全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(4)∶461 ～ 463
基金项目:广西壮族自治区教育厅立项课题(编号:200710LX108)
作者简介:韦健全，副教授，从事中草药药理学、药学教育与研究工作。Email:youyiylwei@ 163． com
榼藤的镇痛抗炎及急性毒性的实验研究
韦健全，罗 莹，黄 健，薛 强，潘 勇，郑子敏
(右江民族医学院药理学教研室，广西 百色 533000)
摘要:目的 研究榼藤水提液的镇痛抗炎作用，并进行急性毒性试验。方法 采用醋酸致扭体反应、热板法测定痛阈，观察
榼藤水提液的镇痛作用;抗炎实验采用二甲苯致鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀和腹腔毛细血管通透性等方法;采用
Bliss法测定了其半数致死量(LD50)。结果 榼藤水提液能减少醋酸所致小鼠的扭体次数，延长热板致痛的时间，明显提高小
鼠的痛阈;能抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶引起的大鼠足趾肿胀，并增加醋酸所致小鼠腹腔毛细血管的通透性;
其 LD50为 85． 4 g(生药)·kg
－1，LD50的 95%可信限为 71． 2 ～ 103． 1 g(生药)·kg
－1。结论 榼藤水提液对实验动物模型具有显
著的镇痛抗炎作用，且具有一定毒性。
关键词:榼藤;镇痛;抗炎;急性毒性
中图分类号:R96 文献标志码:B 文章编号:1006 － 0103(2012)04 － 0461 － 03
榼藤为豆科植物榼藤 Entada phaseoloides(L．)
Merr．的茎藤，分布于广东、广西、台湾、云南及喜马
拉雅山东部等省区［1］。榼藤的树皮含皂苷，茎含氨
基酸、黄酮类、酚类，具有通经、消疮肿、治风湿腰痛、
跌打损伤的功效。文献［2］报道其种子的水溶性提
取物具有抗肿瘤作用，因此，其他相关的药效学研究
未见报道。现观察了榼藤水提液的镇痛抗炎作用及
急性毒性，为临床应用提供依据。
1 实验部分
1． 1 仪器、试药与动物
YLS － 6B智能热板仪、YLS － 7B 足趾容积测量
仪(山东省医学科学院设备站) ;722 可见分光光度
计(上海精密科学仪器公司)。吲哚美辛肠溶片(江
苏亚邦爱普森药业有限公司，批号:0710022) ;醋酸
地塞米松片(浙江仙居制药厂，批号:070340) ;角叉
菜胶(美国 Sigma) ;其余试剂为分析纯;榼藤药材
(市售)经鉴定为豆科植物榼藤 Entada phaseoloides
(L．)Merr．的茎藤，于室温(25 ～ 30 ℃)下晾干，粉
碎备用。昆明种小白鼠体重(18 ～ 20 g)、Wistar 大
鼠［广西医科大学实验动物中心，许可证号:SCXK
(桂)2003 － 0003］，体重 180 ～ 250 g。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 榼藤水提液的制备 取 800 g 粉碎后的榼
藤药粉，用 10 倍量水提取(浸泡 1 h × 2、煮沸 1 h ×
2) ，过滤，合并滤液，浓缩至 200 mL(含生药 4 g·
mL －1) ，用时再配成相应的浓度。
1． 2． 2 对醋酸致小鼠扭体反应的影响［3］ 将 50 只
健康昆明种小鼠，♀♂兼用，随机均分为空白对照组
(生理盐水)、阳性对照组(0． 01 g·kg －1吲哚美辛)和
榼藤水提液高、中、低剂量组(相当于 ig 生药 8、4、
2 g·kg －1)。各组分别 ig 给药 1 次，给药容积为
0. 01 mL·g －1，给药 60 min 后，ip 0． 6% 醋酸溶液
(0. 02 mL·g －1) ，记录 15 min内小鼠的扭体(腹部内
凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)次数。计算抑制率
(表 1)。8、4 g·kg －1榼藤水提液能显著减少醋酸所
致的小鼠扭体次数，与生理盐水组小鼠比较有显著
性差异，镇痛率与剂量相关。吲哚美辛组小鼠对扭
体反应的抑制率更高，但小鼠活动与生理盐水组的
比较明显减少。
表 1 榼藤水提液对醋酸致小鼠扭体反应的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 / g·kg －1 扭体次数 /次 抑制率 /%
生理盐水 － 34． 45 ± 6． 78 －
吲哚美辛 0． 01 10． 08 ± 3． 80* 70． 75
榼藤水提液 8 15． 48 ± 4． 64* 55． 06
4 23． 60 ± 6． 92* 31． 50
2 32． 30 ± 6． 78 6． 25
与生理盐水组比较:* P ＜ 0． 01
1． 2． 3 对小鼠热板致痛反应的影响［3］ 将♀小鼠
置 55 ± 0． 5 ℃的智能热板仪上，记录小鼠足底接触
热板至出现舔后足反应的潜伏期(s)为痛阈指标，
剔除反应潜伏期 ＜ 5 s 或 ＞ 30 s 或跳跃的小鼠。选
取 50 只反应潜伏期在 10 ～ 30 s 内的合格小鼠，根
据药前痛阈和体重随机分成 5 组，分组及给药剂量
同“1． 2． 2”项方法。测 2 次各组小鼠的痛阈，取平
均值作为基础痛阈。再 ig榼藤水提液或吲哚美辛 1
次，于药后 30、60、120 min时分别测定各鼠的痛阈 1
次，痛阈值超过 60 s者以 60 s计算。比较各组小鼠
给药后不同时间痛阈值的组间差异，判断是否有镇
痛作用。结果表明:8、4 g·kg －1榼藤水提液能显著
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.04.021
提高小鼠热刺激体表的痛阈，与生理盐水组的小鼠 比较，差异具有统计学意义(表 2)。
表 2 榼藤水提液对小鼠热板致痛反应的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 / g·kg －1
痛阈值 / s
基础痛阈 给药后 30 min 给药后 60 min 给药后 120 min
生理盐水 － 15． 23 ± 4． 60 17． 39 ± 4． 70 17． 02 ± 4． 14 18． 62 ± 3． 92
吲哚美辛 0． 01 15． 42 ± 4． 78 23． 78 ± 3． 60＊＊ 31． 80 ± 3． 90＊＊ 36． 83 ± 4． 51＊＊
榼藤水提液 8 14． 41 ± 4． 24 22． 26 ± 3． 56* 29． 17 ± 4． 52＊＊ 31． 04 ± 3． 43＊＊
4 15． 91 ± 4． 59 18． 63 ± 3． 29 25． 67 ± 4． 28＊＊ 27． 89 ± 3． 51＊＊
2 16． 06 ± 4． 54 17． 85 ± 4． 19 20． 68 ± 4． 07 21． 81 ± 4． 07
与生理盐水组比较:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 4 对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响［3］ 分组
及给药剂量同“1． 2． 2”项。阳性对照组 ig 醋酸地塞
米松(5 mg·kg －1) ，每天 1 次，连续 3 d，最后一次给
药 1 h后，于各鼠左耳涂 0． 05 mL 二甲苯致炎。致
炎 30 min 后于颈椎处脱臼处死小鼠，剪下左右两
耳，用直径耳肿打耳器(8 mm)在同一部位冲下耳
片，称重。以左、右耳片重差值(mg)表示炎性的肿
胀度，计算肿胀抑制率(表 3)。结果显示:8、4 g·
kg －1榼藤水提液对二甲苯所致的小鼠耳肿胀的抑制
作用非常显著，地塞米松组作用最强，且该组小鼠较
其他组的明显活跃，可能与其兴奋中枢有关。
表 3 榼藤水提液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 / g·kg －1 肿胀度 /mg 抑制率 /%
生理盐水 － 28． 24 ± 4． 90 －
地塞米松 5 × 10 －3 10． 25 ± 3． 21* 63． 68
榼藤水提液 8 14． 09 ± 4． 10* 50． 08
4 18． 46 ± 4． 46* 34． 62
2 21． 37 ± 4． 24* 24． 32
与生理盐水组比较:* P ＜ 0． 01
1． 2． 5 对角叉菜胶所致足肿胀的影响［4 － 5］ 将 50
只大鼠，♀♂兼用，随机均分为空白对照组(生理盐
水)、阳性对照组(5 mg·kg －1醋酸地塞米松)和榼藤
水提液高、中、低剂量组(相当于 ig 生药 12、6、3 g·
kg －1)。实验前禁食不禁水 12 h，测定每鼠致炎前的
右后足趾的容积。每天 ig 给药 1 次，连续 3 d。末
次给药 60 min后，于各大鼠右后足趾皮下注射 0． 1
mL 1%角叉菜胶，于注射后 0． 5、1、2、4、6 h 时分别
测定各鼠右后足趾容积。计算各组大鼠致炎后不同
时间右后足趾的肿胀率(表 4)。结果显示:12、6 g·
kg －1榼藤水提液均能显著抑制角叉菜胶所致小鼠的
足跖肿胀，在 4 h时抑制率最高，且作用持续时间较
长，但抑制程度较地塞米松稍弱。
1． 2． 6 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［4］ 取
50 只健康♂小鼠，分组及给药方法同“1． 2． 4”项，末
次给药后 1 h，于小鼠尾静脉注射 2%伊文思蓝溶液
(0． 01 mL·g －1) ，随即 ip 0． 2 mL 0． 6%醋酸溶液，20
min后于颈椎处脱臼处死小鼠，剪开腹部肌肉，用 6
mL生理盐水分 3 次冲洗小鼠腹腔，收集冲洗液，于
4 ×103 r·min －1离心 10 min，取上清液于 590 nm处测
定吸光度。以此判断小鼠腹腔毛细血管的通透性。
计算抑制率(表 5)。结果表明:8、4 g·kg －1榼藤水提
液对醋酸引起小鼠的腹腔毛细血管通透性有非常显
著的抑制作用，各组的抑制率有明显的剂量依赖性。
表 4 榼藤水提液对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 / g·kg －1
致炎后不同时间足趾的肿胀率 /%
0． 5 h 1 h 2 h 4 h 6 h
生理盐水 － 27． 8 ± 5． 6 33． 9 ± 4． 9 39． 9 ± 4． 7 61． 3 ± 5． 1 82． 6 ± 5． 2
地塞米松 5 × 10 －3 13． 8 ± 4． 0* 17． 9 ± 3． 8* 20． 4 ± 3． 7* 25． 2 ± 3． 7* 31． 3 ± 4． 1*
榼藤水提液 12 19． 7 ± 5． 4* 21． 5 ± 5． 0* 23． 0 ± 4． 9* 30． 7 ± 4． 9* 43． 8 ± 5． 2*
6 24． 6 ± 5． 5 26． 9 ± 5． 5* 29． 6 ± 4． 8* 36． 7 ± 4． 8* 56． 6 ± 5． 3*
3 27． 4 ± 5． 5 31． 6 ± 4． 9 36． 0 ± 4． 9 56． 2 ± 5． 8 78． 2 ± 5． 8
与生理盐水组比较:* P ＜ 0． 01
表 5 榼藤水提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 / g·kg －1 A 抑制率 /%
生理盐水 － 0． 473 ± 0． 128 －
地塞米松 0． 005 0． 247 ± 0． 087＊＊ 47． 8
榼藤水提液 8 0． 288 ± 0． 062＊＊ 39． 1
4 0． 341 ± 0． 077* 27． 7
2 0． 427 ± 0． 090 9． 7
与生理盐水组比较:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 7 急性毒性试验［4］ 先进行预试验，确定 0 动
物死亡的最小剂量(Dn)和 100%动物死亡的最大
致死剂量(Dm) ，按公式“r =(Dm /Dn)1 /(G － 1)”
计算组间比(r) ，G 为组数。将小鼠分为 5 个组，给
药剂量分别为 40. 0、56． 5、80. 0、113． 1、160. 0 g·
kg －1榼藤水提液(r = 1． 414，大 /小相邻组的剂量等
比级数为 1∶0． 71) ，禁食不禁水 12 h，正式实验时
分别 ig给药 1 次，连续观察 7 d，记录死亡小鼠数及
264 华 西 药 学 杂 志 第 27 卷
华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(4)∶463 ～ 464
毒性反应情况。解剖死亡小鼠，肉眼观察心、肝、肾、
肺、脾等重要器官。结果表明:给予小鼠 ig 榼藤水
提液后，大部分出现活动减少、蜷曲、呼吸减慢，多在
24 h内中毒死亡;肉眼未见心、肝、肺、肾、脾等重要
器官出血、坏死等异常表现。用 Bliss法计算出半数
致死量 LD50 = 85． 4 g·kg
－1，LD50 95%的可信限为
71． 2 ～ 103． 1 g·kg －1，因此，榼藤水提液在一定剂量
范围内应用是安全的。
2 讨论
文中采用了 2 种镇痛实验模型和 3 种实验性炎
症模型来检测药物的抗炎镇痛活性。镇痛实验结果
表明:8、4 g·kg －1榼藤水提液能抑制醋酸刺激小鼠
腹腔黏膜引起的痛反应、减少各鼠的扭体次数、提高
小鼠被热刺激后体表的痛阈、延长热板痛反应时间，
具有镇痛作用。此外，榼藤水提液对二甲苯所致小
鼠耳片肿胀、角叉菜胶所致大鼠足肿胀以及小鼠腹
腔毛细血管通透性均有显著的抑制作用，且抑制效
果随剂量呈现一定的量效关系，说明榼藤水提液能
有效地缓解炎症发生过程中的早期症状。榼藤水提
液的 LD50为 85. 4 g·kg
－1，LD50 95% 的可信限为
71. 2 ～ 103． 1 g·kg －1，按榼藤生药、药理试验中动物
间和动物与人体间的等效剂量换算［5］，及成人以 60
kg体重计算，即得其对人的 LD50相当于 435． 5 g。
根据化学物质的急性毒性分级标准，属于低毒，而本
品的推荐用量为 25 ～ 50 g，相对来说是安全的。但
由于不同地域的榼藤中，毒性成分含量可能不同，在
使用时要特别注意观察，中毒症状表现为头晕、呕
吐、血压急剧下降，呼吸减缓而死亡。
参考文献:
［1］ 江苏新医学院． 中药大辞典［M］． 上海:上海科学技术出版
社，1977:2523．
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瘤作用［J］．华西药学杂志，2005，20(6) :487 － 489．
［3］ 徐叔云，卞如濂，陈修． 药理实验方法学［M］． 第 3 版． 北京:
人民卫生出版社，2002:882 － 883，886 － 887，911 － 913．
［4］ 陈奇．中药药理研究方法学［M］． 北京:人民卫生出版社，
2000:23，232，305 － 307，364．
［5］ 黄继汉，黄晓晖，陈志扬，等． 药理试验中动物间和动物与人
体间的等效剂量换算［J］．中国临床药理学与治疗学，2004，9
(9) :1069 － 1072．
收稿日期:2011 － 08 － 10
基金项目:国家药品标准提高研究项目(编号:附件 3 － 690)
作者简介:蒋秋桃(1966—) ，女，硕士，从事生物医药工程的研究工作。Email:317095079@ qq． com
火焰原子吸收分光光度法测定小儿复方四维亚铁散中的
微量元素
蒋秋桃，梁 晟
(湖南省药品检验所，湖南 长沙 410001)
摘要:目的 测定小儿四维亚铁散中微量元素的含量。方法 采用火焰原子吸收分光光度法。结果 钙、铁、锌的回收率分
别为 99． 87%、100． 67%、99． 92%。结论 所用方法简便、灵敏、可靠，可用于小儿四维亚铁散中钙、铁、锌的测定。
关键词:火焰原子吸收分光光度法;钙;铁;锌;小儿四维亚铁散
中图分类号:R917 文献标志码:B 文章编号:1006 － 0103(2012)04 － 0463 － 02
小儿四维亚铁散中含有多种维生素和人体必需
的微量元素，用于促进婴幼儿骨骼发育、改善贫血以
及婴幼儿缺钙的辅助治疗。目前测定药品中微量元
素的方法主要为原子吸收分光光度法［1］，但同时测
定小儿四维亚铁散中的钙、铁、锌含量目前未见报
道。现采用火焰原子吸收分光光度法同时测定小儿
四维亚铁散中微量元素钙、铁和锌的含量，可用于控
制小儿四维亚铁散产品质量。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
PE AAnalyst 800 型原子分光光度仪(美国铂金
埃尔默)。钙、铁、锌标准溶液(国家计量科学研究
院，浓度为 1 mg·mL －1) ;小儿四维亚铁散样品、药品
原料、辅料(湖南方盛制药有限公司) ;水为去离子
水;其余试剂为分析纯。