全 文 ：中国药业 China Pharmaceuticals ·21·
2011年第 20卷第 14期
苗族药材飞龙掌血药材指纹图谱研究＊
杨 亮 1，郭 晶 2，范宝成 1
(1． 贵阳昊臻药物开发有限公司，贵州 贵阳 550025; 2． 贵阳市宏信药业职业学校，贵州 贵阳 550025)
摘要:目的 建立飞龙掌血药材的高效液相色谱 ( HPLC )指纹图谱，为科学评价及有效控制飞龙掌血药材质量提供可靠方法。方法 采用
以十八硅烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱(200 mm × 4． 6 mm，5 μm)，以乙腈 － 0． 1%磷酸水溶液(20 ∶ 80)为流动相，测定波长 221 nm，
流速 1． 0 mL / min。结果 分析了 10 批不同时间不同产地的道地飞龙掌血药材，建立了飞龙掌血药材的高效液相色谱指纹图谱，确立了
5 个共有峰。结论 所用方法准确可靠、重复性好，可作为飞龙掌血药材的质量控制方法。
关键词:飞龙掌血;白屈菜红碱;指纹图谱;高效液相色谱法
中图分类号:R284． 1;R282． 71 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2011 )14 － 0021 － 02
Study on Fingerprint Chromatography of Cortex toddalia by HPLC
Yang Liang1， Guo Jing2， Fan Baocheng1
( 1． Guiyang HaoZhen Pharmaceutical development Co．，Ltd． Guiyang， Guizhou，China 550025;
2． Guiyang HongXin Pharmaceutical vocational schools， Guiyang， Guizhou，China 550025 )
Abstract:Objective To develop HPLC for determination of chelerythrine in Cortex toddalia Toddalia asiatica ( L． ) lam． for identifying and
evaluating its quality． Method The separation was performed on a Phenomenex C18 column (200 mm × 4． 6 mm，5 μm) with acetonitrile －
0． 1% (w ) phosphonic acid (20 ∶ 80 ) as the mobile phase at a flow rate of 1． 0 mL /min． The detective wavelength was set at 221 nm．
Results Ten batches of Cortex toddalia samples from different habitats and harvested in different times were analyzed． HPLC fingerprint of
medicinal material of Cortex toddalia was established preliminarily． Five characteristic peaks were confirmed and the fingerprints of different
samples were compared by similarity evaluation software． Conclusions This method shows high precision and good repeatability，it can be
used to assess the quality of Cortex toddalia．
Key words: cortex toddalia; chelerythrine; fingerprint; HPLC
核的临床对比观察 [ J ] ． 基层医学论坛 (B版 ) ，2007，11 (3 ):216 － 217．
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1996，156 (6 ):661 － 666．
(收稿日期:2010 － 12 － 14 )
表 1 飞龙掌血药材的来源、采集时间
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
样品批号
HZZ20090001
HZZ20090002
HZZ20090003
HZZ20090004
HZZ20090005
HZZ20090006
HZZ20090007
HZZ20090008
HZZ20090009
HZZ20090010
HZZ20090011
来源
贵州省大方县
贵州省大方县
贵州省织金县
贵州省织金县
贵州省贵阳市高坡乡
贵州省贵阳市高坡乡
贵州省贵阳市息烽县
贵州省贵阳市息烽县
贵州省罗甸县
贵州省罗甸县
贵州省兴义市
采集时间
2009 － 08
2010 － 03
2009 － 08
2010 － 03
2009 － 08
2010 － 03
2009 － 08
2010 － 03
2009 － 08
2010 － 03
2009 － 08
飞龙掌血为芸香科植物飞龙掌血 Toddalia asiatica ( L． ) Lam．
的干燥根皮，味微苦、辛、温，具有祛风止痛、散瘀止血、消肿解毒的
功效，用于治疗风湿痹痛、胃痛、跌打损伤、吐血、刀伤出血、痛经、
闭经、牙龈出血、口舌生疮 [ 1 ]。关于其指纹图谱的研究至今尚未见
报道。本研究旨在通过对其指纹图谱研究，为飞龙掌血药材建立严
格的质量控制方法，从而为其临床疗效提供保证。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪，包括 UV － 200Ⅱ型紫外可变波长检测器、
P － 200 高压恒流泵 (大连依利特科学仪器有限公司);Easy － 3000
色谱工作站(中国科学院，浙江大学);TU － 1800SPC型紫外可见分
光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);AUW120D型电子天
平(日本岛津株式会社)，101 － 2 型电热鼓风恒温干燥箱(上海市崇
明实验仪器厂);AS3120 型超声清洗仪(天津津腾实验仪器厂)。乙
腈(色谱纯，天津科密欧化学试剂公司);磷酸(分析纯，贵阳磷山化
工集团);白屈菜红碱对照品(纯度为 97． 3%，中国药品生物制品检
定所)。飞龙掌血药材分别采自贵州省的贵阳高坡乡、息烽县、织金
县、兴义市、大方县及罗甸县，见表 1。
2 方法和结果
2．1 色谱条件 [ 2 ]
色谱柱:迪马C18 柱(200 mm × 4． 6 mm，5 μm);流动相:乙腈－
0． 1%磷酸水溶液(20 ∶ 80); 流速:1． 0 mL /min; 柱温: 室温; 进样
药物研究
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
＊贵阳市科技局 2009年科技计划项目，项目编号:筑科农字[ 2009 ]第 1号。
中国药业 China Pharmaceuticals·22·
2011年第 20卷第 14期
14
． 9
00
4 12 22
图 2 白屈菜红碱对照品图谱
表 3 飞龙掌血药材 HPLC指纹图谱各共有峰的相对峰面积
峰 1
峰 2
峰 3
峰 4 ( s )
峰 5
1
1． 226
2． 095
0． 348
1． 000
0． 628
2
1． 198
1． 991
0． 321
1． 000
0． 558
3
1． 254
1． 828
0． 365
1． 000
0． 597
4
1． 306
1． 985
0． 336
1． 000
0． 625
5
1． 761
4． 320
0． 250
1． 000
0． 896
6
1． 502
3． 780
0． 460
1． 000
0． 667
7
1． 707
3． 644
0． 229
1． 000
0． 663
8
1． 690
3． 747
0． 227
1． 000
0． 631
9
0． 794
2． 421
0． 781
1． 000
0． 800
10
0． 954
2． 437
0． 535
1． 000
0． 682
11
0． 163
1． 644
0． 315
1． 000
0． 505
38． 13
35． 25
42． 96
0
16． 42
表 2 飞龙掌血药材 HPLC指纹图谱各共有峰的相对保留时间
峰 1
峰 2
峰 3
峰 4 ( s )
峰 5
1
0． 322
0． 585
0． 807
1． 000
2． 123
2
0． 333
0． 607
0． 823
1． 000
2． 096
3
0． 329
0． 602
0． 823
1． 000
2． 078
4
0． 326
0． 598
0． 823
1． 000
2． 046
5
0． 335
0． 602
0． 827
1． 000
2． 110
6
0． 334
0． 603
0． 825
1． 000
2． 103
7
0． 335
0． 603
0． 828
1． 000
2． 103
8
0． 335
0． 604
0． 833
1． 000
2． 099
9
0． 339
0． 606
0． 819
1． 000
2． 124
10
0． 335
0． 603
0． 818
1． 000
2． 102
11
0． 343
0． 612
0． 822
1． 000
2． 155
1． 742
1． 114
0． 805
0
1． 303
810． 70
400． 51
－ 18． 51
0 34． 74
图 1 飞龙掌血药材指纹图谱
量:10 μL;测定波长:221 nm。
2．2 溶液制备
精密称取白屈菜红碱对照品 0． 010 43 g，置 100 mL量瓶中，用
甲醇溶解并稀释至刻度，得 0． 104 3 g / L 的对照品母液;精密量取
此溶液 0． 6 mL，置 10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理制成约
为 0． 006 g / L 的对照品溶液。取飞龙掌血药材粉末约 2 g，精密称
定，置具塞锥瓶中，加甲醇 100 mL，精密称定，超声提取 30 min，称
重，用甲醇补足质量，滤过，得供试品溶液。
2．3 方法学考察
精密度试验:取飞龙掌血药材粉末(批号为 HZZ20090001)，依
法制备供试品溶液，连续进样 6次。结果面积百分比不低于 10% 的
共有峰相对峰面积的 RSD ＜ 2% ( n = 6 )，表明仪器的精密度良好。
稳定性试验:取飞龙掌血药材粉末(批号为 HZZ20090001)，依
法制备供试品溶液，分别于 0，2，4，8，12，24 h 时进样测定。结果面
积百分比不低于 10% 的共有峰相对峰面积的 RSD ＜ 2% ( n = 6 )，
表明供试品溶液在 24 h内稳定。
重复性试验:取同一批样品粉末(批号为 HZZ20090001)5 份，
依法制备供试品溶液，进样测定。结果面积百分比不低于 10% 的共
有峰相对峰面积的 RSD ＜ 2% ( n = 5)，表明方法重现性良好。
2．4 指纹图谱建立
2． 4． 1 共有指纹峰标定
取不同产地和批次的样品(11 批)，依法制备供试品溶液，进
样，绘制指纹图谱。采用国家药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱
相似度评价系统的操作规范软件 (版本 2004A)，标定其中 5 个色
谱峰为共有指纹峰(图 1)，其中 4 号峰为参照物质白屈菜红碱峰
(图 2)，其余共有峰与 4(S)号峰相对保留时间与相对峰面积见表 2
及表 3。
2． 4． 2 相似度评价
根据共有指纹峰的标定结
果，计算相似度。11 批飞龙掌血
药材与对照指纹图谱的相似度
结果均大于 0． 90，表明各批次
药材具有良好的一致性，本方
法可用于综合评价药材的整体质量。
药物研究
t / min
3 讨论
曾考察了 95%乙醇和甲醇两种溶剂，甲醇的提取效果明显较
好;并考察了甲醇超声和水浴回流两种提取方法，结果两者无明显差
别;提取时间考察了超声15 min，30 min及 60 min，前者效果较差，后
两者无明显差别。因此选择超声提取 30 min。
曾检测了 315，274，221 nm波长下的药材指纹图谱。比较分析
发现，检测波长为 221 nm时，色谱峰较多，且各色谱峰能较好地分
离，因此选 221 nm作为检测波长。本试验比较了飞龙掌血药材根、
茎及叶，发现飞龙掌血药材根、茎及叶的指纹图谱完全不一致，这
可作为本药材药用部位确定的依据。
通过全面系统研究建立的飞龙掌血药材指纹图谱，具有稳定
性、重现性好的特点。本研究有助于飞龙掌血药材的标准化种植和
质量控制，并可在贵州省中药材、民族药材质量标准基础上对飞龙
掌血药材的鉴别及质量控制起到一定的补充作用，有助于全面、科
学地评价和控制飞龙掌血药材的质量。
作者简介:杨亮(1972 －)，男，贵州贵阳人，硕士研究生，主要
从事新药研发及药学技工教育工作，(电话)0851 － 8292192(电子
信箱)hongxinzhixiao@ 163． com; 郭晶(1974 －)，女，辽宁铁岭人，硕
士研究生，主要从事新药研发及药学技工教育工作，(电话)0851 －
8293192(电子信箱)xindao888@ sohu． com。
参考文献:
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(收稿日期:2010 － 05 － 13 )
样品编号
峰号
RSD
(% )
样品编号
峰号
RSD
(% )
A
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1 t / min