全 文 ：(总 1 8期 ) 沈 阳 药 .学 院 学 报
一 .一 户一 一 - - 刁 - ~ ~一一 ~- ~—— —
中药白鲜皮活性成分的研究
康胜利带 王素置料 朱廷儒料
天 然药片分研 究室
摘要 :白鲜皮 ( Di c a tm nus d“ s yc a r pus Tu c r z.的根皮 )是 我国传统中药 , 70 年
代曾有报导表明白鲜皮具有抗菌 (包括抗结核菌 ) , 抗肿瘤活性 。 本文报导了依据
伊红染色试验确认其非极性提取物具有体外抗癌活性 , 并从其乙醚提取物和其挥发
油部分共分离得到九个化合物 。 根据其理化性质和光谱分析鉴定了其中的五个化合
物— 稗酮 ( F r a 父 i n e l l o n e ) (也得自其挥发油中 ) , 日一谷幽醇 , 白鲜碱 ( D i e t母平 i n e ) ,黄柏酮 ( o b a e u n o n e ) , 和柠檬苦素 ( L i n l o n i n ) 。 药理实验表明手岑酮 , 白 鲜 碱
和得 自挥发油的一种无色透明液体 ( 化合物 )I 具有体外抗癌活性 。
白鲜皮为芸香科白鲜属植物自鲜 D i e t a m n u s d a s y e o r p u s T u r e z . 的根皮 ( ` ) 2 ) ,为我 国常
用中药 。 其主要功用为清热解毒 , 内服可治疗鼠凄以 及中医诸黄疽病症 。 ( “ ) 。 70 年代曾报导
白鲜皮对皮肤化脓性溃疡 ( 4 ) , 结核性脓胸 t s ) , 和晚期肺癌 ( “ )的治疗有一定的效果 , 然而 对白
鲜属植物化学 成分和其生理活性的系统研究 , 尚未见报导 。
国外对白鲜属植物的研究虽然较早也较多 , 但大部分研究是对其化学成分的研究 , 共从
该属中分离到 37 个单组分 。 该属植物中分布最广的为柠檬苦素类化 合 物 ( L i m o n io ds ) ,
和映喃咬琳类生物碱 ( F ur o q u i n ol i n 。 ) ; 近年来 的研究表明 所 含 生 物 碱之一 , 菌 芋 碱
( S k i m m i a n i n e ) 具有镇痛和中枢抑制 ( 7 )作用以 及镇静和降低体温的作用 ( “ ) 。
我们通过伊 红染色法确认白鲜皮的非极性溶剂提取物具有体外抗癌活性 , 蒸馏所得挥发
油也具有这种活性 , 故采用 乙醚提取法 , 对白鲜皮内可能具有体外抗癌活性的成分进行初步
的分离 。
分离得到三个柠檬苦素类化合物— 体酮 、 黄柏酮和柠檬苦素 , 都含有 内l酉旨和日一取代吠喃环结构 , 所 以在 I R和 ’ H N M R谱中都含有相类似的吸收峰 。 如在 I R谱中都可见到 1 6 0 0 ,
1 5 0 0
, 1 4 5 0 , 5 7 5 e m
一 `等日一取代吹喃环的吸收一峰 , 前面的吸收较弱 , 甚至消失 ,但 8 7 5 e m 一 ’
峰则比较强 。 黄柏酮和柠檬苦素都含有 C 4偕二甲基 , 在绘制 ` H N M R谱时 , 若用 C D C I。做溶
剂 , 偕二甲基的化学位移相等 , 改用 C F 。 C O O D 做溶剂 , 则由于产生顺磁性位移而化学位移
不等 。 另外 , 柠檬苦素类化合物在后者中的溶解度也较大 。
白鲜碱为一弱碱性生物碱 。 在精制过程中发现该碱具有升华性 (这一性质 尚米见文献报一一~ 一 ~ ~ - 一~一 - ~ ~ 曰. 研究生 。个 * 指导教 `J月J
DOI : 10. 14066 /j . cnki . cn21 -1349 /r . 1983. 18. 002
呀 ), i迫过用乙醇垂结品所得微黄色晶休 与减压 升华听得自色针状晶体的 I R和 ` 以N M R 谱的
比较以及薄层鉴识 , 确证二者完全相同 , 故可认为白鲜碱有一定的升华性 , 并利用减厂位升华
法可得到较为纯净的样品 。
对于白鲜属植物挥发油的研究 , 国外有些报导 , 但均非根皮挥发油成 分 的 研 究 。 通过
G C一 M S分析 , 我们认为根皮挥 发油中不含有文献所报导的按 树 脑 ( l , 8一 C i en ol e M w ,
1 5 4 )
, 声了香脑 ( A n e t h o l M w . 2 4 8 ) , 和爱草脑 ( E s t r a g o l e M w 1 4 5 ) 一 , 而这些 成 分是 `
地上部分挥发油的主要组分 ( , )。 通过挥发油的提取分离 , 确认格酮为根皮挥发油 的 主 要组
分之一 。 另外 G C一 M S仪所给各组分质谱图的分析 , 初步认为根皮挥发油中含有 日一旅烯 ,
刃于烯 , 对伞花烧及 3 、 7 、 7一三甲基一双环 (3 、 1 、 l) 一庚烯 (2 ) 。
伊红实验结果表明手岑酮 , 白鲜碱和一种得自挥发油的无色透明液体 (化合物 l) , 具有体
外抗癌活性 。 然而样酮和白鲜碱在抗癌活性方面的研究尚未见报导 。 近年来对白鲜碱们研究表
明 , 在紫外光照射下 , 白鲜碱能与 D N A 双螺旋结构中的哦咤碱基形成加成物 (l “ ) , 此性质与牛皮癣治疗药物 : 一甲氧补骨脂素相类似 ; _ 所 以有可望成为牛皮癣治疗药物 。 至于丽谕和白鲜
碱在体外所呈现 的抗癌活性尚需进一步的体内实验来验证 。
由于白鲜皮为清热解毒药物 , 临床也有用于治疗皮肤化脓性溃疡 , 所以也曾对自鲜皮的
不同溶剂提取物进行体外抑菌试验 , 但结果表明白鲜皮的乙醚 、 乙醇和水提取物对金黄色葡
萄球菌 、 大肠杆菌 、 绿脓杆菌和草分枝杆菌均不呈现体外 抑制作用 。
实 验 分 部
实验材料 : 白鲜皮购 自沈阳药材公可 , 产地木溪 。
实脸仪器 : I R一 2 7G红外分光光度计 , 日立型 20 0一 20 紫外分光光度仪 , R 。 2型核磁共振
仪 , P e r k i n , E l m e r旋光仪 , J M S 。 30 0一 J M S A ; 2 0 0 0色谱质谱计算机联用仪 。
实脸方法及步葬 :
自鲜皮粉 _ 1 0公卜 f
乙醚回流提取 (索氏法 )
析
(化 合物 E
乙醚提取液
】出物
F混合物 )
硅胶
石油醚洗脱物
1柱 层 (工 0 0一 1 4 0}二 l)
{ 干法装柱 , 石油醚 :
} 乙酸乙酷梯度洗脱
药渣
!滤手夜 (浓缩 )
}
乙醚总提取物 ( 油状 ) 亡勺5 0() 川 !
1
硅胶 3 0 0克 ( 1 0 0一 1 4 0 目 ) I吸环士…依次分别用石油醚 、 乙醚 、 甲醇
{连续提取 (索氏法 )
} !乙醚洗脱物 甲醇洗脱物
硅胶柱层 ( 1 0 0一 1拍目 ) 」 二
{
} 干法装柱 , 氯仿 : 甲醉
梯度洗脱
}化合物 A
( 9 5
:
5 )
}
f匕簇宁物 C
( 8 5 : 1 5 )
化合物 E
( 1 0 0
: 0 )
D5)
l
物:5
合(9化郁:l5jl
脸(85
乙醚
洗脱
氛仿洗脱物
, 硅胶 H 加压柱
(甲 ]_ , 5 0 e , n )
柱前压 ( 1 k g / c ; n “ )
化台物 F 化合物 G
( 1 0 0
, 0 ) ( 8 5
,
1 5 )
{氯仿洗脱物
l
硅胶 H柱层析
…干法装柱
{苯
: 乙酸乙嗽 8 : 2 )
化合物 B 化合物 C 【 1了匕合物 E 化合物 H
其挥发油采用水蒸汽蒸馏法 , 连续蒸馏近 2。小时· , 所得 挥 发 油 为墨绿色油状物 d器-
。 . 。6 7 8 , 〔。 〕节= 、 3 8 . 。 6 3 ( 乙醚 ) : , : 。 = 1 . 5 1 5 3
挥发油于室温放置即可析出脑晶 (性质同化合物 A ) , 脱脑油经硅胶多次柱层析 , 得一
无色透明浪体 , 经气相层析检测 (热 分 ) 为单一组分 , 氢焰检测尚有微量 杂质 , 为化合物 I ,
结构待定 。
在固定相为 8 % 甲摧硅油 l , 载气 X : , 柱温 : 70 一片 o 、 C , 气化温度 2 2 o C 条件下 , 可得 10
组分图 ,采用 P E G 一 2 0玻璃毛细管柱 ,程 序升温 10 0一 20 0℃ , 气化温度 2 70 c , 则得 27 组 分图 。
各化合物的鉴定 :
13 一
化合物A :无味 , 可溶于乙醇 、 氯仿等 有机 溶媒 , 针 状结晶 (乙醇 ) m 、 p . ’ 1了O℃ ,
2 O
〔a 〕D
1 7 4 5 ,
= 一 44 . 7 (
1 7 4 0 , 1 6 7 4
7
.
5 ( Z H
, 宽 )
1 %
,
1 2 0 4
6
.
3 8 ,
乙醇 ) , U V :
1 0 4 0
,
10 2 0
M
e O H
工U a X (
n m )
, 2 2 1 ; I R
:
K B ;
丫 m a X ( e m
一 `
)
, 3 1 4 0 ,
,
8 7 0
, ,
H N M R ( g OM e
,
C D C 1
3 .
T M S )
, 乙 ( P P m ) 、 ,
( I H
, 宽 ) , 4 . 9
可确定化合物 A 为样酮 ( F ar x i n el l o n e l)
( I H
,
S )
, 2
.
]
_
5 ( 3 1王, S ) , 0 . 8 8 ( 3 H , S ) ,
挥发油脑晶的理化性质与牛岑酮一致 。
化合物 B : 无味 , m . p . 14 0一 2℃ , I R : v K B rm a x . 3 4 5 0 ,
1 3 8 0 , 1 0 6 0 , c m 一 ’ , 利伯曼反应阳性 , 与日一谷街醇标准品
展开剂中均为单一斑点 , ;玫确认 化合物 B为一日谷当醇 。
2 9 8 0 , 2 9 0 0 , 1 4 7 0 , 14 5 0 , 1 3 9 0
,
( m
·
p 13 6一 7℃ ) 共薄层在不同
1
. 林酮 几 自鲜碱
瓜
化合物 C :
13 1 oC
,
U V
: 入
一 C 二 N一 ) ,
黄柏 酮 爪柠 檬 苦素
无味 ,溶于乙醇 、 氯仿等有机溶媒 。 D r a 梦 n d or f 反应阳性 , 有升华性 , m ·
M e O H
1』l a X
1 4 5 0
,
2 3 8一 2 4 2 , 3 10
1 3 8 5 , 1 3 7 0
,
, 3 1 6 , 3 3 1 n m
1 1 2 0
, 1 0 8 5
,
; I R
9 8 0 ,
d )
K B
r
: V m a x
7 6 0 ,
3 1 2 0 , 1 6 2 5 , 1 5 8 0 ,
7 2 0 , 5 7 5 ,
( I H
,
d )
,
C 111
(一 C = C一 ,
产
H N M R
,
( 6 0M
e , C D C I
。 ,
8
.
3 5 3一 7 . 2 8 4
化合物 E :
( 4 H
T M S )
m )
5 ( P P i n )
,
7
.
6 1 ( I H
,
7
.
0 6 4
.
4 3 3 ( 3 H
,
S )
, 确定为白鲜碱 ( D i c t a , n i n e , 五) 。
无味 , 溶于乙醇 、 氯仿 、 苯等有机溶媒 , 白色立方晶体 (乙 醇 : 苯 ) m . P
2 2 9
.
5一 2 3 0 . 5℃ ,
2 9 8 0 , 2 9 5 0 , 1 7 4 0
T M S ) 乙 ( P Pm )
2 O〔a 〕D = 一 5 0 ,
17 1 0 , 1 2 8 5 ,
u v
: 入黔二里H : 2。 n m , xR : 、 釜鑫 3 1 5 0 ,
8 0 0
,
7
.
5 (2 H
, 宽 )
( 1%
,
C H C 1
3
)
,
1 0 3 0 , 1 0 0 0 , 8 7 5 ,
6
.
6 ( I H
,
d ) 6
.
4 5
e m
一 ’ , `
H N M R ( g o M e
.
,
C D C 1
3 ,
( I H
, 宽 ) , 氏 0 (1 H , d ) ,
未注 明者均为显散熔点测定仪测值 , 遇度计未校准 .
1 4
5
.
5 2 ( I H
,
S )
, 3
.
7 1 ( I H
,
S )
, 1
.
5 4 ( 6 H
,
S )
, 1
.
4 8 ( 3 H
,
S )
, 1
.
2 7 ( 3 H
,
S )
,
1
.
15 ( 3 H
,
S )
,
M S
: , 1 1 /, e (场 ) 4 5 4 ( M 牛 ) , 4 3 9 ( 9 . 9 ) 4 1 1 ( 5 . 0 ) , 3 9 7 ( 1 3 . 8 ) , 3 3 2
( 2 10
.
5 )
, 3 3 1 ( 1 0 0 0 )
, 2 73 ( 8 8
.
3 )
, 2 0 1 ( 5丁. 0 ) , I G J ( 9 9 . 9 ) , 1 3 6 ( 1 7 6 . 5 ) ,
1 05 ( 3 5一 7 ) , 9 5 ( 3 5 4 . 9 ) , 9 1 ( 1 7 3 . 6 ) , 7 9 ( 14 2 . 9 ) , 确定其为黄柏酮 ( O b a e u n o n e 川 ) 。
化合物 f , 无味 , 常用有机洛媒对该物 的溶解性均不理想 、 自色针状结晶 ( 氯 仿或冰醋
酸 ) , 。 1 · p 2 9 7一 s c ( 毛细管法 , 温度 计未校准 ) 〔a 〕锣一 1 2 9 . 3 ( 1% , 丙酮 ) u v 、 禁互奥H
Z o 7 n m , z R 、蓄票 : 9 6 。 , : 9 0 0 , , 7 6 , , 1 7一。 , 1 2 8 5 , : 16 ; , 1 0 3。 , 1。 2 。 , 8 7 5 , : 8 5 。 :: 飞一 : ,
`
H N M 尺 ( 9 0入I c , C D C I ;: , ` r 入15 ) a ( p p m ) : 7 . 4 ( ZH , 览 ) , 6 . 3 3 ( I H , 宽 ) , 5 . 5 6
( 1 卜1 . 5 ) , 4 . 了了 ( l 玉I , d ) , 4 . 3 ( I H , d ) , 4 . 0 5 ( Z H , 宽 ) 1 . 3 , ( 3 H , S ) ,
1
.
1 8 ( 6 1
一
{
,
S )
,
2
.
0 5 ( 3上l , S ) ; M S : , n / 。 ( 肠 ) : 4 7 0 ( M 十 ) , 咬5 5 ( x5 . 5 ) , 4 1 3
( 5 1
.
1 )
,
3 7 3 ( 7 9
.
5 )
, 3 4 7 ( 1 0 0 0
.
0 )
,
2 2 5 ( 9 7
.
9 )
, 13 5 ( 2 1 6
.
3 )
, 1 0 8 ( 18 2
.
5 )
,
9 5
( 3 , 1
.
1 )
, 6 9 ( 1 2 3
.
2 ) , 谨3 ( 2 6 6 . 7 ) , 4 2 ( 2 9 2 . 8 ) , 确认化合物 F 为柠檬苦素 ( L ,m o n i。 即 ) 。
另外化合物 D ( m . p , 7 5 (: ) , 化合物 G ( :二 · p 2 9 2一 2 9通c ) ,化合物 壬I ( n : · p 1 8 4一 6 〕 ) _
和挥发油中分离得到的化台物 l 的结构尚未确定 。
药理实验 :
伴酮用氯仿溶解 , 加豆 磷脂 (1 % ) 研磨挥尽氯仿 , 加蒸馏水配成 l %乳剂 ; 自鲜碱加芝
麻油洛解 , 加豆磷脂 ( l % ) , 蒸馏水 , 研磨配成 1%乳剂北合物 I直接用蒸馏 水分散成 1 %
浓度药液 。
_之氏
1 0 0
5 1 5 0 I了 z ` 芝氏 5 1 . 0 U , -
一…
一 {一军羊生{
一 险塑 一…止竺二 { ;丁一
、…几厂
l 10 0
1 0 0
~ 一~ . . .~ 二~ ~ ~ 口 一一{1 0 0 I n n4 . U 一 ` U U一
取接种艾氏等瘤株丁 一 切 人
小白鼠 , 腹腔抽取甸液 . 生
理盐水稀释后 , , J等体积药
了浅相 混 , 观察堵养 ( 3了℃ 夕1 1
3小时后伊 红,赤 ’尧率 .
呀书
耳多代éō卜沙
黄柏酮 . 利忿檬若索 . p 一谷沁醉无明显效果 , 未列出 .
致谢 :
实验材料山 4二院中草药教研室郭允珍副教授鉴定 。
室 , 微生物教研室 , 天然药物 研究室 , 辽宁省药物所 ,
给予热情的指 导和帮助 , 在此一并致谢 。
部分核磁谱 , 质谱由辽宁省理化测试中心代测 。
参 考 文
卜 宝 国中草药汇编 (上附 ) , 3此页 , 上公75
次 中国科学院 休业土壤研究所 : 东北草卞植物志
仪器分析室代测各种光谱 , 药理教研
辽宁省药检所的许多老师对本专题都
( 第六卷 ) , 具一 6页 , 科学出版社
1 9 7了 ’
3
.成都中医学院 : 常用 中药学 , 12 1页 , 1 9 7 3
4
. 肖荣汉等 : 赤脚医生杂志 6 ` 2 1 , 1 9 7 5
5
. 辽宁省铁岭地区结核病防治所 : 辽宁医药 3 , 2 5 , 1 9 7 7
6
. 辽宁省铁岭地区医院肿瘤科 : 内部总结材料 , (未发表 )
7
. 常志青等 ; 药学学报 , 16 ( 5 ) , 3 9 4一 5 , 19 8 1
8
.
H
. 瓦格纳等 : 生物活性天然产物 (中译本 ) , 10 4页 , 科学出版社 , 1 9 8 1
9
.
C A
: 5 9
: 7 8 5 4 ; 2 0
, 3 7 7 4
10
.
G H X T o w c r s
, e t a l
:
B i o c h e 阴 B i o P h y R e s C o n ;优 u n 9 5 ( 2 ) : 6 0 3一 7 , 1 9 8 0
S T U D IE S O N A C T IV E
O F T H E R O O T BA R K O F
D A S Y C A R P U S
C O N S T IT U E N T S
D IC T A M N U S
T U R C Z
K A N G S h e n g一 11 W A N G S U一 x i a u Z H U T i卫一 r u ( C H 兀J T i n 一 ,· u )
R e
s e a r e h D e P a r t。 。 n t o f N a t u r a l D r u g s , S h o n夕 a n g C o l l e g e o f P h a r o a e 少
Ab s t r a e t
T h e r o o t b a r k o f D i e t a m n u s d a s y e a r p u s T u r e z
.
15 o n e o f t r a d i t i o n a l
C h i n e s e m e d i e i n e s
.
I t w a s r e p o r t e d i n t h e 7 0
/ 5 o f t h e 2 0 t h e e n t u r y t h a t i t
s h o w e d n o t o n ly a n t i b i n t i e ( i n e l u d i n g t u b e r e l e b a e i l l u s ) b u t a l s o w i t h s o m e
a n t i e a n e己r a e t i v i t i e s . F r o m t h e r e s u l t s o b t a i n e d b y E o s i n t e s t , t h e a n t i e a n e e r
a e t i v i t y i n v i t r o o f t h e n o n一 p o l a r e x t r a e t s w a s e o n f i r m e d . N i n e e o m p o u n d s
w e r e i s o l a t e d f r o m b o t h t h e e t h e r e x t r a e t a n d v o l a t i l e 0 11
,
F i v e o f t h e m :
f r a x i n e l l o n e
,
d i e t a m i n e
, 日一 s i t o s t e r o l , o b a e u n o n e a n d l i m o n i n , w e r e i d e n t i f i e d
a o n t h e b a s e s o f t h e i r p h y s i e o 一 e h e m i e a l p r o P e r t i e s a n d s p e e t r a d a t a . I n
d d i t i o n
, a n t i e a n e e r a e t i v i t i e s i n v i t r o o f f r a x i n e l l o n e ; d i e t a m i n e a n d a
e o l o r l e s s t r a n s p a r e n t l i q u i d (
e o m p o u n d l ) i
s o l a t e d f r o m t h e 0 11 w e r e p r o v e d
b y p h a r m a e o l o g i e a l e x P e r i m e n t s
.
1 6