全 文 ：第 20卷　第 1期 经　济　林　研　究 Vo1. 20　 No. 1
　 2002年 3月 ECONOM IC　 FOREST　 RESEARCHES Mar. 2002　

余甘子丛生芽诱导和快速繁殖研究
张守英　姚小华　任华东　王开良
(中国林业科学研究院亚热带林业研究所 ,浙江 富阳 311400)
[摘　要 ] 本试验以余甘子嫩芽和嫩枝茎段为外植体 ,在 M S培养基中进行离体繁殖和培养试验。结果表明 ,添加细胞分裂素 BA对
丛生芽诱导有明显促进作用 ,激素组合以 BA与 N AA为最好 ,嫩芽外植体诱导丛生芽的最适培养基为 MS+ BA0. 5 mg /L+
N AA 0. 1 mg /L,分化率达 90%以上 ;嫩枝茎段旅导丛生芽所需的 BA浓度相对高些 ,最适培养基为 M S+ BA 2. 0 mg /L+ NAA 0. 1
mg /L,分化率达 56. 7% ,丛生芽增殖生长培养基为 M S+ BA 0. 1 mg /L+ N AA 0. 1 mg /L+ Na H2 PO4 50 mg /L。 生根培养基为 1 /2
M S+ N AA 0. 25 mg /L+ IBA 0. 25 mg /L,生根率在 30%左右。
[关键词 ] 余甘子 ; 丛生芽 ; 诱导 ; 快速繁殖
[中图分类号 ] S794. 9　　　　　 [文献标识码 ] A　　　　　 [文章编号 ] 1003- 8981( 2002) 01-0011-03
Bud Induction and Fast Propagation in Emblic
ZHANG Shou-ying, YAO Xiao-hua, REN Hua-dong, WANG Kai-l iang
( Resea rch Institute o f Subtr opical Fo rests, CAF, Fuyang , Zhejiang 311400, China)
Abstract: The tender bud and shoo t segment of emblic we re in v itro cultured on th e M S medium. Results indicated
that the addition o f BA had a marked promo ting effect on bud induc tion. The optima l h ormone combina tion w as found
to be BA with N AA. Fo r the bud explant, the optimal medium dosage fo r bud induction w as MS added with 0. 5 mg /
L o f BA and 0. 1 mg / L o f N AA , and the differentiating ra te w as above 90% . And fo r the shoot explant, the
concentra tion o f BA requir ed fo r bud induction w as highe r, and the optima l dosage was M S added with 2. 0 mg /L o f
BA and 0. 1 mg /L o f N AA, the differentia ting rate wa s 56. 7% . Fo r bud multiplication, the medium used was MS
added with 0. 1 mg / L o f BA, 0. 1 mg /L of N AA, and 50 mg /L o f NaH2PO4. Fo r roo t induction, the m edium used
w as 1 /2 M S added with 0. 25 mg / L of N AA and 0. 25 mg / L of IBA, w hich gener ated a ro oting ra te of 30% .
Key words: Emblic (Phyllanthus emblica ) ; bud induction; fast propagation.
余甘子 Phy llanthus embl ica L.为大戟科叶下珠属落叶小乔木或灌木。在我国主要分布于南亚热带地区。
余甘子果是重要的中药材和制药原料 ,树皮是重要的栲胶原料。余甘子在干热河谷、石质山地等生态脆弱区已
作为优良的生态经济兼用造林树种。
目前 ,余甘子良种苗木多采用嫁接方法进行无性繁殖 ,扦插等无性繁殖方法尚没有成功。余甘子离体繁殖
的研究国内外甚少 ,仅限于印度 Sehga l-CB对余甘子胚乳再生三倍体小植株的研究。本文是对余甘子组织培养
进行研究 ,以期为国内外优良品种微体快繁打下基础 ,从而进一步加速优良品种的繁殖和培育 ,缩短育种周期 ,
为今后的遗传改良和生产良种化服务。
1　材料和方法
1. 1　外植体的处理及培养条件
选取: a )余甘子优良成熟种子放在培养皿中进行水培发芽 ,以 15 d左右子叶刚展开的嫩芽及 b) 4、 5月份
[收稿日期 ] 2001-10-15
[基金项目 ] 本研究为“ 948”项目“余甘子优良品种和育种材料引进 ( 96- 4- 15)”的部分内容。
[作者简介 ] 张守英 ( 1968- ) ,女 ,黑龙江加格达奇人 ,助理研究员 ,从事林木组培、细胞培养及原生质体研究工作。
DOI : 10. 14067 /j . cnki . 1003 -8981. 2002. 01. 003
余甘子 1～ 5年生新发的嫩枝为外植体材料 ,先在流水下冲洗干净后 ,用 75%酒精漂洗 30 s,无菌水清洗 3次 ,
再用 0. 15%的 HgCl2溶液浸泡 1～ 2 min,无菌水清洗 3～ 5次 ,然后用无菌滤纸吸去材料表面水 ,接于诱导培
养基上进行芽的分化 ,培养基中加入 3%蔗糖 , 0. 5%琼脂 , pH值为 5. 7,培养温度在 25± 2℃ ,每日辅助光照 12
～ 14 h,光照强度为 1 600～ 2 000 lx。
1. 2　丛生芽诱导的最适培养基筛选
基本培养基选用 MS,进行了激素组合 BA与 NAA、 BA与 GA、 BA与 IAA以及激素 BA不同水平的丛生
芽诱导试验。
1. 3　生根培养
生根培养基用 MS和 1 /2M S,附加 NAA( 0、 0. 25、 0. 5、 1. 0 mg /L )或 IBA( 0、 0. 25、 0. 5、 1. 0 mg /L)组合的
不同培养基配方。
2　结果与分析
2. 1　 BA与 NAA或 GA或 IAA组合诱导丛生芽试验
在芽诱导培养基培养 20 d左右形成丛生芽。 试验表明 (见表 1) ,诱导丛生芽最好的激素组合是 BA与
NAA,外植体材料 a先在基部形成少量的愈伤组织 ,随后产生大量丛生芽 ;材料 b腋芽处分化出丛生芽 ,生长
正常。在 BA与 GA组合的培养基上虽也有丛生芽的发生 ,但数量和质量均不如 BA与 NAA的组合 ,出现了丛
生芽叶子变黄脱落及断枝的现象 ,形态不正常 ,长势衰退。 而 BA与 IAA组合的培养基诱导的丛生芽数量少。
从试验观察得知 ,无论材料 a或材料 b,激素 BA与 NAA的组合诱导丛生芽效果好于 BA与 GA、 BA与 IAA
的组合。
表 1　不同激素组合对余甘子丛生芽诱导的影响
激素组合 外植体数 丛生芽发生数 /丛 丛生芽发生率 /%
BA0. 5+ N AA0. 1 30 27 90. 0
BA0. 5+ GA0. 1 30 19 63. 3
BA0. 5+ IAA0. 1 30 17 56. 7
表 2　 6- BA浓度对余甘子丛生芽诱导的影响
BA浓度 /mg· L- 1 0 0. 5 1. 0 2. 0
外植体接种数 /个 30 30. 0 30. 0 30. 0
材料 a丛生芽发生率 /% 0 90. 0 73. 3 60. 0
材料 b丛生芽发生率 /% 0 26. 7 43. 3 56. 7
2. 2　 BA浓度对余甘子丛生芽诱导的影响
外植体材料培养于含 BA的培养基中约 20 d
左右 ,大多形成由多数芽组成的丛生芽群或腋芽
分化出丛生芽。而不含 BA的培养基中只有高生
长 ,没有丛生芽的分化 ,说明 BA对余甘子的丛生
芽诱导具有促进作用。 从表 2结果看 ,材料 a在
BA为 0. 5 mg /L时 ,丛生芽发生率最高 ,最适培
养基为 MS+ BA0. 5 mg /L+ N A A 0. 1 mg /L;材
料 b的丛生芽发生数随 BA浓度的增高而增加 ,
最适培养基为 MS+ BA2. 0 mg /L+ N AA0. 1
mg /L,但材料 b比材料 a的丛生芽发生率低 ,说
明材料 b比材料 a诱导丛生芽的难度大。
表 3　余甘子根系的诱导试验
序号 基本培养基
植物激素种类及质量浓度
N AA /mg· L- 1 IBA /mg· L- 1
嫩枝数
/个
生根数
/个
生根率
/%
1 0 0. 25 20 4 20
2 0. 25 0 20 4 20
3 1 /2M S 0. 25 0. 25 20 6 30
4 0. 50 0. 50 20 3 15
5 1. 0 1. 0 20 0 0
6 0 0. 25 20 0 0
7 0. 25 0 20 0 0
8 MS 0. 25 0. 25 20 0 0
9 0. 50 0. 50 20 0 0
10 1. 0 1. 0 20 0 0
余甘子每培养 20 d左右可增殖大约 2倍 ,枝长大都在 2 cm以上 ,生长较正常 ,叶嫩绿。但也发生有些嫩枝
基部愈伤化严重、叶子变黄脱落和
断枝的现象 ,这可能因为外源激素
在植物体中的积累造成的 ,为了获
取大量优质的丛生芽 ,试验采取降
低 细 胞 分 裂 素 浓 度 和 添 加
NaH2 PO4两种方法来提高丛生芽
的质量和数量 ,情况有所好转。通过
大量试验 ,最后确定丛生芽增殖生
长的最好培养基为 M S+ BA0. 1
mg /L+ N AA0. 1 mg /L NaH2 PO4
50 mg /L。
2. 3　根诱导
剪取粗壮的 3 cm左右的嫩枝
12　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　经　　济　　林　　研　　究　　　　　　　　　　　　　　　　　 20卷　
培养于生根培养基中进行生根试验 , 20 d左右形成愈伤组织 ,再经过 30 d左右从愈伤组织分化形成根 ,根较粗
壮 ,主根上附有须根。从表 3可以看出 ,低无机盐含量的培养基有利于余甘子的生根 ,植物激素 NAA0. 25 mg /
L和 IBA0. 25 mg /L的配合使用比单独添加 NAA或 IBA生根率高 ,余甘子生根的最适培养基为 1 /2M S+
N AA0. 25 mg /L+ IBA0. 25 mg /L ,生根率只有 30%左右。从试验观察看 ,根是从愈伤组织团再分化形成的 ,比
较容易脱落。 为了降低愈伤组织的形成数量 ,提高根的质量 ,正在进行进一步的探讨试验。
3　小结与讨论
( 1)余甘子的嫩芽和嫩枝茎段外植体在含 BA的培养基上 ,分化出丛生芽 ;而不含 BA的培养基中 ,没有丛
生芽的分化 ,说明细胞分裂素 BA对芽的分化起关键作用。 相对来说 ,嫩芽诱导丛生芽要求 BA的浓度比嫩枝
茎段的低 ,也较容易 ,这可能因为材料越年幼 ,繁殖的潜力越大。
( 2)余甘子的生根率很低 ,需进一步深入研究作为生根外植体的条件、影响生根的因素及移栽的条件。
[参　考　文　献 ]
[1 ]　姚小华 ,叶金好 ,盛能荣 ,等 .余甘子优良类型选择 [ J] .林业科学研究 , 1993, 3: 299～ 305.
[2 ]　崔永忠 ,陈玉德 ,郑德蓉 .余甘子繁殖试验初报 [ J] .林业科学研究 , 1997, 10( 1): 93～ 95.
[3 ]　姚小华 ,盛能荣 .我国余甘子良种现状和选育重点探讨 [ J] .经济林研究 , 1999, 17( 1): 9～ 12.
[4 ]　 Sehgal-CB, Sunilia-Khurana, Syed-Abbas-N, et al. In vi t ro regeneration of t riploid plan tlet s f rom th e endosperm of Emblica of ficinali s
Gaertn [ J] . Advances-in-Ag ricul tu ral-Research-in-India, 1994, 2: 1～ 19.
[5 ]　陈振光 .果树组织培养 [M ].上海:上海科学技术出版社 , 1987.
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