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余甘子功能性成分研究和多酚的提取



全 文 :!#$
余甘子功能性成分研究和多酚的提取
潘! 颉,钟秋平!,赵新河
(海南大学食品学院,海南海口 !#$$%)
摘& 要:以余甘子果实为原料,测定了“大油甘”和“甜油甘”$ 个品种的 ’( 含量、多糖含量、)*+ 活性、自由基清除能
力,并对余甘子多酚浸提条件进行了研究。结果表明,“甜油甘”的 ’(、多糖含量较高,)*+活性及清除自由基的能力
较强,具有大面积推广种植的价值;提取多酚时,甲醇的提取效果最佳,其最佳条件为:料液比 ,-%,浸提次数 $ 次,浸提
温度 !#.,浸提时间 #/01。
关键词:余甘子,功能性,成分,提取
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中图分类号:F)$#,E,& & & & 文献标识码:G& & & & 文 章 编 号:,##$2#H#I($##J)#%2#$HK2#H
收稿日期:$##J2#,2#I& !通讯联系人
作者简介:潘颉(,J%!2),女,在读硕士,研究方向:应用微生物。
基金项目:海南省自然科学基金资助(%##HI)。
& & 余 甘 子( !#$%#& ’()**+,%(-)是 大 戟 科
(.#/(01-+$2+2)、叶下珠属(’()**+,%(#&)植物余甘子
(’()**+,%(#& 231*-$+ 4E)的果实,俗名橄榄、滇橄榄、
油柑、油甘子、山油甘、庵摩勒、庵婆罗果、牛甘果、喉
甘子、杨甘、回甘子等[,,$]。余甘子起源于印度和缅
甸,主要分布于印度、中国、泰国、缅甸、马来西亚等
地,中国的产量最多,主要分布于云南、广西、广东、
福建、贵州、台湾、海南等省区。余甘子不仅营养丰
富,食用价值高,更是优良的中药材。余甘子果实可
以治疗消化不良、胃腹痛、感冒、牙疼、咽喉痛、乙型
肝炎、糖尿病、坏血病、’( 缺乏症、咳嗽、河豚鱼中毒
等疾病,还具有抗病毒、抗衰老、抗肿瘤等功效[$]。海
南省地处热带地区,具有得天独厚的地理优势,土
壤、气候等环境因素都非常适合种植余甘子。研究
海南余甘子品种中各功能性成分的含量,并与其他
省份的不同品种进行比较,对于推广海南品种和引
进新品种具有一定的指导意义。而对余甘子多酚提
取的初步研究,为研究多酚的性质及提纯等提供理
论依据。
8! 材料与方法
898! 材料与仪器
大油甘、甜油甘 & 海南 $ 个余甘子的主要种植
品种,“大油甘”果实个体均重为 ,,E!6,表皮光滑,外
表略显暗绿,味淡,苦味轻,“甜油甘”果实个体单重
为 E#6,表皮多麻斑,外表略显淡黄,味较苦,余味较
甜;生石灰,粉状碳酸钙,甲醇,乙醇,丙酮,乙酸乙
酯,+LL:·,MNF,OPF,P+FG2M;$,H,!2二硝基水
杨酸。
离心机& 上海安亭科学仪器厂;$$ 光栅分光光
度计& 上海精密科学仪器有限公司;荧光灯 & 反应
试管处照度为 K###QR;恒温水浴锅。
89:! 实验方法
,E$E,& 原料处理& 将余甘子洗净,去核,剥取果肉置
于研钵中,加入适量石英砂和粉状碳酸钙,将果肉连
皮尽量磨碎,置于低温下保存备用。
,E$E$& 测定方法
,E$E$E,& ’( 含量的测定& 采用直接碘滴定法
[K,!]。
,E$E$E$& 多糖含量的测定 & 采用 H,!2二硝基水杨
酸法[I,]。
,E$E$EH& )*+活性的测定& 采用 MNF法[%]。
!#$
表 ! 海南余甘子与其它地区余甘子相关成分比较
不同产地及品种 #$(%& ’ ())&) 多糖(*) 多酚(*)
+,-活性
(. ’ %/)
-001·抑制率
(*)
云南楚雄市富民镇品种[(!] ’ ’ ’ 23245 ’
于惠安紫山余甘子品种[(3] (634273!)428 ’ ’ ’ ’
广东地区栽培余甘子品种[(2] ’ (4()3*(干重) (549(3*(干重) ’ 6!4)6
广东地区野生余甘子品种[(2] ’ (4685*(干重) !)42(9*(干重) ’ 5:452
“大油甘” (59469 )4(3(*(鲜重) 9425*(鲜重) !6(469 884)9
“甜油甘” !5(498 )4!!9*(鲜重) 34!!*(鲜重) 365432 56428
(4!4!42 自由基清除能力的测定 -001·法测定自
由基清除能力[6 7 ((]。
(4!4!49 多酚含量测定 采用酒石酸铁比色法[5]。
(4!43 单因素实验选择浸取剂 各称取研磨过的余
甘子 ()&(准确至 )4)(&),分别加入蒸馏水、甲醇、乙
醇、丙酮、乙酸乙酯 5)%/,用保鲜膜盖于烧杯口并扎
上皮筋,在室温下静置抽提 29%;<,用纱布过滤后作
为供试液。吸取供试液 2%/ 放入 ())%/ 容量瓶中,
加蒸馏水 (:%/、酒石酸铁溶液 !)%/,摇匀,用 =1849
磷酸缓冲液稀释至刻度,以蒸馏水代替供试液加入
同样的试液作空白。选择 92)<% 波长和 )49>% 的比
色杯测定光密度。
(4!42 正交实验 在选择最佳浸提剂之后,利用正
交实验进一步考察温度、时间、料液比、浸提次数四
个因素对提取效果的影响,实验设计如表 (,各处理
重复两次。
表 ( 正交实验因素水平表
水平
因素
?温度
(@)
A时间
(%;<) $料液比 -次数
(
!
3
3)
2)
9)
8)
9)
3)
(B()
(B5
(B:
2
3
!
! 结果与分析
!#$ 功能性成分含量及活性对比
“大油甘”和“甜油甘”的功能性成分及其活性测定
结果见表 !。从表 ! 可以看出,“大油甘”和“甜油甘”
的 #$含量分别为 (59469%& ’ ())& 和 !5(498%& ’ ())&;
多糖含量分别占鲜果的 )4(3(*和 )4!!9*;多酚含量
分别占鲜果的 9425* 和 34!!*;+,- 活性分别为
!6(469 . ’ %/和 365432 . ’ %/;-001·抑制率分别达
到 884)9*和 56428*。由此可见,“甜油甘”的功能
性成分含量大都高于“大油甘”。与其它地区的油甘
相比,海南“大油甘”的 #$、多酚、多糖含量(通过烘
干处理干物质占鲜果的 ()*7(9*)及 +,- 活性、
-001·抑制率均较低;“甜油甘”的 #$ 含量、+,-活
性、-001·抑制率与云南、广东等地的品种相当。
!#! 选择浸提剂的单因素实验结果
当提取的其他条件如:温度、时间、料液比、浸提
次数都相同时,分别用不同的溶剂对余甘子的多酚
进行抽提,结果见表 3。从表 3 可看出,甲醇的提取
效果最佳,提取出的多酚百分含量为 )4536*,其次
是乙醇,为 )45)9*,然后分别是丙酮 )453(*、乙酸乙
酯 )43(9*、蒸馏水 )4:89*。因此确定以甲醇作为正
交实验的提取剂来优化最佳浸提条件。
表 3 不同溶剂提取多酚的结果
实验号 提取剂 ?平均值 多酚(*)
(
!
3
2
9
甲醇
乙醇
丙酮
乙酸乙酯
蒸馏水
)49:2)
)49!89
)495(9
)4!)()
)42:))
)4536
)45)9
)453(
)43(9
)4:89
!#% 多酚最佳提取条件的确定
通过正交实验进一步考察温度、时间、料液比、
浸提次数四个因素对提取效果的影响,进行四因素
三水平正交实验,结果见表 2。通过对正交实验的极
差分析可知,料液比的极差最大,其次是浸提次数,
而温度和浸提时间对多酚提取的影响较小。极差越
大,则说明该因素对多酚提取的影响越大。因此,对
于浸提效果的影响次序为:料液比 C浸提次数 C浸
提温度 C浸提时间,最佳组合为 ?3A($!-3,即温度为
9)@,浸提时间 8)%;<,料液比为 ( B5,浸提 ! 次的条
件下,提取出的多酚百分含量最高为 (42:!*。
表 2 正交实验结果及分析
实验号 ? A $ - 多酚含量(*)
( ( ( ( ( (433(
! ( ! ! ! (43):
3 ( 3 3 3 (4(:(
2 ! ( ! 3 (4!2)
9 ! ! 3 ( (4(98
: ! 3 ( ! (4!3(
8 3 ( 3 ! (4(63
5 3 ! ( 3 (4!59
6 3 3 ! ( (435)
D( (4!:: (4!98 (4(8) (4(8)
D! (4!() (4!9) (43)6 (4!23
D3 (4!5: (4!99 (4!53 (4!56
E )4)8: )4))8 )4(36 )4((6
% 结论
%#$ 由功能性成分分析可知,海南“甜油甘”的 #$、
多糖含量较高,+,-活性及清除自由基的能力较强,
具有大面积推广种植的价值。
%#! 甲醇是一有效的多酚提取溶剂,其浸提的最佳
工艺条件为:料液比 ( B5、浸提次数 ! 次、浸提温度
9)@、浸提时间 8)%;<。
参考文献
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(下转第 3(5 页)
!#$
按照检测限的定义,可检测仪器的最小讯号,通
常用信噪比来表示,当信号与噪声之比大于等于 !
时,相当于信号强度的试样浓度,定义为仪器检测下
限。在高效液相色谱条件下,将标样连续稀释后进
样,依据 ! 倍噪音的峰高响应值计算, 种药物中磺
胺嘧啶检测限最小,为 #$##%!& ’ (),磺胺喹恶啉检测
限最大为 #$#*!& ’ ()。
! 结论
随着人们生活水平的不断提高,食品安全问题
越来越受到关注,磺胺类药物(+,-)作为一类传统的
合成抗菌药物,以其抗菌谱广、抗球虫、价廉易得等
特点,已广泛应用于预防和治疗食源性动物的疾病。
由于 +,-在体内的作用时间和代谢时间较长,蓄积
浓度超过一定值,对人体机能就会有害。因此,联合
国食品法典委员会(.,.)和许多国家对这类药物给
出了限量规定。可见对动物源食品中磺胺类药物残
留的精确测定具有重要的意义。
现在检测分析磺胺类药物残留的常用方法有
/0).法和微生物方法。微生物学检测法是应用较
广泛的方法,但不易筛选到特异性好的菌株,灵敏性
太低。传统的 /0).法样品提取和净化步骤繁琐、回
收率偏低,对实验人员要求高并使用大量有毒溶剂,
本文通过过 +01 小柱的方法进行前处理,不仅大大
简化了净化步骤,而且灵敏度高、特异性好、检测限
低同时节约了有机溶剂的使用量。是一种理想的分
离检测方法。
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