全 文 ：·药物与临床·
多定量指标研究千里香提取物工艺▲
李 嘉1，2 何春欢1 张赟赟1 杨海船1 姜平川* 1
(1 广西壮族自治区中医药研究院，南宁市 530022;2 广西中药质量标准研究重点实验室，南宁市 530022)
▲基金项目:广西科技厅科技攻关项目(桂科攻 11107010-3-1)
* 通讯作者
【摘要】 目的 优选千里香药材乙醇提取物最佳工艺条件。方法 以千里香醇提浸膏量、浸膏中九里香酮和 5-九里
香酮的含量为考察指标，采用正交实验法对影响醇提工艺的主要因素:乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数进行研
究。结果 千里香乙醇提取物提取最佳工艺为:用浓度为 80%的乙醇提取，乙醇用量为药材量 10 倍，提取两次，每次 1 小
时。结论 该提取工艺方法可行、简便、合理。
【关键词】 千里香;正交试验;工艺优化
【中图分类号】 Ｒ 284． 2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1673-7768(2014)01-0073-03
Extraction of Murraya Paniculata (L．)Jack． by multiple quantitative indicators
LI Jia1，2，HE Chun-huan1，ZHANG Yun-yun1，YANG Hai-chuan1，JIANG Ping-chuan1
(1Guangxi Institute of Chinese Medicine ＆ Pharmaceutical Science，Nanning，530022，China;
2Guangxi Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Quality Standards，Nanning，530022，China)
【Abstract】 Objective To screen the extracting method of ethanol in Murraya paniculata(L．)Jack． Methods The
extraction process was optimized by orthogonal experiment with yield of ethanol extract，murrayone and 5-murrayone as indexes，and
the concentration of ethanol，the ratio of solid to liquid，extraction time，and extraction times were used as the factors． Ｒesults The
optimum extracting condition was as follow:Murraya paniculata was extracted by 10 times of 80% EtOH for 2 times with 1 hour per
time． Conclusion The optimum extraction technology is feasible，simple and reasonable．
【Key words】 Murraya paniculata (L．)Jack;Orthogonal experiment;Optimization
千里香(Murraya paniculata (L．)Jack)是芸香科九里
香属植物，主要分布于我国台湾、福建、广东、海南及广西、
云南、湖南、贵州四省区的南部，其叶和根常作为药材被用
在传统的治疗方法中，具有通经络、行气、活血、散瘀、止痛、
镇惊、消肿、解毒等功效［1，2］。千里香中的化学成分主要分
为黄酮类、生物碱、香豆素及萜类等，现代药理研究表明，千
里香具有抗生育和终止妊娠、抗菌消炎、降血糖、麻醉镇静
以及增强免疫功能等作用［3］。经我们课题组的药理实验表
明，千里香醇提物具有镇痛、解痉和抑制胃肠运动的作用，
因此我们对其提取物进行深入研究。据文献报道及课题组
的研究均表明，千里香中的主要成分为九里香酮和 5-九里
香酮［4 ～ 6］，因此我们选择九里香酮和 5-九里香酮作为含量
测定的考察指标，采用正交实验法对影响醇提工艺的主要
因素:乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数进行研究，
优选千里香醇提物最佳提取工艺条件。
1 实验材料与方法
1． 1 仪器与制剂
1． 1． 1 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱仪，包括二元泵、
柱温箱、二极管阵列检测器及 Agilent 化学工作站(美国安
捷伦科技公司) ;梅特勒 －托利多 XS205 电子天平(Mettler
Toledo公司)。
1． 1． 2 试剂与药品 甲醇为色谱纯(Fisher 公司) ，水为娃
哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯。千里香由广西源安堂
药业有限公司提供，经本院中药资源所严克俭助理研究员
鉴定为千里香(Murraya paniculata (L．)Jack)。九里香酮
和 5-九里香酮均为自制，纯度 ＞ 98%，核磁共振氢谱、核磁
共振碳谱等主要数据与文献报道一致［7，8］。
1． 2 实验方法
1． 2． 1 因素水平的选择 本实验采用正交设计的方法，以
千里香醇提浸膏量、膏中九里香酮和 5-九里香酮的含量为
指标，考察不同乙醇浓度、加醇量、提取时间以及提取次数
对千里香药材中指标性成分提取率的影响。每个因素选择
三个水平进行试验，因素水平见表 1。
表 1 因素水平表
水平
A
乙醇浓度
(%)
B
加入乙醇量
(倍)
C
提取时间
(h)
D
提取次数
(次)
1 70 6 1 1
2 80 8 2 2
3 90 10 3 3
1． 2． 2 样品含量测定
1． 2． 2． 1 得膏率的计算 根据因素水平表拟定了 L9(3)
49
37内 科 2014 年 02 月 第 9 卷 第 1 期
DOI:10.16121/j.cnki.cn45-1347/r.2014.01.007
次试验，分别称取千里香药材各 100 g共 9份，按 L9(3)
4 正
交表的规定加不同浓度、不同倍量的乙醇，分为不同的提取
时间和提取次数，过滤后将提取液合并，减压蒸馏浓缩至稠
膏物，按药典干燥失重测定法操作，称重，计算得膏率。
1． 2． 2． 2 九里香酮和 5-九里香酮含量测定
1． 2． 2． 2． 1 色谱条件 Global Chromatography SP-120-5-ODS-
AP C18 色谱柱(4． 6 mm × 150 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 －
水(60 ∶ 40) ，流速 1 ml·min －1，检测波长 332 nm，柱温
25℃。在上述色谱条件下，将九里香酮、5-九里香酮混合
对照品溶液和千里香药材供试品溶液分别进样 20 μL。
1． 2． 2． 2． 2 对照品溶液的制备及线性关系考察［6］ 分别
精密称取九里香酮、5-九里香酮对照品适量，置同一量瓶
中，加甲醇制成九里香酮质量浓度为 294． 80 mg·L －1和
5-九里香酮质量浓度为 282． 20 mg·L －1的混合溶液，作为
备用液。
分别精密吸取备用液 1，2，4，6，8，10 mL置 10 mL量瓶
中，并用甲醇定容至刻度，摇匀，即得。分别取上述对照品
溶液 20 μL，注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定峰面
积。以进样量 X(μg)为横坐标，以峰面积 Y 为纵坐标进行
线性回归，九里香酮回归方程为 Y =2． 15 ×103X + 5． 23 × 10，
r = 0． 999 9，线性范围 0． 589 6 ～ 5． 896 μg;5-九里香酮回归
方程为 Y = 1． 82 × 103X + 3． 88 × 10，Ｒ = 0． 999 9，线性范围
0． 564 4 ～ 5． 64 μg。
1． 2． 2． 2． 3 液相色谱法测定含量 取正交试验得到的千
里香提取物适量，配成甲醇溶液，即得对照品溶液。按照
2． 2． 2． 1的色谱条件进行测定。
2 结 果
以千里香乙醇提取物得膏率为考核指标时，影响提取
得率的各因素作用主次顺序为 D ＞ A ＞ C ＞ B;方差分析结
果表明 D因素差异具有统计学意义(P ＜ 0． 05) ，A 因素影
响也较大，B、C 因素无明显差异(P ＞ 0． 05) ，最佳工艺为
A2B3C2D2。
以九里香酮、5-九里香酮为考核指标时，影响两者提取
得率的各因素作用主次顺序均为 A ＞ D ＞ C ＞ B;方差分析
结果表明 A 因素差异具有统计学意义(P ＜ 0． 05) ，
B、C、D因素无明显差异(P ＞ 0． 05) ，九里香酮、5-九里香酮
的最佳工艺分别为 A2B3C1D2、A2B1C1D2。
综合考虑，因素 D在以提取物得膏量为考核指标时有
显著性，以 D2 为最好;因素 A 在以九里香酮得率、5-九里
香酮为考核指标时均有显著性，以 A2 为最好;直观分析结
果显示，乙醇溶剂用量对提取物有一定程度的影响，我们选
择了最优的因素 B3;因素 C 影响不显著，从节能高效的角
度出发，我们尽量缩短提取时间，选择 C1;综上，最佳提取条
件为 A2B3C1D2，即 80%乙醇提取两次，时间为(1h，1h) ，加
乙醇量为(10倍，10倍)。实验编号 6的结果也证明了该工
艺条件最优。正交实验设计结果、千里香提取物得膏重量
方差分析、九里香酮得率方差分析、5-九里香酮得率方差
分析结果分别见表 2 ～ 5。
表 2 正交实验设计表及结果
实验号 A B C D 得膏重量 / g 九里香酮质量 / g 5-九里香酮质量 / g
1 1 1 1 1 8． 86 0． 813 6 0． 530 1
2 1 2 2 2 13． 14 0． 913 0 0． 595 0
3 1 3 3 3 11． 54 0． 770 6 0． 497 6
4 2 1 2 3 13． 67 0． 977 1 0． 670 2
5 2 2 3 1 8． 91 0． 880 2 0． 593 3
6 2 3 1 2 14． 48 1． 168 0 0． 769 6
7 3 1 3 2 11． 42 0． 833 5 0． 563 6
8 3 2 1 3 10． 49 0． 696 9 0． 476 0
9 3 3 2 1 7． 98 0． 711 9 0． 465 8
膏状物量 k1 33． 54 33． 95 33． 83 25． 75
k2 37． 06 32． 54 34． 79 39． 04
k3 29． 89 34． 00 31． 87 35． 70
Ｒ 2． 390 0 0． 486 6 0． 973 3 4． 430 0
ssj 8． 569 1 0． 458 0 1． 476 6 31． 864 7
九里香酮量 k1 2． 497 2 2． 624 2 2． 678 5 2． 405 7
k2 3． 025 2 2． 490 1 2． 602 0 2． 914 4 C =(∑Y)2 /N
k3 2． 242 3 2． 650 5 2． 484 3 2． 444 6 Qj =(K1)
2 +(K2)
2 +(K3)
2
Ｒ 0． 261 0 0． 053 5 0． 064 7 0． 169 6 SSj = Qj /3-C
ssj 0． 106 3 0． 004 9 0． 006 4 0． 053 4
5-九里香酮 k1 1． 622 8 1． 763 9 1． 775 7 1． 589 2
k2 2． 033 1 1． 664 3 1． 731 0 1． 928 2
k3 1． 505 3 1． 733 0 1． 654 5 1． 643 8
Ｒ 0． 175 9 0． 033 2 0． 040 4 0． 113 0
ssj 0． 051 2 0． 001 7 0． 002 5 0． 022 1
47 Internal Medicine of China，Feb． 2014，Vol． 9，No． 1
表 3 千里香提取物得膏重量方差分析
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 P值
A 8． 569 1 2 4． 284 5 18． 709 ＞ 0． 05
B(误差) 0． 458 0 2 0． 229 0
C 1． 476 6 2 0． 738 3 3． 223 9 ＞ 0． 05
D 31． 864 7 2 15． 932 3 69． 573 3 ＜ 0． 05
F0． 05(2，2)= 19． 00，F0． 01(2，2)= 99． 00
表 4 九里香酮得率方差分析
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 P值
A 0． 106 3 2 0． 053 1 21． 24 ＜ 0． 05
B(误差) 0． 004 9 2 0． 002 5
C 0． 006 4 2 0． 003 2 1． 28 ＞ 0． 05
D 0． 053 4 2 0． 026 7 10． 68 ＞ 0． 05
F0． 05(2，2)= 19． 00，F0． 01(2，2)= 99． 00
表 5 5-九里香酮得率方差分析
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 P值
A 0． 051 2 2 0． 025 6 28． 444 4 ＜ 0． 05
B(误差) 0． 001 7 2 0． 000 9
C 0． 002 5 2 0． 001 3 1． 444 4 ＞ 0． 05
D 0． 022 1 2 0． 011 0 12． 222 2 ＞ 0． 05
F0． 05(2，2)= 19． 00，F0． 01(2，2)= 99． 00
3 讨 论
本文通过正交实验法优选千里香乙醇提取物的最佳提
取条件，实验结果表明，提取次数对千里香提取物得膏率有
显著影响;而乙醇浓度对九里香酮和 5-九里香酮的提取有
显著影响;乙醇用量及提取时间的影响则不大，加大乙醇用
量将会增加成本、延长周期，进一步缩短提取时间如 0． 5 h
应该会影响有效物质的释放;综合各因素最终确定千里香
醇提物最优提取工艺为将药材加 80%乙醇回流提取 2 次，
每次 1 h，每次加醇量为药材量的 10倍。
参 考 文 献
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(收稿日期:2013-11-13 修回日期:2014-1-19)
(上接第 43页)
综合考虑瘤体位置，大小，患者身体状况以及经济条件后再
选择最佳治疗手段。SAH 患者治疗后大部分恢复好，但约
有 10%的患者在接受治疗以前死亡，30 d 内病死率约为
25%或更高。本组患者治疗后 79． 1%痊愈、好转，累计死亡
37例。高血压与不良预后有密切关系，此外，影响预后的因
素还有很多，包括发病后的时间间隔、意识水平、年龄大小、
自身基础疾病(合并高血压、糖尿病等)、血浆 D-二聚体水
平显著升高等［7］;动脉瘤性 SAH患者较非动脉瘤性 SAH患
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57内 科 2014 年 02 月 第 9 卷 第 1 期