全 文 ：1 9 9 4 年 第 6 期
中 山 大 学 学 报 论 丛
S U P P L E 入I E N ` T T O T H E J ( )毛J R N A I
O F S U N Y A T S E N U N IV E R S I T Y N o
.
6 1 9 9 生
白饭树水提物对实验性肝损伤的保护作用
许实波 王正滚 ` 赵金华
( 中山 大学生 命科学学院药理研完室 )
摘 要 白饭树留 zu g e 。 : i , , 0 5 。 。尺o x 。 。 x w iz z J ) 月。 ; 22 仁F , n 、 ; e r o o a r n 。 B I . ] ) 水提物对 c c l 、
造成的小鼠 、 大鼠急性肝损伤具有明显的保护作用 , 可使中毒鼠血清中 G P T , G O T , A l一 P ,
L D H 等酶的含量显著下降或趋于正常 ; 对 C CI 、 所致肝脏脂质过氧化作用具明 显的缓解作
用 , 并提高 C CI 、 损伤肝的解毒能力 .
关键词 白饭树水提物 , 肝 , c cl 、 中毒 , 血清酶 , 脂质过氧化 , 戊巴比妥睡眠时间
白饭树 ( F z u g e a v i or s e ( R o a b e x w i l ld ) B i a l l 〔F , m e i r o e a r n a B I . 」)属大戟科白饭树属
植物 ,分布于广东 、 广西 、 江西等地 ,文献报道其株入药有抗炎 、 治湿疹 、 浓疮 、 疮疖 、 疹症等
功效 ,其主要成分为生物碱 、 蹂质等 l[, ’ 〕 ,其中白饭树碱的化学式为 c l o H , : o N , 民间用白饭
树入药治肝炎 . 采集白饭树果 ,提取出其水提物 ,进行对 c CI ; 所致小鼠 、 大鼠急性肝损伤
的保护作用实验 . 结果发现水提物有降低 C CI 、 中毒鼠血清 G P T 等酶升高的作用 , 抑制
C C I
; 所致的鼠肝脂质过氧化作用 ,能缩短 C CI 压肝损伤小鼠的戊巴比妥睡眠时间 .
1 实验材料
1
.
1 试验样品
白饭树水提物 ,为本室 自行采集的白饭树果 ,水浸数天 ,低压蒸馏后 ,烘干所得 .
1
.
2 试 剂
G P T 试剂盒 ,重庆乐方试剂厂出品 ; G O T 试剂盒 ,宁波市慈城生化试剂厂出品 ; L D H
一 L 试剂盒 , 北京中生生物工程高技术公司出品 ; A L P 试剂盒 ,北京中生生物工程高技术
公司出品 ; 硫代巴比妥酸 , is g m a 公司出品 ;三氯乙酸 ,化学纯 ,生理盐水 , 自制 .
1
.
3 动 物
S p a r g u e
一
D a w l e y 系大鼠 ,体重 1 8 0士 2 0 9 , 雌雄各半 ; N I H 系小鼠 ,体重 2 0士 29 , 雌雄
各半 ;均为本室实验动物养殖场提供 .
` 现在华南濒危动物研究所工作
第 6期 许实波等 :白饭树术提物对实验性肝损伤的保护作用
2方 法
2
.
1对 c I C;所致小鼠肝损伤的保护作用
取 I H N小鼠 0 6只 ,随机分为 6组 , 即 : 空白对照组 , c cl ; 中毒组 ,高 、 中、 低剂量 3 个
给药组 ,生理盐水对照组 . 按文献〔3〕方法 , 以 0 . 2% CCI 、 。 . Zm l/ 只 扣造成中毒组 ,给药
组共 4 组动物急性肝损伤模型 , 同时 , 以同剂量生理盐水如对照组 . 24 卜后高 、 中、 低剂量
给药组分别以 .0 5 , .0 1 6 7 , .0 05 m g / k g i p 白饭树水提物 , 生理盐水对照组 ip .0 s m g k/ g 白
饭树水提物 , 48 h 后摘眼取血样 ,测血清 G P T (谷丙转氨酶 )含量 ,取肝脏匀浆测脂质过氧
化产物丙二醛 (M D A )含量 .
2
.
2 对 c cl ; 所致大鼠肝损作的保护作用
取 S D 系大鼠 48 只 , 随机分为 6 组 ,即 : 空白对照组 , C 1C 4 中毒组 , 高 、 中 、低剂量 3 个
给药组 , 阳性药联苯双脂对照组 · 按文献阁方法 ,以 .0 l m l C 1C 4 1/ 0 0 9 剂童造成大鼠急性
肝损伤模型 . 24 h 后 ,高 、 中 、 低剂 量 3 个给药组分别 iP Z, O. 67 , 0 . 2 m g k/ g 白饭树水提
物 , 阳性对照组以 30 om g k/ g 剂量 iP 联苯双脂 · 48 h 后 ,摘眼取血 , ZOo o r / m in 离心分离血
清 ,取血清作谷丙转氨酶 ( G P T ) 、 谷草转氨酶 ( G O T ) 、 碱性磷酸酶 ( A L P )和乳酸脱氢酶
(L D H )的酶活性检测 · 取肝脏匀浆测丙二醛 (M D A )含量 .
2
.
3 对 c 1C 4 肝损伤小鼠戊巴比妥钠引起睡眠时间的影响
取 N I H 系健康小鼠 50 只 ,体重 20 士 29 ,雌雄各半 ,分为 5 组 ,正常对照组 iP 等剂量
生理盐水 ,其它组 i p s % CCI ; 的花生油 32 m l k/ g ; 1 h2 后 , 肝损伤对照组 ip 等剂量生理盐
水 , 给药 组分 别 i p 白饭树 水提物 0 . 2 , 0 . 6 7 , Zm g / k g ; 给药 h4 后全部 i p 戊 巴 比妥 钠
5腼 g k/ g, 记录小鼠身体翻正反射消失至恢复时间川 ·
3 结 果
3
.
1 对小鼠血清 G P T 和肝脏 M D A 的影响
赖氏 ( R e i tm a n 一 F r a n k e t )法 [5〕测血清 G P T . 肝脏 M D A 含量测定按文献〔5 , 6〕方法稍
改 : 精确切取同一部位 的肝组织 2 50 m g ,加 5m l N S 匀浆 , 加入 。 . 5m l 20 %的三氯 乙酸
( T e A )沉淀蛋白 , Z 0 0 0 r /m i n 离心 z o m i n ,取全部上清液 , 加入 0 . s m l o ` 6 7%的硫代巴 比
妥酸 , 沸水浴 Z om in , 却冷后 7 2 1一 A 型分光光度计测光密度 O D 值 . 结果如表 1所示 .
结果提示 , 白饭树水提物对 C 1C 4 致小鼠的 G P T 升高有明显的降低作用 ,对 CCI ; 所
致小鼠肝脂质过氧化亦有明显的抑制作用 , 正常给药组提示此水提物对正常小鼠 G P T
及肝 M D A 无明显影响 ,
5 6 中山大学学报论丛 1 9 9 生年
表 1 白饭树水提物对 C CI 、 致肝损伤小鼠的血清 G P T 和肝脏 M D A 的影响
T
a
b
.
1 E f f e e t s o f t h e e x t r a e t s fr o m F
.
v iro
s e o n s e r u n l G P
`
F
a n
d h
e P a t ze M D A
I n
C C I
` 一 z n t o x l e a t e d : n ie 。
组 别 剂量( m g / k g ) G P ’ r ( o D 值 ) M D A ( ( ) r ) 值 )
空白对照组 N S 0 . 2 88士 o · 0 4 6 “ ’ O · 1 1 4 士 o · 0 4 9 ` ”
正常给药组 0 . 5 0 . 2 9 1士 O · 0 3 1 ” ` O · 1 1 9 士 O · 0 1 3 ” `
C C I峨 中毒组 N S 0 . 4 7 0 士 0 . 0 3 8 0 . 2 0 2 士 O · 0 2 9
低剂量组 0 . 0 5 0 . 3 4 5士 0 . 0 3 2 ” 0 . 1 8 5 士 o · 0 4 0 “
中剂量组 0 . 1 6 7 0 . 3 2 8士 O · 0 8 0 ’ ` O · 1 7 8 土 O · () 1 7 “
高剂量组 0 . 5 0 . 3 1 1士 0 . 0 2 2 ’ “ ` O · 1 4 4士 O · 0 1 4 ` ”
n 一 1 0 , 牙士 S D ; 与 C C I; 中毒组比较 * 二 尸 < 0 . 0 5 , * * * P < 0 . 0 1
3
.
2 对大鼠血清 G P T , G O T , A L P , L D H 的影响
大鼠摘眼取血后 ,赖氏法测 G P T , G O T , A L P 及 L D H 测定法按北京中生生物高技术
公司出品的试剂盒所附说明书进行 . 结果见表 .2
表 2 白饭树水提物对 CCI 、 肝损伤小 鼠的血清 G P T , G O T . L D H , A L H 的影响
T
a b
.
2 E f fe e t s o f t h e e x t r a e t s f r o m F
. 沂 or s e o n s e r z, m G P T , G ( ) T , I D H , A l矛 H i n C C I、 一 in t o x 、 e a t o d 111 I C花2
组 别 G P T (O D 值 ) G O T (O D 值 ) A L T ( U / L ) L D H (U / L )
空白对照组 0 . 3 7 0士 0 . 0 2 9 ` ’ ` 0 . 4 8 6士 0 . 0 2 5 “ “
C C I、 中毒组 0 . 6 7 1士 0 . 0 74 0 . 6 4 3土 0 . 0 4 9
低剂量组 0 . 4 86士 0 . 0 4 3 ” 0 . 5 3 9士 0 . 0 4 2二
中剂量组 G . 4 4 2 士 0 . 0 4 7 “ 0 53 2士 0 . 0 2连“
高剂量组 0 . 3 9 8士 0 . 0 2 9 “ ` 0 . 5 2 3士 0 . 0 1 8 ’ `
联苯双醋组 0 . 5 2 1士 0 . 0 6 9 ” 0 . 6 2 0士 0 . 6 5
7 3
.
2 5士 2 6 . 2 3 “ ` 3 3 9 . 9 9士 4 8 . 5 7 ’ ` “
2 0 6
.
1 9士 29 . 8 4 7 9 3 . 3 1士 1 3 7 . 4 1
1 2 2
.
5 1士 3 2 . 5 6 . ` 4 6 9 . 8 2士 9 7 . 1 4
1 0 6
.
6 5士 5 0 . 6 4 ` ’ 4 4 5 . 2 3土 8 9 . ( )4 `
8 1
.
3 9士 2 3 . 5 1 诀 ’ 4 4 2 . 5 3士 6 4 . 5 9 ` 卜
1 3 3
.
8 4士 1 1 . 7 6 ` ’ 7 4 7 . 7 6士 4 8 . 5 7
n
= 8
, 牙士 S D ; 与 C C14 中毒组比较 二 * P < 0 . 0 5 , 、 * * P < 0 . 0 1
结果表明 ,该提取物有明显的降低 c CI ; 所致的大 鼠血清 G P T , G O T , A L P , L lD l 升
高的作用 ,与阳性对照药联苯双醋比较其剂量小 ,但降低酶升高的幅度大 . 各给药组血清
酶指标接近于正常组 ,与中毒组相比较 , 尸 检测表明差异有显著性 .
.3 3 对大鼠肝脂质过粗化的影响
大鼠取肝脏测 M D A 的方法同 3 . 1, 其 O D值测量结果表 3 .
表 3 白饭树水提物对 C 1C 4肝损伤大鼠肝指质过氧化的影响
T
a b
.
3 E f f e e t s o f t h e e x t r a e t s f r o m F
.
v i or
s e o n h e p a t ie li p o p e r o x i d a t i o n in C C I
; 一
i n t o x ie a t e d r a t s
项目 空白组 C CI ; 中毒组 高剂量组 中剂量组 低剂量组
剂量 (m g /k g ) —
M D A ( O D ) 0
.
10 4士 0 . 0 4 1
0
.
6 7 0
.
2
0
.
23 2士 0 . 0 4 0 0 . 1 6 4士 0 . 0 5 7’ ` 0 . 1 6 3士 0 0 2 2“ 0 . 1 3 6士 0 . 0 5 5“
n = 8
, 王士 S D ; 与 C C 14 中毒组 比较 , ! , P < 0 . 0 5 , ! ! * P < 0 . 0 1
结果表明 ,该水提物降 CCI ` 所致大鼠肝脏 M D A 作用明显 , 尸 检测有显著性 ,提示该
第 6 期 许实波等 : 白饭树水提物对实验性肝损伤的保护作用
水提物有抗 c cl 4 所致脂质过氧化作用 .
3
.
4 对 c cl 4 肝损伤小鼠戊巴比妥钠引起睡眠时间的影响
按前述方法测得小鼠翻正反射消失至恢复时间 , 结果见表 4 .
表 4 白饭树水提物对 c CI 、 肝损饰大 鼠戊 巴比妥钠引起睡眠时间的影响
T a b
.
4 E f f
e e t s o f t h
e e x t r a e t s f
r o m F
·
v ior
s e o n p e n t o b a
r b it a l s l e e p i n g t ime i
n C C I` 一i n t o x i e a t e d r a t s
项目 正常对照组 肝损伤对照组 低剂量组 中剂量组 高剂 t 组
反刃石雨而3— 下二 一 1 . 6 : . 6 1 . 0 1 . 6 -水提物 一 — 。. 2 0 . 67 2时 l旬 (m ;n ) 1 0 6 . 4 士 3 0 . 3 ` “ ’ 2 0 7· 3士 51 . 2 1 6 3 · 4土 4 2 . 8 “ ’ ` 1 5 6 . 4士 31 , 9 “ 气 13 1 . 3士 3 9 · 7 ” “
, `二 1 0 , 牙士 S D ; 与 C C I。 中毒组比较 , , 二 , P < 0 . 0 1
实验结果表 明 , 给药组均不同程度地使睡眠时间缩短 · 参照文献 4[, `〕分析 , 因戊巴比
妥主要在肝脏代射失活 , 肝损伤后使其分解失活时间延长引起小鼠睡眠时间延长 , 几 而白
饭树水提物能缩短肝损伤小鼠戊 比巴妥的睡眠时间 , 提示此水提物可提高肝脏解毒能
力 .
4 讨 论
c C I
、 可诱发多种实验动物肝损伤 , 可致实验动物多种血清酶含量上升 , 肝细胞膜的
脂质过氧化 , 使肝脏解毒能力降低等 . C 1C 4 肝损伤模型广泛用于护肝药物筛选和机理研
究义 .
通过 c CI ; 所致的大鼠 、 小鼠的肝损伤模型 , 我们初步研究了白饭树水提物对小鼠的
C C 1
4 月干损伤的保护作用 , 结果表明 , 该水提物能明显缓解 C CI ; 所致血清 G P T , GO T ,
A L P
,
L DH 升高 , 能对抗 C 1C 4 所致的肝脂质过氧化作用 ; 能缩短 C 1C 4 肝损伤小鼠的戊
巴比妥的睡眠时间 , 提示它能提高肝脏的解毒能力 . 而对于正常大鼠 , 给予该水提物 , 肝
脏无明显变化 . 这些结果提法 , 白饭树水提物对肝损伤有一定的保护作用 , 说明民间用
白饭树入药治疗肝炎确有根据 . 但该水提物护肝作用的其它肝损伤模型及其作用机理 尚
待进一步研究 .
参 考 文 献
全国中草药汇编 . 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 7 5 . 206
中科院华南植物研究所 . 广东药用植物手册 1 982 , 2 50
李仪奎等 . 中药药理方法学 . 上海 : 上海科学技术出版社 , 1 99 .1 458 ~ 4 5 9
许实波等 . 中国药理学报 . 1 9 9 3 , 14 ( 4) : 379 ~ 379
徐淑 云等 . 药理实验方法学 . 北京 : 人民卫生出版社 , 19 85 . 8 68
许实波等 . 中山大学学报 (自然科学报 ) . 19 90 , 29 (增刊 ) : 12 2
5 8 中山大学学报论丛 1 9 9 4年
P r o t e e t i v e E f f e e t s o f W
a t e r E x t r a e t s f r o m
F l u g e a V i r o s e a g a in s t E x p e r im e n t a l L i v e r In iu
r y
X u S h ibo
余
W a心 Z h e n g n i a n Z h a o J in h u a
A b s t r a e t In C C I
、 一
in t o x ie a t e d r a t s a n d m i e e
,
t h e w a t e r e x t r a e t s f r o m F l u g
e a v i or
s e m a y
d e e r e a s e t h e s e r u m a la n i n e a m i n o t r a n s f e r a s e ( G P T )
, a s P a r t a t e a m i n o t r a n s f e r a s e
( G O T )
, a l k a l i n e p h o s p h a t a s 砂 ( A L P ) a n d l a e t a t e d e h y d r o g e n a s e ( L D H ) , s h o r t e n t h e
p e n t o b a r b i t a l i n d u e e d s le e p i n g t im e
, a n d h a s p r o m i n e n t a n t i l i p o p e r o x id a t i o n i n l i v e r
.
I t
s u g g e s t s f r o m t h a t t h e e x t r a e t s p r o t e e t l i v e r a g a i n s t i n iu r y i n d u e e d b y C C I
、 ·
K e y w o r d s w a t e r e x t r a e t s F r o m F l u g e a v i or
s e , p r o t e e t i v e e f f e e t s
,
l i v e r I n z u r y
.
豢
eS
e t io n o f P h a r m a e o l o g y
,
S
c h o o l o f L if e S e ie n e e s
,
Z h o n g s h a n U z l iv e r s i t y