全 文 ：薄层扫描法测定龙爪槐叶中的芦丁含量
钱彦丛 ,刘景东 ,戎文慧 ,张书锋
(白求恩军医学院药学教研室 ,河北 石家庄 050081)
摘要:目的 建立薄层扫描法测定龙爪槐槐叶中芦丁含量的方法。 方法 取龙爪槐叶干品 ,用乙醚提取 ,
弃去醚层后 ,用甲醇提取 ,用薄层扫描法测定芦丁的含量。 结果 芦丁呈现良好的线性关系 ,平均回收率为
97. 3% , RSD为 1. 9%。 结论 本法适用于龙爪槐槐叶中芦丁的测定。
关键词:龙爪槐叶 ;芦丁 ;薄层扫描法 ;含量测定
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 1004-2199( 2002) 01-0026-02
芦丁主要从豆科植物槐 Sophora japonica L .花
(蕾 )中提取 ,具有广泛的生理活性 ,是合成维脑路通
的原料。近年来由于城市改造、道路拓宽 ,二十世纪
五、六十年代种植的槐树已大量被砍伐 ,芦丁来源日
益紧张。 龙爪槐 Sophora japonica L. f. pendula
Loud . Arb. Bri t作为一种观赏树种 ,与槐的亲缘关
系十分相近 ,近年来城区绿地、道路两旁大量种植 ,
资源十分丰富。我们用薄层扫描法测定了龙爪槐槐
叶中的芦丁含量 ,为开发新的药源 ,提供参考。
1 仪器与试剂 CS-9000双波长薄层扫描仪 (日本
岛 津 ) , 紫 外 透 射 分 析 仪 , 定 量 用 毛 细 管
( Drummond ) ,索氏提取器 ,硅胶 G254薄层层析板
(青岛海洋化工厂 ) ,芦丁对照品 (中国药品生物制品
鉴定所 ) ,龙爪槐槐叶 (秋季采集阴干后测定 ) ,其它
试剂均为 AR。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 取芦丁对照品用甲醇配
制成 1 mg· ml- 1溶液 ,作为对照品溶液。
2. 2 薄层层析及扫描条件 吸取对照品及供试品
溶液各 2、 4、 6μl,分别点于同一块硅胶 G254薄层板
上 ,以醋酸乙酯 -甲酸 -水 ( 8∶ 1∶ 1)为展开剂展开 ,
展距约 12 cm ,取出 ,晾干 ,用紫外透射分析仪定位 ,
双波长 (λs 267 nm \λR235 nm )反射法锯齿扫描 ,线性
参数 Sx= 7,测量供试品和对照品斑点面积的积分
值 ,计算 ,即得。
2. 3 线性关系的考察 取芦丁对照品溶液各 1、 2、
3、 4、 5、 6μl,点于硅胶 G254薄板上 ,按上法测定 ,以峰
面积为纵坐标 ,以点样量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,
测得回归方程为: Y= 1 675+ 19 420X ,芦丁在 1～
6μg范围内与积分值呈线性关系。
2. 4 稳定性实验 同前点样 ,展开 ,取出后晾干 30
min后 ,按上述条件每隔 10 min重复扫描测定 ,持
续 2 h ,积分值保持不变 , RSD为 1. 9% 。
2. 5 回收试验 精密量取已测含量的龙爪槐槐叶
提取液 5 m l,加入 5 mg芦丁 ,混匀后制成回收液。
取回收液 2μl,对照品溶液 1. 0μl和 3. 0μl,点在同
一块硅胶 G254薄板上 ,以法测定 ,外标二点法定量 ,
结果见表 1。
表 1 芦丁加样回收率试验结果
序号 加入量
( mg)
回收量
( mg)
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
1 5 4. 81 96. 2
2 5 4. 98 99. 5
3 5 4. 86 97. 2 97. 3 1. 9
4 5 4. 93 98. 6
5 5 4. 74 94. 8
2. 6 样品分析 取龙爪槐槐叶粗粉约 10 g ,精密称
定 ,置索氏提取器中 ,加乙醚 150 ml,加热提取至回
流液无色 ,放冷 ,弃去乙醚液。再加甲醇 200 ml ,加
热连续提取 10 h (或至提取液无色 ) ,放冷后 ,过滤 ,
用甲醇定容至 200 ml ,作为供试品溶液。按上述方
法测定 4批样品的芦丁含量 ,结果见表 2。
表 2 龙爪槐槐叶中芦丁含量测定结果
序号 百分含量 (% ) RSD(% )
1 0. 26 2. 2
2 0. 31 2. 3
3 0. 26 2. 4
4 0. 25 2. 6
3 讨论
3. 1 本文所测定龙爪槐槐叶为秋季所采集样品 ,其
它季节有待进一步研究。
3. 2 芦丁是广泛存在于槐、大蓟、小蓟、红松松针、
新疆雪莲 [1～ 3 ]等药用植物中的黄酮类化合物 ,临床
上用于防治脑溢血、高血压等。除槐外 ,其它植物中
芦丁并非其主要成分 ,且含量都比较低 (如红松松针
为 0. 04% ,新疆雪莲为 0. 17% ) ,而龙爪槐槐叶中芦
丁含量 > 0. 25% ,高于文献报道除槐花 (蕾 )以外的
·26· 基层中药杂志 2002年 第 16卷 第 1期Primary Journal of Chinese Mate ria M edica
DOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 2002. 01. 012
其它植物 ,可以作为新的芦丁药物来源。
3. 3 展开后的斑点在 200～ 360 nm范围内 ,进行
光谱扫描 ,在 267 nm有最大吸收 ,在 235 nm吸收
度最低 ,与文献报道一致 [2 ] ,故测定选用λS267 nm λR235 nm。
参考文献
[1 ] 周文序 ,陈信义 .中药大、小蓟中柳穿鱼苷和芦丁的薄层扫描法
定量分析 [ J] .药物分析杂志 , 1994, 14( 6): 39。
[ 2] 李 伟 ,堵年生 .双波长薄层扫描法测定新疆雪莲中的芦丁的
含量 [ J ].新疆医学院学报 , 1995, 18( 2): 97.
[3 ] 朴奉花 ,贾梅林 ,陈志歆等 .薄层扫描法测定红松针中芦丁的含
量 [ J] .黑龙江医药 , 1996, 9( 5): 258.
(收稿日期: 2001-11-01)
Determination Content of Rutin by TLC Scanning from Leaf
of Sophora japonica L. f. pendula Lound. Arb. Brit.
QIAN Yan-cong, LIU Jing-deng , RONG Wen-hui , ZHANG Shu-feng
( Department o f Pharmacy, Bethune Mili tary M edical Col leg e, Shi jiazhuang 050081, China)
Abstract: Objective To establish the method of TLC scanning fo r determination content o f rutin f rom
leaf of Sophora japonica L. f . Methods Dried leaf is ex t racted by ether, then the ether lay er is throw n
aw ay. The remainder is ex tracted continuously by methy l alcohol. The content of rutin in the ex traction is
determined by T LC scanning. Results Rutin show s a good linear rela tionship, the average ra te of recovery
on rutin is 97. 3% , RSD is 1. 9% . Conclusion TLC scanning is a sui table method for determination con-
tent o f rutin f rom leaf of Sophora japonica L. f.
Key Words: Sophora japonica L. f. pendula Lound. Arb. Brit. ; leaf; rutin; TLC scanning; determina-
tion content
正交试验法研究猪苓多糖提取工艺
苏德龙 1 ,史红波1 ,裴福成 1 ,姜成忠 2 ,李桂红 2
( 1.哈药集团中药二厂研究所 ,黑龙江 哈尔滨 150078; 2.哈药集团制药六厂科研处 ,黑龙江 哈尔滨 150056)
摘要: 目的 优选猪苓多糖的最佳提取工艺。 方法 采用正交试验法 ,以煎煮液中水溶性多糖的含量为
考察指标 ,对影响猪苓多糖的提取工艺因素进行了研究 ,用苯酚 -硫酸法对煎煮液中的猪苓多糖进行含量测
定 ;结果 优选出猪苓多糖的最佳提取工艺 ,重复试验结果满意。结论 猪苓多糖的最佳提取工艺为: 用 10倍
量水 ,煎煮 1. 5 h ,煎煮 4次。
关键词:正交试验 ;猪苓 ;猪苓多糖 ;提取工艺
中图分类号: R284. 2 文献标识码: B 文章编号: 1004-2199( 2002) 01-0027-02
猪苓为多孔菌科植物真菌猪苓 Polyporus um-
bellatus ( Pers. ) Fries的干燥菌核 ,具有利水渗湿
的功效 [ 1] ,现代药理研究证明 [2 ]猪苓多糖对人体免
疫力和肝脏功能均有影响及有抗肿瘤的作用。 本试
验以水溶性多糖含量为指标 ,用正交试验法对煎煮
过程中煎煮时间、煎煮次数、加水量进行了优化研
究。
1 仪器、材料及试剂
仪器: Lambda 3B UV /V IS分光光度计 (美国
PERKIN ELMER公司 ) ;材料: 猪苓饮片 2～ 4 mm
(由哈药集团中药二厂供应科采购 ) ;葡萄糖标准品
(北京益利精细化学品有限公司 ) ;试剂:苯酚、浓硫
酸 (试剂均为分析纯 ) ; 6%苯酚 (临时配制 )。
2 猪苓多糖的含量测定方法 [3 ]
2. 1 标准溶液的制备 精密称取葡萄糖对照品
( 105℃干燥至恒重 ) 100 mg ,置于 100 ml容量瓶
中 ,加水适量使溶解 ,稀释至刻度 ,摇匀。精密吸取
10 ml置于 100 ml容量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,即得
每 10μl含葡萄糖 1μg的对照品溶液。
2. 2 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液 0. 1、
·27·基层中药杂志 2002年 第 16卷 第 1期Prima ry Journal o f Chinese Materia Medica