 2． 1 溶液的制备 (1)对照品溶液的制备:称
取飞龙掌血内酯对照品适量，乙醇定容后稀释为
41． 52 μg /mL的对照品溶液; (2)供试品溶液的制
备:称取样品约 0． 1 g 于具塞锥形瓶中，量取乙醇
50 mL加入瓶中，回流提取 1． 5 h，冷却后补足质量，
滤过，从续滤液中取 5 mL 稀释至 50 mL，即得样品
溶液。
1． 2． 2 提取方法 (1)超声提取:称取药材粉末
0． 1 g共 3 份于具塞锥形瓶中，分别加入乙醇 50 mL
溶解，称定其总质量。采用超声提取，提取时间分
别为超声 0． 5、1． 0、1． 5 h，超声提取后取下冷却至
室温，补足损失质量，过滤，经稀释 10 倍后进行测
定，记录吸光度，计算其含量; (2)回流提取:称取
药材粉末约 0． 1 g 共 3 份于具塞锥形瓶中，分别加
入乙醇 50 mL 溶解，称定其总质量。采用回流提
取，提取时间分别为回流 1． 0、1． 5、2． 0 h，回流提取
后取下冷却至室温，补足损失质量，过滤，经稀释
10 倍后进行测定，记录吸光度，计算其含量。
1． 2． 3 测定方法 通过配制一系列不同浓度的对
照品溶液，测定波长为 329 nm，绘制标准曲线，将上
述供试品溶液在同样条件下测定其吸光度，代入标
准曲线，计算其含量。
2 结果与分析
2． 1 提取方法的选择
超声提取、回流提取两种提取方式的结果见表
1。从表 1 可以看出，超声提取 1． 5 h 效果较理想，
回流提取 1． 5 h效果较理想。
表 1 不同提取时间、提取方式测定结果
Tab． 1 Determination results of total content of lactones
in Toddalia asiatica with the reflux extraction
and ultrasonic extraction
超声(h)
0． 5 1． 0 1． 5
回流(h)
1． 0 1． 5 2． 0
总内酯含量(%) 6． 21 7． 10 7． 23 8． 36 8． 56 8． 54
2． 2 测定波长的选择
在 200 ～ 400 nm 分别扫描飞龙掌血内酯对照
品及样品溶液，前者在 330 nm处有最大吸收，后者
在 329 nm处有最大吸收(图 1) ，且峰型变化平缓，
便于定量测定，因此，将 329 nm作为测定波长。
注:A．飞龙掌血内酯对照溶液;B．样品溶液。
图 1 对照品溶液与样品溶液光谱扫描图
Fig． 1 Spectrum scan of reference substance solution and sample solution
441 山地农业生物学报 2013 年
2． 3 线性关系
吸取飞龙掌血内酯对照品溶液各 0． 5、1、2、3、
4、5 mL，分别用乙醇(95%)定容至 10 mL。以乙醇
为空白，于 329 nm处测定。以浓度(C)为横坐标、
吸光度 A为纵坐标作图，得回归方程:A = 48． 36 ×
10 －3C － 6． 98 × 10 －3(r = 0． 999 9，n = 6)。表明飞
龙掌血内酯对照品溶液浓度在 2． 08 ～ 20． 76
μg /mL范围内，吸光度与浓度的线性范围良好。
2． 4 重复性试验
称取样品约 0． 1 g，按“1． 2． 1”方法制备样品溶
液 6 份，平行测定，含量(%)分别为 8． 58、8． 59、
8. 49、8． 36、8． 52、8． 45，RSD = 1． 01%，表明测定方
法重复性良好。
2． 5 精密度试验
取“1． 2． 1”项下样品溶液，于 329 nm 处连续测
定 6次，吸光度的 RSD =0． 08%，表明精密度良好。
2． 6 稳定性试验
取“1． 2． 2”项下回流 1． 5 h样品溶液，分别在
0、0． 5、1、2、4、6、8、12 h 于 329 nm 处测定吸光度，
吸光度的 RSD = 0． 15%，表明样品在 12 h 内稳定
性良好。
2． 7 加样回收试验
称取已知含量的样品约 0． 05 g(总内酯含量以
飞龙掌血内酯计) ，分别加入相当于样品中含量
100%的飞龙掌血对照品，按样品溶液制备方法操
作，测定样品含量，计算本法的回收率。从表 2 可
以看出，平均回收率为 101． 44%，RSD 为 2． 49%，
表明该方法测定飞龙掌血总内酯含量回收率高，准
确度较高。
2． 8 样品测定
对市场上购买的 10 批不同产地、不同采收时
间的飞龙掌血根皮按照“1． 2． 1”方法制备供试品
溶液，各制备 2 份，按“1． 2． 3”方法进行测定，记录
吸光度，计算其总内酯含量，结果见表 3。
从表 3 可以看出，不同产地、不同采收时间的
飞龙掌血中总内酯含量相差不大，不存在显著性差
异，说明原来地方标准中用根皮有很好的参考性。
表 2 加样回收率测定结果(n =6)
Tab． 2 Results of recovery test
原药材理
论量(mg)
加入对照
品量(mg)
实测量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
4． 39 4． 36 8． 89 103． 30 101． 44 2． 49
4． 40 4． 36 8． 88 102． 61
4． 43 4． 36 8． 91 102． 91
4． 41 4． 36 8． 90 103． 00
4． 42 4． 36 8． 66 96． 98
4． 32 4． 36 8． 67 99． 81
表 3 飞龙掌血中总内酯的测定结果 (n =2)
Tab． 3 Determination results of tolal content
of lactones in Toddalia asiatica
产地 采收日期 总内酯量(%)
贵阳东站 2012 年 8 月上旬 9． 03
花溪青岩 2012 年 8 月中旬 8． 46
安顺关岭 2012 年 8 月中旬 8． 40
乌当水田 2012 年 7 月 26 日 8． 15
龙里 2012 年 8 月上旬 8． 65
阿哈湖水库 2012 年 3 月 15 日 9． 49
毕节金沙 2012 年 3 月上旬 8． 39
清镇九龙山 2012 年 4 月中旬 9． 43
乌当水田 2012 年 5 月上旬 9． 36
新添寨 2011 年 12 月中旬 9． 23
3 结论
3． 1 通过两种提取方式的结果比较，发现超声提
取在 1、1． 5 h 没有明显差别，回流提取在 1． 5、2 h
没有明显差别，而回流提取 1． 5 h 比其他提取方法
所得总内酯含量要高，最终选择回流提取 1． 5 h 为
最佳提取方法。
3． 2 本试验结果显示，10 批药材(均为根皮)含量
差别不大，均在 8． 0%以上，说明飞龙掌血药材中
总内酯含量在根皮中很稳定。本文使用的方法稳
定性和精密度好，而且准确、快速，可用于飞龙掌血
药材的质量控制。
参 考 文 献:
［1］ 广西壮族自治区卫生厅．广西中药材质量标准［S］．南宁:广西科学技术出版社，1996:42 － 44．
［2］ 贵州省药品监督管理局． 贵州省中药材、民族药材质量标准［S］． 2003 年版．贵阳:贵州科技出版社，2003:62 － 63．
［3］ 国家中医药管理局〈中华本草〉编委会．中华本草苗药卷［M］．贵阳:贵州科技出版社，2005:108．
［4］ 石 磊，李 东，康文艺．飞龙掌血化学成分和药理作用研究进展［J］．中国药房，2011，7(22) :666 － 668．
541第 2 期 冉勇华，等:紫外分光光度法测飞龙掌血中总内酯类成分的含量