全 文 ：鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮含量的测定
宋　萍 , 　杨赵立 , 　赵明德
(青海民族学院化学系 ,青海西宁 810007)
摘　要:利用分光光度法 ,以芦丁为对照品 ,采用 NaNO 2-Al(NO 3)3-NaOH 显色方法 ,在最大吸收
波长 510 nm 处对青海不同产地的藏药鬼箭锦鸡儿花和叶中的总黄酮含量进行测定 , 建立了藏药
鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮含量的测定方法 。芦丁测定的线性方程是 A=0.0117c-0.0002 , 相
关系数 r=0.9998(n=6), 测得方法的平均回收率为 100.2 %(n=6), RSD=1.24% 。实验结果
显示该方法测定样品的结果准确可靠 、快速 、重现性好 。
关键词:分光光度法;鬼箭锦鸡儿花和叶;总黄酮
中图分类号:O 657.32　　　文献标志码:A
文章编号:0367-6358(2009)05-0271-02
Determination of T otal Flavonoids in Flow ers and Leaves of
Caragana J ubata (pall.)Poir.
SONG Ping , 　YANG Zhao-li , 　ZHAO Ming-de
(Department o f Chemist ry , Qingha i N ationa li t ies Inst i tute , Qingha i X inin g 810007 , China)
Abstract:By spect rophotometry method w ith rutin as standard sample and sodium nit rite-aluminium
nit rate-sodium hydroxide as colouring agent , the to tal f lav onoids content in flowe rs and leaves o f Caragana
jubata (pal l.)poir f rom different places of Qinghai w as dete rmined at the abso rption wavelength o f 510
nm .The calibration curve w ith A=0.0117c-0.0002 and r=0.9998(n=6)was found , and the average
recovery w as 100.2%(n=6)with RSD of 1.24% .The results show this method is reliable , accurate ,
quick and reproducible.
Key words:spectrophotometry;f low ers and leaves of Caragana jubata(pall.)poir.;total f lav onoids
收稿日期:2008-07-10;修回日期:2009-03-21
基金项目:国家自然科学基金项目(30660221);青海自然科学基金项目(2006-N-554)
作者简介:宋　萍(1965～ ),女 ,山东长岛人 ,教授 ,主要从事药物及食品的分析研究工作。 E-mail:spzhe@126.com;Tel:0971-8800307。
　　藏锦鸡儿学名鬼箭锦鸡儿(Caragana jubata
(pal l.)poir.), 藏名“作毛兴” , 为豆科锦鸡儿属
植物 ,是叶型较小的中生 、中旱生 、旱生和沙生灌木 。
生长在海拔3000 ～ 4700 m 的阴坡 、半阴坡地带[ 1-3] 。
鬼箭锦鸡儿中含有皂苷 、生物碱 、鞣质 、挥发油 、糖类
以及黄酮类化合物。藏医用其根茎及其干燥红色木
质部心材入药 ,其味涩 、性凉 ,具有活血散瘀 、凉血 、
降压 、生肌止痛的功能 ,可用于防治多血症 、血热症 、
高血压和心血管等方面的疾病[ 4 , 5] 。由于藏医民间
用药常以藏药鬼箭锦鸡儿的红色芯材为主 ,较少关
注于其花和叶等的研究和应用 ,并且目前关于藏药
鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮含量的分析方法还鲜见
报道 ,为此 ,本文建立了藏药鬼箭锦鸡儿花和叶中总
黄酮含量的分析方法 ,并对其中的总黄酮含量进行
测定。这可对充分利用该植物资源 ,合理选取用药
部位提供重要的参考依据。
1　仪器 、试剂及样品采集
1.1　仪器与试剂
722型可见分光光度计(上海精密科学仪器有
限公司);电子天平(上海良平仪器仪表有限公司);
·271·第 5 期 化　　学　　世　　界 　
芦丁(中国药品生物制品检定所);恒温水浴锅;乙醇
等试剂均为分析纯;常用玻璃仪器等。
1.2　样品采集
鬼箭锦鸡儿花和叶分别采自青海省大通县
(2007年 6月采集)、互助县(2007年 6月采集)、玉
树州(2007年 8月采集),去杂质 、切断 ,阴干 ,粉碎
后过 40目筛作为试验药材。
2　实验方法
2.1　对照品芦丁标准溶液的制备
精密称取芦丁标准样品 0.0250 g , 75%乙醇溶
解并定容至 100 mL 容量瓶中稀释到刻度 ,即得芦
丁对照品标准溶液 ,使用时稀释成所需浓度即可 。
2.2　最大吸收波长的确定
取芦 丁标 准溶 液 6 mL 采用 NaNO 2-Al
(NO 3)3-NaOH 显色 , 在 50 mL 容量瓶内定容 ,在
470 ～ 560 nm 波长范围内测定溶液的吸光度 , 测定
结果见表 1。由此可见 ,该溶液在 510 nm 处有最大
吸收值 , 因此可以选择 510 nm 作为检测波长。
表 1　不同波长下芦丁标准溶液对应的吸光度
波长/ nm 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560
吸光度, A 0.287 0.301 0.318 0.325 0.327 0.312 0.285 0.248 0.213 0.175
2.3　鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮提取方法的确定
准确称取已粉碎过筛后的鬼箭锦鸡儿花和叶
1.000 g 于烧瓶中 , 加入 10 mL 75%的乙醇 , 回流
提取 30 min 3次 , 弃去滤渣 , 合并滤液后进行蒸馏
浓缩 , 用 75%乙醇定容至50 mL 量瓶中 , 即得样品
总黄酮提取物 , 可用于含量的测定[ 6 , 7] 。
2.4　标准曲线的绘制
精密吸取芦丁标准溶液 0.0 、1.0 、2.0 、3.0 、4.
0 、5.0 、6.0 、7.0 、8.0 mL 分别置于 50 mL 容量瓶
中 , 各加 1.0 mL 5%亚硝酸钠溶液 , 摇匀放置 5
min , 加1.5 mL 10%硝酸铝溶液 , 摇匀放置 5 min ,
再加 10%的氢氧化钠溶液 10 mL , 然后用 75%乙
醇溶液稀释至刻度 , 摇匀放置 10 min后 , 分别在
510 nm处测定其吸光度。应用最小二乘法 , 以浓
度 c(g/mL)与吸光度 A 进行线性拟合 , 得回归方
程 A=0.0117c-0.0002 , 相关系数 r =0.9998(n
=6)。
2.5　精密度试验
取浓度为 0.0250 mg/mL 的芦丁对照品溶液 ,
在选定的 2.4项实验条件下连续测定 6次 , 分别测
定出其吸光度 A值 , 计算得吸光度值的相对标准偏
差 RSD=0.99%(n=6),表明仪器精密度良好 。
2.6　重复性试验
精密称取 6份玉树鬼箭锦鸡儿花和叶的样品各
1.000 g , 按 2.3项的方法制备供试品溶液 ,并在选
定的 2.4项实验条件下分别测定其吸光度 A 值 , 计
算得吸光度值的相对标准偏差分别是 RSD =
1.01%(n=6);RSD=0.6%(n=6),实验结果表明
本方法的重复性满足要求 。
2.7　稳定性试验
精密称取玉树鬼箭锦鸡儿花和叶样品各 1.000
g , 按 2.3项的方法操作制备供试品溶液 , 并按 2.4
项下的实验条件分别在 2 、4 、6 、8 、10 h时测定其吸
光度 A值 , 实验结果表明样品溶液在 10 h内稳定 。
2.8　回收率试验
精密称取 6份已知含量的玉树鬼箭锦鸡儿花样
品 1.000 g , 依次加入对照品溶液适量 , 按2.3所述
的供试品样品溶液的制备方法进行操作 ,并在选定
的 2.4实验条件下分别测定其吸光度 A值 , 测得方
法的平均回收率为 100.2%(n=6), RSD=1.24%。
2.9　药材中总黄酮含量的测定
称取各地区鬼箭锦鸡儿花和叶样品按 2.3的方
法制备供试品溶液 ,取试样离心 ,除去悬浮杂质 ,准
确吸取上层清液 1 mL 4份 , 分别置于 50 mL 容量
瓶中 , 其中 1份用 75%的乙醇定容至刻度 , 作为参
比溶液 。其余 3份按 2.4的实验条件分别测定其吸
光度 A 值 , 取平均值代入标准曲线回归方程中可得
浓度数据 , 经计算后可得藏锦鸡儿花和叶中总黄酮
的含量[ 6-8](见表 2)。
表 2　鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮含量的测定
产地 吸光度平均值 , A 总黄酮含量/ %
大通花
大通叶
玉树花
玉树叶
互助花
互助叶
0.801
0.205
0.514
0.275
0.334
0.050
4.1413
2.1662
5.0338
1.4325
1.7224
1.0121
3　结论
3.1　通过检测发现六个样品中黄酮含量各不
相同 ,其原因可能是由于采集时间 、地点的不同而引
起的;另外 ,不同地区海拔及气候等原因也可能对实
验结果产生一定的影响。因此 ,可根据以上实验测
定结果对藏药鬼箭锦鸡儿全药材进行有目的的开发
(下转第 267 页)
·272· 化　　学　　世　　界　 2009 年
benzene to pheno l o ver suppo rted Pt-VO x and Pd-
VO x ca ta ly sts [ J] .Applied Catalysis A:General ,
2002 , 230:271-280.
[ 2 ] 　Schmidt R J.Industrial cataly tic processes-pheno l
production[ J] .Applied Cataly sis A:General , 2005 ,
280:89-103.
[ 3 ] 　Hoelde rich W F.One-po t r eactions:a contribution to
environmental pro tection[ J] .Applied Ca taly sis A:
Gene ral , 2000 , 194/ 195:487-496.
[ 4 ] 　La rsson P O , Ander sson A.Oxides o f coppe r , ce ria
promo ted copper , manganese and copper manganese
on A l2O3 fo r the combustion of CO , ethyl aceta te and
e thanol[ J] .Appl Ca tal B , 2000 , 24:175-192.
[ 5 ] 　鲁继青 , 罗孟飞 , 李　灿.Cu/SiO 2 催化剂上丙烯在
空气中的直接环氧化反应[ J] .催化学报.2004 , 25
(1):5-9.
[ 6 ] 　曹声春 , 黄孟光 , 李　克 , 等.铁-铜-锰氧化物/
海泡石催化剂对苯羟基化为苯酚的催化作用[ J] .催
化学报 , 1996 , 17(2):170-172.
[ 7 ] 　Chou Ber ryinne , Tsai Jailong , Chen Soofin.Cu-
Substituted molecular sieves as liquid pha se oxidation
cataly st[ J] .Micropor ous and Mesopo rous Materials ,
2001 , 48:309-317.
[ 8] 　任永利 , 米镇涛.Cr-AlPO4-5 的合成及其对苯直接
氧化制苯酚反应的催化性能[ J] .催化学报 , 2004 , 25
(9):757-761.
[ 9] 　王军伟 , 曹国英 , 胡信全.CuO-NiO/ SiO2 催化氧化
1-甲氧基-2-丙醇氧化合成甲氧基丙酮[ J] .催化学
报 , 2002 , 23(4):349-351.
[ 10] 　陈　宜 , 刘洛娜 , 郭士岭 ,等.正丁醇在 CuO , NiO/
HZSM-5 催化剂上一步合成正丁胺[ J] .精细化工 ,
2005 , 22(15):941-943.
[ 11] 　陈　彤 , 付真金 , 祝良芳 , 等.Ni-Z r-Ce/Al2O 3 催
化剂上 H2O2 作氧化剂直接使苯氧化胺化一步合成
苯酚的研究[ J] .化学学报 , 2003 , 61(11):1701-
1703.
[ 12] 　Estervam Vito rio spinace , Ulf Schuchardt , Dilso
Cardoso.Ox idation of hydrocarbons with pero xides
cataly zed by chromium and iron incorpo rated in
SAPO-37 f ramwo rk [ J ] .Applied Catalysis A:
General , 1999 , 185:193-197.
(上接第 272 页)
和利用 ,并且综合利用各地区的藏药鬼箭锦鸡儿植
物资源。
　　3.2　鬼箭锦鸡儿在我国的许多地区都有广泛
分布 ,资源丰富 ,适应能力强 ,且在民间有很好的用
药经验 ,若能再对其根 、茎 、叶 、花的化学成分和药理
活性进行深入的研究 , 将更加有助于促进鬼箭锦鸡
儿资源的综合开发和可持续利用 ,同时对生态环境
也有一定的保护作用 。
参考文献:
[ 1] 　牛西午.柠条研究论文集[ M] .太原:山西科学技术
出版社 , 2003 , 163-164.
[ 2] 　中科院西北高原生物研究所.藏药志(修订版)[ M ] .
西宁:青海人民出版社 , 1991 , 297-298.
[ 3] 　张　彪 ,淮虎银 , 杜　坤.藏药“作毛兴” 原植物的资源
学研究[ J] .中国野生植物资源 , 2004 , 23(1):12-17.
[ 4] 　《中华本草》编委会.《中华本草》藏药卷[ M] .上海:上
海科学技术出版社 , 2002 , 343-344.
[ 5] 　杨敬芝 ,李建北 , 张万隆 .鬼箭锦鸡儿化学成分的研究
[ J] .中草药 , 2003 , 34(5):405-406.
[ 6] 　陈文娟 ,杨敏丽.苦豆子中黄酮的提取工艺[ J] .华西
药学杂志 , 2006 , 21(5):428-430.
[ 7] 　郑一敏 ,胥秀英 , 傅善权 ,等.青皮总黄酮的提取工艺研
究 [ J] .华西药学杂志 , 2007 , 22(5):580-581.
[ 8] 　蒙秋霞 ,牛　宇 , 牛西午.锦鸡儿属几种植物总黄酮含
量研究 [ J] .华北农学报 , 2005 , 20(3):43-45.
(上接第 283 页)
[ 3] 　石家华 ,孙　逊 , 杨春和.离子液体研究进展[ J] .化学
通报 , 2002 , 25(1):243-248.
[ 4] 　张所波 ,于孟贤 , 高连勋.离子液体在有机反应中的应
用[ J] .有机化学 , 2002 , 22(3):159-165.
[ 5] 　WELTON T. Ionic liquids in cataly sis [ J ] .
Coordination Chemistry Review s , 2004 , 248:2459-
2477.
[ 6] 　许雪棠 ,段文贵 , 彭庆华 , 等.离子液体[ bmim] PTSA
中松香乙酯的微波辅助合成[ J] .化学世界 , 2008 , 49
(1):27-30.
[ 7] 　袁艳琴 ,郭圣荣 , 周潮晖.离子液体作为微波吸收剂用
于促进亲核取代反应[ J] .化学试剂 , 2007 , 29(10):
605-607.
[ 8] 　张　萌 , 徐晓冬 ,赵志红 , 等.微波辅助离子液体法在
液相合成中的应用[ J] .化学通报 , 2007 , 70(7):513-
520.
[ 9] 　刘仕伟 , 于世涛 ,刘福胜 , 等.离子液体复合催化剂催
化松节油聚合反应的研究[ J] .精细化工 , 2006 , 23
(6):609-612.
[ 10] 　许雪棠 , 段文贵 ,黄　媚 , 等.离子液体中 12-苯甲酰基
脱氢松香酸甲酯的合成[ J] .化学通报 , 2008 , 71(2):
138-143.
[ 11] 　ZBB 72.008-89 ,中华人民共和国行业标准(林业部)
聚合松香[ S] .
·267·第 5 期 化　　学　　世　　界