全 文 ：余甘子果汁活性成分与抗氧化活性研究＊
刘晓丽　赵谋明
(华南理工大学轻工与食品学院 , 广州 , 510640)
摘　要　测定了不同产地余甘子果汁中多酚 、黄酮和多糖含量。结果表明:广东野生余甘果汁的多酚 、黄酮含量
和水溶性多糖含量最高 , 分别为(204.15±6.85)mg/ g 干物质 、(81.11±8.67)mg/ g 干物质和(19.78±1.22)
mg/g 干物质。通过测定还原力和自由基清除率 , 研究了余甘子果汁的抗氧化活性 , 结果表明:各种余甘子果汁都
有清除自由基和抗氧化作用 , 其中广东野生果汁抗氧化活性较高 , 浓度为 10 mg/ mL 时 , 其还原力为 1.344±
0.14 ,羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为(91.50±3.53)%、(92.31±1.30)%,其抗氧化性优于同
浓度的 Vc;由广东栽培的余甘于做的果汁的 DPPH 自由基清除力最高 , 浓度为 10 mg/m L时 , 清除率达到(92.09
±1.52)%。
关键词　余甘子果汁 , 黄酮 ,总多酚 , 多糖 ,抗氧化活性
　第一作者:博士,教授。
＊广东省广州市科技攻关项目(No.2004Z1-E0061)
　收稿日期:2006-01-21 ,改回日期:2006-05-08
　　余 甘 子 (Phyllanthus embl ica)系 大 戟 科
(Euphorbiaceae)叶下珠属(Phyllanthus)热带 、亚热
带落叶小乔木的果实 ,俗名滇橄榄 、油甘子 、庵摩勒 、
庵婆罗果 、喉甘子等 。截止 2002 年 ,我国余甘子野生
及栽培林面积大约在 60 000 hm2 以上 ,野生余甘子
在福建 、云南 、贵州 、广西等省每年合计产量为 10 万
t。研究表明 ,余甘果中含有丰富的超氧化歧化酶
(SOD)、Vc、多酚类物质及多糖等活性物质[ 1 ～ 3] ,具有
抗炎 、抗肿瘤 、抗突变 、抗高血压 、降血脂 、降血压 、保
肝等功效[ 4] ,并且已证实 ,余甘子强烈的抗氧化活性
是其生理功能的基础[ 5 , 6] 。本文测定了广东和海南
产地的余甘子果汁的总多酚 、粗黄酮和多糖的含量 ,
并测定了其还原力和自由基的清除能力 ,分析其活性
成分含量与抗氧化活性之间的关系 ,为余甘子的深度
开发提供依据。
1　材料与方法
1.1　材　料
试样分别购自广东省惠州市及海南省海口市 。
DPPH(1 , 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)、氮蓝 四 唑
(NBT)、芦丁(Rutin)购于 Sigma 公司 ,其他试剂均为
分析纯。
1.2　实验方法
1.2.1　余甘果汁和样品液的制备
称取余甘果样各 200 g加入 50 g 水打浆 ,过滤得
到余甘果汁。余甘果汁冷冻干燥 ,并于-4℃下保存
备用 。干燥粉用体积分数 70%乙醇稀释并定溶到 10
mg/mL。
1.2.2　活性成分含量的测定
总多酚采用 Folin-Ciocalteu法测定[ 7] ;总黄酮采
用硝酸铝-亚硝酸钠比色法[ 8] ;多糖含量采用硫酸-苯
酚法进行测定[ 9] 。
1.2.3　还原力测定[ 10]
取1 mL 样品液 ,加 pH 6.6的磷酸缓冲液 2.5
mL和质量分数 1%铁氰化钾溶液 2.5 mL ,混合后在
50℃放置 20 min ,加入质量分数 10%三氯乙酸溶液
2.5 mL ,4 800×g 离心 10 min ,取上清液 2.5 mL ,加
入 2.5 mL 蒸馏水和质量分数 0.1%氯化铁 2.5 mL ,
混匀 ,静置10 min ,在 700 nm 处测定吸光度 。吸光度
越高 ,抗氧化性越好 ,还原力越强 。
1.2.4　DPPH 自由基清除能力测定[ 11]
样品吸光值 (A样品):取 1 mL 样品液 ,加入 1
mmol/L DPPH 甲醇溶液 1 mL ,室温放置 30 min ,测
定 520 nm 处吸光值。以 1 mL 体积分数 70%乙醇替
代提取液测定空白吸光值(A空白)。
DPPH 清除率/ %=(1 -A样品/ A空白)×100
1.2.5　羟基自由基清除能力测定[ 12]
样品吸光值(A样品):取 0.005 mol/L 邻二氮菲
溶液0.6 mL ,加 0.4 mL pH 7.4的磷酸盐 , 0.01 mol/
L 硫酸亚铁溶液 0.3 mL ,0.02 mol/ L EDTA 溶液 0.3
mL ,蒸馏水 0.6 mL ,样品液 1 mL ,体积分数 0.1%双
氧水 0.8 mL ,37℃保温 1 h ,测定 536 nm 处吸光值。
以 1 mL 70%乙醇和 0.8 mL 蒸馏水替代提取液和双
饮料研究
2006年第 32卷第 5期(总第 221期) 151　
DOI :10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2006.05.041
氧水测定空白吸光值(A空白), 以 1 mL 体积分数
70%乙醇替代样品测定损伤吸光值(A损伤)。
羟基自由基清除率/ %=(A样品-A损伤)/(A空白
-A损伤)×100
1.2.6　超氧阴离子自由基清除能力测定
采用核黄素-光-氮蓝四唑体系测定[ 13] 。
空白吸光值(A空白):取 0.5 mL pH 7.5的磷酸
盐缓冲液 ,加入 0.3 mL 5×10-5 mol/L 核黄素 ,0.25
mL 0.02 mol/ L 甲硫氨酸 , 5.1×10-4 mol/ L 氮蓝四
唑和 1.0 mL 样品溶剂 ,再加去离子水定容至 5.0
mL , 40 W 日光灯照射 20 min ,于 560 nm 处比色。
样品吸光值(A样品):取 0.5 mL pH 7.5的磷酸
盐缓冲液 ,加入 0.3 mL 5×10-5 mol/L 核黄素 ,0.25
mL 0.02 mol/L 甲硫氨酸 , 5.1×10-4 mol/L 氮蓝四
唑和 1.0 mL 样品溶液 ,再加去离子水定容至 5.0
mL , 40 W 日光灯照射 20 min ,于 560 nm 处比色。
超氧阴 离子自由基 清除率/ % =(A空白 -
A样品)/ A空白×100
2　结果与讨论
2.1　不同产地余甘果汁活性成分含量比较
表 1为广东和海南两产地的余甘果汁粉得率和
活性物质含量的测定结果。从表 1 可知 ,不同产地的
余甘果汁的活性物质含量差异显著。广东野生品种
果粉得率最高 ,为 48.1 mg/g , 广东栽培品种的得率
为 40.2 mg/g ,海南栽培品种的得率最低 ,仅为 39.5
mg/g 。广东野生果汁的总多酚含量最高 , 达到
(204.15±6.85)mg/g(干物质);海南产地的余甘子
果汁总多酚含量最低 ,仅为(130.60±3.31)mg/g(干
物质)(P <0.01)。海南野生品种余甘子果汁的总
黄酮含量也最高 , 达到(81.11 ±8.67)mg/g(干物
质)。广东栽培品种的总黄酮含量最低 ,为(38.69±
0.49)mg/g(干物质)(P <0.05)。多糖含量最高的
是广东野生果汁(19.78±1.22)mg/g 干物质 ,最低
的是广东栽培果汁(11.03±2.01)mg/g(干物质)(P
<0.05)。
表 1　不同产地的余甘子果汁粉活性物质含量1)
样　品 果粉得率/mg·g -1 总多酚/mg·g -1(干物质) 黄酮/mg·g -1(干物质) 多糖/mg·g -1(干物质)
广东栽培余甘果 40.2 185.13±6.42 38.69±0.49 11.03±2.01
广东野生余甘果 48.1 204.15±6.85＊＊ 81.11±8.67＊ 19.78±1.22＊
海南栽培余甘果 39.5 130.60±3.31＊＊ 49.48±2.03＊ 14.86±1.55＊
　　1)表 1中数据为 mean ± SD , n = 3;＊＊P < 0.01 , ＊P < 0.05。
2.2　不同产地余甘子果汁的抗氧化能力
不同产地余甘子果汁粉 , VC 的抗氧化能力比较
见表 2。表 2结果表明 ,各种余甘子果汁都有较强的
抗氧化活性和清除自由基的能力 。广东野生余甘子
果汁抗氧化活性较高 ,在浓度为 10mg/ mL 时 ,其还
原力最高 , 达到 1.344 ±0.14;VC 还原力最低 , 为
1.205±0.05;广东栽培余甘子果汁和海南栽培余甘
子果汁还原力分别为 1.291±0.01 、1.210±0.09 ,均
高于同浓度的 VC 。广东栽培余甘子果汁的 DPPH 自
由基清除力最高 ,浓度为 10 mg/mL 时 ,清除率达到
(92.09±1.52)%,高于同浓度的 VC的清除率(90.67
±2.53)%;广东野生余甘子果汁 DPPH 清除力相对
较弱 ,其清除率为(86.84±11.02)%;海南栽培余甘
子果汁 DPPH 自由基清除力最弱 ,其清除率为(72.35
±13.33)%。
表 2　不同产地余甘子果汁粉和维生素 C的抗氧化能力比较1)
样　品 还原力 DPPH 抑制率/ % HO -抑制率/ % O-2 ·抑制率/ %
广东栽培余甘果 1.291±0.01 92.09±1.52 84.40±4.01 86.00±10.33
广东野生余甘果 1.344±0.14 86.84±11.02 91.50±3.53 92.31±1.30
海南栽培余甘果 1.210±0.09 72.35±13.33 84.32±0.77 88.46±10.41
VC 1.205±0.05 90.67±2.53 88.32±2.59 94.03±9.95
　　1)表 2中数据为 mean ± SD , n = 3
　　广东野生余甘子果汁对羟基自由基的清除力最
高 ,其清除率为(91.50±3.53)%;VC 在同浓度下的
羟基自由基清除率为(88.32±2.59)%,海南栽培余
甘子果汁的羟基自由基清除力最低 , 其清除率为
(84.32±0.77)%;广东栽培余甘子果汁与海南栽培
余甘子果汁相近 ,其清除率为(84.40±4.01)%。
对超氧阴离子自由基的清除力最高的是 VC ,浓
度在 10 mg/mL 时清除率为(94.03±9.95)%;广东
野生余甘子果汁的超氧阴离子自由基的清除力较 VC
稍低 ,其清除率为(92.31±1.30)%;广东栽培余甘子
食品与发酵工业 FOOD AND FERMENTAT ION INDUSTRIES
152　 2006 Vol.32 No.5(Total 221)
果汁超氧自由基清除力最低 ,其清除率为(86.00 ±
10.33)%。海南栽培余甘子果汁的超氧自由基清除
力稍高于广东栽培余甘子果汁 ,其清除率为(88.46±
10.41%)。
2.3　余甘子果汁的抗氧化活性与其活性成分的相关
性分析
余甘子果汁中总多酚含量与其抗氧化活性之间
的相关性分析见图 1 ～ 图 4。
图 1　总多酚含量与还原力的关系
图 2　总多酚含量与超氧阴离子清除力的关系
图 3　总多酚含量与羟自由基清除力的关系
图 4　总多酚含量与 DPPH 自由基清除力的关系
从图 1 ～ 图 4可以看出 ,余甘子果汁中的总多酚
含量与其抗氧化活性之间有显著线性相关性 ,相关系
数在 P <0.01水平上都>0.9。总多酚含量越高的
样品 ,其还原力值越高 ,清除自由基的能力也越强 。
广东野生余甘果汁的总多酚含量最高(204.15 ±
6.85)mg/g ,其抗氧化活性相对较高 ,浓度为 10 mg/
mL 时 ,其还原力为 1.344±0.14 ,羟基自由基和超氧
阴离子自由基的清除率分别为(91.50 ±3.53)%、
(92.31±1.30)%。
采用总多酚含量与其抗氧化活性相关性分析的
方法 ,对余甘子果汁中黄酮类物质的含量与其还原
力 、超氧阴离子自由基 、羟基自由基及 DPPH 自由基
清除率的相关性进行分析 ,结果表明 ,黄酮物质的含
量与抗氧化活性之间的相关性稍差。黄酮物质的含
量与还原力 、羟基自由基清除力 、DPPH 清除力及超
氧阴离子自由基的清除力的相关系数分别为:R2 =
0.824 8(P <0.05)、R2=0.669 6(P <0.05)、R2=
0.754 2(P <0.05)及 R2=0.830 4(P <0.05)。虽
然在很多植物中黄酮类物质起主要的抗氧化作用 ,但
在余甘子果汁中除了黄酮类还有其他的酚类物质一
起组成一个抗氧化体系 , 协同发挥抗氧化作用。
Goshal等人曾报道[ 14] , 从余甘子果实中分离出的 2
种水解单宁油柑酸 A 和 B 有较强的的抗氧化活性。
余甘果汁中抗氧化酚类物质的提取 、分离及各成分间
的协同作用需进一步研究。
采用相同的方法对余甘子果汁中多糖物质的含
量与还原力 、超氧阴离子自由基 、羟基自由基及
DPPH 自由基清除率的相关性分析表明 ,多糖含量与
抗氧化活性之间没有显著的相关性 ,说明多糖对余甘
子果汁的抗氧化能力没有显著的贡献 ,这与肖湘等人
的实验结果[ 15]不相吻合 ,原因可能是原料来源不同
导致的。
余甘子果汁起抗氧化作用的主要是酚类物质 ,它
能够提供活泼的氢质子 ,有效的清除氧自由基;酚类
还能够与过氧化自由基结合成稳定的化合物 ,阻止了
氧化过程中的链锁反应的传播;另外 ,酚类通过对金
属离子络合作用清除自由基。不同余甘子果汁有不
同的酚类物质组成 ,就有不同的抗氧化活性 。体现在
不同的样品对不同的自由基的清除能力不同。比如 ,
广东野生余甘果汁的总多酚含量最高 ,其还原力 、羟
基自由基和超氧阴离子自由基的清除力都是最强的 ,
饮料研究
2006年第 32卷第 5期(总第 221期) 153　
广东栽培果汁虽然多酚含量稍低 ,但其 DPPH 自由基
清除力最高。
3　结　论
余甘子果汁中含有丰富的生物活性物质 。在实
验所用的原料中 ,广东野生余甘果汁的总多酚含量 、
总黄酮含量和水溶性多糖含量最高 ,分别为(204.15
±6.85)mg/g 、(81.11±8.67)mg/g 和(19.78 ±
1.22)mg/g;余甘子果汁具有较强的清除自由基和抗
氧化活性 ,其中广东野生余甘子果汁的还原力 、羟基
自由基的清除率 ,广东栽培余甘果汁的 DPPH 自由基
清除率均高于同浓度的 VC ;余甘子果汁中起抗氧化
作用的主要是多酚类物质 ,余甘子果汁的抗氧化活性
与其总多酚含量之间有显著线性相关性 ,与黄酮物质
的含量之间的相关性稍差 ,与多糖含量之间没有显著
的相关性 。
参 考 文 献
1　Jeena K J , Kuttan R.Antiox idant activity o f Emblica offici-
nalis[ J] . Journal o f Clinical Bio chemistry and Nutrition ,
1995 , 19:63 ～ 70
2　Bar thakur N N.Chemical analy sis of the emblica(Phyllanthus
emblica)and its Po tential as a source[ J].Scientia Ho ticultur-
al , 1991 , 47(1～ 2):99 ～ 105
3　Singh H K , Mishra N , Srivastava A K , et al.Pollination and
fruit set behavio r o f anonla(Emblica officinalis)[ J] . I ndian
Journal of Ag ricultural Sciences , 2001 , 71(1):65 ～ 66
4　Nadkarni K M.Indian Materia Medica[ M].Bombay:Popu-
lar Book Deport , 1994.94 , 481
5　Jeena K. Jose , Girija Kuttan , Ramadasan Kuttan.Antitu-
mour activity of Emblica officinalis[ J] .Journal of Ethnophar-
macology , 2001 , 75:65～ 69
6　 Jeena K , Ramadasan Kuttan.Hepatopro tective activity o f
Emblica officinalis and Chyavanaprash [ J] . Journal o f
Ethnopharmacology , 2000 , 72:135 ～ 140
7　Singleton V L , Rossi J A.Colo rimetry o f total phenolics with
phosphomolybdic-phospho tung stic acid reagents[ J] .Ameri-
can Journal o f Eno logy and Viticulture , 1965 , 16:144～ 158
8　Dewanto V , Wu X , Adom K K , e t al.Thermal processing
enhances the nutritional value of tomatoes by increasing to tal
antioxidant activity [ J] . J Agric Food Chem , 2002 , 50:
3 010～ 3 014
9　Jia Z , Tang M , Wu J.The determina tion o f flavonoid con-
tents in mulberry and their scavenging effects on supero xide
radicals[ J].Food Chem , 1999 , 64:555 ～ 599
10　Oyaizu M.Studies on products of browning reaction:an-
tiox idative activities of products of browning reaction prepared
from glucosamine[ J] . Japanese Journal of Nutrition , 1986 ,
44:307～ 315
11　Shimada K , Fujikawa K , Yahara K T.Antioxidative prop-
erties of xanthan on the auto xidation of soybean oil in cy-
clodex trin emulsion[ J] . Journal of Ag riculture and Food
Chemistry , 1992 , 40:945 ～ 948
12　Halliwell B , Gutteridge J M C.Formation of thiobarbituri-
cacid-reactive substances from deoxy ribose in the presence o f
iron salts:the role of superoxide and hydroxy l radicals[ J] .
FEBS Letters , 1981 , 128:347 ～ 352
13　Beauchamp C , F ridovich I.Superox ide dismutase:improved
assay s and an assay applicable to acrylamide gels[ J].Analy ti-
cal Biochemistry , 1971 , 44:276 ～ 277
14　Goshal S , T ripathi V K , Chauhan S.Activ e constituents o f
Emblica officinalis.The chemistry and antioxidative effects o f
tw o new hydrolysable tannins:Emblicanin A and B[ J] .I ndi-
an J Chem , 1996 , 35:941～ 948
15　肖　湘 , 俞丽君 , 邱玉莹 , 等.油柑多糖的提取与清除氧
自由基作用研究[ J] .中国药学杂志 , 1998 , 33(5):279～
281
Antioxidant Activities and Functional Composition
Content of Selected Phyllanthus emblica L.Fruits Juice
Liu Xiaoli　Zhao Mouming
(College of Light Industry and Food , South China University of Technolog y , Guang zhou 510640 , China)
ABSTRACT　The variability in contents of total polyphenol , to tal flavonoids , polysaccharide and reducing pow er in
the f rui t juice of Phyllanthus emblica w ere evaluated.The result showed that Guangdong w ild emblica had the
highest contents of total polyphenol , f lavonoids , and polysaccharide , as 204.15±6.85 mg of gallic acid equiva-
lents/1g of dry material , 81.11±8.67 mg of rutin equivalents/ 1 g of dry material , and 19.78±1.22 mg of glu-
cose equivalents/ 1 g of dry material , respectively.It also had the highest antioxidative activities(The values of
scavenging activities of hydroxy l radical and supero xide anion and reducing power were 91.50±3.53%, 92.31±1.
30%, and 1.344±0.14 , respectively.).Guangdong cultivated fruits had highest scavenging act ivit ies of DPPH
radical wi th the value of 92.09±1.52%.
Key words　Phyl lanthus emblica L , total polyphenol , flavonoid , poly saccharide , antio xidative act ivity
食品与发酵工业 FOOD AND FERMENTAT ION INDUSTRIES
154　 2006 Vol.32 No.5(Total 221)