全 文 ：天然药物紫地榆不同溶剂提取物对牛切牙脱矿的动力学研究
蓝 海 ,张星星 (大理学院药学院 ,云南大理 671000)
摘要 [目的 ]比较天然药物紫地榆不同溶剂提取物对牙齿脱矿速率的影响 ,优化紫地榆的提取方法。 [方法]通过动力学试验比较紫
地榆经不同溶剂提取物处理牛切牙后抗酸脱矿作用的强弱。 [结果]脱矿速率顺序为醇提物组<丙酮提取物组<水提物组<正丁醇提
取物组 <空白对照组。 [结论]紫地榆的醇提物组抗龋效果最好。
关键词 紫地榆;溶剂;脱矿;动力学
中图分类号 S567.9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)32-18124-02
EffectsofDiferentGeraniumstrictipesR.KunthExtractsontheDemineralizationofBovineIncisor
LANHaietal (DepartmentofPharmacy, DaLiUniversity, Dali, Yunnan671000)
Abstract [ Objective] TocomparethecariostaticefectofdifferentextractsGeraniumstrictipesR.Kunthofinvitro.[ Methods] Kineticsex-
perimentwasusedtocomparetheefectsofanti-demineralizationonBovineincisordealtwithdiferentextractsofGeraniumstrictipesR.Kunth.
[ Results] ThereweresignificantdifferenceontheeffectsofteethdemineralizationamongGeraniumstripeR.Kunthofdifferentextractsgroup,
therateorderofdemineralizationwasalcoholextractgroup
tipesR.Kunthcanbepriority.
Keywords GeraniumstrictipesR.Kunth;Solvents;Demineralization;Kinetics
基金项目 云南省大理州科学技术局基金项目。
作者简介 蓝海(1964-), 女 ,云南大理人 ,教授, 从事生物无机化学
研究。
收稿日期 2010-08-23
紫地榆是牻牛儿苗科老鹳草属植物 GeraniumtrictipesR.
Kunth的根 [ 1] ,俗称 “隔山消 ”,是一种云南常见的中药材 ,在
白族和彝族民间长期用作厌食症的治疗 ,同时具有明显的止
血 、止痢功能 [ 2] 。研究表明 ,紫地榆中含有鞣酸 [ 3] ,具有抗酸
防龋的作用 [ 4] ,是紫地榆的重要活性成分之一。
迄今为止 ,天然药物紫地榆一般采用水或甲醇提取 [ 5] ,
其他溶剂的提取还未见报道。笔者通过恒 pH值法进行紫地
榆不同溶剂提取物对牙齿的脱矿动力学研究 ,比较其不同溶
剂提取物对牙齿脱矿的影响 ,以期为选择提取紫地榆有效成
分的溶剂提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 药品 、试剂 乙酸(AR);KCl(AR);乙醇(AR);乙醚
(AR);正丁醇(AR);丙酮(AR)。紫地榆 , 2008年 4月购于
大理云济堂大药房 ,由大理学院药学院马晓匡教授鉴定。
1.2 试验仪器 雷磁 ZDJ-4A自动电位滴定仪(上海精科仪
器有限公司);雷磁温度补偿电极(上海精科仪器有限公司);
雷磁 E-201C型 pH复合电极(上海精科仪器有限公司);磨
牙打磨机(韩国 SAEYANG公司);超级恒温水浴锅(上海实
验仪器厂有限公司);IKAAlbasic分析用研磨机(广州仪科
实验技术有限公司);SY5200DH超声清洗器(上海声源超声
波仪器设备有限公司);80-2台式低速离心机(上海医疗器械
有限公司手术器械厂);旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);
SIEMENS冰箱(博西华家用电器有限公司)。
1.3 材料处理 将紫地榆药材洗净置 80 ℃干燥至恒重 ,粉
碎成粉末 ,准确称取 20 g于干净烧杯中 ,加 200ml超纯水超
声提取 40 min,离心收集上清液 ,用旋转蒸发仪浓缩成浸膏 ,
把浸膏用 200 ml超纯水溶解 ,即为紫地榆水提物。其他溶剂
(乙醇 、丙酮 、正丁醇)提取物制备方法同上。
市场购买新鲜拔出的牛切牙 50颗 ,去除牙根 、软组织及
冠髓 ,用磨牙打磨机打磨去除釉质表面的色素菌斑 ,用 0.9%
的生理盐水超声 40 min,自然晾干 。随机将 50颗牙齿分为 5
组 , 10颗 /组 ,分别用紫地榆水提物 、80%醇提物 、丙酮提物 、
正丁醇提物 、超纯水浸泡 48 h,晾干 ,再用 95%乙醇浸泡 15
min,无水乙醇浸泡 15min(2次),无水乙醚浸泡 15min,进行
梯度脱水 ,在空气中过夜干燥 ,用研磨机将牛切牙粉碎至颗
粒粒径 20目 ,备用。
1.4 脱矿试验 脱矿液的制备:0.15 mol/L的 KCl,用乙酸
调 pH值为 4.00[ 6] 。试验开始时分别准确称取紫地榆组牙
粉 10mg于 50 ml脱矿液中 ,置于(37±0.1)℃恒温 ,用自动
电位滴定仪向脱矿液中滴加 0.100 7mol/L的乙酸 ,恒 pH值
法控制 pH值为 4.00,每 5 min定时记录乙酸的加入量 ,绘制
消耗乙酸体积与时间的关系曲线 ,即为紫地榆组水提物组牙
粉的脱矿动力学曲线 ,同法试验操作并绘制其他溶剂提取物
组牙粉的脱矿动力学曲线 ,每组试验分别重复 3次。
2 结果与分析
2.1 不同溶剂提取组的乙酸消耗体积比较 由表 1可知 ,
80%乙酸提取组消耗乙酸体积最少 ,与空白对照组比较差异
极显著(P<0.01);而水提物组 、丙酮提取组和正丁醇提取组
显著低于空白对照组(P<0.05)。
表 1 不同提取组的乙酸消耗体积
Table1 Aceticacidconsumptionvolumeindifferentextractiongroup
ml
组别
Groups
乙酸消耗体积
Aceticacid
consumptionvolume
空白对照组 Blankcontrolgroup 0.834±0.021
水提组Waterextractsgroup 0.625±0.056＊
80%乙醇提取组 80% alcoholextractsgroup 0.442±0.010＊＊
丙酮提取组 Acetoneextractsgroup 0.623±0.021＊
正丁醇提取组 n-butanolextractsgroup 0.665±0.075＊
注:＊表示与对照组比较差异显著(P<0.05);＊＊表示差异极显著
(P<0.01)。
Note:＊standsforsignificantdiferencecomparedwithcontrolgroup(P<
0.05);＊＊standsforextremelysignificamtdiference(P<0.01).
责任编辑 王强 责任校对 况玲玲安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(32):18124-18125
2.2 脱矿动力学结果 绘制消耗乙酸体积与时间的关系曲
线 , 5组牙粉脱矿动力学曲线如图 1所示。水提组 、80%乙醇
提取组 、丙酮提取组 、正丁醇提取组和空白对照组的线性回
归方程分别为 Y=0.005 1X+0.015 3, Y=0.003 7X-0.000 8,
Y=0.005X+0.050 7, Y=0.005 3X+0.044 8, Y=0.007X+
0.024 7;相关系数 r分别为 0.996 4、0.999 8、0.996 7、0.997 7
和 0.998 4,表明线性关系良好。由图 1可知 ,乙酸消耗越多 ,
脱矿速率越快 。因此 ,脱矿速率由低到高依次是 80%乙醇提
取组 、丙酮提取组 、水提组 、正丁醇提取组 、空白对照组 。因
此 ,抗酸作用最强的是乙醇提取组。
图 1 脱矿动力学曲线
Fig.1 Kineticscurveofdemineralization
3 结论与讨论
该试验结果表明 ,紫地榆不同溶剂提取物的抗酸作用不
同 ,乙醇提取组的抗酸作用最强;4种溶剂中 ,极性大小顺序
为水 >乙醇 >丙酮 >正丁醇;提取效率由高到低依次为乙
醇 、丙酮 、水和正丁醇 。一般情况下 ,极性越强 ,提取的鞣酸
含量越高。可见 ,抗酸效果并不与溶剂的极性呈正相关 ,说
明起作用的物质并不一定只与鞣酸有关 ,还可能与其他成分
有关 ,此外 ,不同溶剂提取物之间所含的活性成分可能不同。
今后还应对提取物中的其他成分进行进一步分析 ,为紫地榆
抗龋作用提供更有力的证据 。
参考文献
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(上接第 18123页)
表 3 生根结鳞茎最佳方案验证试验结果
Table3 Thevalidationtestresultsoftheoptimumschemeoftherootingandbulbletinduction
处理号
TreatmentNo.
培养基
Medium
接种数∥个
Inoculatednumber
结鳞茎数∥个 /处理
Bulbletnumber
根数∥条 /株
Rootnumber
1 NAA0.33mg/L+IBA0.27mg/L+IAA0.30mg/L 30 48.0 18.67
2 NAA0.50mg/L+IBA0.50mg/L+IAA0.50mg/L 30 30.0 12.33
3 NAA0.10mg/L+IBA0.10mg/L+IAA0.10mg/L 30 35.5 4.50
注:基本培养基为 1/2MS, 1号处理为最佳方案。
Note:Thebasicmediumwas1/2MSandtreatment1wastheoptimumscheme.
优结果。笔者应用该设计探索 NAA、IBA和 IAA3个因子对
龙牙百合组培苗生根 、结鳞茎的影响 ,不仅减少了工作量 ,而
且大大提高了工作效率及试验的科学性和合理性。
(2)该试验通过建立多项式回归方程 ,研究 NAA、IBA和
IAA对龙牙百合组培苗生根 、结鳞茎影响的大小 、互作效应
大小的关系发现 ,在 NAA、IBA和 IAA3因子中 , IAA浓度变
化对龙牙百合继代芽生根 、结鳞茎的影响最大 ,浓度为 0.3
mg/L时的生根 、结鳞茎数最多 。应用 Qbasic寻优 ,得到龙牙
百合组培苗生根 、结鳞茎数量以及合理使用激素浓度的最佳
组合方案为 1/2MS+NAA0.33 mg/L+IBA0.27 mg/L+
IAA0.30mg/L。该结论在理论上和实践上具有重要的参考
价值和指导意义 。
参考文献
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1812538卷 32期 蓝 海等 天然药物紫地榆不同溶剂提取物对牛切牙脱矿的动力学研究