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傣药倒心盾翅藤抗肾结石活性研究



全 文 :Chinese Journalof NewDrugs 2015,24(9)
1047
中国新药杂志 2015 年第 24 卷第 9 期
[基金项目] 协和青年基金资助项目(2303-3141031)
[作者简介] 宋美芳,女,助理研究员,主要从事傣药南药研发。联
系电话:15969182182,E-mail:songmeifang1981@ 126. com。
·实验研究·
傣药倒心盾翅藤抗肾结石活性研究
宋美芳,李宜航,张忠廉,吕亚娜,李学兰,李 光
(中国医学科学院药用植物研究所云南分所,西双版纳州傣药南药重点实验室,景洪 666100)
[摘要] 目的:研究傣药倒心盾翅藤对肾结石模型大鼠及草酸钠损伤肾小管上皮细胞(HK-2)的影响。
方法:用乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型,分组灌胃给予水和 95%醇提取液,4 周后测定血清中
肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、钙(Ca2 +)、磷(P)含量和肾组织钙(Ca2 +)、镁
(Mg2 +)含量,镜下观察肾组织病理改变并对肾脏结晶沉积情况进行统计分析;采用 MTT法测定不同极性部
位提取液对草酸钠致肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用。结果:倒心盾翅藤水和 95%醇提液高剂量
组能明显降低大鼠血清 Cr,BUN,肾 Ca2 +含量及肾组织草酸钙结晶沉积(P < 0. 05),并能显著提高草酸钠诱
导建立的肾小管上皮模型细胞的细胞活力,其中,95%醇提液的乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及水提水部位
能显著提高模型细胞的细胞活力。结论:傣药倒心盾翅藤具有显著的抗肾结石活性,乙酸乙酯部位、正丁醇
部位以及水部位可能是其抗结石活性的有效部位。
[关键词] 倒心盾翅藤;抗结石;HK-2 细胞
[中图分类号] R965;R285 [文献标志码] A [文章编号] 1003 - 3734(2015)09 - 1047 - 06
Inhibiting effect of Aspidopterys obcordata Hemsl on renal calculus
SONG Mei-fang,LI Yi-hang,ZHANG Zhong-lian,L Ya-na,LI Xue-lan,LI Guang
(Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy of Medical Sciences,Yunnan Branch,The Key Laboratory
of Dai and Southern Medicine of Xishuangbanna Dai Autonomous Prefecture,Jinghong 666100,China)
[Abstract] Objective:To determine the effect of Aspidopterys obcordata Hemsl. on kidney stones in rats
and sodium oxalate-induced HK-2 cells damage. Methods:Renal calcium oxalate calculus was induced by glycol
and chloride in rats,and rats were given with water and 95% alcohol extraction,respectively,by gavage once a
day for 4 weeks. The levels of Cr,BUN,Ca2 +,and P in serum as well as Ca2 + and Mg2 + in renal tissues were
measured 4 weeks after induction of kidney stones. Renal pathological changes were observed at the same time. The
renal crystal deposition was statistically analyzed by image-pro plus6. 0 software. Cell viability was determined by
MTT reduction assay to observe the protecting effect of Aspidopterys obcordata Hemsl extracts on sodium oxalate-in-
duced damage in HK-2 cells. Results:The extracts of water and 95% alcohol from Aspidopterys obcordata Hemsl
significantly reduced the levels of Cr and BUN in serum and Ca2 + in renal tissues,and reduced renal crystal depo-
sition. In addition,the extracts significantly improved cell viability in HK-2 cells damaged by sodium oxalate. The
ethyl acetate,n-butyl alcohol and water extracts were particularly effective. Conclusion:Aspidopterys obcordata
Hemsl. has an inhibiting effect on renal calculus,and the ethyl acetate,n-butyl alcohol and water extracts may be
the effective parts.
[Key words] Aspidopterys obcordata Hemsl.;antilithic;HK-2 cell
肾结石是一种发病率高、病因复杂的常见泌尿 系统疾病,由于生活方式、饮食和气候等因素的改
变,结石病每年的发病率都在不断上升,且发病的年
龄正在不断下降[1]。使用现代技术手段如体外冲
击波碎石术、输尿管镜检查术以及经皮肾镜取石术
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等虽能暂时治愈结石病,但肾结石的复发并未改变,
且常伴有肾损伤、高血压、严重血尿症等不良反
应[2]。而傣药倒心盾翅藤治愈结石的临床疗效显
著,傣族民间主要用于治疗尿路感染、膀胱炎、尿路
结石等疾病。该药物是傣药中的一味解药,入水塔,
具有消炎利尿,清热排石的功效,其来源于金虎尾科
植物倒心盾翅藤(Aspidopterys obcordata Hemsl. var.
obcordata)的干燥藤茎,分布于云南省西南、南部至
东南部,被《云南省中药材标准—傣族药》(2005 年
版)收载[3 - 7]。本实验对倒心盾翅藤进行在体和体
外抗肾结石活性研究,为其民间使用和临床应用提
供理论支持,也为抗结石新药的研发提供参考依据。
材 料
1 药物与试剂
倒心盾翅藤(Aspidopterys obcordata Hemsl),采
集于云南省西南部,由本单位李学兰研究员进行基
源鉴定;倒心盾翅藤水和 95%醇提取液以及不同极
性部位提取液由本实验室进行制备;戊巴比妥钠
(中国医药集团上海化学试剂公司提供,批号:
F20020915);肾石通颗粒(江西南昌桑海制药厂,批
号:140301);甲醛、乙二醇、氯化铵(均为分析纯,天
津市风船化学试剂科技有限公司);肌酐(creati-
nine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、钙
(Ca2 +)、镁(Mg2 +)、磷(P)测试盒(南京建成生物工
程研究所提供,批号:20140513)。
MTT[阿拉丁试剂(上海)有限公司,批号:
L1331024];DMEM/F12培养液(Hyclone 公司,批号:
NZB1075);胎牛血清(Gibco 公司,批号:1133067);二
甲基亚砜(Gibco 公司,批号:1138657);2. 5%胰蛋白
酶(Gibco公司,批号:1369113);双抗(Hyclone 公司,
批号:J130071);L-谷氨酰胺(阿拉丁试剂(上海)有限
公司,批号:J1318016);D-Hanks 缓冲液(Hyclone 公
司,批号:20130824258)。
2 仪器
HF160W二氧化碳培养箱(上海力申科学仪器
有限公司);SW CJ 1F 超净工作台(苏净集团苏
州安泰空气技术有限公司);Multiskan MK3 酶标仪
(赛默飞世尔仪器有限公司);IC1000 countstar 自动
细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司)。
3 动物与细胞
Wistar健康雄性 SPF 级大鼠,由北京维通利华
实验动物技术有限公司提供,合格证号:SCXK(京)
2012-0001,70 只,体重 180 ~ 220 g。实验动物获得
动物实验伦理委员会批准。
肾小管上皮细胞(HK-2)细胞株购买于中国科
学院昆明动物研究所细胞库。
方 法
1 动物分组及给药
Wistar健康雄性 SPF级大鼠,随机分为 7 组,每
组 10 只,购买后适应性饲养 1 周进行实验。具体分
组如下:空白组、模型组、水提物高剂量组、水提物低
剂量组、95%醇提物高剂量组、95%醇提物低剂量
组、肾石通颗粒组。除空白组每天给予纯化水外;其
余各组每天给予 1%乙二醇饮水结合 2%氯化铵隔
天灌胃每只 1 mL,进行造模,造模时间持续 4 周。
给药方式及给药剂量:各组动物均采用灌胃的
方式给药,各组分别给予相应的提取物,各高剂量组
给药剂量折合生药量为 20 g·kg -1,低剂量减半(即
10 g·kg -1),持续 4 周。
2 观察指标及检测方法
动物实验结束前禁食 12 h,戊巴比妥钠麻醉大
鼠,腹主动脉取血,3 500 r·min -1离心 15 min 后,取
上层血清测定血清 Cr,BUN,Ca2 +,P 含量,切取双
肾,纵向剖开,取左肾用 10%中性福尔马林液固定,
作为常规石蜡切片,HE 染色,显微镜下观察肾组织
草酸钙结晶分布及肾组织病理改变,并用 image-pro
plus 6. 0 软件对肾脏结晶沉积数量进行统计分析,
取右肾用于测定肾组织 Ca2 +和 Mg2 +含量。
3 草酸钠致 HK-2 细胞损伤模型的建立
取生长良好的 HK-2 细胞,胰蛋白酶消化,制成
浓度为 1 × 105·mL -1的细胞悬液,接种于 96 孔板
中,每孔 100 μL,24 h 后,吸弃培养液,换成不含血
清的 DMEM/F12 培养液,使细胞处于静止期,空白
组加入培养液,模型组分别加入不同终浓度的草酸
钠(1,3,5 mmol·L -1),每个浓度设 4 个复孔,37 ℃
培养箱内孵育 24 h 后,采用 MTT 法检测草酸钠对
HK-2 细胞活力的影响。
4 倒心盾翅藤不同溶剂提取物对草酸钠致 HK-2
细胞损伤的保护作用
HK-2 细胞的消化、接种同上,空白组接种正常
HK-2 细胞,药物组分别加入不同终浓度(1,0. 5,
0. 25,0. 125 mg·mL -1)的倒心盾翅藤水提液和 95%
醇提液,除空白组细胞外,其他组均加入终浓度为 3
mmol·L -1的草酸钠建立 HK-2 细胞损伤模型,每个
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浓度设 4 个复孔,37 ℃培养箱内孵育 24 h 后,采用
MTT法检测各组细胞活力,探讨倒心盾翅藤对草酸
钠致 HK-2 细胞损伤的保护作用。
5 倒心盾翅藤不同极性部位对草酸钠致 HK-2 细
胞损伤的保护作用
HK-2 细胞的消化、接种、造模方法同上,空白组
接种正常 HK-2 细胞,药物组分别加入不同浓度的
(1,0. 5,0. 25,0. 125 mg·mL -1)的倒心盾翅藤不同
极性部位提取液,每个浓度设 4 个复孔,37 ℃培养
箱内孵育 24 h后,采用 MTT法检测各组细胞活力。
6 统计学分析
数据均以 SPSS 13. 0 软件进行统计分析,组间
差异用单因素方差分析进行检验,以 P < 0. 05 和
P < 0. 01 作为差异具有显著性意义。
结 果
1 倒心盾翅藤对大鼠血清 Cr,BUN,Ca2 +,P 含量
的影响
倒心盾翅藤对各组大鼠血清生化指标的影响如
表 1 所示,模型组血清 Cr,BUN 含量明显高于空白
组,水提液高剂量组(20 g·kg -1)和 95%醇提液高剂
量组(20 g·kg -1)血清 Cr,BUN 含量明显低于模型
组,差异有统计学意义;而血清 Ca2 +,P 含量各组间
均无显著差异。
表 1 倒心盾翅藤对结石模型大鼠血清生化指标的影响
组别 Cr /μmol·L -1 BUN /mmol·L -1 Ca2 + /mmol·L -1 P /mmol·L -1
空白组 212. 86 ± 20. 75b 6. 54 ± 1. 04b 2. 27 ± 0. 05 1. 71 ± 0. 18
模型组 285. 79 ± 22. 61 8. 54 ± 1. 01 2. 36 ± 0. 02 1. 86 ± 0. 31
水提液高剂量组(20 g·kg -1) 233. 13 ± 20. 56a 6. 81 ± 1. 01a 2. 32 ± 0. 06 1. 75 ± 0. 08
水提液低剂量组(10 g·kg -1) 255. 67 ± 18. 76 7. 12 ± 1. 12 2. 34 ± 0. 05 1. 71 ± 0. 03
醇提液高剂量组(20 g·kg -1) 225. 64 ± 19. 76b 6. 78 ± 1. 04a 2. 29 ± 0. 06 1. 81 ± 0. 41
醇提液低剂量组(10 g·kg -1) 239. 45 ± 23. 65a 7. 47 ± 0. 71 2. 37 ± 0. 10 1. 79 ± 0. 36
肾石通颗粒(5 g·kg -1) 241. 35 ± 21. 05a 7. 95 ± 0. 79 2. 34 ± 0. 08 1. 74 ± 0. 42
与模型组相比,a:P <0. 05,b:P <0. 01
2 倒心盾翅藤对大鼠肾组织Ca2 +和Mg2+含量的影响
倒心盾翅藤对各组肾组织 Ca2 +和 Mg2 +含量
的影响结果如表 2 所示,模型组肾组织 Ca2 +含量
明显高于空白组,水提液组和 95%醇提液高剂量
组(20 g·kg - 1)能明显降低肾组织 Ca2 +含量,与模
型组比有统计学差异;模型组肾组织 Mg2 +含量明显
低于空白组,水提液高剂量组与模型组比较能显著
升高 Mg2 +含量,差异有统计学意义。
表 2 倒心盾翅藤对大鼠肾组织 Ca2 +和
Mg2 +含量的影响
组别 Ca2 + /μmol·g - 1 Mg2 + /μmol·g - 1
空白组 2. 56 ± 0. 89a 0. 81 ± 0. 09a
模型组 8. 29 ± 1. 15 0. 56 ± 0. 04
水提液高剂量组(20 g·kg - 1) 4. 96 ± 1. 13a 0. 76 ± 0. 08a
水提液低剂量组(10 g·kg - 1) 5. 26 ± 1. 05a 0. 55 ± 0. 10
醇提液高剂量组(20 g·kg - 1) 5. 38 ± 0. 97a 0. 69 ± 0. 11
醇提液低剂量组(10 g·kg - 1) 6. 26 ± 1. 37 0. 54 ± 0. 13
肾石通颗粒(5 g·kg - 1) 6. 49 ± 1. 18 0. 59 ± 0. 08
与模型组相比,a:P <0. 05
3 肾组织病理切片观察及结晶沉积情况统计
常规病理切片 HE 染色后如图 1 所示,草酸钙
结晶在显微镜下呈无色透明,不规则,折光性较强;
空白组显示正常肾组织结构;模型组在肾皮质和髓
质交界处有多数结晶沉积,有的结晶成堆沉积,且晶
体主要存在于肾小管内壁,上皮细胞肿胀、坏死,管
腔扩张明显,肾间质有大量散在的慢性炎性细胞浸
润;倒心盾翅藤水提液高剂量组和 95%醇提液高剂
量组肾组织中草酸钙晶体明显少于模型组,结晶大
多散在分布,肾小管管腔扩张程度明显减轻;其他给
药组肾组织病理改变及晶体沉积与模型组比较有所
改变,但不明显。
每个病理切片样本随机选择 5 个视野,100 ×倍
数下获取图片后,采用 image-pro plus 6. 0 软件进行
统计分析肾脏结晶沉积数据,对各组分别进行 10 个
视野的统计分析,结果如表 3 所示:与模型组相比,
水提液高剂量组和 95%醇提液高剂量组能显著降
低肾脏结晶分布面积。
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1:空白组;2:模型组;3:水提液高剂量组;4:水提液低剂量组;5:95%醇提液高剂量组;
6:95%醇提液低剂量组;7:肾石通颗粒组
图 1 肾脏病理切片图(HE染色,200 ×)
表 3 倒心盾翅藤对大鼠肾组织草酸钙
结晶沉积的影响
组别 结晶总面积值 /μm2
空白组 0
模型组 99 269 ± 3 177
水提液高剂量组(20 g·kg -1) 52 187 ± 6 772a
水提液低剂量组(10 g·kg -1) 64 553 ± 2 731
醇提液高剂量组(20 g·kg -1) 48 373 ± 4 710a
醇提液低剂量组(10 g·kg -1) 54 104 ± 6 071a
肾石通颗粒(5 g·kg -1) 65 214 ± 3 574
与模型组相比,a:P <0. 05
4 草酸钠致 HK-2 细胞损伤模型的建立
结果如表 4所示,终浓度为 3和 5 mmol·L -1的草
酸钠可导致HK-2细胞的损伤,与空白组比较,有显著
差异。依据此结果,后续实验选取用 3 mmol·L -1的草
酸钠建立 HK-2细胞损伤模型进行实验。
表 4 草酸钠对 HK-2 细胞的毒性作用
组别 浓度 /mmol·L -1 细胞活力 /%
空白组 — 100
草酸钠 1 98. 24 ± 1. 3
3 62. 91 ± 2. 6a
5 60. 30 ± 2. 1a
与空白组相比,a:P <0. 05
5 倒心盾翅藤不同溶剂提取物对草酸钠致 HK-2
细胞损伤的保护作用
结果如表 5 所示,与空白细胞相比,草酸钠组
细胞活力明显下降,说明 HK-2 细胞损伤模型成功;
与草酸钠组相比,倒心盾翅藤水提液 1,0. 5 mg·
mL -1和 95%醇提液各剂量组的细胞活力均明显提
高,差异有显著性意义,提示倒心盾翅藤水提液和醇
提液对草酸钠导致的 HK-2 细胞损伤均有明显的保
护作用。
表 5 倒心盾翅藤不同溶剂提取液对草酸钠致
HK-2 细胞损伤的保护作用
分组 浓度 细胞活力 /%
空白组 — 100b
草酸钠组 3 mmol·L -1 67. 54 ± 2. 31
水提液组 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 95. 42 ± 3. 10b
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 86. 17 ± 2. 91a
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 76. 35 ± 3. 28
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 65. 93 ± 2. 37
95%醇提液组 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 81. 56 ± 3. 49a
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 91. 38 ± 3. 71b
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 97. 25 ± 4. 26b
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 93. 68 ± 3. 45b
DMSO对照组 0. 5% 97. 53 ± 2. 89b
与草酸钠组相比,a:P <0. 05,b:P <0. 01
6 倒心盾翅藤不同极性部位对草酸钠致 HK-2 细
胞损伤的保护作用
结果如表 6 所示,与空白细胞相比,草酸钠组细
胞活力明显下降;与草酸钠组相比,95%醇提乙酸乙
酯部位 0. 5 和 1 mg·mL -1、95%醇提正丁醇部位 0. 5
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和 1 mg·mL -1以及水提水部位 0. 5 和 1 mg·mL -1组
的细胞活力明显提高,差异有显著性意义,说明倒心
盾翅藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位对草酸
钠导致的 HK-2 细胞损伤有明显的保护作用。
表 6 倒心盾翅藤不同极性部位对草酸钠致
HK-2 细胞损伤的保护作用
分组 浓度 细胞活力 /%
空白组 — 100b
草酸钠组 3 mmol·L -1 63. 73 ± 4. 30
95%醇提石油醚部位 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 64. 39 ± 3. 98
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 60. 87 ± 5. 98
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 67. 15 ± 4. 65
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 63. 15 ± 3. 45
95%醇提乙酸乙酯部位 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 91. 58 ± 4. 62b
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 82. 53 ± 5. 10a
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 72. 83 ± 4. 98
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 62. 85 ± 4. 91
95%醇提正丁醇部位 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 87. 22 ± 6. 02a
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 77. 24 ± 5. 90a
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 61. 38 ± 4. 25
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 62. 71 ± 5. 28
95%醇提水部位 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 61. 82 ± 5. 30
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 65. 64 ± 4. 65
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 59. 19 ± 4. 62
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 60. 95 ± 6. 32
水提水部位 3 mmol·L -1 + 1 mg·mL -1 81. 36 ± 6. 20a
3 mmol·L -1 + 0. 5 mg·mL -1 95. 46 ± 4. 95b
3 mmol·L -1 + 0. 25 mg·mL -1 75. 28 ± 5. 20
3 mmol·L -1 + 0. 125 mg·mL -1 69. 30 ± 6. 92
DMSO对照组 0. 5% 98. 26 ± 4. 17b
与草酸钠组相比,a:P <0. 05,b:P <0. 01
讨 论
肾结石是一种发病率极高的常见泌尿系统疾
病,在亚洲国家其发病率为 2% ~ 5%,在欧美国家
为 8% ~15%,在中东地区发病率高达 20%左右,这
与结石病的高复发率有关。据资料显示,结石病每
年的复发率达 10% ~23%,治愈后 5 ~ 10 年内的复
发率达 50%,20 年内达 75%,复发周期也有不断缩
短的趋势[8 - 9]。目前西医手术疗法导致结石复发率
高,临床上使用的柠檬酸盐和噻嗪类利尿药等药物
治疗肾结石的效果也并不理想[10]。傣药倒心盾翅
藤是傣医传统经方“五淋化石胶囊”的主要组方药
材,同时也是目前傣医临床用量最大的一味药材,具
有很好的临床应用基础,且治疗结石疗效显著,对粒
径小于 1 cm的单纯性肾结石、泥沙性尿路结石和尿
路结石伴肾积水等疾病的治愈率能达到 80% 以
上[11 - 13]。目前除了伍睿等[14]从倒心盾翅藤中分离
鉴定了 6 个化合物(木栓酮、无羁萜-3β-醇、廿二烷
酸甲酯、10-廿九烷醇、豆甾醇和 daphnetin-8-glucopy-
ranoside)外,作者未见其他相关化学成分的报道,也
未见有关活性成分及药效研究的报道。为了对其进
一步深入研究和开发,作者对倒心盾翅藤在体和体
外抗肾结石活性进行研究。
参考文献[15 - 16]方法,本研究采用 1%的乙
二醇和 2%氯化铵隔天灌胃的方法诱导形成大鼠草
酸钙结石模型,对倒心盾翅藤进行在体抗结石活性
研究,结果显示该药物能降低肾组织肌酐、尿素氮及
钙含量,提高肾组织镁含量,并能显著减少肾脏结晶
沉积,改善肾脏病理改变,提示倒心盾翅藤有保护肾
功能以及抑制结石形成成分和提高结石抑制成分的
作用。
国内外研究发现,肾小管上皮细胞的损伤与肾
结石形成关系密切,肾小管上皮细胞受损后所产生
的一系列生理病理改变在肾结石的形成中起了重要
的作用[17 - 19]。损伤的细胞不但成为初始成核的有
效位点,而且增强了膜与微晶的黏附,加速了肾结石
的形成;细胞损伤后产生的碎片还可为草酸钙结晶
的异质成核提供条件[20]。体外培养的肾小管上皮
细胞在形态和机能上均可作为模拟体内环境的模
型,本研究通过草酸钠致 HK-2 细胞损伤的体外模
型,研究倒心盾翅藤对 HK-2 细胞损伤的保护作用,
结果发现,该药物能明显提高模型组的细胞活力,说
明倒心盾翅藤对草酸钠导致的 HK-2 细胞损伤有明
显的保护作用;其中 95%醇提乙酸乙酯部位、正丁
醇部位以及水提水部位组的细胞活力明显提高,与
模型组相比有显著性意义,提示倒心盾翅藤乙酸乙
酯部位、正丁醇部位及水部位中含有其体外抗结石
的活性物质。实验中出现的 95%醇提液中最高浓
度细胞活力反而低于低浓度的现象,可能是由于高
剂量的 95%醇提物冻干粉用 DMSO助溶,再加入培
养液后出现部分药物沉淀析出,实际药物溶解浓度
下降所致。
本研究结果验证了倒心盾翅藤在体内外的抗肾
结石活性,为其进一步深入研究和临床应用提供理
论支持,也为抗结石新药的研发提供参考依据。接
Chinese Journalof NewDrugs 2015,24(9)
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中国新药杂志 2015 年第 24 卷第 9 期
下来,我们将对倒心盾翅藤治疗肾结石的有效部位
进一步分离纯化,进而进行物质基础及作用机制
研究。
[ 参 考 文 献 ]
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编辑:赵文锐 /接受日期:
檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴
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编辑:夏海波 /接受日期:2015 - 02 - 10