免费文献传递   相关文献

饿蚂蝗中总黄酮含量的测定



全 文 :[收稿日期] 20110315(016)
[基金项目] 贵州省中药现代化科技产业研究开发专项:黔科
合字[2010]5029 号
[第一作者] 李传宽,研 究 生,从 事 应 用 有 机, Tel:
13078550736,E-mail:chuankuanli@ 163. com
[通讯作者] * 张前军,教 授, Tel: 0851-8292313, E-mail:
qianjunzhang@ 126. com
饿蚂蝗中总黄酮含量的测定
李传宽1,张前军2* ,康文艺3,黄钟碧2,陈青1
(1. 贵州大学化学与化工学院,贵阳 550025;
2. 贵州大学精细化工研究开发中心,贵阳 550025;
3. 河南大学天然药物研究所,河南 开封 475004)
[摘要] 目的:建立饿蚂蝗中总黄酮含量的测定方法。方法:采用紫外分光光度法,以槲皮素为对照品,测定波长 510
nm。结果:槲皮素对照品在0. 020 8 ~ 0. 104 g·L - 1与吸光度线性关系良好(r = 0. 999 7) ,平均加标回收率为 98. 09%,测定结果
的相对标准偏差为 1. 34%(n = 5)。结论:该方法简便易行、现性好、结果可靠,适用于饿蚂蝗总黄酮的定量测定。
[关键词] 饿蚂蝗;总黄酮;紫外分光光度法
[中图分类号] R284. 1 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2011)23-0058-02
Determination of Total Flavones in Desmodium Sambuse
LI Chuan-kuan1,ZHANG Qian-jun2* ,KANG Wen-yi3,HUANG Zhong-bi2,CHEN Qing1
(1. College of Chemistry and Chemical Engineering,Guizhou University,Guiyang 550025,China;
2. Fine Chemical Research Center,Guizhou University,Guiyang 550025,China;
3. Pharmacological Research Center,Henan University,Kaifeng 475004 China)
[Abstract] Objective:To establish ultraviolet spectrophotometry for the determination of total flavones in
Desmodium Sambuse. Method:Quercetin was used as reference material,and the samples were determined at 510
nm. Result:The linear range for quercetin was 0. 020 8 - 0. 104 0 g·L - 1 . (r = 0. 999 7) ,The recovery rate was
98. 09%;RSD 1. 34% (n = 5). Conclusion:This method was easy to handle with accuracy and reproducibility
and suitable for quantitative determination of flavonoid in Desmodium Sambuse.
[Key words] Desmodium sambuens;total flavones;spectrophotometry
饿蚂蝗 Desmodium sambuense DC.为豆科山蚂蝗
属植物,分布于我国浙江、江西、福建、台湾、湖南、广
东、广西、四川、贵州、云南、西藏等地。饿蚂蝗性味
干、凉,有活血止痛,解毒消肿之功效,用于胃痛、小
儿疳积、腮腺炎、妇女干血痨、腰扭伤、创伤、尿道炎、
腮腺炎、毒蛇咬伤等[1]。我们对其化学成分及生物
活性进行了系统研究,其化学成分主要为有机酸,甾
体,萜类,黄酮类及酚类[2]并且具有良好的抗氧化活
性[3]。作者认为其抗氧化活性可能与其中黄酮及酚
类成分有关,本实验采用分光光度法,以槲皮素为对
照品,测定饿蚂蝗中总黄酮的含量。为其抗氧化作
用提供理论依据。
1 材料
1. 1 仪器 TU-1901 紫外分光光度计(北京普析通
用仪器有限责任公司) ;TP-114 电子分析天平(北京
赛多利斯仪器系统有限公司)。
1. 2 试药 槲皮素对照品(中国药品生物制品检定
所,批号 100081) ;其他试剂均为分析纯。植物全草
采自贵州省贵阳市经贵阳中医学院陈德媛教授鉴定
为豆科山蚂蝗属植物饿蚂蝗 D. sambuense.
·85·
第 17 卷第 23 期
2011 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17,No. 23
Dec.,2011
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液制备[4] 精密称取槲皮素对照品
20. 8 mg,置于 100 mL 量瓶中,加入 60%乙醇 30 mL
溶解,再以 60% 的乙醇定容至刻度,摇匀,即得
0. 208 g·L - 1的对照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备[5] 取 108 ℃干燥 2 h 饿
蚂蝗 1. 000 g 置于 100 mL 圆底烧瓶中,加入 30 mL
75%乙醇回流 2 h,回流 3 次,滤液减压浓缩,60%
乙醇溶解后置于 100 mL 量瓶,补加 60% 乙醇至刻
度,摇匀,作为供试品溶液。
2. 3 标准曲线的制备[4] 精密量取对照品溶液
0. 0,2. 5,5. 0,7. 5,10. 0,12. 5 mL,分别置于 25
mL 的量瓶中,前 5 瓶补加 60% 的乙醇至 12. 5 mL。
精密加入 5% NaNO2 溶液 0. 75 mL,摇匀,放置 6
min;加入 10% Al(NO3)3 溶液 0. 75 mL,摇匀,放置 6
min;加入 4% NaOH 溶液 10 mL;分别用 60%乙醇稀
释至刻度,摇匀,放置 15 min。以第一瓶做空白在
510 nm 处分别测其吸光度,以对照品浓度为横坐
标,以吸光度为纵坐标,回归方程 Y = 5. 231X +
0. 003 6 (r = 0. 999 7)。结 果 表 明,槲 皮 素 在
0. 020 8 ~ 0. 010 4 g·L - 1呈良好的线性关系。
2. 4 稳定性试验 取同一供试品溶液,于配置后
0,15,30,45,60 min 后依照 2. 3 项方法测定结果测
定吸光度,分别为 0. 320,0. 317,0. 322,0. 320,
0. 315,RSD 0. 87%。说明供试品溶液制备后 1 h 稳
定,吸光度无明显变化。
2. 5 精密度测定 取同一供试品溶液 5 份,依照
2. 3 项方法测定吸光度,分别为 0. 321,0. 323,
0. 318,0. 326,0. 319,RSD 1. 00%
2. 6 重复性试验 取同一批样品(批号 20101201)
5 份,每份 1. 000 g 重复 2. 2 项方法制备供试品试
验。精密吸取 5. 0 mL 供试品溶液,依 2. 3 项方法测
定,结果总黄酮分别为 30. 053,29. 862,30. 913,
30. 340,30. 244 mg·g - 1,平均含量为 30. 282 mg·
g - 1,RSD 1. 42%。
2. 7 加样回收试验[6] 取同一批样品 (批号
20101201)5 份,每份 1. 000 g,精密加入对照品适
量,依 2. 2 项方法制备供试品试验。依 2. 3 项方法
测定,计算回收率,结果见表 1。
2. 8 样品含量的测定 精密量取供试品溶液 5. 0
表 1 饿蚂蝗中槲皮素加样回收率测定
No.
取样量
/ g
样品中
含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均
回收率
/%
RSD
/%
1 0. 500 3 15. 150 15. 000 29. 973 98. 82
2 0. 500 7 15. 162 15. 000 30. 158 99. 97
3 0. 500 1 15. 144 15. 000 29. 802 97. 72 98. 09 1. 34
4 0. 499 8 15. 150 15. 000 29. 720 97. 25
5 0. 500 2 15. 147 15. 000 29. 648 96. 67
mL 置于 25 mL 量瓶中,加入 60% 的乙醇使成 12. 5
mL;照 2. 3 项方法,自“精密加入 5% NaNO2 溶液
0. 75 mL”起,依法操作;另精密量取 5 mL 60%的乙
醇,照 2. 3 项方法,自“精密加入 5% NaNO2 溶液
0. 75 mL”起,依法操作制成空白溶液。在波长 510
nm 处,以空白溶液校正基线,测定供试品的吸光度,
代入回归方程,计算供试品中总黄酮的含量。结果
见表 2。
表 2 3 批饿蚂蝗药材中总黄酮含量测定
批号 平均含量 /mg RSD /%
20101202 30. 18 1. 42
20101203 30. 55 1. 51
20101204 29. 85 1. 37
3 讨论
本方法采用 75% 乙醇回流提取饿蚂蝗全草中
的总黄酮,以 NaNO2-Al(NO3)3 -NaOH 体系为显色
剂,利用紫外分光光度法测定总黄酮,操作简单,重
复性好,结果准确可靠,为饿蚂蝗全草的质量控制提
供了可靠方法。
[参考文献]
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草
[M]. 上海:上海科学技术出版社,1999,3130.
[2] 李传宽,张前军,黄钟碧,等 . 饿蚂蝗化学成分研究
[J]. 中国中药杂志,2010,35(17) :37.
[3] 张前军,刘瑜新,康文艺,等 . 饿蚂蝗抗氧化活性研究
[J].中草药,2010,32(11) :1980.
[4] 罗兰,郭丽冰,曾长青 . 大山楂丸中总黄酮的含量测
定[J]. 时珍国医国药,2007,18(9) :2207.
[5] 董玉,王爱民,陈朝军,等 . 文冠木中总黄酮的含量测
定方法研究[J]. 蒙医药论坛,2008,30(5) :364.
[6] 惰焕平,夏薇,张玉梅 . 芹菜提取物中总黄酮含量测
定[J]. 中国公共卫生,2001,17(4) :332.
[责任编辑 蔡仲德]
·95·
李传宽,等:饿蚂蝗中总黄酮含量的测定