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民族药小飞扬草薄层色谱鉴别方法的研究



全 文 :中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
民族药小飞扬草薄层色谱鉴别方法的研究
李 玲
广西省柳州食品药品检验所, 广西 柳州 545001
【摘 要】: 目的: 建立小飞扬草的薄层鉴别方法。 方法: 采用不同的展开系统对小飞扬草进行了薄层鉴别的研究。 结果: 以三氯甲
烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸 (3:1.5:0.3:0.3) 为展开剂时, 分离效果较好。 结论: 此法具有简便、 专属的特点, 可用于小飞扬草药材的鉴别。
【关键词】: 小飞扬草; 薄层色谱; 鉴别
【中图分类号】 R29 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-8517 (2009) 15-0137-02
Identification of ethnicdrug Thyme-leaved spurge by TLC
Li Ling
Liuzhou Institute for Food and Drug Control, Liuzhou 545001
Abstract: Objective: The research of identifying the TLC of ethnicdrug thyme-leaved spurge. Method Using different solvent systems to do the
research about identifying thyme-leaved spurge. Results Chloroform-ethyl acetate-methanol-formic acid (3:1.5:0.3:0.3) was used as the developer ,
it has good separation effect . Conclusion The method was simple and special, it can be used as identify for Thyme-leaved spurge.
Key words: Thyme-leaved spurge; TLC; identification
小飞扬草为大戟科千根草 Euphorbia thymifolia L.
全草, 具有清热解毒、 止痢功效, 用于治疗疳积、 眼膜初
起、 痢疾、 肠炎、 湿疹、 过敏性皮炎等 [1], 为广西壮、 瑶
医常用药材。 为控制药材质量, 保证临床用药安全有效,
鉴别药材真伪具有重要意义。 根据小飞扬草中含有的活性
成分是没食子酸 [2], 我们经过大量实验, 以没食子酸为对
照品建立了小飞扬草 TLC 定性鉴别方法, 现报道如下。
1 仪器及试剂与样品
三用紫外分析仪 (ZF-1, 上海顾村电光仪器厂), 超声
波清洗器 (CQX25-06, 上海必能信超声有限公司), 高速
中药粉碎机 (D-02, 浙江省温岭市大鹏机械有限公司) 没
食子酸对照品 (中检所, 110831-200302, 供含量测定用)。
从不同产地 (广西武宣, 广西象州, 广西柳州, 广西柳江)
共收集 4 批小飞扬草样品, 其原植物经本所黄成勇副主任
药师鉴定均为大戟科千根草 Euphorbia thymifolia L.
展开缸 ,预制硅胶 G 板 (浙江省台州市路桥四甲生化塑料
厂), 甲醇、 乙醇、 三氯甲烷、 醋酸乙酯均为分析纯, 水为
纯化水。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 : 取本品粉末 2g, 置具塞锥形瓶
中 , 加甲醇 25ml, 超声提取 20min, 放冷 , 滤过 , 蒸干 ,
残渣加 2ml 甲醇使溶解, 作为供试品溶液。。
2.2 对照品溶液的制备: 取没食子酸对照品, 加甲醇制成
每 1ml 含 1mg 的溶液, 作为对照品溶液。
2.3 薄层层析: 照薄层色谱法 (2005 年版附录 VIB) 操作
(室温 : 22~26℃ ,相对湿度 : 52~63%), 供试品溶液点样
5μl, 对照品溶液点样 3μl, 三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸
(3:1.5:0.3:0.3) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以 5%三
氯化铁乙醇溶液。 供试品色谱中, 在与没食子酸对照品色
谱相应的位置上, 显相同的灰蓝色的斑点。
2.4 鉴别结果: 4 批小飞扬草药材的薄层试验证明, 小飞
扬草含有没食子酸成分, 且含量较高。 色谱图见图 1。 由图
1 可见, 薄层层鉴别重现性、 稳定性均较好, 专属性强, 斑
点清晰, 结果较为满意。
基金项目: 广西科技厅科技创新能力建设项目 (编号: 桂科能 05112001-3A)
作者简介: 李玲 (1963-), 女, 副主任药师, 长期从事中药检验、 鉴别与开发。 Tel: (0772) 2824128 E-mail:lzyjs-ywjs@gxfda.gov.cn
图 1 小飞扬薄层色谱图
1.没食子酸对照品
2, 3, 4, 5.6.7.小飞扬草药
材 (不同产地)
民族民间医药
journal of ethnomedicine 137· ·
中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
(上接第 26 页)
3.0ml, 测定峰面积, 求得没食子酸含量, 计算回收率, 测
定结果见表 4。 试验结果表明, 本法回收率良好。
2.9 样品中没食子酸的含量测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl, 注入
液相色谱仪, 依法测定, 计算含量, 结果见表 5
3 讨论
用 HPLC 法测定八味沉香丸中测定没食子酸的含量
时, 流动相 (乙腈: 水) 易产生拖尾, 加入一定比例的磷酸
可使峰形减少拖尾, 增加没食子酸峰形对称性 [2]。 通过线
性范围、 精密度、 稳定性、 重现性、 回收率的试验考察 ,
证明该方法快速、 结果准确可靠, 能有效控制本制剂的质
量。
参考文献
[1] 中国药典 [S] .一部, 2005: 附录 VID.33-35.
[2] 朱彭龄.现代液相色谱 [M] .兰州:兰州大学出版社, 1996: 215-254.
[3] 徐小平 .HPLC 测定 4 种藏药中的没食子酸的含量 [J] .华西药学杂志 ,
2003, 18 (6) 448-450。
[4] 潘国庆.HPLC 测定藏成药九味青鹏散中的没食子酸的含量 [J] .中成药,
2006, 28 (9) 1391-1393。
[5] 李彩东.高效液相色谱法测定苦味叶下珠胶囊中没食子酸的含量 [J] .中国
现代应用药学杂志, 2007, 24 (6) 487-488.
[6] 徐莱 .HPLC 测定舒冠通胶囊中没食子酸的含量 [J] .中成药, 2007, 29
(9) 附 15-附 16.
[ 7] 卢永昌 .HPLC 测定藏成药七味诃子散中没食子酸 . [ J] .中草药 ,
2006, 37 (9) 1350-1351.
(收稿日期: 2009.6.15)
表 5 样品中没食子酸的含量测定
批 号 含量 (mg·g-1)
20071201 6.00
20071203 6.23
20071202 5.93
图 3 八味沉香丸诃子阴性样品
图 1 没食子酸对照品
图 2 八味沉香丸样品
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
3 讨论
3.1 很多文献报道 [3][4], 测定药材中的没食子酸含量的提取
方法均是超声处理, 我们曾比较了甲醇回流提取, 但杂质
干扰太多, 因而仅考察了不同溶剂 (甲醇、 50%甲醇、 80%
甲醇、 50%乙醇、 乙醇) 和不同时间 (15 分钟、 30 分钟、
45 分钟) 对超声提取的影响, 最终选定甲醇作提取溶剂,
因超声处理 15 分钟和 30 分钟效果差不多, 故我们定为 20
分钟。 该法得到的供试液, 其层析效果较好, 斑点清晰 ,
杂质干扰小。
3.2 展开剂我们试验了 (1) 甲苯 (水饱和) -甲酸乙酯-甲
酸 (5∶4∶1)、 (2) 三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸 (6∶4∶1)、 (3)
三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸 (3∶1.5∶0.3∶0.3), 结果以三
氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸 (3∶1.5∶0.3∶0.3) 层析效果为
好, 主斑点 Rf 值适中, 故采用之。
3.3 做了不同产地的小飞扬草对比试验, 结果认为此方法
简便、 可行、 专属性强, 可作为小飞扬草鉴别方法之一。
参考文献
[1] 广西壮族自治区革命委员会卫生局主编: 广西本草选编 [M] .广西出版
社, 1974: 406.
[2] 张兰珍, 王晓强, 宣辉, 等.高效液相色谱法测定叶下珠没食子算的含量
[J] .北京中医药大学学报, 2000, 23 (6): 46.
[3] 丁岗 , 刘延泽 .诃子中的多元醇酸类成分 [ J] .中国药科大学学报 ,
2001, 32 (3): 193-193.
[4] 叶蕻芝, 叶蕻倩, 林薇, 等.三白草没食子酸含量的测定 [J] .福建中医学
院, 2004, 14 (1): 15.
(收稿日期: 2009.6.15)
民族民间医药
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